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miR-146a通过调节IPr1基因对结核分枝杆菌感染的AEC Ⅱ型细胞活性作用机制
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作者 许明昭 林清香 +1 位作者 寇昌伟 汪求真 《西部医学》 2024年第3期333-337,共5页
目的 探讨miR-146a通过调节IPr1基因观察对结核分枝杆菌(Mtb)感染的肺泡II型上皮细胞(AEC II)活性的作用机制。方法 采用Mtb感染AECⅡ细胞。将AECⅡ细胞分为结核组(感染Mtb)、 NC组(模型+转染miR-146a NC)、转染组(模型+转染miR-146a mi... 目的 探讨miR-146a通过调节IPr1基因观察对结核分枝杆菌(Mtb)感染的肺泡II型上皮细胞(AEC II)活性的作用机制。方法 采用Mtb感染AECⅡ细胞。将AECⅡ细胞分为结核组(感染Mtb)、 NC组(模型+转染miR-146a NC)、转染组(模型+转染miR-146a mimics)。RT-PCR检测AECⅡ细胞miR-146a、Ipr1基因表达;CCK8检测AECⅡ细胞增殖;流式细胞仪检测AECⅡ细胞凋亡;双荧光素酶报告测定Ipr1与miR-146a靶向关系。结果 DIO荧光染色的Mtb在感染人AECⅡ细胞12 h内会进入细胞质基质中,并围绕细胞核分布,表明建立的结核分枝杆菌感染模型成功;结核组与NC组AECⅡ细胞中miR-146a、Ipr1基因表达比较无差异(P>0.05),与NC组相比,转染组AECⅡ细胞中miR-146a、Ipr1基因表达水平升高(P<0.05);结核组与NC组AECⅡ细胞在不同时间点的OD值比较均无差异(P>0.05),与NC组相比,转染组AECⅡ细胞在不同时间点的OD值均升高(P<0.05);结核组AECⅡ细胞凋亡率与NC组相比无差异(P>0.05),与NC组相比,转染组AECⅡ细胞凋亡率显著降低(P<0.001)。双荧光素酶报告结果显示,转染miR-146a后野生型Mtb感染的AECⅡ细胞中Ipr1活性升高(P<0.05),突变型Mtb感染的AECⅡ细胞中Ipr1活性无明显变化(P>0.05),表明Ipr1是miR-146a的靶基因。结论 过表达的miR-146a可增加Mtb感染的AECⅡ细胞活性,降低凋亡,研究机制认为可能与通过激活Ipr1水平相关。Ipr1是miR-146a靶基因,可通过激活表达而发挥减少Mtb对AECⅡ细胞活性的损伤。 展开更多
关键词 MIR-146A 肺结核 胞内病原体抗性基因1 结核分枝杆菌 肺泡Ⅱ型上皮细胞 增殖 凋亡
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Enhancing Accumulation and Penetration Efficiency of Next-Generation Antibiotics to Mitigate Antibiotic Resistance in Pseudomonas aeruginosa PAO1
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作者 Godspower Oghenemaroh Sebe Supreme O. Oghenerhoro +3 位作者 Ogbole E. Jonathan Ebuka Victor Anyaogu Adeyemo David Adebowale Raymond Chidozie Ntomchukwu 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2023年第8期107-120,共14页
This study explores the efficacy of advanced antibiotic compounds against P. aeruginosa, focusing on Antibiotic B, an enhanced derivative of Ceftriaxone. The study measured the intracellular uptake of Antibiotic B and... This study explores the efficacy of advanced antibiotic compounds against P. aeruginosa, focusing on Antibiotic B, an enhanced derivative of Ceftriaxone. The study measured the intracellular uptake of Antibiotic B and introduced a novel adjuvant, Influximax, which augmented its antibacterial activity. Results showed a diminished potential for resistance emergence with Antibiotic B, particularly when used in combination with Influximax. The study suggests that optimizing antibiotic delivery into bacterial cells and leveraging syner-gistic adjuvant combinations can enhance drug resistance combat. . 展开更多
关键词 Pseudomonas aeruginosa PAO1 Antibiotic resistance Next-Generation Antibiotics Adjuvant Synergy intracellular Accumulation Penetration Rates Minimum Inhibitory Concentration (MIC) resistance Tra-jectory Fluorescence Quantification
