EFFECT OF ACUPUNCTURE AND POINT-INJECTION TREATMENT ON IMMUNOLOGIC FUNCTION IN RHEUMATOID ARTHRITIS

The results of treatment of 54 cases of rheumatoid arthritis(RA)by warm needling(WN)and point-injection(PI)with Zhuifengsu are reported.Good clinical results were observedwith an effective rate of 100%.At the same time,changes in cellular and humoral immunityand other parameters in peripheral blood were noted before and after treatment.The NK ac-tivity and IL-2 value in RA patients were found to be lower than those of normalindividuals;both increased after treatment(P【0.01).This suggests that the WN and PIwith Zhuifengsu exert a regulatory effect on the cellular immunological function.

高碘对大鼠甲状腺TPO、TgmRNA表达及血清甲状腺激素的影响

目的观察不同水平的碘摄入对大鼠甲状腺功能的影响及其发病机理。方法断乳1月龄的Wistar大鼠90只随机分为6组,即低碘组(LI)、正常碘组(NI)、5倍碘组(5HI)、10倍碘组(10HI)、50倍碘组(50HI)和100倍碘组(100HI),分别饮用含碘量不同的水,饲养6个月后处死,摘取甲状腺,采用RT鄄PCR及放射免疫方法,检测甲状腺过氧化物酶(TPO)、甲状腺球蛋白(Tg)mRNA的表达和血清甲状腺激素水平。结果LI组、100HI组的血清甲状腺激素水平均低于NI组(P<0.01);NI、5HI、10HI、50HI组的血清TT4呈逐渐下降趋势,但各组间差异无统计学意义(P>0.05);100HI组TT4、FT4、rT3仍高于LI组(P<0.01)。从LI到10HI组大鼠甲状腺TPOmRNA表达水平随碘摄入量增加而呈逐渐减少趋势,而50HI、100HI组呈现回升趋势,经统计学分析,LI组高于NI组(P<0.05),10HI组低于NI组(P<0.05),50HI和100HI组与NI组差异无统计学意义(P>0.05)。甲状腺TgmRNA表达水平显示,6组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论长期碘过量可导致甲状腺功能低下(甲低),与碘缺乏的后果相近,但甲低的程度不如碘缺乏性甲低严重;大鼠对高碘的摄入有很强的耐受性,在长期摄入高剂量的碘后,较严重碘过量时才发生明显的甲低;无论是碘缺乏还是碘过量所造成的甲低,都会引起代偿性的TPOmRNA的高表达,以促进?

不同碘营养状态对大鼠肝组织Ⅰ型5’脱碘酶的影响

目的研究不同碘营养状态对大鼠肝组织甲腺氨酸I型5’脱碘酶(DI)表达水平及活性的影响。方法正常1月龄Wistar大鼠根据碘摄入量不同分为6组,饲养3个月后处死。放免法测定血清甲状腺激素水平。提取肝组织总RNA,以B-actin为内对照,半定量RT-PCR分析DI基因的表达水平。Chopra氏方法测定肝组织匀浆液中DI的脱碘活性。结果 LI组TT4和FT4显著低于其他5组(P<0．05),100HI组TT3和FT3显著低于其他5组(P<0．05),100HI组TT4和FT4显著低于NI、5HI、10HI和50HI组(P<0．05)。大鼠肝组织DI基因mRNA表达量6组间差异有统计学意义(P<0．01),LI组显著高于其他5组(P<0．05),不同剂量HI组和NI 组相比差异均无统计学意义(P>0．05)。大鼠肝组织DI活性6组间差异有统计学意义(P<0．01),LI组显著高于其他5组(P<0．05),50HI组和100HI组显著低于其他4个组(P<0．05)。结论在碘缺乏状态下,大鼠出现以低T4为主要表现的甲状腺功能减退(甲减),DI活性和DI基因表达水平代偿性上调,使机体维持足够的T3 水平,以避免周围组织出现器官性甲减。高碘仅在转录后水平影响DI,表现为直接抑制DI的活性,使血清TT3和 FT3下降,机体出现失代偿性周围组织器官性甲减。DI对碘过量有一定的耐受能力,这种耐受性有一定的阈值。

