古代埃及的传记文学评述

传记文学是古代埃及文学中早期的形式之一，也是古代埃及文学的一个重要组成部分。保留下来的古埃及传记文学作品，大多是歌颂法老、贵族大臣的所谓“辉煌业绩”和一切“善行”，文中有许多夸大不实之词。但是，不少传记作品却涉及了主人生活的时代和社会关系，仍能让我们了解到古埃及人心中的某些价值标准和社会道德规范。同时，传记作品的一些记载，可以让我们得知古埃及片段的历史事实，对于研究古埃及人的社会生活、古代埃及的国家机关、军事活动和对外关系，都具有一定的史料价值。

环氧化酶2特异性siRNA真核表达质粒的构建与鉴定

目的构建环氧化酶2(COX-2)特异性小干扰RNA(siRNA)真核表达质粒,研究其对人结肠癌细胞COX-2的阻抑作用。方法设计短发夹结构的COX-2siRNA对应模版DNA序列,退火处理后克隆至pGPH1-GFP-Neo质粒,构建重组质粒pGPH1-GFP-Neo-COX-2。将重组质粒转染人结肠癌HT-29细胞,采用RT-PCR、Westernblot分别从mRNA和蛋白水平检测COX-2表达。结果酶切及测序证实质粒pGPH1-GFP-Neo-COX-2构建成功。转染重组质粒72h后可以显著抑制HT-29细胞COX-2mRNA和蛋白表达(P<0.05)。结论成功构建的COX-2siRNA真核表达质粒pGPH1-GFP-Neo-COX-2可以抑制人结肠癌HT-29细胞COX-2基因表达。

宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞中HIF-1α、survivin的表达及其与放射敏感性的关系

目的探讨在乏氧条件下,低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和存活蛋白(survivin)在宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞中的表达情况及与放射敏感性的关系。方法采用Western blot法检测未乏氧(空白对照组)和乏氧后24 h(阴性对照组)时SiHa细胞中HIF-1α及survivin的表达情况。采用siRNA技术转染SiHa细胞,构建HIF-1α(HIF-1αsiRNA组)、survivin(survivin siRNA组)表达沉默细胞株。分别对4组细胞进行不同剂量的照射,通过苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态,并比较4组细胞的放射敏感性。结果Western blot法检测乏氧培养后SiHa细胞中HIF-1α和survivin蛋白表达均升高,其中HIF-1α在未乏氧时明显低表达,乏氧后表达明显升高。HE染色结果显示,HIF-1αsiRNA组、survivin siRNA组细胞放疗后形态发生明显改变。4组随着剂量增加,放射增敏比(SER)、集落形成率(PE)、细胞的存活分数(SF)值均下降。在放射剂量为2 Gy和4 Gy时,HIF-1αsiRNA组与survivin siRNA组的SER均高于空白对照组和阴性对照组。结论乏氧环境可以上调宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞中HIF-1α和survivin的表达,沉默HIF-1α和survivin的表达对SiHa细胞具有放射增敏作用。

转染组织因子胞内段siRNA阻抑人脐静脉内皮细胞凋亡的体外实验

目的探讨转染组织因子胞内段小片段干扰RNA（siRNA）对血管内皮细胞凋亡的影响。方法体外设计组织因子胞内段siRNA I和siRNA II，插入质粒DNA后用脂质体将其转入人脐静脉内皮细胞株（HUVEC）中。3组HUVEC分别转染siRNAI质粒（siRNA I组）、siRNA II质粒（siRNAII组）和pcDNA^TM 6．2GW／-miR质粒（对照组）。取各组HUVEC细胞，分别与CD8^＋T淋巴细胞进行混合淋巴细胞反应。用流式细胞仪检测混合淋巴细胞反应中HUVEC的凋亡率，用磁珠法检测混合淋巴细胞反应上清液中活化部分凝血活酶时间（APTT）。结果插入的siRNA经过测序，证实为正确序列。HUVEC转染siRNA后24h及48h，siRNA I组和siRNA II组HUVEC的凋亡率均低于对照组（P〈0．01）。siRNAI组HUVEC的凋亡率低于siRNA II组（P〈0．05）。3组上清液的APTT较对照（RPMI1640培养基）缩短（4±0．46）s（P〈0．05）。siRNA I组和siRNA II组与对照组相比较，APTT的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论组织因子胞内段siRNA构建成功。转染该siRNA可在不影响凝血功能的情况下对混合淋巴细胞反应中的内皮细胞起到一定保护作用，减少内皮细胞的凋亡。

siRNA沉默Galectin-3基因对血管内皮EA.hy926细胞增殖和迁移影响

目的半乳糖凝集素-3(Galectin-3)在肿瘤血管形成中起重要作用,关于其在血管内皮细胞生物学行为中的研究较少。本研究探讨siRNA转染下调Galectin-3表达对血管内皮EA.hy926细胞增殖和迁移能力的影响。方法将EA.hy926细胞分为干扰组、阴性对照组和空白对照组,干扰组转染Galectin-3特异性小干扰RNA(small interference RNA,siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组只加转染空白试剂。蛋白质印迹法检测转染前后EA.hy926细胞内Galectin-3蛋白表达的变化,MTT比色法检测转染前后EA.hy926细胞增殖变化,Transwell小室法检测转染前后EA.hy926细胞迁移变化。结果干扰组EA.hy926细胞转染3条靶向siRNA后,Galectin-3蛋白表达量分别为0.07±0.02、0.25±0.01和0.26±0.04,其中序列1的干扰效果最佳。转染序列1的EA.hy926细胞中Galectin-3蛋白表达低于阴性对照组的0.77±0.05(t=9.52,P=0.011),也低于空白对照组的0.87±0.11(t=11.23,P=0.003),故选择转染序列1的细胞作为干扰组进行后续实验。干扰组EA.hy926细胞增殖能力在72h为0.38±0.02,低于阴性对照组的0.52±0.01(t=11.32,P=0.001)和空白对照组的0.54±0.01(t=11.73,P=0.001)。干扰组EA.hy926细胞迁移的细胞数目为32.67±9.02,低于阴性对照组的84.00±2.65(t=12.54,P=0.001)和空白对照组的85.33±4.73,t=12.66,P=0.001。结论靶向Galectin-3的特异siRNA能够下调Galectin-3在EA.hy926细胞中的蛋白表达水平,有效抑制EA.hy926细胞的增殖和迁移能力。