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小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养及Ipr1基因真核表达载体的构建和表达 被引量:1
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作者 陈元圆 马勋 +2 位作者 薄新文 王新华 黄新 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第6期21-24,229,共5页
为了获取Ipr1基因全长编码序列,构建与EGFP基因融合的表达载体,观察小鼠Ipr1基因在小鼠巨噬细胞中的表达情况及对细胞生长状态的影响,试验通过RT-PCR方法获得Ipr1基因,将获得的Iprl基因片段与pEGFP-C1载体片段连接后获得真核表达质粒pEG... 为了获取Ipr1基因全长编码序列,构建与EGFP基因融合的表达载体,观察小鼠Ipr1基因在小鼠巨噬细胞中的表达情况及对细胞生长状态的影响,试验通过RT-PCR方法获得Ipr1基因,将获得的Iprl基因片段与pEGFP-C1载体片段连接后获得真核表达质粒pEGFP-Ipr1,经PCR、酶切鉴定正确后,脂质体瞬时转染pEGFP-Ipr1至第5代的小鼠腹腔巨噬细胞内,以空质粒pEGFP-C1转染组作为对照,采用Western-blot检测Ipr1基因的表达并用荧光显微镜观察融合蛋白的表达情况。结果表明:研究构建了真核表达载体pEGFP-Ipr1并进行了Ipr1基因转染,通过Western-blot检测在大约50 ku处有目的条带,转染24 h后有绿色荧光蛋白表达,并经G418筛选获得稳定转染Ipr1基因的小鼠腹腔巨噬细胞株。说明试验获得了易于转染的小鼠腹腔巨噬细胞株,成功转染了Ipr1基因并得以表达。 展开更多
关键词 ipr1基因 结核病 转染 巨噬细胞 真核表达载体
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2009年上海分离的2株猪源甲型H1N1流感病毒
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作者 宋志刚 任广旭 +4 位作者 田棣 周志统 何静 袁正宏 胡芸文 《公共卫生与临床医学》 2010年第4期261-268,共8页
2009年全球暴发猪源甲型H1N1流感病毒疫情,上海地区于5月份诊断第一例输入性病例。本研究从上海地区较早发现的两个输入性甲型H1N1流感病例样本中分离出2株病毒,分别命名为A/Shanghai/37T/2009和A/Shanghai/71T/2009。MDCK细胞... 2009年全球暴发猪源甲型H1N1流感病毒疫情,上海地区于5月份诊断第一例输入性病例。本研究从上海地区较早发现的两个输入性甲型H1N1流感病例样本中分离出2株病毒,分别命名为A/Shanghai/37T/2009和A/Shanghai/71T/2009。MDCK细胞培养上清中的病毒通过电镜显示,该病毒的直径大约为60~80nm,具包膜,包膜表面有突起,呈现出正粘病毒颗粒形态特征。免疫荧光检测显示,MDCK细胞内病毒成分能与病人恢复期血清反应。2株病毒的全基因核酸序列和氨基酸序列与美国参考株California04具有高度的同源性;基于全基因的系统发育分析,确认此2株病毒属于2009年在全球暴发流行的新型H1N1甲型流感病毒。在此基础上的进一步研究发现,2株病毒可诱导A549细胞中抗病毒效应基因的表达;经Ⅰ型干扰素预处理的细胞可有效抵抗病毒的感染,提示其潜在的保护作用。综上所述,上海分离的2株病毒和2009年北美暴发的猪源甲型H1N1流感病毒是同源的,并且在病毒的致病性,药物的抗性和抗原性方面没有发生变异。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 上海2009年 病毒分离 核酸测序 进化树分析
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Cloning and characterization of the PtVIP1 gene in Populus 被引量:1
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作者 Haoran Wang Weitao Zhang +1 位作者 Mingxiu Wang Qiang Cheng 《Journal of Forestry Research》 SCIE CAS CSCD 2019年第6期2259-2266,共8页
The VirE2-interaction protein 1(VIP1)serves as a regulator of mitogen-activated protein kinase 3(MPK3)-mediated stress gene modulation under biotic stress,which in turn activates the MPK3 pathway in Arabidopsis.The mo... The VirE2-interaction protein 1(VIP1)serves as a regulator of mitogen-activated protein kinase 3(MPK3)-mediated stress gene modulation under biotic stress,which in turn activates the MPK3 pathway in Arabidopsis.The mode of action of the VIP1 protein in Populus in response to biotic stress remains unknown.In this study,we cloned the full-length cDNA of the PtVIP1 gene from Populus trichocarpa(accession number of GenBank:KY793105).The VIP1 protein harboured a conserved bZIP(basic leucine zipper)domain