抗人平足蛋白单克隆抗体在结直肠癌中的临床应用研究

目的 应用单克隆抗体SZ168探讨平足蛋白(PDPN)在结直肠癌组织中的表达及与临床病理参数和预后的关系。方法 通过免疫组化(单克隆抗体SZ168作为一抗)检测结直肠癌及癌旁组织中PDPN的表达水平差异,利用TCGA数据库对结直肠癌中PDPN表达及预后进行分析。结果 免疫组化检测显示PDPN在结直肠癌组织中高表达,在癌旁组织中低表达,且结直肠癌患者PDPN高表达和低表达组淋巴转移和肿瘤远处转移的差异有统计学意义(P<0.05),年龄、性别、T分期的差异无统计学意义(P>0.05);生存分析显示PDPN高表达与低表达的结肠癌患者预后差异无统计学意义(P>0.05)。结论 单克隆抗体SZ168可应用于结直肠癌免疫组化中PDPN的检测,检测阳性率较高,PDPN检测在结直肠癌的临床诊断中具有一定的价值。

非小细胞肺癌中PNCK、EGFR表达与EGFR基因突变状态的相关性

目的 探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中PNCK、EGFR表达及与EGFR基因突变状态的相关性。方法 采用免疫组化EnVision法检测PNCK、EGFR蛋白在肺浸润性癌(256例)、肺浸润癌前病变(42例)和癌旁组织(40例)中的表达。应用NGS检测EGFR基因扩增、突变情况,分析PNCK、EGFR蛋白表达与NSCLC临床病理特征、EGFR基因扩增或突变的关系。利用GEPIA数据库分析肺腺癌、肺鳞状细胞癌中PNCK与EGFR基因表达的相关性。使用Kaplan-Meier Plotter数据库分析PNCK对肺癌患者预后的影响。结果 PNCK、EGFR在肺浸润性癌组中的表达(53.5%,137/256;47.7%,122/256)高于肺浸润癌前病变组(47.6%,20/42;31.0%,13/42)、癌旁组(22.5%,9/40;7.5%,3/40),三组间两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。PNCK蛋白高表达与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移、远处转移相关(P<0.05);EGFR蛋白高表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移相关(P<0.05)。NSCLC组织中PNCK与EGFR蛋白表达呈负相关(r=-0.208,P<0.05)。EGFR蛋白在EGFR基因突变、扩增的NSCLC中表达高于野生型(P<0.05)。PNCK蛋白表达与EGFR基因突变和扩增均无相关性(P>0.05)。生物信息学数据库分析:肺腺癌、肺鳞状细胞癌中PNCK与EGFR基因表达均呈正相关(r=0.15,P<0.05;r=0.30,P<0.05),肺癌中PNCK高表达患者总生存率低(HR:1.28,95%CI:1.09~1.51,P=0.003 1)。结论 PNCK高表达与NSCLC发生、发展、不良预后有关,并与EGFR蛋白表达呈负相关,其有望成为肺癌EGFR突变患者的治疗靶点。

转化生长因子β_1在下颌牵张成骨过程中的表达及意义

目的 :研究转化生长因子 β1 (TGF_β1 )在下颌牵张成骨过程中的表达及意义。方法 :对 15只山羊行双下颌骨皮质切开术 ,安置口外牵张器 ,经 7d间歇期后 ,按 1mm d的速率延长下颌骨 10mm。在间歇期末、牵张结束当天及牵张结束后第 7、14和 2 8天分别处死 3只动物 ,取牵张区骨痂用免疫组化方法检测不同时间内TGF_β1 表达水平的变化。结果 :TGF_β1 在下颌牵张成骨过程中呈高水平表达 ,主要定位于间充质细胞和成骨细胞的胞浆中 ,其中以牵张结束当天和第 7天的表达最强 ,以后逐渐下降 ,第 2 8天时仅有微弱表达。结论 :TGF_β1 可能在牵张成骨过程中 。

