牙周膜成纤维细胞多种培养法的研究

目的提高人牙周膜成纤维细胞原代培养的成功率,提高组织块贴壁率,缩短培养时间,加快细胞增殖。方法以高血清结合改良组织块培养法培养原代HPDLCs与传统组织块法及改良组织块培养法作比较。通过免疫组化方法鉴定细胞的来源,绘制细胞的生长曲线,对三种方式的培养成功率、组织块贴壁率及细胞增殖速度进行比较。结果三种方法所培养的原代细胞生长均趋于正常,细胞呈长梭形或多角形,波形蛋白鉴定呈阳性,角蛋白鉴定呈阴性,符合正常HPDLCs的正常形态及生物学特点。高血清结合改良组织块培养法的成功率为86.67%,明显高于其他两种方法(P<0.01)。结论高血清结合改良组织块培养法明显提高了HPDLCs原代培养的成功率,适合在临床上运用。

留置导尿管患者尿培养采集方法的研究

目的留置导尿管的患者尿培养采集的成功率和合格率低,本研究旨在提高留置导尿管患者尿培养采集的成功率和合格率。方法选取邯郸市第一医院泌尿科2019年1月至12月665例留置导尿管的患者,按随机数字表法分为参考组和试验组,两组均取晨尿。参考组男176例、女156例,年龄(54.23±5.18)岁;试验组男189例、女144例,年龄(55.18±5.24)岁。参考组采取传统尿培养采集方法,夹闭导尿管1~2 h后分离导尿管和尿袋留取标本;试验组采取改良尿培养采集的方法,留取尿培养前延长导尿管夹闭时间、集尿袋增加采集胶塞、改变尿袋夹闭阀位置、严格无菌操作、于采集胶塞处采集标本。比较两组的尿培养一次采集成功率、标本污染率及患者满意度。结果参考组尿培养标本的成功率、合格率分别为64.7%(215/332)、73.8%(245/332),试验组分别为90.1%(300/333)、94.9%(316/333),两组比较差异均有统计学意义(均P<0.001)。参考组患者满意度为83.7%(278/332),试验组患者满意度为91.9%(306/333),两组比较差异有统计学意义(χ2=10.341,P=0.001)。污染标本菌谱分析,参考组46例污染标本中大肠埃希菌21例、白假丝酵母菌8例、热带假丝酵母菌9例、肺炎克雷伯菌4例、粪肠球菌3例、铜绿假单胞菌1例,试验组3例污染标本中肺炎克雷伯菌2例、铜绿假单胞菌菌1例。结论改良留置导尿管患者尿培养采集方法后,提高了标本采集的成功率和合格率,不仅降低了医疗资源浪费,同时也给临床治疗带来及时准确的科学依据。

乳鼠心肌细胞片状生长的分离、培养及纯化

目的探讨乳鼠心肌细胞分离、培养的方法与条件,从而在体外实验中得到纯度、存活率更高的心肌细胞。方法出生24h内C57BL/6J乳小鼠,开胸分离出左心室并剪碎,用0.1%胰酶与0.1%胶原酶Ⅱ型的混合液消化心肌组织,并用两次差速贴壁法纯化心肌细胞。在倒置光学及荧光显微镜下观察细胞形态,并计数心肌细胞搏动次数,通过台盼蓝染色法检测细胞存活率。结果心肌细胞培养24h后基本全部贴壁,伸出伪足;培养48h后,细胞伪足逐渐增多呈局部片状;培养72h后,大部分心肌细胞的突起相互交联,形成片状。培养第2天细胞存活率达到(95.33±2.51)%。结论本研究方法所培养的心肌细胞具有存活率高、纯度高及稳定性强等优势,有利于加强心肌细胞的基础实验研究。