产ESBL肺炎克雷伯菌中16SrRNA甲基化酶的分布与相关耐药性的研究

目的调查我院产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株16SrRNA甲基化酶基因的分布以及与耐药谱的关系，并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用。方法收集我院临床2010年3月至9月分离出69株非重复产ESBL肺炎克雷伯菌，采用PCR法检测16SrRNA甲基化酶基因，并对阳性菌株进行ESBL基因及整合子基因分析，通过DNA直接测序确定。质粒接合试验和质粒消除试验确定16SrRNA甲基化酶基因的传播途径，利用ERIC-PCR技术进行基因分型。结果69株产ESBL肺炎克雷伯菌中有rmtB阳性菌株20株（28．9％），其中2株同时携带有rmtB和armA。在20株产16SrRNA甲基化酶菌株中，均携带有CTX—M基因，测序显示14株CTX—M-14基因，6株CTX—M-15基因；14株携带有TEM-1基因；8株携带有SHV基因，测序显示5株SHV-12基因，3株SHV-11基因；3株携带有OXA-10基因；3株携带有VBE-1基因。另有12株携带有intl阳性，含有5种不同的耐药基因盒，分别携带d（fA25、drfa1、drfA12、aadA1、aadA2、sat和blaVEB-1基因。ERIC—PCR法显示20株16SrRNA甲基化酶基因阳性的肺炎克雷伯菌主要分为5型，A型为优势流行克隆株。质粒接合和消除试验发现A型克隆株KP5和KPl6rmtB均位于一质粒上并通过接合传播。结论本院产ESBL肺炎克雷伯菌临床分离株中存在16SrRNA甲基化酶基因rmtB的普遍流行，导致对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药。rmtB可通过水平基因传播和克隆传播的两种方式进行播散，并且存在同时产ESBLs、16SrRNA甲基化酶和I类整合子的肺炎克雷伯菌的传播。

妇科肿瘤患者分离铜绿假单胞菌中rmtB的分布与耐药性研究

目的调查本院妇科肿瘤患者铜绿假单胞菌rmtB及I类整合子基因分布及与耐药谱关系。方法收集妇科肿瘤患者2010年1月-2013年1月分离120株非重复铜绿假单胞菌,采用PCR及DNA测序检测rmtB和I类整合酶基因（int1）,PCR检测整合子可变区。结果铜绿假单胞菌对头孢噻肟和头孢曲松耐药率较高,分别为86.7%和90%,而对其他抗生素耐药率为29.2%～73.3%。筛选出88株对氨基糖苷类抗生素耐药铜绿假单胞菌中rmtB阳性菌35株（39.7%）。rmtB阳性菌intlI阳性率为100%（35/35）,含有9种整合子类型,以携带400 bp、1 000 bp大小片段基因盒为主,另有三株为空盒。质粒接合试验均未成功。结论 rmtB广泛存在于铜绿假单胞菌中,导致对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药。rmtB不存在于I类整合子中,但或可与I类整合子通过染色体联合传播,I类整合子可变区呈现多态性分布。