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Ischemic postconditioning protects against ischemic brain injury by up-regulation of acid-sensing ion channel 2a 被引量:5
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作者 Wang-sheng Duanmu Liu Cao +3 位作者 Jing-yu Chen Hong-fei Ge Rong Hu Hua Feng 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2016年第4期641-645,共5页
Ischemic postconditioning renders brain tissue tolerant to brain ischemia,thereby alleviating ischemic brain injury.However,the exact mechanism of action is still unclear.In this study,a rat model of global brain isch... Ischemic postconditioning renders brain tissue tolerant to brain ischemia,thereby alleviating ischemic brain injury.However,the exact mechanism of action is still unclear.In this study,a rat model of global brain ischemia was subjected to ischemic postconditioning treatment using the vessel occlusion method.After 2 hours of ischemia,the bilateral common carotid arteries were blocked immediately for 10 seconds and then perfused for 10 seconds.This procedure was repeated six times.Ischemic postconditioning was found to mitigate hippocampal CA1 neuronal damage in rats with brain ischemia,and up-regulate acid-sensing ion channel 2a expression at the m RNA and protein level.These findings suggest that ischemic postconditioning up-regulates acid-sensing ion channel 2a expression in the rat hippocampus after global brain ischemia,which promotes neuronal tolerance to ischemic brain injury. 展开更多
关键词 neural regeneration brain injury ischemic brain injury acid-sensing ion channels neuroprotection ischemic postconditioning neuroprotection protein expression neuronal density ischemic tolerance molecular mechanism gene expression nerve regeneration
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山奈酚对缺氧/复氧损伤诱导心肌细胞凋亡的影响及机制研究 被引量:1
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作者 武金盼 陈继军 +2 位作者 袁青 赵新春 何佩娟 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第1期3-7,18,共6页
目的:探究山奈酚对缺氧/复氧损伤诱导心肌细胞凋亡的影响和机制。方法:利用随机数字法将H9C2大鼠心肌细胞随机分为三组,对照组细胞在常规孵箱培养,缺氧/复氧组细胞利用缺氧孵箱和常规孵箱交替培养,山奈酚组细胞在缺氧/复氧培养的基础上... 目的:探究山奈酚对缺氧/复氧损伤诱导心肌细胞凋亡的影响和机制。方法:利用随机数字法将H9C2大鼠心肌细胞随机分为三组,对照组细胞在常规孵箱培养,缺氧/复氧组细胞利用缺氧孵箱和常规孵箱交替培养,山奈酚组细胞在缺氧/复氧培养的基础上应用30μmol/L山奈酚。分别利用流式细胞仪和多核苷酸链断裂技术检测各组细胞凋亡水平,利用蛋白印迹技术检测凋亡相关蛋白和钙离子通道蛋白含量,利用免疫荧光技术检测细胞中钙离子浓度。结果:和对照组比较,缺氧/复氧组细胞凋亡增加,钙离子通道蛋白Cav1.2表达和细胞中钙离子含量增加(均P<0.05);和缺氧/复氧组比较,山奈酚组细胞凋亡减少,钙离子通道蛋白Cav1.2表达和胞内钙离子浓度减少(均P<0.05)。结论:山奈酚可能通过减少钙离子通道蛋白Cav1.2表达和胞内钙离子浓度抑制缺氧/复氧损伤诱导的大鼠心肌细胞H9C2凋亡。 展开更多
