紫菜多糖对小鼠NK细胞活性的增强作用

目的:探讨紫菜多糖对小鼠免疫功能的刺激作用。方法:以不同浓度的紫菜多糖及生理盐水向BALB/C小鼠腹腔连续注射7d后,通过ELISA技术及乳酸脱氢酶释放法分别检测小鼠的脾细胞分泌γ-干扰素(IFN-γ)水平及自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性。结果:0.15g·kg-1紫菜多糖注射组小鼠的脾细胞分泌IFN-γ水平及NK细胞杀伤活性高于生理盐水对照组(P<0.05)。结论:适宜浓度的紫菜多糖具有增强小鼠免疫功能的效应。

EAE小鼠模型的构建及其免疫学机制的探讨

目的用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)多肽免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型并初步探讨EAE发病的免疫学机制。方法用MOG35-55抗原免疫C57BL/6小鼠,观察实验动物的症状及中枢神经系统的病理改变;应用MTT法测定EAE小鼠脾脏T淋巴细胞活化增殖程度;应用ELISA技术测定EAE小鼠血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体水平。结果EAE组发病率为100%,HE染色观察到脑脊髓炎性细胞浸润,白质脱髓鞘等病理改变;EAE小鼠脾脏MOG35-55反应性T淋巴细胞增殖活化,血清IFN-γ浓度和抗MOG35-55抗体随病情的加重而升高。结论用MOG35-55多肽成功诱导了C57BL/6小鼠EAE模型;并推断EAE的发生可能与MOG35-55反应性T淋巴细胞的活化、抗MOG35-55抗体和IFN-γ升高有关。

活动性肺结核患者外周血CD4^+T细胞中TLR4与血清IFN-γ、IL-4的关系

目的探究活动性肺结核(PTB)患者外周血CD4^+T细胞中Toll样受体4(TLR4)与γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的关系。方法选取我院收治的95例活动性PTB患者为研究对象,将本组患者根据疾病严重程度分为轻度组、中度组和重度组,同期选取30例体检健康者为对照组。分别检测各组患者外周血CD4^+T细胞中TLR4表达情况和血清IFN-γ、IL-4水平。结果 PTB轻度、中度、重度组CD4^+T细胞TLR4 mRNA表达量明显高于对照组,重度组也明显高于轻度和重度组(P<0.05);轻中度和重度组血清IFN-γ水平均显著低于对照组,其中重度组明显低于其他两组(P<0.05);轻中度和重度组血清IL-4水平均显著高于对照组,其中重度组明显高于其他两组(P<0.05);Pearson相关性分析,肺结核患者CD4^+T细胞TLR4mRNA表达情况与血清IFN-γ水平呈负相关(P<0.05);与IL-4水平呈正相关(P<0.05)。结论 PTB患者外周血CD4^+T细胞TLR4表达显著升高,且与血清IFN-γ、IL-4水平有显著相关性,推测外周血CD4^+T细胞TLR4表达可能参与PTB的发生发展。