Galectin-3、CK19和TPO表达在甲状腺良恶性肿瘤病理诊断中的价值

目的比较甲状腺病变中galectin3、CK19和甲状腺过氧化物酶(thyroidperoxidase,TPO)蛋白表达的差异,寻找有助于诊断良恶性肿瘤的标志物。方法采用免疫组化EnVision二步法检测134例甲状腺癌(123例乳头状癌、11例滤泡癌)、34例甲状腺腺瘤、20例结节性甲状腺肿和10例桥本甲状腺炎中galectin3、CK19和TPO蛋白的表达。结果Galectin3、CK19和TPO在甲状腺乳头状癌(包括主要的3个亚型)与良性病变中的表达差异有显著性(P<0.01),在乳头状癌各亚型间和各良性病变之间的表达差异均无显著性(P>0.05)。滤泡癌和良性病变中galectin3表达差异有显著性(P<0.01)。滤泡癌和腺瘤中CK19、TPO的表达差异有显著性(P<0.05,P<0.01)。结论甲状腺恶性肿瘤特别是乳头状癌中galectin3和CK19的表达有增高,而TPO表达缺失。3种蛋白分别是诊断甲状腺肿瘤特别是乳头状癌的有用标志物,联合使用结果更可靠。

甲状腺自身抗体在白癜风诊治中的应用价值

目的研究甲状腺过氧化物酶抗体(ATA)和甲状腺球蛋白抗体(抗-Tg)在白癜风诊治中的应用价值。方法选择100例(男52例,女48例)白癜风患者和80例健康人(男38例,女42例)为研究对象,排除甲状腺疾病、甲状腺手术及接受甲状腺药物治疗的患者。2组对象的性别和年龄相当。所有对象都接受问卷调查,内容包括人口统计学资料,甲状腺疾病相关症状,皮肤表现和甲状腺功能检测结果。甲状腺功能检测项目包括促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(fT3)、游离甲状腺素(fT4)和ATA、抗-Tg。结果白癜风患者23例(23%)血清ATA升高,11例(11%)血清抗Tg升高;而对照组只有5例血清(6.3%)ATA升高,3例(3.8%)血清抗-Tg升高,病例组与对照组差异具有统计学意义(P<0.05)。病例组血清TSH水平为(1.59±1.25)U/L,对照组血清TSH水平为(1.14±1.08)U/L,差异具有统计学意义(P<0.05)。亚分组分析显示,性别、年龄和皮肤受累范围等与血清ATA、抗-Tg阳性率相关性的差异具有统计学意义(P<0.05)。白癜风的病程及其类型与ATA及抗-Tg阳性率不具有相关性。此外,病例组与对照组血清fT3、fT4水平的差异亦无统计学意义。结论血清ATA和抗-Tg可作为女性白癜风患者诊断和疗效观察的标志物,对血清ATA和抗-Tg水平升高的女性白癜风患者定期进行随访并检测甲状腺功能显得尤为重要。

伴自身免疫性甲状腺炎的肾上腺皮质激素反应性脑病临床分析

目的探讨伴自身免疫性甲状腺炎的肾上腺皮质激素反应性脑病的发病形式、临床表现、实验室检查以及影像学特点,以期早期明确诊断和及时治疗。方法回顾分析17例临床诊断明确的伴自身免疫性甲状腺炎的肾上腺皮质激素反应性脑病患者的临床资料,总结其发病特点、诊断及治疗原则。结果 17例患者分别以癫发作(4例)、精神情绪异常(4例)、记忆力减退(4例)、行走不稳(2例)、头痛(2例)、构音障碍(1例)发病;其中急性发病3例、亚急性发病5例、慢性发病9例。所有患者血清抗甲状腺过氧化物酶抗体水平均升高,15例抗甲状腺球蛋白抗体水平升高;脑脊液蛋白定量轻度升高;脑电图以慢波(5例)或样放电(2例)为主,MRI表现为颅内多发病灶(11例);临床免疫学指标及肿瘤标志物均于正常值范围。甲泼尼龙(11例)或地塞米松(3例)治疗有效且预后良好,仅2例复发。结论伴自身免疫性甲状腺炎的肾上腺皮质激素反应性脑病发病形式多样,以癫发作、认知功能障碍、情绪改变为主要表现,血清抗甲状腺抗体水平升高,MRI可见灰质和白质多发病变。