关键词 山奈酚 大鼠心肌细胞H9C2 缺氧/复氧损伤 细胞凋亡 钙离子通道蛋白Cav1.2 细胞内钙离子浓度
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机械应力调控血管平滑肌细胞的凋亡
3
作者 徐飞 闫金强 柴守栋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第5期1064-1072,共9页
背景:随着生物力学的发展,其在心血管疾病中的研究也日益广泛,通过研究血管的力学特性可以有效地揭示动脉粥样硬化、再狭窄等心血管疾病的发病机制,开发心血管疾病治疗的新思路和新方法。目的:综述机械应力刺激对血管平滑肌细胞凋亡的... 背景:随着生物力学的发展,其在心血管疾病中的研究也日益广泛,通过研究血管的力学特性可以有效地揭示动脉粥样硬化、再狭窄等心血管疾病的发病机制,开发心血管疾病治疗的新思路和新方法。目的:综述机械应力刺激对血管平滑肌细胞凋亡的研究现状,寻找临床治疗潜在靶分子和信号通路,以期改善临床动脉粥样硬化及再狭窄等心血管疾病的临床治疗效果。方法:检索1992年1月至2023年5月在中国知网、PubMed及ScienceDirect数据库收录的文献。中文检索词为“血管平滑肌细胞,机械应力,剪切力,牵张力,凋亡”;英文检索词为“vascular smooth muscle cell,mechanical stress,shear stress,stretch stress,apoptosis”,最终纳入63篇文献进行综述分析。结果与结论:①血管平滑肌细胞的生理性和病理性凋亡都是为了适应血管力学变化而发生的适应性重构。不同部位的平滑肌细胞承受不同的力学刺激,其发病机制也不同。②低剪切力、生理剪切力和高剪切力可通过直接与平滑肌细胞表面分子、受体及蛋白等作用调控凋亡信号分子和抑制增殖实现对血管平滑肌细胞凋亡的调控,该部分未对促进增殖的研究进行综述。③低牵张力、生理牵张力和高牵张力可导致平滑肌细胞凋亡,但仍存在争议。平滑肌表面存在多种力学感受分子(如整合素及受体络氨酸激酶等)可以将力学信号转导为细胞内的化学信号(如Hippo通路),启动平滑肌细胞的凋亡信号,调控平滑肌细胞的凋亡。④总之,不同力学刺激通过多种信号分子,启动多个信号通路共同作用,调控平滑肌细胞的凋亡,例如剪切力主要通过刺激分泌前列腺素、转化生长因子等影响Fas/FasL、Akt通路;而牵张力主要通过Yes相关蛋白等调控YAP通路和Notch通路等。这些分子在不同的作用时间,或不同作用强度下可能发挥相反的双向作用,比如,小鼠血管平滑肌细胞受到10%生理牵张1 h时,其增殖增加;然而,人的血管平滑肌细胞牵张12 h后可以减少其增殖。临床可以通过寻找其关键作用时间点干扰力学转导关键分子,达到预防和治疗临床心血管疾病的目的。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 机械应力 凋亡 牵张力 剪切应力 整合素 受体络氨酸激酶 G蛋白偶联受体和G蛋白 离子通道
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基于PKC-P2X3信号通路观察电针对神经病理性疼痛小鼠神经修复的作用机制
4
作者 王立 程仕萍 +4 位作者 易惺钱 周平生 刘静 陶添明 陈丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1178-1182,1188,共6页
目的:基于蛋白激酶C(PKC)-配体门控型非选择性离子通道3(P2X3)信号通路观察电针对神经病理性疼痛小鼠神经修复的作用机制。方法:48只小鼠随机分成假手术组、模型组、针刺组与电针组,每组12只。除假手术组外,其余小鼠构建坐骨神经慢性限... 目的:基于蛋白激酶C(PKC)-配体门控型非选择性离子通道3(P2X3)信号通路观察电针对神经病理性疼痛小鼠神经修复的作用机制。方法:48只小鼠随机分成假手术组、模型组、针刺组与电针组,每组12只。除假手术组外,其余小鼠构建坐骨神经慢性限制性损伤(CCI)模型。术后第8天针刺组与电针组接受针刺与电针干预,连续7 d。于术前、术后3 d、5 d、7 d、10 d、12 d、14 d对各组进行机械缩足反射阈值(MWT)与热刺激缩足反射潜伏期(TWL)测试。术后15 d处死所有小鼠,HE染色观察坐骨神经组织形态,ELISA检测脊髓组织IL-1β、TNF-α水平,Western blot检测脊髓组织PKC、P2X3水平,免疫荧光检测脊髓神经元PKC、P2X3表达情况。结果:假手术组神经元细胞大小不一,细胞膜完整,细胞质呈细小颗粒状,细胞核大而圆,核仁居中清晰可见;模型组可见萎缩的神经元,有髓神经纤维紊乱,轴突肿胀,神经元间形成间隙;与模型组相比,针刺组、电针组萎缩神经元数量减少(P<0.05),有髓神经纤维排布情况改善,电针组较针刺组改善更为明显。与相同时间点的假手术组相比,术后3 d、5 d、7 d、10 d、12 d、14 d模型组、针刺组、电针组患侧后肢的MWT、TWL值明显下降(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PKC、P2X3表达量、PKC、P2X3阳性细胞数、平均光密度值升高(P<0.05);与模型组相比,术后10 d、12 d、14 d针刺组、电针组MWT、TWL值明显上升(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PKC、P2X3表达量、PKC、P2X3阳性细胞数、平均光密度值降低(P<0.05);与针刺组相比,术后10 d、12 d、14 d电针组MWT、TWL值升高(P<0.05),IL-1β、TNF-α、PKC、P2X3表达量、PKC、P2X3阳性细胞数、平均光密度值降低(P<0.05)。结论:电针可能减轻CCI模型小鼠神经炎症反应,降低PKC、P2X3表达水平,改善坐骨神经细胞形态与有髓神经纤维排布情况,缩小神经元间间隙,提升MWT、TWL值,缓解神经病理性疼痛程度。 展开更多
