变应性鼻炎患者血清IL-17和IL-23的表达及临床意义

目的:检测变应性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者血清IL-17和IL-23的表达水平并探讨其临床意义。方法:检测25例AR患者(观察组)血清IL-17、IL-23、s Ig E(过敏原特异性Ig E)的表达水平,并以23名健康体检合格者(对照组)为对照,比较两组人群血清中IL-17、IL-23、s Ig E表达水平的差异,并探讨AR患者血清中IL-17、IL-23、s Ig E三者间的相互关系。结果:观察组患者血清中IL-17、IL-23及s Ig E水平均高于对照组(P均<0.01);观察组患者血清中IL-17、IL-23、s Ig E三者两两之间均呈线性正相关关系(P均<0.05)。结论:IL-17、IL-23参与了AR的发生发展过程,与s Ig E的形成可能有关。

甘氨酸对急性坏死性胰腺炎鼠血和胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10的影响

目的:探讨甘氨酸对急性坏死性胰腺炎鼠血和胰腺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10的影响。方法:Wistar大鼠150只,随机分为3组:假手术组(SO)、急性坏死性胰腺炎组(ANP)和急性坏死性胰腺炎+甘氨酸处理组(ANP+Gly),以牛磺胆酸钠复制急性坏死性胰腺炎大鼠模型,ANP+Gly组大鼠胰管内给予牛磺胆酸钠前10min静脉给予甘氨酸1g/kg。观察血和胰腺组织中ET、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10含量变化,同时观察各组大鼠胰腺组织的病理变化、24h病死率及平均生存时间。结果:在0h、2h、4h、8h和12h的血和胰腺组织中ET、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10水平,ANP组和ANP+Gly组均显著高于SO组(除0h组及ANP组的IL-1012h外)(P<0·01/P<0·05),且在ANP和ANP+Gly组ET、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8随病程进展而升高(P<0·05),在ANP组IL-10水平随病程进展降低(P<0·05),而在ANP+Gly组IL-10水平随病程进展增高(P<0·05)。在相同时段除ET在ANP组和ANP+Gly组无显著差异外(P>0·05),除0h组外,TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8水平在ANP组显著高于ANP+Gly组(P<0·01),而IL-10水平(除0h和2h组无差异外)ANP+Gly组显著高于ANP组(P<0·05/0·01)。虽然ANP组和ANP+Gly组大鼠胰腺组织的病理变化无显著差异,但ANP+Gly组大鼠24h病死率显著低于ANP组(P<0·05),平均生存时间显著延长于ANP组(P<0·05)。结论:ET、TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和IL-10参与了大鼠ANP的病理过程,甘氨酸可减少促炎细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的产生,上调抗炎细胞因子IL-10的负调控作用,有助于减轻ANP时炎性细胞因子瀑布样级联反应,降低大鼠24h病死率及延长平均生存时间。

阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞功能的影响

目的探讨阿奇霉素对支气管哮喘患儿外周血辅助性T淋巴细胞(Th)1/Th2功能的影响。方法选取24例支气管哮喘发作期患儿为支气管哮喘组,20例健康儿童为健康对照组。二组均在无菌条件下获取外周血单个核细胞(PBMC)悬液,哮喘组予不同质量浓度(0.2、0.1、0.05、0mg/L)阿奇霉素治疗,健康对照组未予阿奇霉素干预,均体外培养48h。酶联免疫吸附(ELISA)法检测培养上清液中干扰素-γ(IFN-γ)、IL-4及IL-10水平变化。采用SPSS11.5软件进行统计学分析。结果1.支气管哮喘组患儿PBMC产生IL-4水平明显高于健康对照组(P<0.05),IFN-γ/IL-4比值明显低于健康对照组(P<0.05),IFN-γ和IL-10水平与健康对照组比较无显著性差异(Pa>0.05);2.支气管哮喘组患儿PBMC在阿奇霉素0.1mg/L水平条件下,IL-4分泌水平明显高于0.2mg/L和0.05mg/L组(Pa<0.05)及空白对照组(P<0.01),各组间PBMC分泌IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值均无显著性差异(Pa>0.05);3.阿奇霉素0.2mg/L和0.1mg/L组PBMC产生IL-10水平均明显高于空白对照组(P<0.01,0.05),0.2mg/L组明显高于0.05mg/L组(P<0.05),其他各组间均无显著性差异(Pa>0.05)。结论常规质量浓度阿奇霉素(0.1mg/L)对支气管哮喘患儿外周血Th1/Th2平衡无明显影响,但可通过上调PBMC产生IL-10水平,而间接发挥其免疫调节作用。

