黄芪皂苷Ⅱ对肾透明细胞癌细胞迁移和侵袭能力的抑制作用及其机制

目的 探讨黄芪皂苷Ⅱ(ASⅡ)对肾透明细胞癌细胞迁移和侵袭的抑制作用,并分析该作用与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法 取人肾透明细胞癌细胞786-O,随机分为对照组、ASⅡ组和LiCl干预组。对照组仅更换新鲜血清培养基,不进行其他处理;ASⅡ组加入100μmol/L ASⅡ溶液;LiCl干预组先加入10 mmol/L LiCl(Wnt/β-catenin信号通路激活剂)溶液,24 h后加入100μmol/L ASⅡ溶液。采用细胞划痕实验观察各组细胞迁移能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,Western blotting法检测细胞上皮间充质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)。结果 与对照组比较,ASⅡ组细胞迁移率降低;与ASⅡ组比较,LiCl干预组细胞迁移率升高(P均<0.01)。与对照组比较,ASⅡ组穿膜细胞数减少;与ASⅡ组比较,LiCl干预组穿膜细胞数增加(P均<0.01)。与对照组比较,ASⅡ组E-cadherin蛋白表达水平升高,N-cadherin、Vimentin及β-catenin蛋白表达水平降低;与ASⅡ组比较,LiCl干预组E-cadherin蛋白表达水平降低,N-cadherin、Vimentin及β-catenin蛋白表达水平升高(P均<0.01)。结论 ASⅡ能够抑制肾透明细胞癌细胞的迁移和侵袭能力,其机制可能是通过调控Wnt/β-catenin信号通路来抑制细胞EMT实现的。

LncRNAs-MEG3对鼻咽癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:研究长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNAs-MEG3)对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法:体外培养鼻咽癌细胞系TW03、CNE-2,转染MEG3后分为空白对照组(NC)、阴性转染组(阴性对照质粒转染)和实验组(MEG3 mimis质粒转染)。采用实时定量PCR检测鼻咽癌细胞中LncRNAs-MEG3含量,CCK-8检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:与正常鼻咽上皮细胞系NP69相比,鼻咽癌细胞中MEG3的表达明显降低(0.62±0.04)(P<0.05)。与空白对照组、阴性转染组相比,实验组中MEG3 mRNA的表达升高(5.31±0.12)(F=441.062,P<0.01),同时检测到鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭均减少(F=10.832,P<0.05;F=1 534.134,P<0.05;F=1 430.212,P<0.05),凋亡增多(F=798.066,P<0.05),差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:MEG3在鼻咽癌中的表达降低,提高MEG3表达则能够抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,并促进细胞的凋亡,机制可能与抑制上皮-间质转化有关。

circMAN1A2调节miR-212-3p/DDIT4轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的探究circMAN1A2靶向miR-212-3p/DNA损伤诱导转录子4(NDA damage-inducible transcript 4,DDIT4)轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法qRT-PCR法检测胃癌组织和细胞中circMAN1A2、miR-212-3p表达水平。荧光素酶检测circMAN1A2与miR-212-3p、DDIT4和miR-212-3p的靶向关系。在胃癌细胞SGC-7901、HGC-27中转染si-NC、si-circMAN1A2、si-circMAN1A2+anti-NC、si-circMAN1A2+anti-miR-212-3p、miR-NC、miR-212-3p mimics,将未转染的SGC-7901、HGC-27细胞设为对照。平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕及Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力。Western blotting检测增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达。结果在胃癌组织及细胞中,circMAN1A2高表达,miR-212-3p低表达;下调circMAN1A2可以靶向上调miR-212-3p表达,且下调DDIT4表达,进而抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。抑制miR-212-3p表达可部分逆转抑制circMAN1A2表达对胃癌细胞恶性增殖的抑制作用。结论在胃癌细胞中抑制circMAN1A2表达可抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,其与调节miR-212-3p/DDIT4信号轴有关。