关键词 蛋白激酶C 配体门控型非选择性离子通道3 电针 神经病理性疼痛 脊髓
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天香丹抑制P2X7/NLRP3表达改善动脉粥样硬化的作用机制研究
5
作者 白银雪 张夏夏 +2 位作者 吴丹丹 任珊 安冬青 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第7期1225-1228,共4页
目的:探讨天香丹对动脉粥样硬化小鼠嘌呤能配体门控离子通道7(P2X7)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的影响。方法:选取8周龄无特定病原体(SPF)级雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠30只,予以高脂饲料喂养12周,造模成功后... 目的:探讨天香丹对动脉粥样硬化小鼠嘌呤能配体门控离子通道7(P2X7)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的影响。方法:选取8周龄无特定病原体(SPF)级雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠30只,予以高脂饲料喂养12周,造模成功后随机分为模型组、阿托伐他汀组、天香丹组,每组10只;另选取C57BL/6J小鼠10只予普通饲料喂养,设为空白对照组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β、腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)的水平;免疫组化检测组织中P2X7、NLRP3的表达。结果:ELISA结果显示:与空白对照组相比,模型组IL-18、IL-1β、ATP水平升高(P<0.05);与模型组相比,阿托伐他汀组、天香丹组IL-18、IL-1β、ATP水平降低(P<0.05)。免疫组化结果显示:与空白对照组相比,模型组P2X7、NLRP3表达均明显升高(P<0.05);与模型组相比,阿托伐他汀组、天香丹组P2X7、NLRP3表达均明显降低(P<0.05)。结论:天香丹改善动脉粥样硬化与调节钾稳态抑制炎症小体的激活有关。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 天香丹 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 嘌呤能配体门控离子通道7 腺嘌呤核苷三磷酸 实验研究
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Piezo1、VEGF在上皮性卵巢癌组织中的表达及与其临床病理特征相关性分析 被引量:4
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作者 杨红耀 郭哲 张欣贺 《实用癌症杂志》 2023年第4期558-561,共4页
目的 探讨机械敏感性离子通道蛋白Piezo1(Piezo1)、血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法 回顾性分析59例上皮性卵巢癌患者临床资料。所有患者均经手术切除肿瘤组织及癌旁组织,采用免疫组织化学法检测Piezo1、VEG... 目的 探讨机械敏感性离子通道蛋白Piezo1(Piezo1)、血管内皮生长因子(VEGF)在上皮性卵巢癌中的表达及意义。方法 回顾性分析59例上皮性卵巢癌患者临床资料。所有患者均经手术切除肿瘤组织及癌旁组织,采用免疫组织化学法检测Piezo1、VEGF表达,比较肿瘤组织与癌旁组织内Piezo1、VEGF阳性表达情况;分析Piezo1、VEGF表达与其临床病理特征的关系,以及不同Piezo1、VEGF表达患者微血管分布。结果 肿瘤组织内Piezo1阳性率、VEGF阳性率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);Piezo1阳性组、VEGF阳性组中Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、有浸润者占比高于Piezo1阴性组、VEGF阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);Piezo1阳性组、VEGF阳性组MVD、MVA高于Piezo1阴性组、VEGF阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Piezo1、VEGF在上皮性卵巢癌中多呈阳性表达,且表达水平越高肿瘤分期越高,更易伴发淋巴结转移及浸润,微血管分布也更为密集。 展开更多
关键词 上皮性卵巢癌 机械敏感性离子通道蛋白 血管内皮生长因子 临床病理特征
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基于嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7的资生肾气丸镇痛机制研究
7
作者 李文昊 任鹏鹏 +5 位作者 韩洁茹 常佳怡 解颖 陈飞 李富震 姜德友 《世界中医药》 CAS 2023年第17期2452-2456,共5页