NF-κB在牙髓卟啉单胞菌脂多糖诱导小鼠成骨细胞白介素6表达中的作用

目的:探讨核因子κB(NF-κB)在牙髓卟啉单胞菌(P.e)脂多糖(LPS)诱导小鼠成骨细胞株MC3T3-El白介素6(IL-6)表达中的作用。方法:10 mg/L P.e-LPS刺激MC3T3-El细胞不同时间后,应用免疫荧光方法检测NF-κB核易位情况和BAY-117082对NF-κB核易位抑制情况,反转录聚合酶链反应(RT—PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测BAY-117082对MC3T3-El细胞的IL-6基因和蛋白表达的影响。采用SPSS 13.0软件包对结果进行多因素方差分析和Dunnett t检验。结果:在静息状态下,NF-κB定位在胞质中,10 mg/L P.e-LPS刺激MC3T3-El细胞30 min后即引起NF-κB快速的核易位;60 min后,大部分NF-κB重新定位在胞质里,10μmol/L BAY-117082预处理1 h可抑制P.e-LPS引起的NF-κB核易位,降低P.e-LPS诱导MC3T3-El细胞IL-6 mRNA表达水平和IL-6蛋白的分泌水平,其中,蛋白分泌水平从(774.983±6.585)ng/L降低至(377.384±14.620)ng/L(P<0.O1),而BAY-117082单独刺激组与空白对照组无显著差异。结论:P.e-LPS可诱导MC3T3-El细胞中NF-κB的核易位,P.e-LPS可通过激活NF-κB信号途径诱导MC3T3-El细胞产生IL-6。

芍药苷对骨髓间充质干细胞增殖的影响

背景:研究显示芍药苷具有补血及治疗自身免疫性疾病的功效,骨髓间充质干细胞对机体的造血及免疫功能也起着重要的作用,但芍药苷对骨髓间充质干细胞的增殖及细胞因子的分泌和表达有何影响报道较少。目的:探讨芍药苷对人骨髓间充质干细胞增殖及白细胞介素6表达的影响。方法:采用密度梯度离心法和贴壁培养法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,用流式细胞术和成脂及成骨诱导法鉴定人骨髓间充质干细胞生物学特性,MTT法检测不同浓度芍药苷对人骨髓间充质干细胞增殖的影响,ELISA法测定芍药苷干预人骨髓间充质干细胞后培养上清液中白细胞介素6的分泌水平,RT-PCR检测芍药苷干预后白细胞介素6 m RNA的表达情况。结果与结论:成功分离出骨髓间充质干细胞,具有成骨、成脂分化潜能。与对照组相比,芍药苷浓度为2μmol/L和10μmol/L可明显促进骨髓间充质干细胞增殖。10μmol/L芍药苷干预骨髓间充质干细胞后,G0/G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著升高。10μmol/L芍药苷干预组骨髓间充质干细胞白细胞介素6的分泌和m RNA表达均显著高于对照组(P<0.01)。由此得出,一定浓度的芍药苷可促进骨髓间充质干细胞增殖,并提高骨髓间充质干细胞分泌白细胞介素6水平和基因表达。