五味地龙汤对哮喘豚鼠血清γ-干扰素和白细胞介素4失衡的影响

目的:观察哮喘时γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的关系及五味地龙汤对其影响。方法:取豚鼠48只随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松组、五味地龙汤高、中、低剂量组,每组8只。以卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏,气道吸入激发建立哮喘动物模型。致敏15d后,ig给药,连续8d。颈动脉取血离心取血清,用豚鼠IFN-γ和IL-4 ELISA试剂盒测定血清IFN-γ和IL-4水平。结果:五味地龙汤高剂量组豚鼠血清IFN-γ(35.06±2.83)pg.ml-1,中剂量组豚鼠血清IFN-γ(29.74±1.84)pg.ml-1,低剂量组豚鼠血清IFN-γ(28.80±1.36)pg.ml-1,地塞米松组血清IFN-γ(39.08±1.06)pg.ml-1,与正常对照组血清IFN-γ(35.41±2.31)pg.ml-1比较,无显著性差异(P>0.05);与哮喘模型组血清IFN-γ(18.74±2.22)pg.ml-1比较,均有非常显著的差异(P均<0.01)。五味地龙汤高剂量组血清IL-4(9.27±0.86)pg.ml-1,中剂量组血清IL-4(9.40±2.91)pg.ml-1,与正常对照组血清IL-4(9.45±0.62)pg.ml-1比较,无显著差异(P>0.05);与哮喘模型组血清IL-4(13.37±1.86)pg.ml-1比较,地龙汤高、中剂量组和地塞米松组均有非常显著的差异(P均<0.01);五味地龙汤低剂量组与哮喘模型组比较,亦有一定差异(P<0.05)。五味地龙汤高剂量组的作用优于低剂量组,组间比较,有一定差异(P<0.05)。结论:五味地龙汤能升高哮喘状态下豚鼠血清IFN-γ,降低IL-4水平,能调节哮喘状态下的IFN-γ/IL-4失衡。这可能是五味地龙汤抑制炎症介质的释放,治疗气道炎症的机制之一,其作用与剂量呈正比例关系。

旋毛虫感染沙鼠小肠及脑组织中一氧化氮水平的观察

目的探讨IFN-γ对感染旋毛虫沙鼠组织NO及组织病理变化的影响。方法用硝酸还原酶法测定组织NO量,并观察组织病理变化。结果IFN-γ促进各组组织NO量。高浓度组小肠组织破坏严重;各组脑组织未见明显变化。结论IFN-γ能促进组织NO合成;各组织的炎症病变不同。

IFN-γ、IL-10与斑秃关系的初步研究

目的探讨IFN-γ和IL-10在斑秃发病中的作用及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测。对30例病程在1个月内的斑秃活动期患者进行4个月的局部米诺地尔治疗且取得满意效果后,检测其治疗前后血清Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-10水平,并将其结果与20例健康对照组进行比较。并分析IFN-γ和IL-10在治疗前后的相关性。结果①治疗前斑秃患者血清IFN-γ水平较对照组显著升高(P<0.01),IL-10与正常对照组比较无显著差异(P>0.05);②治疗后斑秃患者血清IFN-γ水平较治疗前显著下降(P<0.01),与正常对照组比较无显著差异(P>0.05);而治疗后IL-10水平较治疗前显著升高(P<0.01),与正常对照组比较呈显著升高(P<0.01);③治疗前后IFN-γ与IL-10之间呈显著负相关关系(r1=-0.425,P1<0.01;r2=-0.429,P2<0.01)。结论IFN-γ是斑秃发病的重要致病因子;IL-10对斑秃皮损的好转发挥重要作用,其能否作为一种新的免疫治疗方法尚需进一步论证。

肾移植慢性排斥反应中细胞因子基因多态性与环孢素A的关系

目的测定肾移植受者干扰素γ、转化生长因子β1基因型,探讨在肾移植慢性排斥反应中,细胞因子与免疫抑制药物CsA之间的关系。方法用PCR方法,在肾移植前进行IFN-γ、TGF-β1基因型检测,追踪移植肾慢性排斥反应发生情况,分析受者基因型及免疫抑制药物不同组合对移植肾功能的影响。结果肾移植受者IFN-γ高分泌型+CsA中低剂量组慢性排斥反应的发生率较高,肾移植受者TGF-β1高+中分泌型+CsA中低剂量组慢性排斥反应的发生率较高。结论受者IFN-γ和TGF-β1基因分泌型与免疫抑制剂用量的某种组合与移植肾慢性排斥反应发生率有关联。