located in the C-terminus.The VIP1 subcellular localization assay indicated that the VIP1 protein was present in the cytoplasm and nucleus under normal conditions,and that an increase in the amount of the protein in the nucleus occurred after treatment with flg22,the elicitor-active epitope of flagellin which triggers the innate immune response in plants.Transgenic Populus plants overexpressing VIP1 genes(PtVIP1 of Populus;or AtVIP1 of Arabidopsis,as positive control)were generated to investigate the role of VIP1 in vivo.The expression of poplar pathogenesis-related protein 1(PR1)genes was upregulated in transgenic-PtVIP1 or AtVIP1 poplar plants.The transgenic poplar plants overexpressing PtVIP1 or AtVIP1 also showed enhanced resistance to Brenneria salicis infection.These results suggest that the VIP1 protein accumulates in the nucleus in response to biotic stress,and that the pathogen resistance of transgenic VIP1 poplar may be associated with the induced expression of PR1 genes in response to pathogen challenge. 展开更多
关键词 VirE2-interaction protein 1 SUBCELLULAR localization TRANSGENIC POPLAR pathogen resistance
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胆总管结石合并感染患者外周血单个核细胞中CD36/mTORC1通路表达及其诊断价值
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作者 施颖琦 沈美琴 樊锦河 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期2969-2973,共5页
目的探讨胆总管结石合并感染病原菌及外周血单个核细胞(PBMCs)中分化抗原36(CD36)/雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)通路表达及其诊断价值。方法选取2020年8月-2023年8月南通市第一人民医院收治的胆总管结石合并感染患者79例设为感染组,同... 目的探讨胆总管结石合并感染病原菌及外周血单个核细胞(PBMCs)中分化抗原36(CD36)/雷帕霉素靶蛋白复合物1(mTORC1)通路表达及其诊断价值。方法选取2020年8月-2023年8月南通市第一人民医院收治的胆总管结石合并感染患者79例设为感染组,同期83例胆总管结石无感染患者设为非感染组;统计胆总管结石合并感染患者胆汁中病原菌及其药敏分析;分别采用流式细胞术和免疫蛋白印迹法检测CD36/mTORC1通路水平,比较两组PBMCs中CD36、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的核糖体S6蛋白激酶(p-p70S6K)水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析CD36、mTOR、P-p70S6K对胆总管结石合并感染的诊断价值。结果胆总管结石合并感染患者共培养分离病原菌91株,其中革兰阴性菌62株占68.13%,革兰阳性菌27株占29.67%,真菌2株占2.20%,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、粪肠球菌为主;大肠埃希菌对哌拉西林(86.96%)、氨苄西林(82.61%)耐药率较高,肺炎克雷伯菌对头孢他啶(85.71%)、氨苄西林(76.19%)耐药率较高,两者对美罗培南(0)、亚胺培南(0)敏感;粪肠球菌对氨苄青霉素(85.00%)、克林霉素(80.00%)耐药率较高,对万古霉素(0)、替考拉宁(0)敏感;感染组外周血PBMCs中CD36、mTOR、P-p70S6K分别为(27.66±8.95)%、0.82±0.26、0.64±0.20高于非感染组(P<0.05);绘制ROC曲线获得CD36、mTOR、P-p70S6K联合诊断的曲线下面积(AUC)高于各项单独检测(P<0.05)。结论胆总管结石合并感染后CD36/mTORC1通路被激活,联合检测CD36、mTOR、P-p70S6K有助于诊断胆总管结石合并感染。 展开更多
关键词 胆总管结石 感染 病原菌 耐药性 分化抗原36/雷帕霉素靶蛋白复合物1 诊断价值 受试者工作特征曲线
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四肢开放性骨折合并感染病原菌和sTREM-1、Th1/Th2细胞因子及NLRP3信号通路
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作者 朱军 刘宏波 +1 位作者 王复超 孙英华 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第19期2978-2982,共5页