代谢综合征患者血清白介素10与胰岛素抵抗的关系

目的探讨代谢综合征(MS)患者胰岛素抵抗(IR)与血清白介素10(IL-10)水平的关系。方法 MS患者及年龄相匹配的正常对照组各18例。以高胰岛素-正常血糖钳夹技术检测葡萄糖代谢率(M值),评价IR程度:采用酶联免疫吸附法检测血清IL-10水平,用Pearson相关分析法分析血清IL-10水平与M值的相关性。结果 MS组M值显著低于对照组[(5．76±1．81)mg／kg·min vs (8．39±1．25)mg／kg·mim,P<0．05];MS组血清IL-10水平显著低于对照组[1．3(0．8／3．1) pg／ml vs 2．4(1．1／4．5)pg/ml,P<0．05];Pearson相关分析法显示血清IL-10水平与M值正相关(P<0．05)。结论 MS患者血清IL-10水平降低,可能与IR的发生有关。

丁酸钠诱导的未成熟树突状细胞的免疫学功能研究

目的:探讨丁酸钠对人外周血来源的树突状细胞(DC)的成熟状态和免疫学功能的影响。方法:通过粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)结合丁酸钠体外诱导人外周血来源的DC,6d后结合不同成熟因子诱导成熟,并以流式细胞仪、FITC标记的Dextran的内吞检测、混合淋巴细胞反应(MLR)、ELISA法分别检测DC的表面标志、内吞能力、DC刺激淋巴细胞增殖能力和白细胞介素12(IL-12)分泌量的改变。结果:丁酸钠可以抑制DC成熟,使DC具有较强的抗原吞噬能力,而刺激淋巴细胞增殖能力和IL-12的分泌能力下降。结论:丁酸钠可以抑制DC成熟,诱导不成熟DC生成,在移植免疫耐受方面具有较好的应用前景。

白介素10对大鼠缺血梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax表达的作用研究

目的探讨白介素10对大鼠脑缺血梗死灶周围Bcl-2和Bax表达的作用。方法48只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血组(MCAO组)、脑缺血+溶剂对照组(Vehicle组)和脑缺血+IL-10干预组(IL-10组),免疫组化和RT-PCR法观察术后24h梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax表达水平的变化。结果与Sham相比,MCAO组梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax的表达显著上调,Bcl-2/Bax比值显著下降;与Vehicle组比,IL-10组Bcl-2的表达显著上调,Bax表达显著下调,Bcl-2/Bax比值显著增加。结论IL-10与脑缺血梗死灶周围Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax比值增加有关,提示IL-10可能与抑制梗死灶周围脑组织神经细胞凋亡有关。

塞来昔布对人三阴性乳腺癌裸鼠体内白细胞介素6和白细胞介素8水平的影响

目的探讨塞来昔布对人三阴性乳腺癌(TNBC)裸鼠体内白细胞介素6(IL-6)和IL-8水平的影响。方法人TNBC细胞MDA-MB-231接种于裸鼠背部皮下,建立人TNBC裸鼠移植瘤模型。随机分为对照组和塞来昔布低、中、高剂量组。42 d后观察裸鼠一般状况的变化、用药前后肿瘤生长情况及肿瘤质量变化;ELISA法检测各组裸鼠血清中IL-6和IL-8含量的变化;RT-PCR检测肿瘤组织中IL-6和IL-8 mRNA的变化;免疫组化法检测肿瘤组织中IL-6和IL-8蛋白表达的变化。结果塞来昔布各组肿瘤大小和瘤重较对照组均明显减小,差异均有统计学意义(P<0.05)。经塞来昔布治疗后,塞来昔布低、中、高剂量组裸鼠血清中IL-6和IL-8的含量明显降低,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),肿瘤组织中IL-6和IL-8 mRNA及蛋白的表达均较对照组明显减少。结论塞来昔布可以抑制人TNBC裸鼠体内IL-6和IL-8的分泌及表达,进而影响肿瘤发展的进程。