转铁蛋白受体对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制

目的探讨转铁蛋白受体(TFRC)对宫颈癌细胞增殖、迁移、侵袭、上皮-间充质转化的影响及可能的作用机制。方法慢病毒构建敲低和过表达TFRC的宫颈癌细胞系,并分为空白对照组、TFRC敲低阴性对照组、TFRC敲低组、TFRC过表达阴性对照组及TFRC过表达组。用蛋白印迹分析法检测TFRC、真核起始因子(EIF4A3)、E-钙黏蛋白(E-cadberin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和锌指转录因子(Snail)的表达情况,通过平板克隆、细胞划痕和Transwell侵袭实验检测宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果与空白对照组相比,TFRC敲低组EIF4A3、N-cadherin、Vimentin和Snail蛋白表达水平下降、E-cadberin蛋白表达水平升高,细胞克隆数减少、迁移率下降和侵袭细胞数量减少(P均<0.05);相反,TFRC过表达组EIF4A3、N-cadherin、Vimentin和Snail表达量增加、E-cadberin表达量减少,细胞克隆数增加、迁移迁移率升高和侵袭细胞数量增加(P均<0.05)。结论TFRC在宫颈癌中呈高表达,通过调节EIF4A3可促进宫颈癌的增殖、迁移、侵袭、上皮-间充质转化;过表达和敲低EIF4A3可相应抵消敲低和过表达TFRC对宫颈癌细胞恶性生物学行为产生的影响。

超深层多断裂碳酸盐岩气藏水侵模式及治水对策

超深层天然气勘探开发潜力巨大,已经成为全球勘探开发的热点。近年川西北地区发现双鱼石构造中二叠统栖霞组气藏,成为四川盆地目前最具潜力的超深层勘探开发领域之一。该气藏高温、高压且多断裂,埋藏深度超过7000 m,开发投资成本高。2020年气藏整体投产以来,5口气井陆续产出地层水,产水井比例超过40%,效益开发面临挑战。为此,基于气藏生产动态特征,采用气藏工程方法对水体活跃性进行评价,提出气藏典型水侵模式,形成气藏差异化治水对策。研究结果表明:①气藏不同区域水体活跃性存在差异,表现出整体水体不大但局部水体活跃的特征。②气井水侵特征包括指数产水型、线性产水型及指数+线性产水型等3类,并以指数产水型为主。③结合气藏地质特征,将气井水侵模式划分为构造端部沿层推进型、单翼边水沿裂缝推进型及双翼边水沿裂缝窜进型这3种类型,并确定气藏3口产水风险井。④提出气藏治水对策:Ⅰ号条带控水为主,Ⅲ-Ⅳ号条带中部各优选排水井1口,气藏合理排水规模250 m3/d。研究结果可保障气藏的长期稳产与科学开发,同时对同类型气藏的开发具有指导意义。

LINC00341通过靶向miR-187对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响

目的 探讨LINC00341对前列腺癌DU145细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的靶向影响及机制。方法 将LINC00341过表达载体(pcDNA3.1-LINC00341)转染前列腺癌细胞DU145,检测细胞的增殖力、细胞凋亡及迁移和侵袭能力,蛋白质印记(Western blot)法检测Cyclin D1、P21、Bcl-2、Bax、MMP-2和E钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。双荧光素酶报告实验联合RT-qPCR验证LINC00341对miR-187的靶向调控关系。将miR-187模拟物(miR-187 mimics)和pcDNA3.1-LINC00341共转染DU145细胞,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力变化。结果 过表达LINC00341抑制DU145细胞Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2的表达,促进P21、Bax和E-cadherin蛋白的表达水平,抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。miR-187是LINC00341的靶基因,LINC00341靶向负性调控miR-187表达。过表达miR-187可逆转LINC00341过表达对DU145细胞的增殖、迁移侵袭抑制作用和凋亡促进作用。结论 LINC00341通过靶向下调miR-187抑制DU145细胞的增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡。