不同分子亚型乳腺癌超声及MRI特征

目的探讨不同分子亚型乳腺癌超声和MRI表现。方法回顾性分析101例经病理证实的乳腺癌患者(109个病灶)的超声和MRI资料;根据雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2(HER-2)的表达状态,将乳腺癌分为三阴性、HER-2过表达和Luminal三个亚型,分析不同亚型乳腺癌超声和MRI表现。结果三种分子亚型乳腺癌病理分型差异有统计学意义(P<0.05);超声声像图中不同分子亚型乳腺癌的边界、边缘、是否钙化、血供程度及周围组织结构变化差异有统计学意义(P均<0.05);MRI中不同分子亚型乳腺癌平扫信号、边界、边缘、强化与否及强化方式和时间-信号强度曲线类型差异有统计学意义(P均<0.05)。结论不同分子亚型乳腺癌超声及MRI表现各具特点。

瘦素在黄体功能不足患者子宫内膜中的表达

目的测定黄体功能不足患者黄体中期血清瘦素值和子宫内膜瘦素表达水平,探讨黄体功能不足和体内瘦素水平异常的关系。方法48例黄体功能不足患者,年龄(35.0±5.3)岁,体重指数(BMI)(23.2±3.2)kg/m2。分别做黄体中期的血清瘦素放射免疫测定和子宫内膜瘦素免疫组化染色。51例正常对照组,年龄(37.0±4.1)岁,体重指数(BMI)(22.8±2.6)kg/m2。结果黄体功能不足患者组血清瘦素值(8.49±3.72)ng/ml;正常对照组为(7.43±4.02)ng/ml。两组数据经t检验,无统计学意义(P=0.18>0.05)。H评分法显示:正常对照组子宫内膜腺体瘦素半定量为2.11±0.74,内膜间质为1.90±0.85;黄体功能不足患者组内膜腺体为1.49±1.06,内膜间质为1.30±0.89。对两组结果进行t检验,具有统计学意义(P=0.001<0.05)。结论黄体功能不足的患者子宫内膜上的瘦素表达异常,在黄体中期存在瘦素不表达或弱表达。

乳腺癌中survivin的表达及其与Caspase-7和肿瘤病理特征的关系

目的研究乳腺癌组织中survivin的表达及其与Caspase-7和肿瘤病理特征的关系。方法免疫组织化学SP法检测survivin和Caspase-7在乳腺癌、乳腺小叶增生、乳腺导管单纯性增生、乳腺癌旁不典型增生组织中的表达情况,并分析其与临床病理学特征的关系。结果survivin和Caspase-7在乳腺癌中的阳性表达率分别为62.0%和81.7%,两者的表达呈正相关(r=10.22,P<0.01)。在乳腺小叶增生、乳腺导管单纯性增生和乳腺癌旁不典型增生组织中,survivin阳性表达率分别为0、0、6.67%,明显低于乳腺癌组(P<0.01);乳腺良性病变组中Caspase-7阳性表达均为100%,明显高于乳腺癌组(P<0.05)。survivin与肿瘤大小和淋巴结转移有关,与年龄、组织学分级及C-erbB-2表达无关。结论survivin蛋白在乳腺癌中表达上调,且与肿瘤大小和淋巴结转移有关,其可能通过抑制Caspase-7的活性来抑制凋亡,促使肿瘤增殖。