复发-缓解型多发性硬化和化脓性脑膜炎患者血清和脑脊液中IL-18和IFN-γ水平的研究

目的探讨白细胞介素-18(IL-18)、干扰素-γ(IFN-γ)在化脓性脑膜炎(BM)及复发-缓解型多发性硬化(RRMS)发病中的可能的病理生理机制。方法选取RRMS急性期患者24例,BM患者8例及作为对照组的非炎性神经系统疾病(NIND)患者12例,应用ELISA法测定受试者血清及脑脊液中IL-18、IFN-γ水平。结果与NIND组相比,RRMS组血清IL-18水平显著升高,而血清IFN-γ水平无明显差异,但两者间呈显著正相关。脑脊液中IL-18、IFN-γ在RRMS组和NIND组检测到的阳性例数极低,相比之下无统计学差异。与NIND组相比,BM组血清中IL-18水平明显升高,但无统计学差异,而血清中IFN-γ及脑脊液中的IL-18、IFN-γ水平在BM组中均有显著性升高。结论IFN-γ及IL-18参与了多发性硬化及化脓性脑膜炎这两种不同的中枢神经系统炎性疾病的免疫病理生理学机制。

人类永生化角膜内皮细胞的生物学特性

目的探讨人类永生化角膜内皮细胞在免疫反应中的分子表达及其刺激T淋巴细胞活化的能力。方法人类永生化角膜内皮细胞分别培养在含干扰素-γ(IFN-γ)(1000U/mL)和不包含IFN-γ(1000U/mL)的F99和M199培养液中,按照1∶1等比例混合并含有5%小牛血清。健康志愿者采集外周血并分离外周血单核细胞(PBMCs),应用锥虫蓝染色鉴定细胞的完整性和细胞数量。免疫组织化学染色法测定人类永生化角膜内皮细胞分别在有无IFN-γ诱导条件下的HLA-DP、DQ、DR抗原及CD40的表达。同时,体外共同培养人类永生化角膜内皮细胞和PBMCs,荧光活化细胞分类(FACS)法测定活化的T淋巴细胞中CD69的表达。结果 IFN-γ能够诱导HLA-DP、DQ、DR抗原和CD40在人类永生化角膜内皮细胞上的阳性表达,表现为细胞膜和细胞质中的红色染色。CD3和CD28抗体预处理的外周血单核细胞中,20%的CD69阳性T淋巴细胞活化,无IFN-γ诱导时有10%阳性T淋巴细胞,而IFN-γ诱导组中,有12%的阳性T淋巴细胞,说明共同培养人类永生化角膜内皮细胞和PBMCs体系中,CD69阳性淋巴细胞数量增加。结论外周血中的T淋巴细胞可以被人类永生化角膜内皮细胞活化,由此人类永生化角膜内皮细胞是具有免疫学特性潜能的抗原递呈细胞。

慢性牙周炎患者血液及龈沟液中干扰素γ、白介素4水平与复发性自然流产的关系

目的检测复发性自然流产（recurrentspontaneousabortion，RSA）孕妇外周血及其龈沟液中自介素4（interleukin-4，IL-4）、干扰素γ（interferon-γ，IFN-γ）的含量并进行比较，探讨牙周炎是否会引起体液免疫失调，引起孕妇宫腔内免疫环境向T辅助细胞1型（T-helper1，Th1）漂移并引发流产。方法检查RSA孕妇50例（孕5至28周）（RSA组）和足月待产孕妇40例（孕39至41周）（对照组）的牙周状况，收集其龈沟液和静脉血，对其进行口腔卫生宣教，酶联免疫吸附测定法检测龈沟液和静脉血中IFN-γIL-4的水平。结果RSA组9例患牙周炎，患病率为18％（9／50），对照组5例患牙周炎，患病率为13％（5／40），两组牙周炎的患病率差异有统计学意义（P〈0．05）；RSA组的探诊深度、附着丧失及出血指数均显著高于对照组（P〈0．05）。RSA组孕妇龈沟液及静脉血中IFN．1含量[分别为（52．98±17．56）、（27．79±3．59）ng／L]均显著高于对照组[分别为（25．254±7．93）、（18．39±2．65）ng／L]，P〈0．05；RSA组孕妇龈沟液及静脉血中IL-4的含量[分别为（15．43±1．77）、（15．88±0．95）ng／L]均显著低于对照组[（19．62±4．04）、（22．98±4．30）ng／L]，P〈0．01。相同组内静脉血与龈沟液中IFN-γ、IL-4的含量均呈正相关关系（r值均〉0．8，P〈0．001）。结论RSA孕妇患牙周炎的几率较高，牙周组织中IFN-γ、IL-4浓度的改变会进一步引发静脉血中IFN-γ、IL-4的浓度改变，使Th1-Th2平衡向Th1漂移；RSA孕妇与其患牙周炎存在相关性。