目的探讨四肢开放性骨折合并感染患者可溶性髓系细胞触发受体1(sTREM-1)、辅助性T细胞亚群1/2(Th1/Th2)细胞因子及Nod样受体蛋白3(NLRP3)信号通路。方法选取2020年8月-2023年8月潍坊市益都中心医院收治的102例四肢开放性骨折合并感染患... 目的探讨四肢开放性骨折合并感染患者可溶性髓系细胞触发受体1(sTREM-1)、辅助性T细胞亚群1/2(Th1/Th2)细胞因子及Nod样受体蛋白3(NLRP3)信号通路。方法选取2020年8月-2023年8月潍坊市益都中心医院收治的102例四肢开放性骨折合并感染患者(研究组)和108例四肢开放性骨折未合并感染患者(对照组),分析病原菌及耐药性,比较两组血清sTREM-1、NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)表达,分析血清sTREM-1、外周血NLRP3、Caspase-1对四肢开放性骨折患者合并感染的诊断价值。结果研究组患者血清Th1、Th1/Th2分别为(9.95±2.24)%、0.68±0.07低于对照组,而血清Th2为(14.61±4.03)%高于对照组(P<0.05);102例四肢开放性骨折合并感染患者,检测出108株病原菌,主要为革兰阴性菌中的铜绿假单胞菌和革兰阳性菌中的金黄色葡萄球菌;铜绿假单胞菌对阿米星卡、庆大霉素较耐药;金黄色葡萄球菌对红霉素、青霉素较耐药;研究组血清sTREM-1、NLRP3和Caspase-1水平分别为(67.68±20.97)pg/ml、2.01±0.65和2.12±0.69高于对照组(P<0.05);血清sTREM-1、外周血NLRP3、Caspase-1水平联合检测对四肢开放性骨折合并感染患者的诊断曲线下面积(AUC)为0.945高于单独检测(P<0.05),且联合检测的敏感度为88.24%,特异度为92.59%。结论四肢开放性骨折合并感染患者主要感染的病原菌为革兰阴性菌,各病原菌耐药性有差异,对常用抗菌药物耐药性高。四肢开放性骨折合并感染与血清sTREM-1高表达及Th1/Th2失衡相关,且NLRP3通路活化,血清sTREM-1、外周血NLRP3、Caspase-1联合检测对四肢开放性骨折合并感染诊断价值高。 展开更多
关键词 四肢开放性骨折 感染 病原菌 耐药性 可溶性髓系细胞触发受体1 辅助性T细胞亚群1/2 Nod样受体蛋白3 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1
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PPE68/Ipr1真核共表达质粒的构建及鉴定 被引量:3
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作者 靳志栋 张丹 +4 位作者 何永林 徐蕾 佘茜 张壮苗 杨春 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期410-413,共4页
目的构建结核分枝杆菌PPE68基因和小鼠胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的真核共表达质粒,并在小鼠巨噬细胞RAW264.7中表达。方法将结核分枝杆菌PPE68基因和小鼠Ipr1基因分别亚克隆至含多启动子的共表达... 目的构建结核分枝杆菌PPE68基因和小鼠胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的真核共表达质粒,并在小鼠巨噬细胞RAW264.7中表达。方法将结核分枝杆菌PPE68基因和小鼠Ipr1基因分别亚克隆至含多启动子的共表达载体pBudCE4.1中,构建真核共表达质粒pBud68-Ipr1,转染RAW264.7细胞,通过RT-PCR及Western blot法检测PPE68和Ipr1基因的转录和表达。结果重组表达质粒pBud68-Ipr1经PCR、双酶切及测序证实,插入的PPE68和Ipr1基因片段序列正确;质粒转染RAW264.7细胞后,PPE68和Ipr1基因进行了转录和表达,基因编码产物相对分子质量分别为37 000和50 000。结论已成功构建了真核共表达质粒pBud68-Ipr1,并在RAW264.7细胞中获得表达,为PPE68/Ipr1重组BCG的构建及其免疫保护作用的进一步研究奠定了基础。 展开更多
关键词 结核病 PPE68 胞内病原体抗性基因1 巨噬细胞
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Ipr1和GFP基因真核共表达穿梭质粒的构建及其在人肺癌细胞中的表达
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作者 王瑜伟 朱道银 +2 位作者 张黎 李娜 杨春 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期464-467,共4页
目的构建胞内病原体抗性基因1(Ipr1)和绿色荧光蛋白(GFP)基因真核共表达穿梭质粒,并在人肺腺癌细胞A549中表达。方法采用PCR方法,分别从质粒pEGFP-C1-Ipr1和pEGFP-C1中扩增Ipr1和GFP基因,将GFP基因、分枝杆菌复制子OriM和Ipr1基因同时... 目的构建胞内病原体抗性基因1(Ipr1)和绿色荧光蛋白(GFP)基因真核共表达穿梭质粒,并在人肺腺癌细胞A549中表达。方法采用PCR方法,分别从质粒pEGFP-C1-Ipr1和pEGFP-C1中扩增Ipr1和GFP基因,将GFP基因、分枝杆菌复制子OriM和Ipr1基因同时克隆入多启动子真核共表达载体pBudCE4.1中,构建pBud-GFP-OriM-Ipr1穿梭质粒,脂质体法转染A549细胞,荧光显微镜观察GFP的表达,免疫组化方法检测Ipr1蛋白的表达。结果酶切和测序分析表明,pBud-GFP-OriM-Ipr1真核共表达穿梭质粒构建正确。转染A549细胞后,荧光显微镜下可观察到转染细胞中有GFP表达,免疫组化法可检测到Ipr1蛋白的表达,且定位于细胞核内。结论已成功构建Ipr1和GFP基因真核共表达穿梭质粒,为进一步研究Ipr1抗结核的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 胞内病原体抗性基因1 绿色荧光蛋白 穿梭质粒 共表达 肺癌细胞
