组织芯片的基本应用范围

目的 探索组织芯片的基本应用范围。方法 将HE染色、组织化学、免疫组织化学、原位杂交和荧光原位杂交技术应用于组织芯片 ,了解这些技术应用于组织芯片的可行性和有效性。结果 这些检测技术在组织芯片中均有清晰、定位明确的着色。结论 HE染色、组织化学、免疫组化、原位杂交和荧光原位杂交技术可有效地用于组织芯片 ,因此 ,组织芯片可用于组织形态观察、组化特性分析以及蛋白和核酸 (RNA和DNA)在组织细胞中的定位性研究。

脑红蛋白mRNA在大鼠脑内的定位

目的 了解脑红蛋白 (NGB)mRNA在大鼠脑内的定位。 方法 用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学技术观察了NGBmRNA在成年大鼠脑中的正常分布。 结果 NGBmRNA在成年大鼠脑中有非常广泛的表达 ,其分布区域包括大脑皮质、海马、丘脑、下丘脑、嗅球及小脑等。NGBmRNA阳性物质定位于神经元的细胞质。 结论 NGBmRNA在大鼠脑中有非常广泛的表达 。

传染性单核细胞增多症的临床病理学特征及免疫表型分型

目的探讨传染性单核细胞增多症临床病理特征、免疫表型及EBV原位感染的特点,以提高对该病的认识和诊断水平。方法收集患者临床资料、各项实验室检查、淋巴结活检病理数据,采用免疫组化EliVision两步法和EBER原位杂交双重标记检测9例传染性单核细胞增多症,并进行文献复习。结果 9例患者平均年龄22岁,起病急,病程短,发热、肝脾及颈部淋巴结肿大,多数EBV CAV-IgM抗体阳性,EBV-DNA载量均增高,多数白细胞总数增高,肝功能异常;外周血淋巴细胞比例明显增高,异型淋巴细胞比例均大于10%。外周血免疫表型为高表达全T细胞标记及CD8,而CD4表达明显减低甚至不表达,CD4^+/CD8^+比值倒置。淋巴结结构有不同程度破坏,呈斑驳状,可见B细胞分化谱,无包膜增厚及间质纤维增生;病变以CD3阳性的淋巴细胞为主,CD20及CD30阳性的活化淋巴样母细胞及免疫母细胞散在分布,强弱不等;EBER原位杂交阳性的部位主要在T区。结论传染性单核细胞增多症是EBV引起的自限性淋巴组织增生性疾病,临床、病理工作中需综合考虑各方面的信息才能减少误诊,做出正确诊断。

一条新肺腺癌多药耐药细胞cDNA片段在胃癌中表达的研究

目的 我们在前期工作中通过抑制消减杂交技术 (Suppressionsubtractivehybridization ,SSH)在肺腺癌细胞中发现了 1条新的耐药相关基因片段。本研究主要探讨该片段在胃癌及癌旁正常组织中的表达情况。方法 利用随机引物法将新片段用地高辛标记为探针 ,通过组织原位杂交技术 (Insituhybridizationhistochemistry ,ISHH)检测其在胃癌及癌旁正常组织中的表达情况。结果 该片段在大多数 ( 12 16例 )胃腺癌组织中有表达 ,在癌旁正常组织中没有表达 ,二者之间相差非常显著 (P <0 .0 1) ,而印戒细胞癌组织中无该片段表达 ,与腺癌相比较相差非常显著 (P <0 .0 1)。结论 在大多数被检测的胃腺癌组织中有该片段的表达 ;该片段可能是一些肿瘤组织本身所具有的 。

肾母细胞瘤过度表达基因mRNA在大鼠中枢神经系统的原位杂交定位

为了了解肾母细胞瘤过度表达基因（ＮＯＶ）ｍＲＮＡ在中枢神经系统的定位，用地高辛标记的ｃＲＮＡ探针原位杂交组织化学方法，研究了ＮＯＶ原癌基因ｍＲＮＡ在成年大鼠中枢神经系统的分布。结果显示，在颞叶、听区、梨状前皮质、纹状皮质、海马复合体、杏仁基内侧核、杏仁皮质核、杏仁内侧核、杏仁外侧核、丘脑腹后内侧核、丘脑腹后外侧核、丘脑外侧背核、下丘脑腹内侧核、下丘脑背侧核、下丘脑背内侧核、下丘脑弓状核、脑桥面神经核、脑桥网状结构、前庭神经外侧核、前庭神经上核、脊髓前角均有较多ＮＯＶｍＲＮＡ阳性神经元分布。

