单核细胞增多性李氏杆菌野毒株InlB的分子特征及其表达和纯化研究

采用PCR技术扩增单核细胞增多性李氏杆菌TA野毒株内化索B（InlB）基因，进行编码分子的序列和结构分析，并克隆人大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达。该基因全长1893bp，编码630个氨基酸，其中前35个氨基酸残基构成信号肽序列。在推导的InlB蛋白氨基酸序列中，从N端到C端分别包括1个α-螺旋的Cap结构域、6个富含亮氨酸的重复基序（LRR）、1个免疫球蛋白样结构域（IR）、1段B重复序列和3个串联的GW结构域，同时还存在5个潜在的N-联糖基化位点，Leu占所有氨基酸残基的10．2％。与GenBank已经报道的18个不同流行株InlB基因相比，核苷酸和推导的氨基酸序列的同源性分别在91．1％～99．6％和92．3％～99，8％之间。重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE和Western blot分析证实该基因已经正确表达。用Ni^2＋亲和层析柱纯化了InlB重组蛋白。

2000—2004年浙江省食品中产单核李斯特菌污染状况调查

目的：掌握浙江省食品中产单核李斯特菌污染状况。以及内化素基因（Inl）和李氏溶血素O（Hly）两种致病基因携带情况。方法：按GB4789．30方法分离单增生李斯特菌，采用PCR技术检测李斯特菌的两种致病基因。结果：2000～2004年从2282份食品中共分离产单核李斯特菌163株，总污染率为7．14％（163／2282）。生肉类、熟肉及水产品的污染率分别为12．80％、7．67％和2．24％；114份生食蔬菜中1份标本分离到产单核李斯特菌；285份乳及乳制品、59份冰激凌均未分离到产单核李斯特菌；163株产单核李斯特菌有155株同时检测到内化素基因和李氏溶血素O基因。结论：我省存在发生李斯特菌食物中毒的潜在危险。