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SM-1、IFN-γ、IL-1β与IL-8对ARDS合并肺部感染及预后的预测价值 被引量:2
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作者 杜静 赵华昌 +2 位作者 李小燕 卿刚 刘新 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期2886-2890,共5页
目的探讨血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-8对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)合并肺部感染患者预后的预测价值.方法回顾性选取2018年3月-2020年2月于四川省成都市第四人民医院住院治疗的200... 目的探讨血清内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)及IL-8对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)合并肺部感染患者预后的预测价值.方法回顾性选取2018年3月-2020年2月于四川省成都市第四人民医院住院治疗的200例ARDS患者作为研究对象,检测患者入院后血清ESM-1、IFN-γ、IL-1β及IL-8水平,并依据是否合并肺部感染划分为感染组(n=108)和非感染组(n=92),检测感染组患者病原菌情况,进行药敏试验并对药敏情况进行统计;根据患者入院28 d时生存情况将ARDS患者划分为生存组(n=96)和死亡组(n=104),采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清ESM-1、IFN-γ、IL-1β及IL-8对ARDS患者发生肺部感染和预后的预测价值.结果ARDS合并肺部感染患者共培养分离病原菌165株,其中革兰阴性菌106株占64.24%,以肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌为主;革兰阳性菌59株占35.76%,以金黄色葡萄球菌为主;其中肺炎克雷伯菌对头孢曲松、头孢唑林、氨苄西林舒巴坦耐药率>45%;大肠埃希菌对氨苄西林、环丙沙星以及头孢唑林耐药率>65%;金黄色葡萄球菌对苯唑西林、克林霉素以及磺胺甲噁唑/甲氧苄啶耐药率>70%;感染组患者血清ESM-1、IL-8、IL-1β均高于非感染组(P<0.05),IFN-γ低于非感染组(P<0.05);死亡组患者血清ESM-1、IL-8、IL-1β均高于生存组(P<0.05),IFN-γ低于生存组(P<0.05);血清ESM-1、IFN-γ、IL-1β及IL-8联合预测ARDS患者肺部感染发生和死亡的曲线下面积(AUC)均高于四项指标单独预测(P<0.05).结论造成ARDS患者肺部感染的病原菌主要以肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌以及金黄色葡萄球菌为主,且致病菌的耐药情况较严峻;ESM-1、IFN-γ、IL-1β及IL-8联合检测对评估ARDS并发肺部感染和预后有较高价值. 展开更多
关键词 急性呼吸窘迫综合征 肺部感染 病原菌 耐药性 内皮细胞特异性分子-1 Γ-干扰素 白细胞介素-1Β 白细胞介素-8 预后
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肺癌患者肺部感染的病原菌分布及血清中NSE和CYFRA21-1病理表达的临床研究 被引量:20
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作者 谢文君 朱莉艳 +3 位作者 虞小芳 耿艳华 何飞 叶波 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1008-1011,共4页
目的探讨肺癌患者肺部感染的病原菌分布及耐药性特点,同时观察血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清细胞甲蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)病理表达对肺癌的诊断及鉴别诊断的临床意义。方法选取于2011年3月-2017年3月医院收治的... 目的探讨肺癌患者肺部感染的病原菌分布及耐药性特点,同时观察血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清细胞甲蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)病理表达对肺癌的诊断及鉴别诊断的临床意义。方法选取于2011年3月-2017年3月医院收治的肺癌伴肺部感染患者102例为A组,将同期住院无肺癌伴肺部感染患者102例为B组。取患者痰液至无菌试管中并送检进行细菌培养,观察分析病原菌特点及血清中NSE、CYFRA21-1病理表达水平。结果 102例肺癌肺部感染患者共分离出153株病原菌,其中革兰阴性菌91株占59.48%、革兰阳性菌45株占29.41%、真菌17株占11.11%;A组的NSE、CYFRA21-1、CEA的阳性率均高于B组(P<0.05);NSE病理表达水平在小细胞型肺癌最高,与其他类型肺癌的表达水平比较差异有统计学意义,CYFRA21-1病理表达水平在肺腺癌最高,与其他类型肺癌的表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论对肺癌合并肺部感染患者需早期行细菌培养及药敏试验检查,根据相关检查结果选择对症抗菌药物治疗,对肺癌合并肺部感染患者进行早期有效治疗,降低并发症所致病死率,CYFRA21-1、及NSE的病理表达水平增高不仅对肺癌的早期诊断具有重要作用,还可对不同类型的肺癌进行初步判定。 展开更多
关键词 肺癌 肺部感染 病原菌分布 耐药性特点 NSE CYFRA21-1
