人外周血树突状细胞的分离培养及鉴定

目的从外周血中分离单个核细胞 ,经体外诱导培养获取高纯度的树突状细胞。方法淋巴细胞分离液分离外周血的单个核细胞 ,经贴壁 2h后加入GM CSF、IL 4诱导 7天 ,观察细胞形态 ,用流式细胞仪检测其表面标志 ,采用混合淋巴细胞培养法检测其刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。结果经诱导生成的细胞具有典型的DCs形态特征 ,高表达CD83 、CD86和MHCⅠ、Ⅱ类分子 ,在体外能诱导强烈的同种异体淋巴细胞增殖反应。结论本研究所建立的经济、简便的从外周血获取大量成熟DCs的方法 ,为DCs的进一步研究奠定了基础。

儿童支气管哮喘血清IL-4、IL-10和IFN-γ浓度的测定及其临床意义

目的探讨血清白介素4(IL-4)、IL-10和干扰素γ(IFN-γ)与支气管哮喘(简称哮喘)的关系及其临床意义。方法随机收集于2008年6月至2009年1月期间在山东大学齐鲁儿童医院就诊的哮喘患儿纳入哮喘组,哮喘诊断全部符合2003年中华医学会儿科分会呼吸学组修订的支气管哮喘诊断标准,共计47例。同时选取性别和年龄与哮喘组匹配的51例健康体检儿童作为正常对照组。收集外周静脉血,采用双抗体夹心ELISA方法测定两组血清IL-4、IL-10、IFN-γ浓度,比较两组之间血清IL-4、IL-10、IFN-γ浓度的差异。结果哮喘组血清IL-4浓度[(346.74±82.92)ng/L]显著高于正常对照组[(199.87±59.25)ng/L](P<0.01);哮喘组血清IL-10浓度[(86.38±58.58)ng/L]与正常对照组[(98.77±37.05)ng/L]的差异无统计学意义(P>0.05),哮喘组血清IFN-γ浓度[(94.51±22.92)ng/L]低于正常对照组[(110.75±47.11)ng/L](P<0.05)。结论 Th2类细胞因子IL-4在哮喘患儿血清中浓度升高,而Th1类细胞因子IFN-γ浓度下降,哮喘患儿存在Th1/Th2细胞免疫失衡;血清IL-4、IFN-γ浓度检测可以作为儿童哮喘的辅助诊断手段,同时本研究为使用抗IL-4制剂、补充IFN-γ等免疫学方法治疗哮喘提供依据。