瑞舒伐他汀逆转动脉粥样硬化斑块及其与斑块稳定性的实验研究

目的探讨动脉粥样硬化斑块发生、发展和破裂机制，以及瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化斑块及其稳定性的影响。方法18只普通健康大耳白兔随机分为对照组（6只）、高脂组（6只）和瑞舒伐他汀干预治疗组（6只），建立动脉粥样硬化动物模型。分别采用酶比色法、氧化酶终点法检测血清甘油三脂（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白一胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白．胆固醇（LDL—C）水平；双抗体夹心酶联免疫吸附（ELISA）法、HE染色和免疫组织化学染色检测血清白细胞介素-6（IL-6）和热休克蛋白60（hsp60）表达水平；图像分析软件计算血管面积、斑块面积、斑块比例及hsp60阳性表达面积。结果至实验结束时，瑞舒伐他汀干预治疗组动物血清甘油三脂、总胆固醇和低密度脂蛋白．胆固醇水平以及IL-6和hsp60表达水平均低于高脂组（P〈0．05）。相关分析结果显示，手术前后血清IL-6与hsp60表达水平均呈正相关关系（r=0．743，0．894；P=0．008，0．006）。至实验结束时，瑞舒伐他汀干预治疗组动物血管面积、斑块面积、斑块比例及hsp60阳性表达面积均小于高脂组（p〈0．05），斑块性质稳定。结论瑞舒伐他汀可以降低血清甘油三脂、总胆固醇和低密度脂蛋白-胆固醇水平，从而逆转动脉粥样硬化斑块进展。其药理学机制可能与其抑制hsp60参与的炎性反应有关。

大鼠IL-10基因真核表达质粒的构建及其在BRL细胞中的表达

目的:构建大鼠IL-10基因的真核表达载体,观察其在大鼠肝细胞系BRL中的表达,比较有无受体介导的脂质体的转染效率。方法:抽提外周血单个核细胞的总RNA,通过RT-巢式PCR方法获得大鼠IL-10的全长编码序列,定向克隆到真核表达载体pcDNA3·0,并进行限制性内切酶酶切及测序鉴定。将重组质粒分别通过脂质体TransfastTM与去唾液酸糖蛋白受体介导的脂质体PEIjet-gal转入大鼠肝细胞系BRL,通过RT-PCR方法检测IL-10mRNA的表达,比较二者的转染效率,用ELISA法检测后者分泌型IL-10的表达。结果:经酶切及测序鉴定证实,重组质粒插入片段与大鼠IL-10的全长编码序列完全相符。发现受体介导的脂质体PEIjet-gal转染效率明显高于非受体介导的脂质体TransfastTM。通过受体介导的脂质体转染,BRL细胞获得高水平的IL-10表达。结论:成功地构建pcDNA3·0-IL-10重组质粒。受体介导的脂质体对肝细胞有较高的转染活性,可能成为IL-10基因治疗肝纤维化的有效转染载体。

运动对慢性心理应激大鼠行为及血清皮质醇、IL-2、IL-8的影响

目的研究运动对慢性心理应激大鼠行为及血清皮质醇、IL-2、IL-8的影响方法建立慢性心理应激模型,进行6周游泳训练;通过旷场实验及悬尾实验观察各组大鼠在应激及运动调节前后的行为学变化;测定血清皮质醇、IL-2、IL-8的含量。结果(1)应激组大鼠血清皮质醇含量显著高于对照组(P<0.01),而IL-2、IL-8含量显著低于对照组(P<0.05);60min运动组血清皮质醇含量显著低于对照组(P<0.05),而血清IL-2和IL-8含量均显著高于对照组(P<0.05);应激+30min运动组、应激+60min运动组血清皮质醇含量显著低于应激组(P<0.01),IL-2和IL-8含量显著高于应激组(P<0.01)。(2)旷场实验结果显示,与对照组相比,应激组大鼠中央格停留时间最长,穿格次数、直立次数及修饰时间最少,有统计学意义;与应激组相比,应激+30min运动组及应激+60min运动组均存在统计学意义(P<0.01)。(3)悬尾实验结果显示,应激组大鼠静止时间最长,挣扎次数最少,与对照组相比有统计学意义(P<0.01);与应激组相比,应激+30min运动组及应激+60min运动组均存在统计学意义(P<0.01)。结论慢性心理应激可引起大鼠行为异常,可能与HPA轴释放过量皮质醇,从而使免疫功能受到抑制有关。适量运动能够调节HPA轴适应性,降低皮质醇的过量释放,维持免疫功能稳定,调节心理应激水平。