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难治性根尖周炎患者HK1 mRNA检测、感染病原菌分布及牙龈卟啉单胞菌基因型分析 被引量:3
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作者 邹林洪 张琳林 +2 位作者 邵春婷 陈新 左燕 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第7期833-837,共5页
目的检测难治性根尖周炎患者血糖激酶1(HK1)水平,并分析感染病原菌分布及牙龈卟啉单胞菌基因型,为该病的防治提供参考。方法选择2018年6月-2019年6月本院收治的难治性根尖周炎患者53例(病例组),正常健康者50例(对照组),采用荧光定量PCR... 目的检测难治性根尖周炎患者血糖激酶1(HK1)水平,并分析感染病原菌分布及牙龈卟啉单胞菌基因型,为该病的防治提供参考。方法选择2018年6月-2019年6月本院收治的难治性根尖周炎患者53例(病例组),正常健康者50例(对照组),采用荧光定量PCR检测临床标本中的HK1 mRNA水平,并进行比较分析;培养法检测患者感染病原菌种类,PCR法检测感染牙龈卟啉单胞菌的基因型,K-B纸片扩散法检测病原菌的耐药性。结果与对照组比较,难治性根尖周炎患者临床标本中的HK1 mRNA高表达(P<0.05)。53例患者共检出85株病原菌,其中革兰阳性菌50株(58.82%),主要为葡萄球菌属(21.18%)、粪肠球菌(12.94%)和微单胞菌(11.76%);革兰阴性菌35株(41.18%),以牙龈卟啉单胞菌(27.06%)为主。葡萄菌属、粪肠球菌以及微单胞菌对美罗培南、亚胺培南、头孢曲松的耐药率均<50.00%,牙龈卟啉单胞菌对氯霉素、头孢菌素类和庆大霉素等的耐药率均>50.00%。23株牙龈卟啉单胞菌基因型占比分别为:fimAⅡ型34.78%,fimAⅠ型21.75%,kgpⅠ型56.52%,kgpⅡ型43.48%。常见fimA和kgp基因型组合为fimAⅡ型+kgpⅠ型和fimAⅡ型+kgpⅡ型,占17.39%(4/23)。肿胀患者感染的牙龈卟啉单胞菌以fimAⅡ型(40.00%)和kgpⅠ型(60.00%)为主,窦道患者以fimAⅡ型(46.15%)感染为主,kgpⅠ型与kgpⅡ感染占比相近。结论难治性根尖周炎感染根管感染病原菌以革兰阳性菌为主,不同基因型牙龈卟啉单胞菌引起疾病的临床表现可能不同。患者血HK1高表达,其在难治性根尖周炎中的作用有待进一步研究。 展开更多
关键词 难治性根尖周炎 己糖激酶1 病原菌 耐药性 牙龈卟啉单胞菌
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细胞内病原体抗性基因1的原核表达 被引量:1
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作者 佘茜 徐蕾 +3 位作者 何永林 靳志栋 张丹 杨春 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期426-428,436,共4页
目的构建细胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达。方法以pMD19-T simple-Ipr1质粒为模板,采用PCR法扩增Ipr1基因,克隆至表达载体pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pE... 目的构建细胞内病原体抗性基因1(Intracellular pathogen resistance 1,Ipr1)的原核表达质粒,并在大肠杆菌中进行表达。方法以pMD19-T simple-Ipr1质粒为模板,采用PCR法扩增Ipr1基因,克隆至表达载体pET-32a(+)中,构建重组原核表达质粒pET-32a(+)-Ipr1,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果重组表达质粒经双酶切及测序鉴定构建正确;表达的重组Ipr1蛋白相对分子质量约为70 000,以1.5 mmol/L IPTG诱导4 h,目的蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的16%,重组Ipr1蛋白可与His标签单克隆抗体特异性结合。结论成功构建了Ipr1基因重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了重组Ipr1蛋白,为进一步探讨Ipr1蛋白的功能及Ipr1重组BCG的构建奠定了基础。 展开更多
关键词 结核病 细胞内病原体抗性基因1 原核细胞 基因表达
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NDM-1酶及其抑制剂研究进展 被引量:3
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作者 李兴华 肖春玲 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期270-276,共7页
革兰阴性(G-)菌耐药问题日益严峻,产新德里金属-β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1)的"超级细菌"的出现使G-菌耐药问题引起全球广泛关注。产NDM-1的细菌对几乎所有β-内酰胺类抗生素耐药,使G-菌的临床治... 革兰阴性(G-)菌耐药问题日益严峻,产新德里金属-β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase-1,NDM-1)的"超级细菌"的出现使G-菌耐药问题引起全球广泛关注。产NDM-1的细菌对几乎所有β-内酰胺类抗生素耐药,使G-菌的临床治疗面临巨大挑战,研制可有效杀灭"超级细菌"等G-耐药菌的新型抗感染药物迫在眉睫。本文综述了NDM-1酶及其抑制剂的研究进展,为研制以NDM-1为靶点的抗耐药G-菌的新型药物,有效杀灭"超级细菌"提供借鉴。 展开更多
关键词 G-耐药菌 “超级细菌” NDM-1 筛选方法 抑制剂
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野生大熊猫粪便源携Ⅰ类整合子的产志贺毒素大肠杆菌的分离鉴定 被引量:1