目的:探索资生肾气丸对醋酸致小鼠扭体模型的镇痛作用。方法:将42只小鼠随机分为7组,分别给予相应药液灌胃,末次灌胃1 h后造模,建立醋酸致小鼠扭体模型。观察小鼠扭体次数,计算其扭体抑制率,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血... 目的:探索资生肾气丸对醋酸致小鼠扭体模型的镇痛作用。方法:将42只小鼠随机分为7组,分别给予相应药液灌胃,末次灌胃1 h后造模,建立醋酸致小鼠扭体模型。观察小鼠扭体次数,计算其扭体抑制率,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、前列腺素E 2(PGE 2)、神经生长因子(NGF)含量,采用实时PCR(RT-PCR)检测嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7(P2X7R)mRNA、Nod样受体蛋白3(NLRP3)mRNA、NIMA相关激酶7(NEK7)mRNA的表达情况。结果:与模型组比较,随着时间的增加,资生肾气丸低剂量、中剂量、高剂量均可抑制小鼠扭体反应,降低扭体次数,增加小鼠扭体抑制率,降低小鼠血清中IL-1β、PGE_(2)、NGF的含量,降低P2X7RmRNA、NLRP3mRNA、NEK7mRNA的表达以抑制疼痛反应,以高剂量效果最优(P<0.05),与吲哚美辛、痛风舒片疗效相近。结论:资生肾气丸高剂量对小鼠血清疼痛因子的降低效果显著,其机制可能与嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7信号通路有关。 展开更多
关键词 资生肾气丸 镇痛机制 嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7 Nod样受体蛋白3 NIMA相关激酶7 前列腺素E 2 白细胞介素-1β 痛风性关节炎
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Ion Transport Mechanism in ClC-Type Channel Protein under Complex Electrostatic Potential 被引量:1
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作者 YU Tao GUO Xu +1 位作者 KE Xuan SANG Jianping 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 CAS CSCD 2016年第6期466-472,共7页
In order to illustrate the ion transport mechanism of chloride channel(Cl C) protein,a type of Cl C protein,Cl C-ec1,from Escherichia coli is embedded into an explicit membranewater system by using software VMD. The... In order to illustrate the ion transport mechanism of chloride channel(Cl C) protein,a type of Cl C protein,Cl C-ec1,from Escherichia coli is embedded into an explicit membranewater system by using software VMD. Then a parallel molecular dynamics(MD) simulation is employed to equilibrate the Cl C-ec1 structure for 27.5 ns at temperature 298.15 K. Based on this equilibrated structure,we compute the channel geometric size variation and electrostatic potential distribution along the channel. Meanwhile,Cl^- transport process is simulated using oriented random walk method under variable external potential. The simulation result shows that Cl^- transport velocity depends on the width of the narrowest channel region. Mutation of negative glutamate E148 can produce positive potential,which is beneficial for Cl^- transport,around external Cl^- binding region in the channel. The simulated current-voltage curves about Cl^- transporting in Cl C-ec1 protein agree with Jayaram's experimental results. 展开更多
关键词 ion transport ClC channel protein molecular dynamics simulation random walk simulation
原文传递
靶向抗流感病毒药物的抗病毒作用研究进展
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作者 郑曦 张晨阳 +1 位作者 王俊琳 苏福祥 《抗感染药学》 2023年第9期893-898,共6页