白藜芦醇对IL-lβ诱导体外培养人骨关节炎软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响

目的通过体外培养骨关节炎(OA)软骨细胞体系,了解白藜芦醇对白细胞介素(IL)-lβ诱导OA软骨细胞蛋白聚糖代谢的影响。方法软骨细胞采自OA患者,采用分阶段酶消化法体外原代培养人软骨细胞。在培养液中加入IL-lβ诱导剂,设立兔血清对照组、实验对照组和白藜芦醇加药组;给予实验兔以白藜芦醇剂量灌胃后,抽取含药血清培养细胞。采用3种方法了解蛋白聚糖的代谢水平:1)用二甲基亚甲蓝分光光度法(DMMB法)检测细胞中及培养液中的糖安多糖(GAG)含量;2)酶联免疫吸附法检测培养液中蛋白聚糖的不同代谢片段(Mab-3B3和5D4);3)反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测软骨细胞的蛋白聚糖、基质金属蛋白酶-1(matrix metalLoproteinases,MMPs-1)和MMPs-3的mRNA表达水平。结果各浓度白藜芦醇含药血清组体外培养的软骨细胞释放入培养液中GAG百分比均值明显低于对照组,两者相比差异有统计学意义(P<0.01),随白藜芦醇的增加,释放入培养液中GAG的百分比逐渐降低;3B3含量的均值较对照组相比明显增高(P<0.01),与白藜芦醇浓度呈正相关,释放入培养液中5D4含量的均值则明显降低(P<0.05),与白藜芦醇浓度呈负相关;白藜芦醇可以增加OA患者软骨细胞和IL-1β诱导的OA患者软骨细胞蛋白聚糖mR-NA表达,减低MMPs-1、MMPs-3 mRNA的表达。结论白藜芦醇可以抑制IL-1β对OA患者软骨细胞蛋白聚糖代谢的促进作用,达到保护软骨,防止OA的目的 。

尿激酶对大鼠重症急性胰腺炎肠道微循环障碍的作用

目的:观察重症急性胰腺炎(SAP)时肠道微循环血流量和白细胞介素1β(IL-1β)的变化以及尿激酶的作用。方法:雄性Wistar大鼠192只,随机分成对照组、SAP组和治疗组。以5%牛磺胆酸钠胰腺逆行胰胆管注射复制SAP模型,治疗组经颈静脉注射尿激酶。采用放射生物微球技术在制模后2,6,12,24h分别测定肠组织微循环血流量,同时检测血清IL-1β水平,并观察肠黏膜病理改变。结果:SAP组在制模后各时段肠组织血流量较对照组明显减少(P<0.01),血清IL-1β活性较对照组明显升高(P<0.01),肠黏膜损伤程度较对照组明显加重(P<0.01);治疗组2,6,12h肠组织血流量与SAP组比较升高(P<0.01),24h变化不明显,血清IL-1β活性各时段与SAP组比较减少(P<0.01),肠黏膜损伤程度较SAP组明显改善(P<0.01)。结论:SAP时肠组织血流量减少同时伴有炎性介质IL-1β的升高,尿激酶能改善微循环,减轻肠道损伤。