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作者 龚永平 陈珍容 +6 位作者 杨智捷 曹洪志 杨锐 杨光友 孙国忠 王飞 颜其贵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期767-769,共3页
为了解四川某地区野生大熊猫体内是否携带产志贺毒素大肠杆菌(STEC),本研究采用选择培养基从采集的野生大熊猫粪便中进行细菌分离,结果得到一株β溶血的大肠杆菌。通过菌落形态学观察、革兰染色镜检、生化试验、16S rDNA序列测定分析、... 为了解四川某地区野生大熊猫体内是否携带产志贺毒素大肠杆菌(STEC),本研究采用选择培养基从采集的野生大熊猫粪便中进行细菌分离,结果得到一株β溶血的大肠杆菌。通过菌落形态学观察、革兰染色镜检、生化试验、16S rDNA序列测定分析、毒力基因检测、致病性实验及药敏实验进一步鉴定。结果表明:该菌株属于STEC;接种2×10~8 cfu/0.2 mL剂量该菌的小鼠在24 h内全部死亡,表明该菌株具有较强的致病性;药敏结果显示,该菌株对四环素、头孢噻肟、复方新诺明、卡那霉素、链霉素、哌拉西林、诺氟沙星、强力霉素、头孢呋辛存在多重耐药;该菌株携带Ⅰ类整合子基因。本研究结果对野生大熊猫疫病防控及健康风险评估具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 野生大熊猫 产志贺毒素大肠杆菌 多重耐药 Ⅰ类整合子 致病性
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张念志主任医师扶正祛邪法论治原发性支气管肺癌经验撷萃 被引量:7
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作者 陈晶晶 张念志 《浙江中医药大学学报》 CAS 2013年第9期1076-1077,共2页
[目的]总结张念志主任医师扶正祛邪法治疗原发性支气管肺癌的经验。[方法]通过分析原发性支气管肺癌的病因病机,论述张师坚持扶正祛邪治疗总则、运用自拟肺积1号方并灵活加减主方治疗原发性支气管肺癌,并附病案说明。[结果]张师主张扶... [目的]总结张念志主任医师扶正祛邪法治疗原发性支气管肺癌的经验。[方法]通过分析原发性支气管肺癌的病因病机,论述张师坚持扶正祛邪治疗总则、运用自拟肺积1号方并灵活加减主方治疗原发性支气管肺癌,并附病案说明。[结果]张师主张扶正与祛邪并举的治疗原则,扶正以益气养阴为主,祛邪以理气化痰消瘀为主,灵活运用自拟肺积1号方治疗原发性支气管肺癌,患者取得满意疗效。[结论]张师扶正祛邪思想,灵活运用自拟肺积1号方治疗肺癌的经验在临床上行之有效。 展开更多
关键词 原发性支气管肺癌 扶正祛邪 肺积1号方 名医经验 张念志
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多药耐药相关蛋白1及其与病原体感染和耐药的相关性 被引量:1
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作者 陶然 尚世强 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第6期1098-1103,共6页
多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)是ATP结合盒转运蛋白超家族的ABCC亚家族成员,在人体内分布广泛,转运底物众多,具有重要的生理学、病理学和药理学功能。除与肿瘤及抗肿瘤药物耐药、炎症性和免疫性... 多药耐药相关蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)是ATP结合盒转运蛋白超家族的ABCC亚家族成员,在人体内分布广泛,转运底物众多,具有重要的生理学、病理学和药理学功能。除与肿瘤及抗肿瘤药物耐药、炎症性和免疫性疾病、心血管疾病、神经系统疾病等密切相关外,近年来MRP1在感染性疾病中的作用也日益受到关注。该文就MRP1的结构、功能和调控及其与病原体感染和耐药相关性的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 多药耐药相关蛋白1 病原体 感染 耐药
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2016年中国26个省市食源性沙门菌耐药性特征分析 被引量:23
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作者 胡豫杰 刘畅 +5 位作者 王美美 甘辛 徐进 李凤琴 杨大进 裴晓燕 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2018年第5期456-461,共6页
目的了解2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌的耐药状况。方法采用微量肉汤稀释法测定755株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测mcr-1基因的存在情况。结果 72.7%(549/755)的... 目的了解2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌的耐药状况。方法采用微量肉汤稀释法测定755株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测mcr-1基因的存在情况。结果 72.7%(549/755)的沙门菌对受试的16种抗生素呈现不同程度的耐药性,其中萘啶酸(NAL)、四环素(TET)、氨苄西林(AMP)、氨苄西林/舒巴坦(SAM)4种抗生素的耐药率较高,均在34%以上,未见碳青霉烯类[亚胺培南(IPM)、美罗培南(MEM)]耐药菌株,44.4%(335/755)的沙门菌同时耐受3类或3类以上抗生素,表现为多重耐药,同时耐受抗生素种类最高为8类。共存在134种耐药谱,优势耐药谱型为NAL、TET和AMP-SAM-NAL。全部菌株中检出2株携带mcr-1基因的菌株,分别为八重耐药的德尔卑沙门菌(Salmonella Derby)和七重耐药的鼠伤寒沙门菌(Salmonella Typhimurium)。部分省份沙门菌耐药率较高。结论 2016年中国26个省、直辖市和自治区食源性沙门菌整体耐药水平较高,多重耐药情况严重,我国食源性沙门菌中存在携带mcr-1基因的多重耐药菌株,应引起关注。 展开更多
