ILT4与Ki67在上皮性卵巢癌淋巴结转移患者中的表达情况

目的探讨免疫球蛋白样转录子4(ILT4)与Ki67在上皮性卵巢癌淋巴结转移患者中的表达情况。方法回顾性分析70例上皮性卵巢癌患者,通过淋巴结转移情况分为淋巴结转移组(37例)和无淋巴结转移组(33例),观察两组患者ILT4、Ki67的表达情况。结果免疫组织化学结果显示,淋巴结转移组中,卵巢癌组织中ILT4表达水平低于无淋巴结转移组,Ki67表达水平高于无淋巴结转移组(P﹤0.05);淋巴结转移组ILT4阳性率35.14%(13/37)低于无淋巴结转移组的84.85%(28/33),差异有统计学意义(P﹤0.05);淋巴结转移组Ki67阳性率表达81.08%(30/37)高于无淋巴结转移组的45.45%(15/33),差异有统计学意义(P﹤0.05)。结论在上皮性卵巢癌淋巴结转移患者中,ILT4水平表达降低,Ki67表达升高,可将其作为诊断病情的指标。

LT4、Ki67蛋白表达与卵巢癌淋巴结转移、肿瘤分化、临床分期的关系

目的探讨卵巢癌组织中的免疫球蛋白样转录子4(LT4)、Ki67蛋白表达与卵巢癌淋巴结转移、肿瘤分化程度、临床分期的关系。方法选取90例上皮性卵巢癌组织学标本(卵巢癌组)、60例符合要求的卵巢癌旁组织标本(对照组),采用免疫组化染色检测2组标本中的LT4、Ki67蛋白表达情况,并分析在不同临床分期、是否发生淋巴结转移、不同分化程度的上皮性卵巢癌患者组织间的LT4、Ki67蛋白阳性表达率差异。结果卵巢癌组的LT4、Ki67蛋白阳性表达率均高于对照组(55.56%vs3.33%,71.11%vs6.67%)(P<0.05)。低分化、发生淋巴结转移的卵巢癌患者的Ki67蛋白阳性表达率均显著高于高分化和中分化、未发生淋巴结转移的卵巢癌患者(P<0.05);Ⅲ期和Ⅳ期、低分化、发生淋巴结转移的卵巢癌患者的LT4蛋白阳性表达率均显著高于Ⅰ期和Ⅱ期、高分化和中分化、未发生淋巴结转移的卵巢癌患者(P<0.05)。结论卵巢癌组织中LT4蛋白、Ki67蛋白较正常组织表达上调,并且与肿瘤临床分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度关系密切。

黄芪甲苷对非小细胞肺癌A549细胞增殖侵袭迁移及免疫球蛋白样转录子4表达的影响

目的:观察黄芪甲苷(Astragaloside Ⅳ)对非小细胞肺癌A549细胞增殖侵袭迁移及免疫球蛋白样转录子4(Immunoglobulin-like Transcript 4,ILT4)的信使核糖核酸(Msessenger RNA,mRNA)和蛋白表达水平的影响,初步探讨黄芪甲苷抑制非小细胞肺癌增殖侵袭迁移的机制。方法:A549细胞常规培养于含血清DMEM培养基中,四唑盐(Methy Thiazolyl Tetrazolium,MTT)实验设置对照组(加入完全培养基)与加药组(分别加入浓度为20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L、100μmol/L的黄芪甲苷溶液),测其24 h、48 h、72 h的光密度(Optical Density,OD)值,进而检测黄芪甲苷对A549细胞增殖影响;Transwell实验设置对照组(上室加入不含胎牛血清的DMEM培养液)与加药组(上室加入用不含胎牛血清的DMEM培养液配制的浓度为40μmol/L的黄芪甲苷溶液),观察穿过小室的细胞数量的多少,进而检测黄芪甲苷对A549细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测黄芪甲苷对A549细胞迁移的影响;细胞传代后继续培养24小时,分为对照组(加入完全培养基)与加药组(加入完全培养基稀释的浓度为40μmol/L的黄芪甲苷溶液),采用实时荧光定量(Quantitative Real-time,qRT)-聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)、免疫印迹试验(Western Blot,WB)法检测ILT4的mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT实验、Transwell实验、qRT-PCR、Western blot实验均证实,黄芪甲苷组与对照组比较,黄芪甲苷组明显抑制了A549细胞增殖、侵袭与迁移,且其作用具有时间-浓度依赖性;ILT4蛋白与m RNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭与迁移,其机制可能为通过调控免疫球蛋白样转录子4的mRNA和蛋白表达,抑制非小细胞肺癌细胞的增殖、侵袭与迁移能力。