神经特异性转录因子DAT1 mRNA在大鼠中枢神经系统的定位

目的 观察神经特异性转录因子 (DAT1)在大鼠中枢神经系统中的定位。 方法 原位杂交组织化学染色。 结果 在大鼠中枢神经系统中 ,DAT1mRNA阳性反应产物主要位于胞质和突起内 ,DAT1mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓。强阳性信号主要出现于嗅球、梨状皮质、纹状皮质、内嗅皮质、海马CA1区、齿状回、丘脑后外侧核、红核、被盖背侧核、延髓中央网状核、三叉神经运动核、舌下神经核、迷走神经核、楔束外核、疑核等部位 ;中等强度着色主要分布于大脑皮质Ⅱ～Ⅵ层、海马CA2区和CA3区、杏仁核、苍白球、内侧膝状体、外侧膝状体、视上核、未定带、弓状核、室旁核、黑质、中脑网状核、脑桥网状核、巨细胞网状核、外侧网状核、斜方体内侧核、前庭神经核、蜗神经背核、楔束核、中缝背核 ;在隔核、乳头体前核、上丘浅灰质层、下丘中央核、下丘外侧核、中央灰质、三叉神经中脑核、三叉脊束核、孤束核、下橄榄核、中央上核、小脑顶核、小脑间置核、小脑外侧核、脊髓灰质及丘脑的大部分核团可见弱的阳性细胞。 结论 DAT1广泛分布于大鼠中枢神经系统内 ,其分布与多巴胺能神经分布密切相关 ,提示该基因对大鼠中枢神经系统活动 ,尤其是多巴胺能神经递质活动具有重要的调节功能。

大鼠脊髓和后根节内5-HT_(1A,2A)受体mRNA阳性神经元的分布

目的 观察大鼠脊髓及后根节内 5 - HT1 A,2 A受体 m RNA阳性神经元的分布。 方法 原位杂交组织化学技术。 结果 (1) 5 - HT1 A受体 m RNA阳性神经元分布于脊髓灰质各层 ,主要见于后角浅层 ( 、 层 )及 、 层 , ～ 层和 层也有散在分布。前角 ( 层 )内仅有少量阳性神经元 ;(2 ) 5 - HT2 A受体 m RNA阳性神经元的分布较局限 ,主要见于后角浅层及前角 ( 层 )神经元 ,在其他各层仅呈散在分布。在大鼠后根节内观察到 :(1) 10 .4%的后根节细胞呈 5 - HT1 A受体 m RNA阳性 ,阳性细胞以中、小型节细胞为主 ;(2 ) 17.4%的后根节细胞呈 5 - HT2 A受体m RNA阳性 ,阳性细胞也以中、小型节细胞为主。 结论 5 - HT1 A和 5 - HT2 A受体在脊髓和后根节内具有不同的分布特点 ,它们在介导 5 -羟色胺在脊髓水平的镇痛及在外周的致痛作用中可能扮演着重要的角色。

促性腺激素释放激素mRNA阳性细胞在大鼠胃肠胰系统的分布

用原位杂交组织化学法，研究了大鼠胃肠胰系统ＧｎＲＨ－ｍＲＮＡ阳性反应的上皮和神经细胞的分布。胃底腺、胰外分泌部和十二指肠绒毛都分布有（ＧｎＲＨ－ｍＲＶＡ强阳性反应的上皮细胞。在胃和十二指肠的肌间神经丛、粘膜下神经丛也有ＧｎＲＨ－ｍＲＮＡ阳性反应的神经细胞。以上结果和我们先前免疫组织化学研究的结果相一致，说明胃肠胰的一些上皮细胞和副交感神经节细胞都能自身合成ＧｎＲＨ。ＧｎＲＨ对胃肠胰系统可能有重要的功能意义。

仔猪下丘脑内生长抑素mRNA的分布定位──原位杂交组织化学法研究

用原位杂交组织化学法研究了５只仔猪下丘脑内生长抑素ｍＲＮＡ的分布。结果表明，生长抑素ｚｎＲＮＡ主要见于下丘脑腹内侧核、穹窿周核、腹外侧核、弓状核、室旁核和室周核，此外在视交叉上核、视上核、下丘脑前区和后区偶见零散标记细胞。本研究结果与在绵羊和豪猪上用免疫组织化学法获得的结果略有不同，除与研究方法和种属差异有关外，还可能与实验动物年龄有关。