关键词 沙门菌 耐药性 多重耐药 多粘菌素E mcr-1 食源性致病菌
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2015年分离自中国大陆食品的1070株沙门菌耐药性分析 被引量:18
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作者 胡豫杰 王伟 +6 位作者 闫韶飞 甘辛 吕涵阳 刘畅 杨大进 李凤琴 徐进 《中国食品卫生杂志》 2017年第6期647-652,共6页
目的了解我国2015年食源性沙门菌的耐药状况及mcr-1基因在硫酸粘菌素(conlistin,CT)耐药菌株中的分布情况。方法采用微量肉汤稀释法测定1 070株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测196... 目的了解我国2015年食源性沙门菌的耐药状况及mcr-1基因在硫酸粘菌素(conlistin,CT)耐药菌株中的分布情况。方法采用微量肉汤稀释法测定1 070株食源性沙门菌对10类16种抗生素的药物敏感性,采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法检测196株CT耐药菌株中是否存在mcr-1基因。结果 71.9%(769/1 070)的沙门菌对受试的16种抗生素呈现不同程度的耐药性,其中萘啶酸(NAL)、四环素(TET)、氨苄西林(AMP)、氨苄西林/舒巴坦(SAM)4种抗生素的耐药率较高,均在40%以上,未见碳青霉烯类耐药菌株,47.5%(508/1 070)的沙门菌同时耐受3类或3类以上抗生素,表现为多重耐药,同时耐受抗生素种类最高为9类。共存在141种耐药谱,优势耐药谱型为NAL、AMP-SAM-NAL-CT和TET。196株CT耐药沙门菌检出1株携带mcr-1基因且超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性的菌株,该菌株为伦敦血清型,是所有测试菌株中唯一1株九重耐药株。部分省份沙门菌耐药率较高。生禽肉和生畜肉来源沙门菌耐药率较高,分别为80.6%(349/433)和73.5%(283/385)。结论我国2015年食源性沙门菌整体耐药水平较高,且多重耐药情况严重,生禽畜肉是耐药沙门菌的主要来源,我国食源性沙门菌中存在携带mcr-1基因的严重耐药菌株,应引起关注。 展开更多
关键词 沙门菌 耐药性 多重耐药 硫酸粘菌素 mcr-1 食源性致病菌 中国大陆
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顺铂耐药胃癌细胞株MGC803/顺铂的建立及其耐药机制 被引量:2
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作者 刘金禄 赵昆 +5 位作者 邱越 王震 毛远天 黎伯培 陈业阳 陈俊强 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2200-2202,共3页
目的建立顺铂耐药胃癌细胞株MGC803/顺铂(DDP),探讨其耐药机制.方法采用顺铂体外诱导MGC803细胞耐药,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测耐药株的半数抑制浓度(IC50),蛋白质印迹法(Western blot)检测氯离子通道蛋白1(CLIC1)表达量,构建野生型C... 目的建立顺铂耐药胃癌细胞株MGC803/顺铂(DDP),探讨其耐药机制.方法采用顺铂体外诱导MGC803细胞耐药,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测耐药株的半数抑制浓度(IC50),蛋白质印迹法(Western blot)检测氯离子通道蛋白1(CLIC1)表达量,构建野生型CLIC1质粒及靶向CLIC1的短发卡RNA(shRNA)质粒,Lip03000转染胃癌细胞之后,检测胃癌细胞对顺铂的IC50改变,进而采用MQAE荧光探针检测细胞内Cl-浓度,应用SPSS 22统计软件分析.结果成功诱导顺铂耐药细胞株MGC803/DDP,IC50为(7.02±0.13)mg/L,而MGC803的IC50为(1.29±0.09)mg/L,(t=36.090,P<0.05);MGC803/DDP的CLIC1蛋白相对MGC803上调(2.27±0.15)倍,(t=7.841,P<0.05);沉默MGC803/DDP的CLIC1基因后,CON、CN、KD组的IC50分别为(6.96±0.09)mg/L、(6.93±0.15)mg/L、(3.02±0.20)mg/L,KD组明显降低(F=0.209,P<0.05);MGC803细胞过表达CLIC1基因后,CON、CN、OE组的IC50分别为(1.35±0.07)mg/L、(1.25±0.07)mg/L、(4.77±0.12)mg/L,OE组明显升高(F=0.508,P<0.05);MQAE检测Cl-浓度,MGC803、MGC803/OE、MGC803/DDP、MGC803/DDP-KD的相对荧光强度分别为(1.02±0.03)、(0.61±0.02)、(0.67±0.01)、(1.39±0.02),MGC803/OE细胞内的Cl-浓度较MGC803高(t=10.800,P<0.05);MGC803/DDP的Cl-浓度较MGC803及MGC803/DDP-KD高,KD组的Cl-浓度最低(F=0.229,P<0.05).结论CLIC1基因在体外可诱导胃癌细胞MGC803对顺铂耐受,其机制可能与CLIC1表达上调,导致细胞内的Cl-浓度升高有关. 展开更多
关键词 胃癌 氯离子通道蛋白1 顺铂 耐药
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