流行性感冒(简称流感)是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,甲型和乙型流感病毒每年呈季节性流行,其中甲型流感病毒可引起全球大流行。当前,临床常采用抗流感病毒药物治疗流感,其主要通过阻止流感病毒的进入、复制和释放而发挥药效... 流行性感冒(简称流感)是由流感病毒引起的一种急性呼吸道传染病,甲型和乙型流感病毒每年呈季节性流行,其中甲型流感病毒可引起全球大流行。当前,临床常采用抗流感病毒药物治疗流感,其主要通过阻止流感病毒的进入、复制和释放而发挥药效。然而,流感病毒亦会通过变异与伪装而逃脱免疫系统的识别和清除,这反过来加速了科研人员对靶向抗流感病毒药物的研发。本文主要对靶向流感病毒的血凝素、M2离子通道蛋白、RNA依赖性RNA聚合酶、Cap依赖性内切酶、神经氨酸酶、非结构蛋白1等为位点的抗流感病毒药物的抗病毒作用进行了综合和分析,以期为临床防治流感和新药的研发提供理论支撑。 展开更多
关键词 抗病毒药物 流行性感冒 流感病毒 血凝素 M2离子通道蛋白 RNA依赖性RNA聚合酶 Cap依赖性内切酶 神经氨酸酶 非结构蛋白1
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氯离子通道蛋白及β-肌动蛋白基因在人胃癌组织中的表达 被引量:3
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作者 王妍 周建奖 +3 位作者 谢渊 赵艳 陈娴 李毅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期201-204,共4页
目的:研究Hp(Helicobacter pylori,Hp)感染在胃癌发生发展中的作用。方法:运用实时定量PCR法检测氯离子通道蛋白基因(Chloride ion channel protein,CICP)及β-肌动蛋白基因在50例人胃癌组织的表达,并分析其表达与临床病理特征和胃癌组... 目的:研究Hp(Helicobacter pylori,Hp)感染在胃癌发生发展中的作用。方法:运用实时定量PCR法检测氯离子通道蛋白基因(Chloride ion channel protein,CICP)及β-肌动蛋白基因在50例人胃癌组织的表达,并分析其表达与临床病理特征和胃癌组织中Hp感染状态的关系。结果:两个基因在人胃癌组织及淋巴结组织的表达显著高于癌旁组织(P<0.05)。氯离子通道蛋白基因的表达与胃癌患者pTNM分期及患者生存期相关(P<0.05),而β-肌动蛋白基因的表达与pTNM分期及淋巴结转移相关(P<0.05);人胃癌组织中Hp的感染与氯离子通道蛋白及β-肌动蛋白基因的表达上调相关(P<0.05)。结论:Hp的感染可以上调胃癌组织中氯离子通道蛋白及β-肌动蛋白基因的表达,检测这两个基因的表达对预测胃癌患者的预后有一定作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胃癌氯离子通道蛋白 Β-肌动蛋白
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昆虫对气味信息素的感受机制 被引量:8
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作者 刘召 花保祯 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第11期186-192,200,共8页
昆虫触角拥有灵敏的嗅觉系统,用以感知环境中对其生存繁衍至关重要的气味信息。气味信息素经感受器上的小孔进入,与血淋巴内的气味结合蛋白结合后,导致其结构变化,从而完成信息素到受体的传递。由信息素受体组成的离子通道在与信息素结... 昆虫触角拥有灵敏的嗅觉系统,用以感知环境中对其生存繁衍至关重要的气味信息。气味信息素经感受器上的小孔进入,与血淋巴内的气味结合蛋白结合后,导致其结构变化,从而完成信息素到受体的传递。由信息素受体组成的离子通道在与信息素结合后,可以直接或经由环核苷酸途径打开离子通道,引起昆虫神经冲动,从而传递气味信号。文章介绍了昆虫嗅觉感受器结构的构造特点,总结了气味信息素与气味结合蛋白的结合和释放机制,说明了神经电冲动的产生过程,概述了激活离子通道的整个过程,展望了信息素与离子通道作用机制研究在害虫防治和实践中的应用前景。 展开更多
关键词 气味结合蛋白 离子通道 嗅觉受体蛋白 昆虫化学通信
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Piezo1蛋白在人退变软骨细胞应力模型中的表达特点 被引量:10
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作者 杨骐宁 曹杨 +4 位作者 周勇伟 倪硕 傅蔚聪 施铁军 李晓飞 《中国骨伤》 CAS 2018年第6期550-555,共6页
