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八肋游仆虫eRF3 C端的76个氨基酸对于释放因子eRF1a的结合不是必需的(英文) 被引量:1
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作者 宋莉 王玉瑶 +2 位作者 柴宝峰 王伟 梁爱华 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期486-490,共5页
以八肋游仆虫第二类肽链释放因子eRF3基因为模板,用PCR的方法获得eRF3的C端(eRF3C)和C端缺失76个氨基酸的突变体eRF3Ct片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p-1-eRF3C和pGEX-6p-1-eRF3Ct,转入大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达。通过Glutat... 以八肋游仆虫第二类肽链释放因子eRF3基因为模板,用PCR的方法获得eRF3的C端(eRF3C)和C端缺失76个氨基酸的突变体eRF3Ct片段,并构建重组表达质粒pGEX-6p-1-eRF3C和pGEX-6p-1-eRF3Ct,转入大肠杆菌BL21(DE3)中获得了可溶性表达。通过Glutathione Sepharose 4B柱亲和层析纯化,重组蛋白GST-eRF3C和GST-eRF3Ct获得纯化。Western blotting分析表明获得的蛋白为目的蛋白。PreScission酶切割后得到eRF3C和eRF3Ct蛋白。体外pull down分析显示eRF3C和eRF3Ct均能与八肋游仆虫第一类释放因子eRF1a相互作用,这表明八肋游仆虫eRF3 C端的76个氨基酸对于释放因子eRF1a的结合不是必需的。 展开更多
关键词 八肋游仆虫 肽链释放因子3 表达 Pull-down分析
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MTT比色法检测MGC803^T细胞毒效应的研究
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作者 胡荫 尹维刚 许佐良 《包头医学院学报》 CAS 1998年第3期1-2,共2页
用插入突变的膜结合型TNF—α基因的重组逆转录病毒载体转染人胃癌细胞MGC,获得膜结合型TNF—α基因转染阳性的人胃癌细胞MGC803(MGC803T)。用MTT比色法、3H—TdR释放法检测MGC803T及未转染的... 用插入突变的膜结合型TNF—α基因的重组逆转录病毒载体转染人胃癌细胞MGC,获得膜结合型TNF—α基因转染阳性的人胃癌细胞MGC803(MGC803T)。用MTT比色法、3H—TdR释放法检测MGC803T及未转染的人胃癌细胞MGC803(MGC803N)细胞表面TNF—α的细胞毒效应。结果表明,MGC803T对鼠纤维肉瘤细胞L929有杀伤作用,而对照细胞MGC803N无杀伤作用,说明逆转录病毒介导的膜结合型TNF—α基因在人胃癌细胞获得有效表达。二种方法检测MGC803T细胞的细胞毒效应获得良好相关性。与3H—TdR释放法相比,MTT比色法具有操作简便。 展开更多
关键词 MTT比色法 细胞毒效应 肿瘤 MGC803
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结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数鉴别儿童活动性结核病与潜伏结核感染的价值 被引量:11
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作者 田建岭 刘晓灵 +8 位作者 孙琳 焦伟伟 肖婧 尹青琴 吴喜蓉 郭雅洁 韩锐 李勤静 申阿东 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2013年第4期272-276,共5页
目的通过γ干扰素释放试验探讨结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数(简称T细胞斑点数)鉴别儿童活动性结核病(TB)与潜伏结核感染(LTBI)的价值。方法纳入T细胞斑点试验(T.SPOT.TB)阳性且未经过抗结核治疗的93例活动性TB(重症TB27例,非重症T... 目的通过γ干扰素释放试验探讨结核分枝杆菌特异性效应T细胞斑点数(简称T细胞斑点数)鉴别儿童活动性结核病(TB)与潜伏结核感染(LTBI)的价值。方法纳入T细胞斑点试验(T.SPOT.TB)阳性且未经过抗结核治疗的93例活动性TB(重症TB27例,非重症TB66例)和47例LTBI儿童,根据T.SPOT.TB结果对T细胞斑点数进行比较分析。结果活动性TB组T细胞斑点数中位数84(6~710)显著高于LTBI组17(6~316),P=0.000;非重症TB患儿的T细胞斑点数中位数为99(6~710),显著高于重症TB的44(6~268),P=0.011,也显著高于LTBI组17(6~316),P=0.000;重症TB儿童T细胞斑点数中位数高于LTBI组儿童(44vs17),但差异无统计学意义(P=0.084),T细胞斑点数分布在活动性TB、重症TB、非重症TB和LTBI之间均有较大范围重叠。受试者工作特征曲线分析显示以T细胞斑点数43.5作为区分活动性TB与LTBI的最佳界值,其敏感度与特异度分别为69.9%和70.2%。结论 T细胞斑点数在活动性TB尤其是非重症TB患儿显著高于LTBI儿童;T细胞斑点数的数量可反映体内的结核分枝杆菌负荷,但不能用于区分儿童活动性TB与LTBI。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌特异性效应T细胞 儿童 活动性结核病 潜伏结核感染 Γ干扰素释放试验
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Testing of tuberculosis infection among Chinese adolescents born after terminating the Bacillus Calmette-Guerin booster vaccination: subgroup analysis of a population-based cross-sectional study 被引量:5
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作者 Hengjing Li Henan Xin +6 位作者 Shukun Qian Xiangwei Li Haoran Zhang Mufei Li Boxuan Feng Qi Jin Lei Gao 《Frontiers of Medicine》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期528-535,共8页
The prevalence of tuberculosis infection among adolescents born after terminating the Bacillus Calmette-Guerin (BCG) booster vaccination in China was estimated using tuberculin skin testing (TST) and QuantiFERON-T... The prevalence of tuberculosis infection among adolescents born after terminating the Bacillus Calmette-Guerin (BCG) booster vaccination in China was estimated using tuberculin skin testing (TST) and QuantiFERON-TB Gold assay (QFT) to investigate the influence of neonatal BCG vaccination on the performance of TST. Data analysis was conducted for 2831 eligible participants aged 5-15 years from the baseline survey of a population-based multi-center prospective study. The prevalence rates of TST (induration ≥ 10 mm) and QFT positivity were 9.3% (264/2827) and 2.5% (71/2831), respectively. The rate of QFT indeterminate result was 2.2% (62/2831). The overall agreement between TST and QFT was low (concordance = 88.0%; K coefficient = 0.125). Only TST was positively associated with BCG vaccination with an adjusted odds ratio of 1.71 [95% confidence interval, 1.26-2.31 ]. A history of close contact with patients of active TB was significantly associated with positivity for TST and QFT. Our results suggested that BCG neonatal vaccination still affects TST performance, and a two- step approach might be considered for TB infection testing among adolescents in China. 展开更多
关键词 tuberculin skin test interferon-γ release assays ADOLESCENT AGREEMENT
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