外水相对胰岛素载药纳米颗粒胶体系统分散性的影响

目的探索不同外水相组成对胰岛素纳米颗粒胶体系统分散性的影响,为深入开展纳米载药颗粒研究提供依据。方法采用高速高压联合均质机,经乳化-溶剂挥发法制备不同粒径的纳米载药颗粒,再通过光学显微镜、扫描电镜、激光粒径分析仪分析颗粒在胶体系统中的分散情况。结果高速均质和高速高压均质聚乙烯醇组粒径分布(d50)分别为(5·410±0·487)μm和(0·389±0·034)μm,高速均质和高速高压均质偏磷酸钠-柠檬酸盐缓冲液组粒径分布(d50)分别为(5·505±0·854)μm和(0·204±0·020)μm。联合均质结果缓冲液组粒径分布小于聚乙烯醇组,颗粒表面光滑平整;比表面积与之相反,聚乙烯醇组低于缓冲液组。结论偏磷酸钠-柠檬酸盐缓冲液作为乳化-溶剂挥发法制备胰岛素纳米载药颗粒的外水相,能够获得更好的分散体系。

IGF-1a的克隆与表达

目的构建IGF-1a,并将其表达及纯化。方法用多重PCR技术获得人IGF-1a基因,采用酶切与连接的方法,将其连接至pET28a载体,用IPTG诱导转化pET28a-Cpn10-IGF-1a表达载体的大肠杆菌,以镍金属鳌合亲和层析法纯化融合蛋白质。结果构建了IGF-1a的表达载体pET28a-Cpn10-IGF-1a,DNA序列测定结果表明构建正确;以镍金属鳌合亲和层析获得纯度为98%的蛋白质。结论用分子克隆技术正确克隆IGF-1a,并成功表达与纯化IGF-1a蛋白。