血清甲状腺过氧化物酶抗体对Graves病合并桥本甲状腺炎的诊断意义

目的探讨血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)对Graves病(GD)、Graves病合并桥本甲状腺炎(GH)诊断的临床意义。方法选取2008年1月—2014年12月天津医科大学总医院外科临床确诊为GD、并经手术治疗的患者58例,术后依据甲状腺病理结果分为GD组39例和GH组19例。比较2组血清TPOAb水平及甲状腺内淋巴细胞浸润程度。结果 GD组术前血清TPOAb水平明显低于GH组[60.0(15.0,317.0)IU/m L vs.800.0(231.6,1 000.0)IU/m L,P<0.01];甲状腺淋巴细胞浸润程度明显低于GH组(Z=4.334,P<0.01)。结论 GH患者相比于单纯GD患者血清TPOAb水平更高、甲状腺内淋巴细胞浸润程度更重。

一个新型检测人甲状腺过氧化物酶抗体ELISA技术的临床应用

目的:以重组人甲状腺过氧化物酶(hTPO)为抗原检测人甲状腺过氧化物酶抗体(hTPOAb)的ELISA用于甲状腺疾病临床检测。方法:用该法测定552例正常人,各类甲状腺疾病患者592人次,包括Graves病(GD)364人次(初诊64例及复诊300人次),桥本氏病(HT)142例,单纯甲状腺肿34例,亚急性甲状腺炎23例,结节性甲状腺肿19例,腺瘤10例。结果:确立本法阳性切限为A405值P95为0.74,测定各类甲状腺疾病患者hTPOAbA405值结果以中位数(M)表示,HT为1.19,阳性率87.32%;Graves’病治疗前是0.51,阳性率26.56%,治疗后为0.62,阳性率30.67%;亚急性甲状腺炎为0.48,阳性率为17.39%;单纯甲状腺肿为0.58,阳性率为0;结节性甲状腺肿为0.69,阳性率21.05%;腺瘤为0.68,阳性率20%。HT患者血清hTPOAb阳性率明显高于其他各组(P<0.01)。结论:以重组hTPO为抗原建立的ELISA法特异、稳定、简便,可以常规应用于临床,并可作为HT的特异性诊断手段。

荧光染色技术检测细胞杀伤能力

目的:用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酶(CFSE)及碘化丙锭(propidium iodide,PI)两种荧光染料标记方法检测小鼠脾细胞杀伤能力,并探讨其应用价值。方法:采用CFSE标记靶细胞,PI标记被杀伤细胞,并通过直接杀伤实验和双向杀伤实验验证方法可行性。分离各组C57BL/6小鼠脾细胞作为攻击细胞,Balb/c小鼠脾细胞经5μmol/LCFSE染色后作为靶细胞。将攻击细胞与靶细胞按20∶1的比例混合,培养6h后用PI染色10min,经流式细胞术分析。比较Balb/c小鼠脾细胞致敏C57BL/6小鼠组(免疫组)和地塞米松处理组的脾细胞杀伤能力。结果:CFSE及PI两种荧光染色细胞可以在流式细胞仪上明显区分。CFSE和PI双阳性细胞是被杀伤的靶细胞。免疫组与地塞米松处理组的杀伤能力差异存在显著性(P<0.05)。结论:CFSE与PI两种荧光染料染色的杀伤实验方法操作简单、方便,有良好的应用价值。

甲状腺过氧化物酶抗体与2型糖尿病下肢血管病变的相关性研究

目的探讨甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPO-Ab)对2型糖尿病(diabetes mellitus type 2,T2DM)下肢血管病变的影响。方法回顾性收集沧州市中心医院收治的T2DM患者500例的临床资料,根据患者TPO-Ab水平分为阳性组(n=73,TPO-Ab≥34 U/ml)和阴性组(n=427,TPO-Ab<34 U/mL),记录两组患者下肢血管病变的发生情况,并根据T2DM患者是否发生下肢血管病变分为发生组(n=186)和未发生组(n=314),分析TPO-Ab与T2DM下肢血管病变的相关性。结果TPO-Ab阳性组下肢血管病变发生率为56.16%(41/73),阴性组发生率为33.96%(145/427),阳性组下肢血管病变发生率高于阴性组(χ2=13.160,P<0.01)。经单因素分析后进一步行Logistic回归分析显示,冠心病(OR=10.345)、脑梗死病史(OR=26.942)、T2DM病程(OR=1.921)、TPO-Ab(OR=2.080)、三酰甘油(OR=1.531)、低密度脂蛋白胆固醇(OR=1.559)、糖化血红蛋白(OR=1.703)、餐后2 h血糖(OR=1.119)是T2DM下肢血管病变的不良影响因素(P<0.01,P<0.05)。结论TPO-Ab≥34 U/mL的T2DM患者下肢血管病变发病率高于TPO-Ab<34 U/mL的T2DM患者,在临床工作中应加强T2DM患者群体TPO-Ab的筛查,并且重视对上述不良影响指标的评估及控制,以利早期预防或延缓T2DM患者下肢血管病变的进程。