多基因表达对IIIA期非小细胞肺癌术后转移及生存期的影响

目的 前瞻性探讨抑癌基因 p5 3,癌基因K ras、HER2 ,血管内皮生长因子 (VEGF) ,表皮生长因子受体 (EGFR) ,粘连因子CD4 4 ,金属蛋白酶MMP9等蛋白表达对ⅢA期非小细胞肺癌 (NSCLC)术后复发转移和生存期的影响。方法 采用免疫组织化学方法检测 32例ⅢA期非小细胞肺癌手术标本中上述蛋白表达。结果 p5 3、K ras、VEGF、EGFR、CD4 4、MMP9和HER2蛋白表达率分别为 6 2 .5 % (2 0 / 32 )、34.3% (11/ 32 )、2 5 .0 % (8/ 32 )、4 6 .9% (15 / 32 )、78.1% (2 5 / 32 )、5 0 % (16 / 32 )和4 3.8% (14 / 32 )。K ras,EGFR蛋白表达与疾病进展时间 (timetoprogression ,TTP)有关 (P =0 .0 30 ,P =0 .0 0 8)。多变量Cox回归分析 ,K ras,HER2蛋白表达是影响生存期的独立影响因素。Kaplan M生存分析显示K ras,HER2阳性组生存期明显短于阴性组 (P =0 .0 4 2 ,P =0 .0 39)。结论 对于ⅢA期NSCLC ,上述 7种因子阳性表达率很高。K ras,EGFR蛋白表达阳性患者术后更易发生远处转移 ,K ras ,HER2表达是影响生存期的独立影响因素。

免疫组化在老年胸腔积液细胞块病理诊断中的应用

目的探讨胸腔积液细胞块免疫组化检查方法对老年胸腔积液的诊断价值。方法老年患者(>70岁)渗出液胸腔积液标本78例,离心石蜡包埋后行HE染色和免疫组化染色观察,并与常规涂片比较诊断结果。结果 78例渗出液胸腔积液标本中通过细胞块免疫组化检查恶性病变31例(腺癌28例,胸膜间皮瘤1例,小细胞肺癌2例),良性间皮细胞增生46例,可疑1例;常规胸水涂片检查恶性病变28例,良性病变39例,可疑阳性11例,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论胸腔积液细胞块免疫组化检查有助于提高老年胸腔积液患者的病理诊断阳性率和准确率,合理选择免疫标记可以帮助判断肿瘤原发部位,帮助评估预后,协助治疗方案的选择。

宫颈癌中p27基因的表达及其临床意义

目的 :探讨宫颈癌中p2 7蛋白的表达及其临床意义。方法 :用免疫组化链霉亲合素 -过氧化物酶染色法 (SP法 ) ,检测 2 2例正常宫颈组织和 4 8例宫颈鳞癌组织中p2 7蛋白的表达。结果 :宫颈癌组织中p2 7蛋白表达的阳性率为 39.5 % ,而正常宫颈组织中的表达率为 72 .7% ,两者差异显著 (P <0 .0 1)。另外 ,p2 7蛋白在宫颈癌组织中表达的阳性率 ,与癌细胞的分化程度、患者的临床分期以及有无淋巴结转移有关。癌细胞分化程度低、晚期患者及有淋巴结转移者 ,p2 7蛋白表达的阳性率低 ,反之则高。结论 :p2 7蛋白表达的阳性率与宫颈癌的分化程度、临床分期及有无淋巴转移有关。检测p2

肺鳞癌免疫组化彩色图像定量分析

目的 探讨肺鳞癌免疫组化图像定量分析中描述图像色彩的指标在不同分化程度间的变化及作用。方法 采用S P法进行肺癌p5 3、PCNA和p16免疫组化染色 ,应用计算机病理图像分析系统 (MPIAS 5 0 0 )进行图像分析。结果 2 0例肺鳞癌患者中没有高分化者 ,中分化组和低分化组p5 3阳性均为 6例 ,PCNA阳性分别为 7例和 6例 ,p16阳性分别为 5例和 6例。中分化组p5 3染色的饱和度 (4.95 % )低于低分化组(10 .95 % ) ,两者差异有显著性 (t =4.2 0 8,P =0 .0 0 2 ) ;中分化组PCNA染色的饱和度 (7.74% )亦低于低分化组(12 .98% ) ,差异有显著性 (t =2 .416 ,P =0 .0 34) ;中分化组p16染色的色度 (5 3 .98°)低于低分化组 (6 2 .32°) ,差异有显著性 (t =2 .784,P =0 .0 2 1)。结论 用描述图像色彩的指标定量分析肺鳞癌免疫组化图像可能反应肺癌的不同分化程度。