白头翁汤及其主要成分对脂多糖诱导的内皮细胞体外分泌IL-1α和IL-6及ET-1的影响

为探讨白头翁汤及其主要成分对细菌内毒素(LPS)诱发的病理效应的药理作用,培养内皮细胞至单层融合后加入内毒素,3 h后加入高(10 mg·mL-1)、中(5 mg·mL-1)、低(1 mg·mL-1)3种剂量的8种药物,继续培养21 h后收集细胞上清液,用ELISA方法测定IL-1α、IL-6和ET-1的含量。结果表明:白头翁汤及其成分白头翁皂苷B4、小檗碱、巴马汀可以极显著或显著抑制LPS诱导的IL-1α高水平分泌,白头翁汤及其成分秦皮甲素、秦皮乙素、白头翁素可以极显著或显著抑制LPS诱导的IL-6高水平分泌,白头翁汤及其成分秦皮乙素、白头翁素可以极显著或显著抑制LPS诱导的ET-1高水平分泌。结论:白头翁汤及其主要成分具有潜在的抗细菌内毒素作用,可在由IL-1α、IL-6和ET-1介导的机体炎症等病理损伤过程中发挥一定的药理作用。

肾小管上皮细胞白细胞介素13和白细胞介素4受体的表达及其在肾小管损伤中的作用

目的:研究肾小管上皮细胞IL-4受体和IL-13受体的表达及IL-4和IL-13对肾小管上皮细胞形态和功能的影响,并探讨其作用机制。方法:借助人近端肾小管上皮细胞系(HK2),采用RT-PCR,免疫荧光方法检测HK2上IL-4受体和IL-13受体的表达。免疫荧光方法观察不同浓度IL-4和IL-13干预HK2细胞12～48h后HK2损伤标志物RANTES的变化情况。Western blot方法检测IL-4和IL-13干预HK2细胞后,JAK-STAT6信号通路的活化以及JAK-STAT6信号通路特异性抑制剂来氟米特对IL-4和IL-13作用HK2细胞的影响。结果:(1)RT-PCR和免疫荧光结果显示HK2有IL-4II型受体和IL-13I型受体mRNA和蛋白质表达。(2)IL-4和IL-13呈时间-剂量依赖性影响上皮细胞RANTES的表达。100ng/mlIL-4、50ng/mlIL-13作用48h对HK2的损伤作用最为明显。正常HK2细胞RANTES呈阴性,100ng/mlIL-4和50ng/mlIL-13干预48h后,阳性细胞显著增多。(3)Western blot方法结果显示JAK-STAT6磷酸化水平均在IL-4和IL-1350ng/ml作用10min时开始升高,IL-4100ng/ml作用20min达高峰,IL-1350ng/ml20min达高峰。JAK-STAT6信号通路特异性抑制剂来氟米特可阻断JAK-STAT6信号通路的活化,拮抗IL-4和IL-13诱导的HK2细胞RANTES表达。结论:(1)本研究首次证实人近端肾小管上皮细胞存在IL-4和IL-13受体的表达。(2)IL-4和IL-13可通过人近端肾小管上皮细胞上的相应受体造成细胞损伤,表现为RANTES表达增加。(3)IL-4和IL-13的上述作用与细胞内JAK-STAT6信号通路活化密切相关。

针刺辅助低温对CABG术后缺血再灌注心肌的保护作用

目的:观察针刺辅助低温对冠脉旁路移植术(CABG)术缺血再灌注前后心肌细胞c-fos、HSP72基因表达的变化,机体氧自由基以及血清白介素8(IL-8)的影响。方法:选择冠脉搭桥手术48例,随机分为4组:组Ⅰ(针刺+浅低温组),组Ⅱ(针刺+深低温组),组Ⅲ(无针刺+浅低温组),组Ⅳ(无针刺+深低温组)。针刺组在全麻的基础上辅以电针刺激。针刺穴位取双侧内关(PC6)、列缺(LU7)、云门(LU2)穴位。于转流前、转流后60min取右心耳心肌标本,采用Northernblot方法测定mRNA水平。于术前、停转流后60min、术毕各时点从肺动脉导管取血6mL,用ELISA法测定IL-8浓度,同时记录病人的心肌收缩性指标CI、SI、LVSWI、RVSWI。结果:针刺能增强心肌细胞HSP72基因表达,减轻心肌缺血再灌注损伤;增强心肌细胞c-fos基因表达;降低血清IL-8含量,明显抑制由IL-8介导的缺血再灌注心肌损伤。针刺组CI、SI、LVSWI明显高于非针刺组,浅低温组CI、SI、LVSWI、RVSWI明显高于深低温组。转流后组ⅠCI、SI、LVSWI、RVSWI下降幅度明显小于其他3组;术毕4组CI、SI、LVSWI、RVSWI均明显下降,组Ⅳ下降尤显著。结论:针刺对CABG术缺血再灌注前后心肌细胞有保护作用,且针刺辅助浅低温的保护作用更明显。