T淋巴细胞内mTOR／S6途径在难治／复发再生障碍性贫血发病机制中的作用

目的研究难治／复发再生障碍性贫血（AA）患者骨髓T淋巴细胞内雷帕霉素靶蛋白（mTOR）／核糖体蛋白S6途径活化情况，以及mTOR抑制剂雷帕霉素（RAPA）和CD28抗原阻断剂CTLA4免疫球蛋白（CTLA4Ig）对此途径的影响。方法 采集13例难治／复发AA、8例初治重型AA（SAA）以及10例缺铁性贫血（IDA）患者（对照组）的骨髓标本，加入RAPA和CTLA4Ig进行孵育，用流式细胞术检测加药前后每组患者CD3＋T淋巴细胞胞质内磷酸化mTOR（p-roTOR）、磷酸化S6（P—S6）和干扰素γ（IFN-γ）的表达水平，并分析其与疾病的关系。结果①难治／复发AA组患者骨髓CD3＋T细胞胞内p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较对照组显著升高（P值均〈0．01）。②初治SAA患者p-mTOR和p-S6的表达水平低于难治／复发AA组（P值均〈0．01），而与对照组比较差异无统计学意义（P值均〉0．05）；初治组IFN-γ的表达水平明显高于对照组（P值均〈0．01）。（3）RAPA和CTLA-4Ig作用后，难治／复发AA患者p-mTOR、p-S6及IFN-γ的表达水平较用药前明显下降（P值均〈0．01）。结论CD3＋T淋巴细胞内mTOR／S6途径在难治／复发AA患者中活化。RAPA和CTLA-4Ig均可抑制难治／复发AA患者体内roTOR／S6途径，并下调IFN-γ。CD28／mTOR／S6和IFN-γ途径参与难治／复发AA的免疫发病机制，并且对RAPA和CTLA4Ig敏感，以CD28、mTOR为治疗靶点，临床应用RAPA和CTLA-4Ig治疗此类AA患者值得探索。

干扰素-γ对染矽尘小鼠肺脏肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β_1蛋白表达的影响

目的探讨实验性矽肺纤维化小鼠模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子(TNF)-α及肺组织转化生长因子(TGF)-β1的变化及干扰素-γ(IFN-γ)对其的调节作用。方法雌性ICR小鼠随机分为矽肺模型组、IFN-γ治疗组和对照组,每组32只。矽肺纤维化小鼠模型通过气管内暴露法(气管内注入SiO2粉尘混悬液)建立,对照组气管内注入0.1ml生理盐水。建模成功后,矽肺模型组及对照组每日腹腔内注射生理盐水0.3ml,IFN-γ治疗组每日腹腔内注射1.0×104/0.3mlIFN-γ,至处死为止。每组气管暴露后不同时间(7、14、21、28d)分别处死8只小鼠。用ELISA方法测定3组小鼠BALF中TNF-α水平,用免疫组织化学法测定矽肺组织中TGF-β1蛋白的表达,及IFN-γ治疗对二者的影响。结果矽肺模型小鼠肺组织TGF-β1表达在染尘后的7、14、21、28d时明显高于对照组(P均<0.01),表达高峰是染尘后的7d;IFN-γ治疗组IFN-γ治疗后的7、14、21、28d肺组织TGF-β1表达显著低于矽肺模型组(P<0.01或P<0.05),但仍高于对照组(P均<0.01)。矽肺模型组BALF中TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01或P<0.05);IFN-γ治疗组IFN-γ治疗后TNF-α水平显著低于矽肺模型组(P均<0.05),但仍高于对照组。结论本文结果显示,IFN-γ对实验性小鼠肺纤维化具有一定的抑制作用,IFN-γ可能通过抑制TNF-α水平及TGF-β1在肺组织中的表达来抑制肺纤维化的发生发展。