TgAb、TPO-Ab与首发抑郁症患者动脉硬化的相关性分析

目的探讨血清甲状腺球蛋白抗体TgAb、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)与首发抑郁症患者动脉硬化的相关性。方法选取2018年1月—2018年11月湖州市第三人民医院收治的90例首发抑郁症患者,将患者分为TgAb阳性组、TPO-Ab阳性组和TgAb、TPO-Ab均为阳性组,每组30例。同时随机抽取甲状腺抗体未见异常的首发抑郁症患者30例作为对照组。比较各组血清甲状腺激素水平、踝臂指数(ABI)、肱-踝动脉脉搏波传导速度(BaPWV)、下肢动脉内中膜(IMT)增厚及斑块发生率。结果各组BaPWV比较,经方差分析,差异有统计学意义(P<0.05)。各组下肢动脉ITM增厚、斑块形成比例比较,经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05),TgAb阳性组、TPO-Ab阳性组和TgAb、TPO-Ab均为阳性组下肢动脉ITM增厚、斑块形成例数高于对照组。年龄[O^R=0.943(95%CI=0.892,0.997)]和TgAb[O^R=1.015(95%CI=1.009,1.022)]是动脉病变的影响因素。结论首发抑郁症患者中血清TgAb、TPO-Ab阳性者的动脉硬化发生率高,其中TgAb为下肢动脉硬化的独立危险因素。自动化动脉硬化检测结合血管超声检测有助于首发抑郁症合并甲状腺自身抗体升高患者动脉硬化风险的筛查。

桥本脑病22例临床分析

目的探讨桥本脑病临床特点,提高诊断与治疗水平。方法与结果对22例桥本脑病患者的临床表现、实验室和影像学特点、治疗及预后进行回顾分析,临床主要表现为急性或亚急性发病的认知功能障碍(9例)、精神症状(6例)、癫发作(5例)、共济失调(5例)、卒中样发作(6例)、锥体外系症状(3例)和意识障碍(3例),且血清抗甲状腺过氧化物酶抗体(19例)和抗甲状腺球蛋白抗体(20例)水平明显升高。其中21例经糖皮质激素冲击治疗,17例病情不同程度改善。结论桥本脑病是一种伴抗甲状腺抗体水平升高的脑病,大多数患者对糖皮质激素冲击治疗反应良好,早期诊断、及时治疗对改善患者预后尤为重要。对于不明原因的脑病患者,应考虑桥本脑病的可能,推荐血清抗甲状腺抗体作为常规实验室检查项目。

氟化物对FRTL细胞甲状腺激素代谢相关基因表达的影响

为探讨氟对FRTL细胞甲状腺球蛋白(TG),甲状腺过氧化物酶(TPO)和钠碘转运体(NIS)基因表达的影响,传代培养FRTL细胞,在对数生长期用氟化钠处理,使培养液中的氟浓度分别为20、10、5、2.5、1.25 mg/L,同时设空白对照细胞。培养72 h后收集细胞;采用半定量RT-PCR分析FRTL细胞TG、TPO、NIS mRNA和-βactin表达水平。试验结果表明,与对照细胞相比,较低浓度氟化钠处理的FRTL细胞TG基因表达量代偿性升高,随氟质量浓度增加(5.0 mg/L以上),TG表达量显著降低(P<0.05);各个浓度氟化钠处理的FRTL细胞TPO、NIS基因表达量均下降或显著下降(P<0.05)。由此可知,氟化物降低了甲状腺细胞TG、TPO、NIS基因表达水平,造成甲状腺摄取和利用碘、甲状腺激素合成、贮存、分泌功能障碍,进而导致甲状腺结构和功能异常。