免疫组织化学法双色银染原位杂交与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2基因状态的应用

目的:比较免疫组织化学法(IHC)、双色银染原位杂交(DISH)、荧光原位杂交技术(FISH)对乳腺癌HER-2基因状态的应用效果。方法:回顾性的选取2017年1月至2019年12月我院收治的180例乳腺癌患者作为研究对象,均为女性、单侧,取组织标本行IHC、DISH、FISH检查HER-2。结果:180例患者中各检测方式对HER-2基因的检查效果:IHC检查HER-2表达阴性118例、HER-2表达阳性49例,可疑阳性13例;DISH检查HER-2基因扩增56例、无扩增107例、不确定17例;FISH检查HER-2扩增54例、无扩增107例、不确定19例。各检测方式比较:DISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.788,一致性较好;FISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.784,一致性较好;DISH与FISH检查HER-2基因的Kappa值为0.939,一致性高。结论:IHC、DISH、FISH均可对乳腺癌患者的HER-2基因状态行评估,可以IHC作为筛查手段,若医疗资源许可应当结合DISH检查结果制定治疗方案。

鸭乙型肝炎动物模型的建立和DHBV在肝脏的定位研究

本文利用ＤＨＢＶ阳性血清感染１日龄雏鸭，感染后２、４、８周以血清斑点杂交和Ｄｏｔ－ＥＩＡ检测鸭血清中的ＤＨＢＶ－ＤＮＡ和ＤＨＢｓＡｇ，其阳性率分别为５６．３％、６５．６％、７４．２％和５３．１％、７１．９％、７０．９％。进一步采用原位杂交和免疫组化对鸭肝组织内ＤＨＢＶ－ＤＮＡ和ＤＨＢｓＡｇ进行检测，结果表明ＤＨＢＶ－ＤＮＡ主要存在于细胞浆中，而ＤＨＢｓＡｇ主要分布于细胞浆及细胞膜。对肝组织的病理检查及胶原纤维特殊检测发现，ＤＨＢＶ阳性组与阴性组无明显差别。

大鼠延髓内含前-原脑啡肽mRNA、甲硫氨酸-脑啡肽和亮氨酸-脑啡肽神经元的分布

应用原位杂交和免疫组织化学方法,对成年大鼠延髓内含前-原脑啡肽(PPE)mRNA和甲硫氨酸-脑啡肽(M-ENK)与亮氨酸-脑啡肽(L-ENK)免疫反应神经元进行观察。结果表明:含PPEmRNA的神经元胞体,多数分布在孤束核、腹外侧区以及两者之间的网状结构等形成的一条从背内侧到腹外侧区的弧形带内。M-ENK与L-ENK样免疫反应阳性结构(神经元胞体、纤维和终末)也主要密集分布在该带内。本结果对ENK(M-ENK和L-ENK)参与延髓内脏功能活动的调控过程,提供了进一步的形态学证据。

病理性瘢痕中结缔组织生长因子的表达及其意义

目的:观测结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)在瘢痕组织中的表达,以探讨其与病理性瘢痕形成的关系。方法:分别取正常皮肤20例、成熟瘢痕20例、增生性瘢痕20例和瘢痕疙瘩20例标本,经HE染色、原位杂交(SABC法)染色,用图象分析系统定量分析CTGF在不同组织中表达的差异性。结果:CTGF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、瘢痕疙瘩边缘正常皮肤中呈强阳性表达,明显高于其在正常皮肤中的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);其在成熟瘢痕、增生瘢痕边缘正常皮肤呈弱阳性表达,与正常皮肤相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CTGF在病理性瘢痕的发生发展中起重要作用。

LMO3 mRNA在小鼠脑发育过程中的表达

目的：研究不同发育时期小鼠脑内LMO3的表达．方法：采用以SYBR Green Ⅰ为荧光染料的定量RT-PCR及以地高辛标记的cRNA为探针的原位杂交组织化学法检测LMO3基因在小鼠脑发育过程中的表达．结果：FQRT-PCR结果表明，LMO3在出生前高表达，P7d后表达水平急剧下降，至成年都维持在一个较低的水平．LMO3 mRNA在小鼠胚胎期E10．5d即有表达，但仅限于整个脑泡组织内，胚体其他区域均为阴性；E11．5d脑区信号逐渐加强，无核团及脑区的特异性，胚体其他部分仍为阴性；E15．5～P0d期LMO3阳性信号在几乎所有观察的脑区均有广泛而较强的着色；P7d LMO3阳性信号较出生前变弱，分布逐渐集中；P14～P60d LMO3mRNA表达范围较P7d逐渐缩小，但仍有广泛表达，阳性信号主要集中于不同核团，表达有强弱之分．结论：LMO3基因可能与小鼠出生前脑的发育以及出生后特定脑区神经元的特化及特性维持有关．

脑红蛋白mRNA在大鼠眼球中的表达

目的了解脑红蛋白(Ngb)mRNA在大鼠视网膜中的定位。方法用地高辛标记的cRNA原位杂交组织化学技术观察成年Wistar大鼠视网膜中脑红蛋白mRNA的正常分布。结果NgbmRNA在成年大鼠视网膜中表达强烈,主要分布于外、内核层及神经节细胞的细胞质。结论NgbmRNA在大鼠的视网膜中高度表达,提示Ngb基因可能在维持视网膜中氧平衡状态时发挥重要作用。