可溶性血管细胞黏附分子1在肺结核发病机制中的作用和临床意义

目的探讨可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)在肺结核发病机制中的作用和临床意义,及其与肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测未经治疗的35例肺结核患者(肺结核组)、20名健康人(对照组)血清 sVCAM-1、IFN-γ水平,放射免疫分析(RIA)法测定血清 TNF-γ水平。肺结核组中,血型播散性肺结核(Ⅱ型)15例,继发性肺结核(Ⅲ型)20例,后者于治疗2个月后再次采血。结果肺结核组血清 sVCAM-1、TNF-γ和 IFN-γ的水平分别为(822±206)、(1.5±1.1)和(23±13)μg/L,高于对照组(428±73)、(0.2±0.1)和(16±10)μg/L,差异有统计学意义(P 值分别<0.01、<0.01、<0.05);血型播散性肺结核(Ⅱ型)患者的血清 sVCAM-1和 TNF-α的水平分别为(897±144)、(2.0±1.4)μg/L,高于继发性肺结核(Ⅲ型)患者的(765±230)和(1.2±0.6)μg/L,差异有统计学意义(P 值均<0.05);IFN-γ在Ⅱ型与Ⅲ型肺结核患者之间差异无统计学意义(P=0.222)。抗结核治疗后,血清 sVCAM-1和TNF-α水平分别为(532±103)、(0.8±0.8)μg/L,与治疗前相比差异有统计学意义(P 值均<0.01);治疗2个月后 sVCAM-1和 TNF-α水平仍高于对照组(P<0.01);IFN-γ治疗后水平高于治疗前(P<0.05)。肺结核治疗前血清 sVCAM-1与 TNF-α、IFN-γ均呈正相关(r 值分别为0.669、0.560,P 值均<0.01)。对照组和肺结核组治疗后血清 sVCAM-1与 TNF-α、IFN-γ之间均无相关性。结论sVCAM-1可以作为判断病情严重程度和评价疗效的一项临床指标。

肺结核患者血清干扰素-γ及白细胞介素4水平与肺功能的相关性研究

目的观察肺结核患者血清干扰素-γ（IFN-γ）及白细胞介素4（IL-4）水平与肺功能的相关性。方法75例肺结核患者（肺结核组）按病变程度分为重度25例（重度组）、中度25例（中度组）、轻度25例（轻度组），应用ELISA法检测各组肺结核患者和30例健康体检者（对照组）的外周血IFN-γ及IL-4水平并进行比较，同时检测肺结核组肺功能第1秒用力呼气量（FEV1）、第1秒用力呼气量占预计值的百分比（FEV1％）、最大用力呼气中段流量占预计值的百分比（MMEF％），并与IFN-γ及IL-4水平进行相关性分析。结果肺结核组IFN-γ，[（0．204±0．018）μg/L]及IL-4[（0．523±0．035）μg/L]水平与对照组比较差异均有统计学意义（t=7．685、6．374，均P〈0．05）；肺结核组中重度组、中度组及轻度组IFN-γ及IL-4水平比较差异有统计学意义（F=10．146、7．263，均P〈0．05）；肺结核中度组和重度组FEV1％、MMEF％与肺结核轻度组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）；FEV1、FEV1％、MMEF％与IL-4水平呈显著负相关（r=-0．46、-0．43，均P〈0．05），与IFN-γ水平呈显著正相关（r=0．47、0．45，均P〈0．05）。结论肺结核发病与患者血清细胞因子水平有关；肺结核患者外周血清IFN-γ及IL-4水平可能对其肺功能有一定的影响。