乌龟胃肠胰系统内分泌细胞的免疫组织化学研究

应用过氧化物酶标记的链霉卵白素(Streptavidin peroxidase,简称S-P法)免疫组织化学技术,使用六种特异性胃肠激素抗血清对乌龟胃肠胰系统内分泌细胞的种类、定位、分布密度及形态进行了研究。在乌龟胰腺中检测出5-羟色胺、生长抑素、胰高糖素和胰多肽等4种内分泌细胞,生长抑素、胰高糖素细胞多成簇大量分布于胰岛中;5-羟色胺、胰多肽细胞多散在少量分布于胰腺腺泡之间。在乌龟消化道中共检测出5-羟色胺、生长抑素、胃泌素、胰高糖素和P物质等5种内分泌细胞:5-羟色胺细胞在消化道各段均有分布,以十二指肠处分布密度最高(30.7±4.2),空肠其次,回肠、直肠处最低(12.0±1.0/11.2±3.0);生长抑素细胞仅分布于食道和胃中各段;胃泌素细胞分布于胃幽门部和十二指肠处;胰高糖素细胞分布于胃体至空肠段,以胃幽门部分布密度较高(11.3±1.1);P物质细胞仅布于胃幽门部;消化道各段均未检出胰多肽细胞。与其他爬行动物比较,乌龟胃肠胰系统内分泌细胞的分布既存在着一定共同点,又显示了较大的种间差异。

用BrdU标记技术观察大鼠内淋巴囊的S期细胞

目的 了解大鼠内淋巴囊的细胞增殖状态。方法 选用 10只健康成年S D大鼠 ,腹腔注射溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)后 ,取颞骨作组织学处理 ,用抗BrdU单克隆抗体 ,通过免疫组织化学染色 ,观察内淋巴囊组织中增殖细胞的定位与分布。结果 大鼠内淋巴囊中间部的上皮、上皮下区域和囊腔内存在着散在的BrdU阳性细胞 ,而在耳蜗未发现阳性细胞。结论 大鼠内淋巴囊具有细胞增殖能力 ,可能是内耳具有细胞更新功能的独特部位。

模拟失重对大鼠肠黏膜NF-κB表达的影响

目的:探讨模拟失重条件下健康大鼠肠道黏膜组织中核因子-κB(NF-κB)的表达变化及其意义.方法:成年Wistar大鼠80只,随机分为10组,按模拟失重时相分别为0.5、1、2、7、21d和相应的对照组.采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.免疫组织化学法检测肠道黏膜组织中NF-κB的表达水平.结果:0.5、1、2、7、21d模拟失重组大鼠肠道组织NF-κB表达水平均显著高于相应对照组(10.11%±3.29%vs5.50%±1.92%,22.00%±5.31%vs6.50%±2.32%,25.50%±4.11%vs8.75%±6.36%,21.50%±3.02%vs6.75%±2.12%,10.87%±2.64%vs5.62%±2.13%,均P<0.01),模拟失重0.5d组肠道组织NF-κB表达开始升高,2d组达高峰,随模拟失重时间的延长,NF-κB表达水平依次下降,21d组仍然高于相应对照组.结论:尾悬吊模拟失重大鼠肠道组织NF-κB表达水平明显上调,提示肠道组织NF-κB表达变化与失重应激反应和失重耐受有密切关系.达水平明显上调,提示肠道组织NF-κB表达变化与失重应激反应和失重耐受有密切关系.