免疫球蛋白样转录子4:癌症免疫治疗新靶点

目的总结免疫球蛋白样转录子(ILT)4在肿瘤微环境中的表达、功能及其最新临床转化研究进展,分析阻断ILT4在克服免疫检查点抑制剂(ICIs)耐药中的临床价值。方法在PubMed及ClinicalTrial.gov中以“ILT4、LILRB2、cancer”为英文关键词,检索1998-01-01-2023-03-31发表的所有相关文献。纳入标准:ILT4在肿瘤中表达的研究;ILT4与肿瘤发生发展关系及潜在分子机制的相关研究;ILT4参与肿瘤免疫治疗的转化研究;ILT4单克隆抗体在实体肿瘤中的临床研究。排除标准:与恶性肿瘤无关的文献;数据不完整的文献;低质量和陈旧类文献。最终共纳入文献57篇。结果ILT4是主要表达于髓系细胞的新型免疫检查点分子。ILT4在恶性肿瘤的肿瘤细胞及微环境髓系细胞如单核细胞、肿瘤相关巨噬细胞、树突状细胞和髓源性抑制细胞中高表达,促进了肿瘤的恶性生物学行为,并构建了免疫抑制性肿瘤微环境,直接或间接促进肿瘤进展。在临床前研究中,阻断ILT4能够抑制肿瘤的恶性增殖转移及免疫逃逸,增强免疫治疗的疗效,最终发挥抗肿瘤效应。目前已有多种针对性的ILT4单克隆抗体研发出来并进入早期临床试验阶段,初步证实阻断ILT4具有一定的抗肿瘤活性,并可增强PD-1/PD-L1抑制剂的疗效。结论ILT4是恶性肿瘤免疫治疗新靶点,阻断ILT4为抑制肿瘤进展和克服免疫治疗耐药提供了很有潜力的策略,但是后续临床应用面临的诸多挑战值得进一步探索。

基于GRP78/PERK/ATF4的泽泻汤改善脂质诱导肝细胞内质网应激作用机制研究

目的:基于GRP78/PERK/ATF4通路探讨泽泻汤改善肝细胞内质网应激的潜在机制。方法:采用油酸(OA)及高脂饮食诱导高脂细胞及动物内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)模型。ER与Ca^(2+)荧光共定位观察泽泻汤对ER-Ca^(2+)稳态的调节情况;流式细胞术及Tunel法检测泽泻汤对凋亡的影响;Q-PCR检测ER核心信号1(Ern1)、转录激活因子6(Atf6)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,Chop)、Grp78、Perk、X-盒结合蛋白1(Xbp1)、热休克蛋白90β1(Hsp90β1)、肿瘤坏死因子受体超家族成员10B(Tnfrsf10b)的mRNA表达;Western bolt法检测葡萄糖调节蛋白78/B细胞免疫球蛋白结合蛋白(GRP78/BIP)GRP78、类PKR的内质网激酶(PERK)、p-PERK和转录激活因子4(ATF4)的蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组ER-Ca^(2+)明显失衡(P<0.05),肝细胞凋亡增加(P<0.01),Perk、Xbp1等ERS相关mRNA的表达上调(P<0.05),ERS伴侣标志蛋白GRP78、ATF4蛋白表达明显上调(P<0.05);与模型对照组相比,泽泻汤逆转了OA诱导的ER-Ca^(2+)失衡(P<0.01);显著改善OA及高脂饮食诱导的肝细胞凋亡(P<0.01);体内外下调ERS相关基因Ern1、Atf6、Chop、Grp78、Perk、Xbp1、Hsp90b1、Tnfrsf10b的表达(P<0.05);体内外逆转OA及高脂饮食诱导的ERS伴侣标志蛋白GRP78表达的显著上调(P<0.01),同时下调p-PERK及ATF4蛋白表达(P<0.05)。结论:泽泻汤抑制脂质诱导的ERS,其机制可能与调控GRP78/PERK/ATF4通路有关。

免疫球蛋白样转录子4在恶性肿瘤中作用研究进展

免疫球蛋白样转录子4(ILT4)是免疫球蛋白超家族的一种抑制性受体,主要在髓系细胞中表达,包括单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞和粒细胞。ILT4主要通过与其配体结合后向细胞内传递抑制信号来抑制免疫功能。近年来研究发现ILT4在诸多人类肿瘤中异常表达,对肿瘤的增殖、侵袭、转移等恶性生物学行为起到调控作用,同时与肿瘤微环境中T细胞浸润程度密切相关。进一步了解ILT4在肿瘤中的表达及作用机制将有助于相关肿瘤的靶向治疗药物研发。