实验性早期糖尿病大鼠视网膜水通道蛋白4及其mRNA的表达变化

目的:探讨实验性早期糖尿病鼠视网膜水通道蛋白4(AQP4)及其mRNA的表达变化及其意义。方法:用链脲菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射的方法建立大鼠糖尿病模型,运用墨汁灌注实验检测视网膜微血管渗漏情况;用免疫荧光组织化学检测AQP4在视网膜内的分布和表达变化;用原位杂交和RT-PCR检测AQP4 mRNA在视网膜内的分布及表达变化。结果:与同龄正常对照组大鼠相比,早期糖尿病鼠视网膜未见明显血管渗漏现象,但存在部分细胞水肿、节细胞数目减少、感光细胞外节排列紊乱等病理改变;免疫组织化学、原位杂交和RT-PCR结果显示,模型鼠视网膜内AQP4及其mR-NA的表达明显增强。结论:实验性早期糖尿病鼠视网膜,在微血管病变发生前,已存在细胞水肿等病理改变;AQP4及其mRNA的表达明显上调。AQP4表达上调可能是糖尿病早期视网膜水肿形成、视功能下降的重要原因。

小鼠坐骨神经损伤后内源性BDNF对脊髓前角运动神经元内突触素Ⅰ mRNA表达的调节

本研究旨在探讨小鼠坐骨神经损伤后内源性BDNF是否参与调节脊髓前角运动神经元内突触素ImRNA的表达。在小鼠坐骨神经压榨损伤后,腹腔注射BDNF抗体中和内源性BDNF,动物存活1～2周,用组织原位杂交技术观察突触素ImRNA在脊髓腰骶膨大部前角运动神经元内的表达。结果显示:注射BDNF抗体后坐骨神经损伤侧脊髓前角突触素ImRNA阳性运动神经元的数目和平均光密度与实验对照组相比显著下降(P<0.01)。本研究结果提示,小鼠坐骨神经损伤后内源性BDNF可参与脊髓前角运动神经元内突触素ImRNA表达的调节。

仔猪海马结构及其周围皮质内生长抑素mRNA的分布

用原位杂交组织化学法研究了５头仔猪海马结构及其周围皮质内生长抑素ｍＲＮＡ的分布。结果表明，生长抑素ｍＲＮＡ主要分布于海马的始层和齿状回的多形层，偶见于海马的辐射层和锥体细胞层。此外，在内嗅区和海马旁回内也见到标记细胞，主要位于深层。

电针可增强大鼠脑内前脑啡肽原mRNA的表达:原位杂交组织化学研究

本文采用原位杂交组织化学技术，结合计算机图象处理系统，对电针后大鼠脑内前脑啡肽原（ＰＰＥ）ｍＲＮＡ的表达进行半定量的观察。ＰＰＥｍＲＮＡ探针以半抗原的地高辛标记。电针１０小时之后，ＰＰＥｍＲＮＡ阳性信号的强度和神经元内合ＰＰＥｍＲＮＡ的面积在许多与痛和镇痛有关的核团明显增加，如尾核，伏核，视前区，中脑的脚间核，导水管周围灰质，黑质，红核等。表明电针促进了ＰＰＥｍＲＮＡ在大鼠脑内的表达。这可能是针刺具有累积和长期效应的机制之一。

LMO3 mRNA在小鼠中枢神经系统的表达定位

目的 观察神经特异性转录因子LMO3mRNA在小鼠中枢神经系统中的定位。方法 原位杂交组织化学染色。结果LMO3mRNA阳性神经元可见于大脑、小脑、丘脑、脑干、脊髓，在小鼠中枢神经系统中，LMO3mRNA阳性反应产物主要位于细胞质和突起内。强阳性信号主要出现于大脑皮质的Ⅱ一Ⅵ层、梨状皮质、内嗅皮质、海马的CA1区、齿状回、中脑的黑质致密部、红核、室旁核、巨细胞网状核、外侧网状核、三叉神经脑桥核、面神经核、三叉神经运动核、舌下神经核等部位；中等强度着色主要分布于扣带前皮质、嗅球、海马的CA2区、梨状内核、杏仁核等部位；海马的CA3区、尾壳核、苍白球、杏仁复合体、丘脑、三叉神经脊束核、疑核、中缝核团、小脑间置核及外侧核、浦肯野细胞可见弱的阳性细胞。结论LMO3基因在CNS的广泛分布提示它除了在多巴胺神经递质的活动中起作用外，还参与了机体的学习记忆、嗅觉的调节。