多基因表达对非小细胞肺癌术后预后的评价

目的前瞻性探讨癌基因p53、环氧合酶-2(COX-2)、表皮生长因子受体(EGFR)、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞增殖核抗原(PCNA)、MYC、p21和nm23等蛋白在非小细胞肺癌(non-sm all cell lung cancer,NSCLC)组织表达及其对预后的影响。方法采用免疫组织化学染色法检测40例NSCLC瘤组织中上述蛋白表达,并分析这些参数与患者预后之间的关系。结果p53、COX-2、EGFR、VEGF、PCNA、MYC、p21和nm23蛋白表达率分别为77.5%(31/40)、67.5%(27/40)、57.5%(23/40)、87.5%(35/40)、90%(36/40)、87.5(35/40)、32.5%(13/40)和32.5%(13/40)。多因素Cox回归分析示,EGFR是影响该组患者生存期的独立因素。EGFR阳性表达的NSCLC患者生存期明显短于EGFR阴性表达者(P=0.018)。结论在NSCLC,存在上述8种基因蛋白的表达;EGFR表达与NSCLC患者术后预后不良相关。

利用组织芯片分析肝细胞肝癌中Caspase-9与Ki-67的表达及意义

目的研究Caspase-9和Ki-67在肝细胞肝癌（HCC）的表达及与临床病理参数之间的关系。方法利用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测76例HCC组织和38例正常肝组织中Caspase-9和Ki-67的表达情况。结果Caspase-9在HCC组织中的表达阳性率（55．3％）低于正常肝组织（78．9％）（P〈0．05），Caspase-9在Hcc组织的表达与组织分化有关（P〈0．05）；Ki-67在HCC组织中的表达阳性率（53．9％）高于正常肝组织（13．2％）（P〈0．01），Ki-67在HCC组织的表达与组织分化和转移有关（P〈0．05）；在HCC组织中Caspase-9与Ki-67的表达呈负相关（r=-0．300，P=0．008）。结论HCC中Caspase-9的低表达与Ki-67的高表达可能共同参与HCC中细胞凋亡与增殖的病理过程，在肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。

Ki-67在非霍奇金淋巴瘤的表达及临床价值

采用免疫组化 SABC方法检测 Ki- 6 7在非霍奇金淋巴瘤 (NHL)石蜡包埋组织块中的表达水平。结果为 Ki- 6 7的表达与 NHL 组织学分类有关 (P<0 .0 5 ) ,与血清乳酸脱氢酶 (L DH)的水平相关 (P<0 .0 5 ) ,而与首发部位、年龄、临床分期、性别和有无全身症状无关 (P>0 .0 5 )。认为 Ki- 6 7对非霍奇金淋巴瘤临床分型。

苦参碱对人肝癌细胞HepG_2的细胞形态影响和相关增殖因素的变化

目的 观察苦参碱作用于HepG2 细胞后 ,光镜和电镜下细胞形态结构改变以及AFP、PCNA和分裂指数的变化。方法 倒置显微镜下观察活细胞形态 ;光镜下观察Wright和苏丹Ⅲ染色的细胞形态和分裂指数 ;扫描和透射电镜观察细胞表面和内部超微结构改变 ;免疫组化和图像分析 ,检测AFP和PCNA。结果 未用药细胞具有肿瘤细胞典型的形态特征 ,细胞的分裂指数为 5 3 .8‰ ,胞浆内未见透明颗粒和空泡 ,苏丹Ⅲ染色为阴性。免疫组化染色AFP和PCNA为阳性。苦参碱处理细胞后 ,细胞数量减少 ,散在生长 ,形态呈多形性 ,细胞浆内充满圆形、透明的颗粒。Wright染色 ,细胞浆呈空泡状 ,细胞核变小 ,核浆比减小 ,核仁变小、数目减少 ,细胞的分裂指数降低。苏丹Ⅲ染色 ,胞浆内有阳性的颗粒。电镜下 ,细胞表面微绒毛变短、变粗 ,甚至消失。核内异染色质增多 ,核仁变小、甚至消失。细胞浆内滑面内质网扩张 ,并有脂肪空泡和自噬小体形成。胞浆局部还出现了较多的板层状排列的粗面内质网。细胞核膜和胞膜均完整。AFP和PCNA量 ,随用药浓度和作用时间的增加而降低。结论 苦参碱对HepG2 细胞的生长增殖有抑制作用 ,使HepG2 细胞的某些恶性增殖表型减弱或消失 ,反应了该细胞的恶性程度和侵袭力均减弱或消失。