自身免疫性甲状腺疾病钠/碘同向转运体的相关性研究

目的研究不同自身免疫性甲状腺疾病(AITD)钠/碘同向转运体抗体(NISAb)与甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab),甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)含量之间的相关性,并观察甲亢患者药物治疗前后NISAb含量的变化。方法选择甲亢(GD)患者,桥本甲状腺功能低下者(HT),健康正常人组(NC)各40例,检测NISAb、Tg Ab、TPOAb含量,比较NISAb含量与Tg Ab、TPOAb含量之间的相关性,并分析20例甲亢患者药物治疗前后NISAb含量的差异。结果 (1)甲亢患者NISAb与Tg Ab、TPOAb含量,相关系数R分别为0.90、0.85,P均<0.05,呈直线相关性,GD患者NISAb与Tg Ab,TPOAb呈正相关,HT患者NISAb与Tg Ab、TPOAb含量,相关系数r分别为-0.64、-0.52,P均<0.05,呈线性负相关性。正常人群NISAb,Tg Ab,TPOAb含量之间,相关性分析,P值分别为0.63、0.22,P均>0.05,无线性相关性。(2)甲亢患者NISAb含量与正常人群对比分析,t检验,P<0.05,NISAb含量高于正常人群。HT患者NISAb含量与正常人群对比分析,t检验,P<0.05,NISAb含量低于正常人群。(3)甲亢患者治疗前后NISAb含量对比分析,t检验,P<0.05差异有统计学意义。结论 (1)GD和HT患者血浆NISAb含量与Tg Ab,TPOAb含量之间具有相关性,GD患者血浆NISAb含量与Tg Ab,TPOAb含量之间呈正相关,HT患者血浆NISAb含量与Tg Ab,TPOAb含量之间呈负相关。(2)GD患者血浆NISAb含量高于健康人群,HT患者NISAb含量低于健康人群。(3)GD患者治疗后NISAb含量明显降低,差异明显。

妊娠期抗甲状腺过氧化物酶抗体阳性率分析

目的观察妊娠期抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的阳性率,为评估孕妇甲状腺功能减退症(甲减)和甲减对妊娠及其结局的影响提供理论依据。方法应用化学发光法(CIA)测定2008年3月至12月间,在山西医科大学第一医院妇产科筛查的149名妊娠女性血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平、TPOAb。结果TPOAb阳性率甲减组比亚临床甲减组高,既往有甲状腺病史组比无甲状腺病史组高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论妊娠期TPOAb阳性率与甲状腺功能变化有密切关系,TPOAb检测在妊娠期有着重要意义。

甲状腺自身抗体与复发性流产相关性的研究

目的:探讨甲状腺自身抗体(ATA)与复发性流产的相关性。方法:收集2013年8月—2014年4月于我院产科进行孕前检查,并符合入组条件的非妊娠期妇女,其中有复发性流产病史妇女92例,夫妻双方染色体检查未见异常,凝血功能相关检查无异常,为研究组;无复发性流产病史妇女226例,为对照组。检测2组对象甲状腺球蛋白抗体(Tg Ab)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)的阳性率,Tg Ab(+)和(或)TPOAb(+)为ATA阳性。结果:1研究组中,年龄≥35岁及<35岁者的ATA阳性率分别为39.29%(11/28)和26.56%(17/64),差异无统计学意义(P>0.05);在对照组中则分别为25.00%(10/40)和18.28%(34/186),差异也无统计学意义(P>0.05),说明ATA在不同年龄阶段的状况相近。2研究组ATA阳性率为30.43%(28/92),高于对照组的19.47%(44/226),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组TPOAb阳性率为30.43%(28/92),高于对照组的11.95%(27/226),差异有统计学意义(P<0.05)。研究组Tg Ab阳性率为7.61%(7/92),与对照组的7.52%(17/226)比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ATA与复发性流产有关,尤其与TPOAb关系密切。

人甲状腺过氧化物酶抗原决定簇基因在E.coli细胞中的表达

目的:探索在E.coli BL21中表达hTPO抗原决定簇片段(AA568～AA874)。方法:将hTPO抗原决定簇基因(1702～2622,编号相对于起始密码子)连接到表达型载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒。然后转化E.coli BL21,IPTG诱导表达。表达产物采用亲和层析方法纯化,SDS-PAGE法测定其分子质量,ELISA法鉴定免疫学活性,考马斯亮蓝染色法定量。结果:成功地表达了hTPO抗原决定簇基因。纯化的GST-hTPO融合蛋白分子质量为61.4 ku,hTPO片段分子质量为37.6 ku。以此作为抗原按ELISA法分别与TPOAb阳性血清或阴性血清反应,结果表明GST-hTPO及hTPO片段均与TPOAb特异性结合。纯化的GST-hTPO产量为10 mg/L培养基;hTPO片段产量为1.2 mg/L培养基。结论:利用基因工程技术可获得高纯度的GST-hTPO融合蛋白及hTPO片段,产物具有良好的免疫学活性。