人OC细胞系细胞miR-211-5p表达、转染miR-211-5p模拟物后的增殖及迁移侵袭和EMT观察

目的观察人卵巢癌(OC)细胞系细胞微小RNA-211-5p(miR-211-5p)表达、转染miR-211-5p模拟物(miR-211-5p mimics)后的增殖及迁移侵袭和上皮间质转化(EMT)。方法体外培养人OC细胞系(SKOV3、A2780、HO8910细胞)及人正常卵巢上皮IOSE80细胞,采用qRT-PCR法检测上述细胞miR-211-5p。取对数生长期的SKOV3细胞,并随机分为两组,高表达组转染miR-211-5p mimics,对照组转染miR-NC,采用CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验、Western blotting法分别测算两组细胞OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、EMT相关蛋白及壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)蛋白灰度值比值。将miR-211-5p mimics或miR-NC与CHI3L1野生型双荧光素酶报告载体CHI3L1-wt或CHI3L1突变型双荧光素酶报告载体CHI3L1-mut共转染入SKOV3细胞中,分为记为miR-211-5p mimics+CHI3L1-wt组、miR-NC+CHI3L1-wt组、miR-211-5p mimics+CHI3L1-mut组、miR-NC+CHI3L1-mut组,转染24 h后收集并裂解细胞,应用荧光素酶试剂盒检测各组细胞的荧光素酶活性。结果与IOSE80细胞比较,SKOV3、A2780、HO8910细胞miR-211-5p相对表达量降低(P均<0.05)。与对照组比较,高表达组OD值、划痕移动距离百分比、侵入细胞数、N-Cadherin和Fibronectin蛋白灰度值比值降低,E-Cadherin蛋白灰度值比值升高(P均<0.05)。与对照组比较,高表达组CHI3L1蛋白灰度值比值降低(P<0.05)。与miR-NC+CHI3L1-wt组比较,miR-211-5p mimics+CHI3L1-wt组细胞相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。结论miR-211-5p在OC各细胞系中表达降低;转染miR-211-5p mimics可抑制SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及EMT,机制是通过负向调控CHI3L1表达实现的。

苏北滨海湿地互花米草两种繁殖体与本地种竞争能力分析

在碱蓬滩选取互花米草斑块,由外向内分为外围(A)、外侧(B)、内侧(C)、中心(D)四个取样点,研究互花米草实生苗、分蘖苗与本地植物碱蓬、芦苇的相对竞争力,探讨互花米草在碱蓬滩地入侵扩张的趋势。结果表明:1)在斑块B点处,互花米草实生苗与碱蓬相对竞争力高于互花米草分蘖苗与碱蓬相对竞争力;在斑块C点处,互花米草实生苗与碱蓬相对竞争力低于互花米草分蘖苗与碱蓬相对竞争力;多样性指数分析表现为:B点>C点>A点>D点;在互花米草斑块B点处重要值大小表现为:互花米草实生苗>碱蓬>芦苇实生苗>互花米草分蘖苗,在互花米草斑块C点处重要值大小表现为:互花米草分蘖苗>芦苇实生苗>互花米草实生苗>碱蓬。因此,碱蓬滩互花米草斑块主要是通过实生苗入侵新生境,向外扩张,通过互花米草分蘖苗维持种群的稳定。2)在斑块B点,芦苇实生苗与互花米草实生苗的相对竞争力相当,大于互花米草分蘖苗的相对竞争力,但在斑块C点处,互花米草分蘖苗高于芦苇实生苗。碱蓬与本地种芦苇也产生了竞争关系,并很有可能被芦苇和互花米草共同取代。3)互花米草实生苗与碱蓬的相对竞争力与滩涂微生境土壤含水量、土壤全盐量负相关(P<0.01),与土壤pH正相关(P<0.01);互花米草分蘖苗与碱蓬的相对竞争力与土壤含水量、土壤全盐量正相关(P<0.05),与土壤pH负相关(P<0.01)。碱蓬滩斑块处的含水量、盐度适合互花米草的定居、扩张。

沉默LIMK1促进DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭

目的探讨LIMK1沉默对DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭的影响。方法 RNA干扰技术建立稳定LIMK1-miRNA/SW480细胞株;免疫组化和Western blot检测DADS对沉默LIMK1结肠癌SW480细胞LIMK1和磷酸化LIMK1蛋白表达的影响。划痕实验和侵袭实验检测LIMK1 RNA沉默与DADS对SW480细胞迁移与侵袭的影响。结果 RT-PCR与Western blot显示,LIMK1-miR/SW480细胞LIMK1mNRA与蛋白表达明显下调,表明成功构建稳定沉默LIMK1基因的SW480细胞株。免疫组化和Western blot显示,45 mg.L-1DADS处理和沉默LIMK1组较未转染组与空载体组SW480细胞LIMK1蛋白和磷酸化LIMK1明显下调(P<0.05)。划痕实验和侵袭实验发现,沉默LIMK1或DADS处理SW480细胞的迁移与侵袭能力较未转染组与空载体组明显抑制(P<0.05)。而DADS处理沉默组抑制SW480细胞迁移和侵袭能力更为明显(P<0.05)。结论沉默LIMK1基因可抑制SW480细胞迁移与侵袭,增强DADS抑制SW480细胞迁移与侵袭作用。

雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的影响及机制研究

目的:研究雷帕霉素对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的影响及其机制。方法:将HeLa细胞分为对照组和雷帕霉素低、中、高剂量(10、30、100 nmol/L)组,药物作用48 h后,MTT法检测细胞活力,计算抑制率;Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot法检测细胞中蛋白激酶B(Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)磷酸化水平,以及基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平。结果:与对照组比较,雷帕霉素各剂量组细胞的抑制率增加(P<0.01),迁移细胞数目和侵袭细胞数目减少(P<0.01),MMP-2、MMP-9、Vimentin表达水平降低(P<0.01或P<0.05),E-cadherin表达水平增强(P<0.01或P<0.05),Akt及mTOR磷酸化水平降低(P<0.01)。结论:雷帕霉素可通过Akt/mTOR信号通路抑制He La细胞的侵袭转移。

rhddADAM15蛋白抑制小鼠黑色素瘤细胞生长及其机制

目的探讨重组人ADAM15去整合素结构域蛋白(rhddADAM15)对小鼠黑色素瘤细胞B16体外增殖、迁移、侵袭和凋亡等细胞行为的影响以及对p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)信号通路的作用。方法 MTT法检测rhd-dADAM15对B16细胞增殖的抑制作用;划痕实验观察rhdd-ADAM15对B16细胞迁移的影响;"侵袭小室法"检测rhdd-ADAM15对B16细胞侵袭的作用;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot法检测rhddADAM15作用导致的p38MAPK激酶活性的变化。结果 rhddADAM15作用明显抑制B16细胞生长(IC50为13.80 mg.L-1),当浓度为7.5mg.L-1时,侵袭细胞数较对照组减少了0.55,对B16细胞迁移的抑制作用与共培养的时间呈正比,主要将B16细胞生长阻滞在G2/M期;当rhddADAM15浓度为10 mg.L-1时,p38MAPK激酶的磷酸化程度达0.80。结论 rhddADAM15对B16细胞行为具有明显的抑制作用,其机制可能与激活p38MAPK信号通路有关。

低分子量肝素乙酰化物的理化特性及其体外抗肿瘤活性研究

目的合成低抗凝血性低分子量肝素乙酰化物(ALMWH),并对其理化性质、抗肿瘤活性进行检测。方法采用高碘酸钠氧化,硼氢化钠还原法对普通肝素(UFH)进行选择性裂解,制得低抗凝血性低分子肝素(LMWH),以N,N二环己基碳二亚胺和二甲氨基吡啶(DCC/DMAP)为催化剂,对其进行乙酰化,制得ALMWH,经X线衍射(XRD)和差示扫描量热(DSC)试验,分析其构型和理化性质。以乳腺癌MDA-MB-231、MCF-7细胞为模型,检测其抗增殖、抗侵袭转移能力。利用家兔全血激活凝血时间实验(ACT)检测其抗凝血活性。结果 XRD测得ALMWH与LMWH同属无定形结构,但DSC热损失曲线和LMWH明显不同。与LMWH比较,ALMWH含有更多的结合水较低的抗凝血活性。更有意义的是,在低浓度下ALMWH即表现出较LMWH强的抗肿瘤细胞增殖、转移的活性。结论 ALMWH抗凝血活性低,具有一定的抗肿瘤增殖及侵袭转移的作用。本研究为低毒性抗肿瘤药物筛选提供了基础方法。

miRNA-196a与宫颈癌的关系研究

目的:探讨miRNA-196a与宫颈癌的相关性。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测35例宫颈癌组织、35例宫颈上皮内瘤样病变组织(CIN)和40例非癌疾病切除的正常宫颈组织中miRNA-196a的表达,分析miRNA-196a与宫颈癌的发生发展的相关性;并通过转染的方法将miRNA-196a转入宫颈癌细胞株Siha中,观察其对Siha细胞迁移和侵袭的影响。结果:相对于CIN组织和非癌疾病切除的正常宫颈组织,宫颈癌组织中miRNA-196a的表达水平明显上调,差异有统计学意义(P<0.01);miRNA-196a的表达水平与患者有无淋巴结转移、临床病理分级、临床分期和间质浸润深度密切相关(P<0.01),但与患者年龄、肿瘤直径大小和绝经与否均无明显关系(P>0.05);转染miRNA-196a可促进Siha细胞的迁移和侵袭。结论:miRNA-196a与宫颈癌的发生发展、迁移、侵袭密切相关。