慢性心房颤动患者右心耳CD11b、IL-6和TNF-α基因的表达

目的观察慢性心房颤动(房颤)患者右心耳中性粒细胞黏附因子11b(CD11b)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的改变。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定心房组织中CD11b、IL-6和TNF-α的mRNA含量,用免疫组织化学检查评价IL-6和TNF-α的表达情况。结果与窦性心律组相比,慢性房颤组CD11b、IL-6和TNF-α的mRNA表达显著增加。心房肌细胞IL-6和TNF-α的表达强度也显著大于窦性心律组。结论慢性房颤患者心房组织CD11b、IL-6和TNF-α的mRNA表达显著增加,炎症反应可能是房颤发生和维持的因素之一。

重组白细胞介素13促进成纤维细胞增殖及胶原合成

目的:观察重组白细胞介素13(rIL-13)对3T3细胞的作用,探讨肺纤维化的发生机制。方法:3T3细胞分为实验组和对照组,分别加入rIL-13(80μg/L)及DMEM培养液,作用24h、48h,利用透射电镜观察成纤维细胞的超微结构,用Hoechst试剂盒观察细胞DNA形态;用MTT法测细胞增殖率,用Western blotting检测成纤维细胞分泌Ⅰ型胶原以及用放免法检测细胞上清中IL-6、IL-8水平。结果:实验组细胞DNA合成增加,细胞核增大,细胞质中可见较多核糖体及线粒体;rIL-13呈剂量依赖方式刺激成纤维细胞增殖,当rIL-13浓度在40-160μg/L时,细胞增殖率几乎呈直线式增长。对照组及实验组均可检测到Ⅰ型胶原(CoⅠ),对照组分泌胶原的量显著高于对照组(P<0·01)。细胞培养上清中,实验组IL-6、IL-8含量显著高于对照组(P<0·01)。结论:rIL-13通过促进成纤维细胞增殖及分泌炎性介质和Ⅰ型胶原,可能在肺纤维化的发病机制中发挥关键作用。

IL-33通过ERK1/2信号通路促进哮喘模型小鼠气道重塑

目的探讨白细胞介素(IL-33)诱导支气管哮喘气道重塑的机制。方法雄性BALB/c小鼠随机分为对照组、卵清蛋白(OVA)组和IL-33中和抗体联合OVA组。HE染色观察小鼠气道重塑,免疫组织化学染色及Western blot法观察IL-33、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、1型胶原蛋白(Col1)的表达,Western blot法检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及丝裂原和应激激活的蛋白激酶1(MSK1)的磷酸化水平;培养HLF-1人成纤维细胞,分别给予人重组IL-33(r IL-33)、ERK1/2的抑制剂U0126联合r IL-33、MSK1的抑制剂H89联合r IL-33处理;实时荧光定量PCR及Western blot法检测α-SMA与Col1的mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光细胞化学技术观察ERK1/2及MSK1的磷酸化。结果 OVA组小鼠发生气道重塑,IL-33、α-SMA、Col1表达增加,ERK1/2及MSK1磷酸化增强;IL-33中和抗体预处理可显著降低OVA诱导的小鼠气道重塑及IL-33、α-SMA、Col1表达以及ERK1/2及MSK1的磷酸化。U0126或H89可抑制r IL-33引起的HLF-1细胞中ERK1/2及MSK1磷酸化增强及α-SMA与Col1表达增加。结论 IL-33通过ERK1/2-MSK1信号通路促进哮喘模型小鼠气道重塑。