ILT4基因在卵巢癌发生发展中的作用及其功能初步研究

目的:探讨免疫球蛋白样转录子4(ILT4)在卵巢癌发生发展中的作用并初步推测其功能。方法:收集卵巢癌患者129例,并以子宫肌瘤患者100例为对照,以免疫组化和RT-PCR方法对观察对象进行病理组织中ILT4基因表达和检测,比较患者与对照组患者基因表达差异,并分析不同病理和临床特征与ILT4表达关系。结果:在卵巢癌患者中检测ILT4mRNA(1.85±1.52),ILT4蛋白(37.24±10.62),对照组中ILT4未检出,两组差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、不同病理类型间ILT4表达差异无统计学意义(P>0.05),而是否存在淋巴转移、不同高中低分化程度及不同肿瘤大小间ILT4表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ILT4高表达于卵巢癌患者,而在子宫肌瘤患者中不表达;ILT4与肿瘤大小、恶性程度及是否发生淋巴结转移密切相关,可以作为卵巢癌诊断和预后的指标。

肝癌患者外周血单个核细胞ILT-4mRNA的表达

【目的】检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)免疫球蛋白转录子4(immunoglobulin-like transcript-4,ILT-4)mRNA在肝癌患者中的表达,并探讨其在肿瘤发生发展中的作用。【方法】以β-actin为内参照,实时荧光定量RT-PCR方法检测肝癌患者和健康体检者外周血单个核细胞ILT-4mRNA的表达。【结果】正常对照组ILT-4mRNA表达水平(0.450±0.216)显著低于肝癌组(0.887±0.253,P<0.05),肝癌患者组在不同分期之间的表达差异无统计学意义(P>0.05),低分化(1.061±0.126)显著高于高、中分化(0.693±0.215,P<0.05)。【结论】肝癌患者外周血PBMCILT-4mRNA表达水平上调,检测PBMC的ILT-4基因表达水平有助于肝癌的诊断和研究。

免疫球蛋白样转录物3和4在肾移植受者树突状细胞中表达的意义

目的 探讨免疫球蛋白样转录物3和4（ILT3和ILT4）在肾移植受者外周血树突状细胞（DC）中的表达情况,并分析其在移植免疫低反应中的作用.方法 选择肾移植后存活5年以上肾功能稳定和慢性排斥反应的受者各10例,分别作为肾功能稳定组和慢性排斥组;另选择10例健康志愿者作为正常对照组.用粒-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素4（IL-4）刺激各组研究对象的外周血单核细胞,诱导培养获得DC.用流式细胞仪测定DC表面分子ILT3和ILT4的表达,并分析各组DC表达的差异;用酶联免疫吸附试验法测定各组血清中ILT3和ILT4的配体HLA-G5的表达水平.结果 ILT3在肾功能稳定组DC中表达水平上调,与正常对照组和慢性排斥组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）,而ILT4的表达在各组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;肾功能稳定组血清中HLA-G5的表达水平较正常对照组和慢性排斥组显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 长期存活的肾功能稳定受者外周血中高表达ILT3和其配体HLA-G,说明它们可能在外周免疫耐受的诱导和维持中起非常重要的作用.

ILT4促进脓毒症炎性反应并介导免疫麻痹

目的：探讨脓毒症单核细胞表达ILT4的生物学行为和效应，及对于预后的影响。方法：选取BALB/c、BALB/c ILT4–/–雄性小鼠，CLP复制脓毒症模型。用流式细胞仪定量检测CLP术后24h单核细胞ILT4、MHC-Ⅱ表达水平；用ELISA法检测各组0、6、12、24h血清IL-6、TNF-α浓度；并观察168h内生存预后。 结果：CLP术后24小时脓毒症小鼠外周单核细胞高度表达ILT4分子 （193.50 ± 52.54 vs. 1292.00 ± 143.70, p 〈 0.05） ；较WT组ILT4–/–小鼠外周单核细胞表达MHC-Ⅱ比率明显增高（24.25± 6.76% vs. 49.38 ±5.66%, p 〈 0.05） 。CLP术后24h血清IL-6显著增高（54.25± 20.04 vs. 470.75±88.03, p 〈 0.05），ILT4敲除后很大程度的抑制这一趋势（470.75±88.03 vs. 241.25 ± 45.10, p 〈 0.05）；但对TNF-α表达无显著性干扰（53.13 ±5.49 vs. 50.88 ±6.38, p〉 0.05）。且ILT4–/–小鼠CLP术后生存率WT明显增加（p 〈 0.05）。结论：脓毒症时单核细胞高表达ILT4，与高IL-6水平及低MHC-Ⅱ表达率相关，导致死亡率增加。