影响胰腺癌预后因素的分析

目的 综合分析和评价临床病理特点和治疗方式对胰腺癌患者预后的影响.方法 选取2004年1月至2007年1月,由贵阳医学院附属医院肝胆外科收治的胰腺癌患者作为本课题研究对象,选择其中临床资料齐全并且获得成功随访的91例患者,对有可能影响预后的临床病理因素（包括临床病理特点和治疗方式）进行单因素Kruskal-Wallis法和多因素Cox比例风险模型的统计学分析处理,用Kaplan-Meier方法计算生存率,评价因素对临床预后的影响.结果 可能影响胰腺癌患者预后的临床病理因素包括：年龄、性别、肿瘤部位、病理类型、胰周侵犯（包括周围血管、淋巴结、邻近脏器）、远处转移（包括肝转移）、临床分期和治疗方式.单因素分析表明：胰周侵犯、远处转移、临床分期、治疗方式与胰腺癌预后密切相关（P＆lt;0.05）;而年龄、性别、肿瘤部位、病理类型与预后关系不密切（P＆gt;0.05）.再对筛选出来的有统计学意义的临床病理因素,应用多因素分析表明：胰周侵犯是影响胰腺癌患者预后的首位独立因素.肿瘤临床分期（TNM）Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅴ期患者的1年生存率分别为80.65%、74.29%、26.32%、25.00%,5年生存率分别为16.31%、5.71%、0、0.根治手术组（包括胰十二指肠切除术、胰体尾切除术）、姑息手术组（包括单纯胆囊空肠吻合术、胆总管空肠Roux-en-Y吻合术、胆肠吻合加胃肠吻合术、十二指肠镜下胆道内支架植入术）1年生存率分别为77.42%、23.08%,5年生存率分别为9.22%、0.结论 胰周侵犯是影响胰腺癌患者预后的首位独立因素.早期确诊并进行根治性手术切除是提高胰腺癌患者生存率的最有效方法.对不能行根治性手术的胰腺癌患者应根据其个体情况选择不同类型的姑息手术方式治疗.

PAGE5对非小细胞肺癌细胞生长、凋亡和侵袭能力的影响

目的:探讨前列腺相关基因5(PAGE5)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其对肺癌细胞生物学行为的影响。方法:采用实时定量PCR和Western blot方法检测37例NSCLC及其癌旁组织中PAGE5的表达;采用MTT法、流式细胞术、Transwell以及Western blot法检测转染PAGE5 siRNA对A549和H1299细胞生长、凋亡、侵袭以及Bax、Bcl-2和MMP-2表达的影响。结果:在37.84%(14/37)的肺癌组织样本中PAGE5基因表达上调。转染PAGE5 siRNA的A549和H1299细胞生长无明显变化、细胞凋亡显著增加、侵袭能力显著下降(P<0.05),Bax蛋白表达显著上调,Bcl-2和MMP-2蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论:PAGE5可能通过调控Bax、Bcl-2及MMP-2蛋白的表达影响NSCLC细胞的生长、凋亡与侵袭,有望成为肺癌诊断标志物及潜在的治疗靶点。

B超、CT与MRI的影像学检查在子宫内膜癌术前肌层浸润及淋巴结转移诊断中的价值

目的探讨B型超声(B超)、CT与磁共振成像(MRI)的影像学检查在子宫内膜癌术前肌层浸润及淋巴结转移诊断中的应用价值。方法回顾性分析2010年1月至2014年1月成都市第七人民医院收治的130例经手术治疗的子宫内膜癌患者的临床资料,其中73例接受CT检查,54例接受MRI检查,130例患者均接受了超声检查。以病理结果为金标准,比较3种影像学检查手段对子宫内膜癌术前肌层浸润及淋巴结转移诊断的灵敏度、特异度、阳性预测值与阴性预测值、符合率、误诊率、漏诊率以及Youden指数,并进行一致性分析。结果关于子宫内膜肌层浸润一致性分析中,MRI与病理检查结果一致性较CT与B超高(κ值为0.602,0.327与0.226);关于淋巴结转移一致性分析中,CT和MRI与病理检查结果一致性较B超高(κ值分别为0.706,0.703与0.336)。结论MRI对于子宫内膜癌术前肌层浸润的诊断价值具有明显的优势,CT与MRI用于子宫内膜癌的淋巴结转移均显示出较高的诊断价值,B超诊断价值虽然不及前两者,但是其易操作性与低廉的价格适合子宫内膜癌术前肌层浸润及淋巴结转移的普遍检测。