促凋亡蛋白FasL、Bid在结肠癌组织表达的临床意义

目的了解促凋亡蛋白FasL、Bid在结肠癌组织中的表达及其在生物治疗中的价值。方法应用免疫组织化学MaxVisionTM快捷法检测促凋亡蛋白FasL、Bid在正常结肠黏膜(正常组)18例、结肠腺瘤(腺瘤组)18例及结肠癌(肠癌组)56例的表达。结肠癌Dukes分期为A期21例、B期10例、C期10例及D期15例。表达程度采用半定量积分法。结果各组FasL阳性表达率分别为50%(9/18例)、62.50%(11/18例)和16.07%(9/56例);其阳性表达在正常组与肠癌组及腺瘤组与肠癌组相比,χ2分别为9.82、15.65,P值均<0.01,差异有统计学意义。各组Bid阳性表达率分别为72.22%(13/18)、94.44%(17/18)、66.07%(37/56);其阳性表达在正常组与肠癌组及腺瘤组与肠癌组相比,χ2分别为3.20、5.56,P值分别为>0.05及<0.05,肠癌组与腺瘤组相比差异有统计学意义。结肠癌Dukes D期Bid阳性表达100%与A、B期38.1%、40.00%相比,差异有统计学意义。且Dukes D期有50.00%呈高表达。结论结肠腺瘤是结肠癌的早期阶段,其FasL阳性表达率明显高于结肠癌组织,Bid阳性表达率腺瘤组明显高于正常组及肠癌组,说明两者均参与细胞凋亡调控和结肠癌生物学进程,在结肠癌的发生过程中,由于FasL、Bid缺失,细胞的凋亡程序不能正常进行,致使肿瘤细胞逃避免疫监视,在结肠癌的发生中发挥作用。

鼠双微体2、p16、p53蛋白表达与儿童非霍奇金淋巴瘤的关系

目的探讨鼠双微体2(MDM2)、p16和p53蛋白表达与儿童非霍奇金淋巴瘤(NHL)的相关性。方法用免疫组化S-P法,检测46例NHL(病例组)、12例淋巴结炎(对照组)病理组织MDM2、p16和p53蛋白表达。结果病例组MDM2、p16、p53阳性率分别为5.2%、32.6%、19.6%。MDM2阳性率与病理高度恶性、多位点淋巴结外侵犯、患者血清LDH增高均有显著差异(P均<0.05),与患者的B状态(发热、盗汗、消瘦、体质量下降)间有非常显著差异(P均<0.01);p16阳性率与NHL患者的多位点淋巴结外侵犯、血清LDH增高呈负相关(P均<0.05),与病理高度恶性、临床分期晚、B状态呈负相关(P均<0.01);p53阳性率与NHL病理分类及临床特征均无明显相关性(P均>0.05);MDM2和p16阳性表达间呈负相关。结论NHL儿童MDM2蛋白阳性率较高;p16、p53蛋白阳性率较低;MDM2阳性表达和p16阴性表达与NHL患儿不良状态、不良预后有关。

瘦素与TNF-α在妊高征胎盘中的表达及相关性研究

目的 检测胎盘瘦素、TNF -α的表达并探讨两者的相关性。方法 采用免疫组化方法检测 6 6例妊高征 (分轻中重三组 )及 2 5例正常对照组胎盘瘦素、TNF -α的表达水平。结果 中重度妊高征组胎盘瘦素的表达水平显著高于对照组 (P均 <0 .0 1) ,轻度与对照组无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;妊高征组胎盘TNF -α的表达显著高于对照组 (P <0 .0 5、P <0 .0 1、P <0 .0 1) ;中、重度PIH组瘦素及TNF -α呈正相关性 (r=0 .5 71、P <0 .0 5及r=0 .6 5 7、P <0 .0 1)。结论 瘦素、TNF-α参与PIH发病 ,PIH时TNF -α可调节瘦素水平 ,炎症与代谢过程共同引发PIH。