甲状腺过氧化物酶在细针抽吸甲状腺肿瘤细胞中的表达及意义

目的观察甲状腺过氧化物酶(TPO)在细针抽吸甲状腺肿瘤细胞中的表达,评价TPO免疫化学染色对良、恶性甲状腺肿瘤的鉴别诊断价值。方法应用免疫化学染色法观察TPO在71例手术切除的甲状腺肿瘤组织细针抽吸物(FNA)涂片及组织冰冻切片中的表达,阳性判定按照80%以上甲状腺细胞染色为阳性。结果TPO在恶性组织的FNA细胞涂片与组织切片标本中的表达均低于良性甲状腺肿瘤,差异有统计学意义(P<0.01);而FNA细胞涂片与组织切片TPO表达阳性率无显著差异。图像分析结果显示恶性甲状腺肿瘤细胞的TPO染色强度明显低于良性甲状腺组织细胞,两者平均密度值、相对光密度值和着色的颜色强度均有显著差异(P均<0.05);而FNA细胞涂片和组织切片间无显著差异。甲状腺肿物囊液涂片中良、恶性细胞的TPO表达阳性比分别为20/22、0/4,两者有显著差异(P<0.05)。以H-E染色为参考,FNA细胞涂片阳性及阴性预告值分别为95.74%、91.67%,组织切片染色为100%、66.47%,囊液涂片染色为97.44%、88.46%。结论TPO在良性甲状腺细胞中的表达明显高于恶性甲状腺肿瘤细胞;TPO免疫化学染色可用于甲状腺针吸细胞,作为诊断甲状腺良、恶性肿瘤的辅助手段。

TSH、TPOAb、TGAb在Graves病患者血清中的表达水平及其意义

【目的】探讨促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)在弥漫性甲状腺肿伴甲状腺功能亢进(Graves病)患者血清中的表达水平及其意义。【方法】选取2017年1月至2018年6月在本院诊治的Graves病患者130例(观察组),另外选取同期在本院健康体检志愿者100例作为对照组,检测所有受试者血清TSH、TPOAb和TGAb水平,分析其临床意义。【结果】观察组TSH水平明显低于对照组,而TPOAb和TGAb水平明显高于对照组,其差异均有统计学意义(P<0.05);观察组伴和不伴眼突患者血清TSH、TPOAb、TGAb水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后6个月发生甲状腺功能减退(简称为甲减)患者33例;早发甲减患者治疗前TPOAb和TGAb水平明显高于未发生甲减患者(P<0.05)。【结论】Graves病患者血清TSH、TPOAb和TGAb水平明显异常,其中治疗前TPOAb和TGAb水平可能与患者治疗后甲减发生有关,TSH、TPOAb和TGAb水平与患者是否存在眼突无明显关系。

hTPO膜外区基因的克隆及其杆状病毒表达载体的构建

目的:探索克隆人甲状腺过氧化物酶(hTPO)膜外区基因并构建其杆状病毒表达载体。方法:PCR扩增hTPO膜外区基因,并将其先后重组入pGEM3zf(+)质粒和pFastBac1质粒,以hTPO-pFastBAC1质粒转染E.coliDH10Bac大肠杆菌,获得重组hTPO杆状病毒表达载体(hTPO-Bacmid),每一步均以PCR及酶切、基因测序等方法鉴定其正确性。结果:与预期一致,PCR扩增hTPO膜外区基因的产物为一约2.5kb的条带;hTPO-pGEM3zf(+)经EcoRⅠ+HindⅢ、EcoRⅠ+SalⅠ双酶切后均获得2.5和3.2kb条带;hTPO-pFastBAC1以EcoRⅠ+HindⅢ双酶切得到2.5和4.8kb的带,均符合预期。分别以重组hTPO-pGEM3zf(+)质粒、hTPO-pFastBAC1质粒为模板进行PCR扩增鉴定,均得到约2.5kb的目的条带;对hTPO-Bacmid进行PCR鉴定,得到约4.8kb的片段。对hTPO-pFastBAC1上下游接口测序正确无误。结论:本研究成功克隆了hTPO膜外区基因,并完成了其杆状病毒表达载体hTPO-Bacmid的构建。