沉默Pin1基因对子宫颈癌SiHa细胞生物学性能的影响

目的探讨肽基脯氨酰同分异构酶(peptidyl-prolylcis/trans isomerase,Pin1)基因对子宫颈癌SiHa细胞生物学性能的影响。方法实验设立4组:空白对照组(正常培养的SiHa细胞)、阴性对照组(SiHa细胞转染随机序列)和Pin1siRNA1组、Pin1siRNA2组(转染siRNA序列1、2),采用基因RNA干扰技术下调子宫颈癌SiHa细胞中Pin1的表达;qRT-PCR和Western blot法检测Pin1 mRNA和Pin1蛋白水平的变化。Transwell小室体外实验检测Pin1基因对SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响;应用流式细胞术分析其对SiHa细胞周期及凋亡的影响。结果 SiHa细胞转染基因Pin1siRNA干扰SiHa细胞后Pin1mRNA和Pin1蛋白表达水平明显降低;Transwell小室体外实验表明,Pin1siRNA1、Pin1siRNA2组蛋白表达下调后细胞侵袭、迁移能力降低;流式细胞术结果提示,与空白对照组、阴性对照组相比,Pin1基因被干扰后细胞阻滞在G0/G期,细胞凋亡率明显增高(P<0.05)。结论降低Pin1表达能明显抑制宫颈癌细胞的侵袭、迁移能力。Pin1参与了SiHa细胞的凋亡过程,并且随Pin1表达量的高低来调控肿瘤细胞的周期和凋亡程度。

晚清的内忧外患与日本近代化

晚清遭受西方殖民主义的屡次侵略而渐次沉沦,内部又爆发大规模的农民起义,可谓内忧外患。这向尚处锁国状态的近邻日本频频发出强烈警报,使其获得改弦更张、积极面对列强来袭的启示,并断然走上开国、倒幕、维新的近代化之路。

体外沉默血管内皮生长因子对D-(-)-MTX/A549耐药细胞株迁移侵袭能力的影响

目的:研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因沉默对D-(-)-MTX/A549耐药细胞株迁移和侵袭的影响及可能的分子机制。方法:采用siRNA技术沉默D-(-)-MTX/A549耐药细胞株VEGF基因,细胞划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR检测VEGF、MMP-2 mRNA,Western blot检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果:VEGF siRNA序列及阴性对照成功转染至D-(-)-MTX/A549后,VEGF mRNA表达水平明显下降,与阴性对照相比下降了2.29倍,差异具有统计学意义(P=0.002),表明转染成功。阴性对照组与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。转染后,D-(-)-MTX/A549迁移和侵袭能力明显下降(P值均<0.05),D-(-)-MTX/A549耐药细胞MMP-2 mRNA、p-ERK1/2的蛋白达也较阴性对照水平明显下降(P值均<0.05)。结论:抑制VEGF基因表达可以抑制D-(-)-MTX/A549细胞的迁移和侵袭能力,这一过程可能涉及到MMP-2和p-ERK1/2信号通路。

GM6001对涎腺腺样囊性癌细胞粘附、侵袭及迁移能力的影响

目的 研究GM6001对涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC）肺高转移性细胞（ade-noid cystic carcinoma-M,ACC-M）和肺低转移性细胞（Adenoid cystic carcinoma-2,ACC-2）的粘附、侵袭及迁移能力的影响.方法 选取处于对数期生长的ACC-M和ACC-2细胞,应用MTT法测定不同浓度的GM6001（10、15、20、25 μmol·L-）对ACC-M和ACC-2细胞干预前后粘附能力的影响;应用Transwell小室通过平均穿膜细胞数观察不同浓度的GM6001对ACC-M和ACC-2细胞干预前后侵袭及迁移能力的影响.结果 GM6001在10～25μmol·L-的范围内可抑制ACC-M与ACC-2细胞的粘附能力,ACC-M细胞粘附实验的OD值从（0.226±0.196）降低至（0.065±0.010）;ACC-2细胞的（0.265±0.026）降低至（0.122±0.007）.GM6001浓度在0～25 μmo·lL-的范围内干预ACC-M与ACC-2细胞后侵袭至小室下的细胞数分别从（42.00±2.550）个降至（20.40±3.435）个、（40.20±3.033）个降至（22.00±2.550）个;迁移至小室下的细胞数分别从（62.20±3.768）个降至（17.60±3.847）个、（55.40±2.302）个降至（18.20±2.387）个,GM6001对ACC-M细胞粘附、侵袭及迁移的抑制能力强于对ACC-2细胞的抑制能力.结论 GM6001能降低ACC-M及ACC-2细胞的粘附、侵袭及迁移能力,其在SACC临床治疗中可能具有应用前景.