目的:探索新型机械敏感性离子通道Piezo1蛋白在人退变软骨细胞应力模型中的表达特点。方法:构建人退变软骨细胞体外培养-应力刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统FX-4000T处理软骨细胞,根据预试验结果加载0.5 Hz的加载频率和20%的... 目的:探索新型机械敏感性离子通道Piezo1蛋白在人退变软骨细胞应力模型中的表达特点。方法:构建人退变软骨细胞体外培养-应力刺激模型,采用多通道细胞牵张应力加载系统FX-4000T处理软骨细胞,根据预试验结果加载0.5 Hz的加载频率和20%的细胞拉伸率。按细胞的处理时间分成0 h,2 h,12 h,24 h和48 h机械应力组。采用RT-PCR技术,Western-blot检测Piezo1蛋白在周期性牵张应力作用下的表达水平。利用激光共聚焦显微镜检测Piezo1蛋白荧光的强弱。结果:(1)RT-PCR结果显示,2 h牵张应力组Piezo1的基因相对表达量较0 h牵张应力组增加(F=13.917,q=0.037 1,P<0.05),24 h牵张应力组Piezo1基因相对表达量达峰值,而48 h牵张应力组Piezo1基因相对表达量较24 h牵张应力组降低,差异有统计学意义(F=13.917,q=0.049 5,P<0.05)。(2)Western-blot结果显示,2 h牵张应力组Piezo1的蛋白表达量较空白对照组(0 h牵张应力组)略有增加(F=19.341,q=0.037 1,P<0.05),24 h牵张应力组的Piezo1蛋白的表达量最多,而48 h牵张应力组的Piezo1蛋白表达量较24 h牵张应力组降低(F=19.341,q=0.017 7,P<0.05)。(3)Piezo1蛋白表达于髓核细胞的细胞质与细胞核,并且随着加力时间的增加,蛋白的荧光强度也有相应的增加。结论:在人类退变软骨细胞中,新型机械敏感性离子通道Piezo1蛋白有微量表达,加载周期性机械拉伸力后,Piezo1蛋白的表达量增多,并且呈现时间依赖性。 展开更多
关键词 Piezo1蛋白离子通道 机械牵张应力 软骨细胞
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牛病毒性腹泻病毒离子孔道蛋白p7多肽多克隆抗体的制备和鉴定 被引量:2
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作者 付强 郭妍婷 +2 位作者 陈俊贞 王金泉 史慧君 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期137-142,共6页
牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)非结构蛋白p7因其离子通道活性被称为病毒孔蛋白,参与病毒进入、释放和复制的过程。为了深入研究p7蛋白形成离子通道的机理,使用人工合成的多肽制备p7特异性多克隆抗体。根据GenBank... 牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)非结构蛋白p7因其离子通道活性被称为病毒孔蛋白,参与病毒进入、释放和复制的过程。为了深入研究p7蛋白形成离子通道的机理,使用人工合成的多肽制备p7特异性多克隆抗体。根据GenBank中BVDV毒株NADL p7氨基酸序列信息,进行生物信息学分析,合成表面抗原多肽并偶联血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)作为载体蛋白,经反相高效液相色谱(reversed-phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)纯化、纯度分析,用质谱进行定性鉴定;使用弗氏佐剂进行乳化后,对新西兰大白兔进行皮下多点注射免疫,免疫剂量为400μg/只,连续5次免疫,免疫后10 d时采用多肽亲和柱纯化血清,获得多肽多克隆抗体,使用间接ELISA和SDS-PAGE进行抗体效价和纯度检测;BVDV NADL感染牛肾细胞MDBK后使用免疫荧光染色检测多肽多克隆抗体的反应性和特异性。生物信息学分析p7蛋白的主要抗原表位分布在氨基端,偶联KLH后合成多肽MSQYGAGEIVM MGN-Cys-KLH,经RP-HPLC纯化后多肽纯度可达80.19%,分子量为794.2 Da;经过5次免疫并使用多肽亲和柱纯化血清后,间接ELISA检测多肽多克隆抗体效价为1:100000,Western blot检测抗体的纯度为90.2%;使用免疫荧光染色检测发现该抗体在BVDV NADL感染的MDBK细胞的细胞膜上呈现阳性染色,与p7离子孔道定位相符。成功制备兔抗BVDV p7多肽多克隆抗体,具有较好的反应性和特异性,为进一步研究p7形成离子孔道的机理提供了有利工具。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 p7蛋白 离子孔道蛋白 多肽 多克隆抗体
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植物钾(K^+)离子通道的研究 被引量:8
14
作者 程钰宏 赵瑞雪 董宽虎 《山西农业科学》 2008年第2期3-7,共5页
钾在植物生长发育过程中具有许多重要的作用,钾离子通道是植物吸收钾离子的重要途径之一,根据结构和功能的不同钾离子通道可分为Shaker家族通道、KCO通道、其他通道。对上述植物钾离子通道蛋白的生化特性以及结构功能及相关基因研究的... 钾在植物生长发育过程中具有许多重要的作用,钾离子通道是植物吸收钾离子的重要途径之一,根据结构和功能的不同钾离子通道可分为Shaker家族通道、KCO通道、其他通道。对上述植物钾离子通道蛋白的生化特性以及结构功能及相关基因研究的进展进行了详细的综述。 展开更多
关键词 钾离子 通道蛋白 转运体
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房颤射频消融术逆转冠状窦血miRNA异常表达的研究 被引量:2
15
作者 徐桂玉 赵楠楠 杨水祥 《中国心血管病研究》 CAS 2016年第8期720-726,765,共8页
目的 探讨房颤射频消融手术(RFA)终止房颤后患者冠状窦血miRNA的变化,试图发现真正起调控作用的miRNA,以揭示房颤的机制及可能的干预靶点.方法 选择30例行房颤射频消融术患者(阵发性、持续性和永久性房颤各10例),健康体检者10例作... 目的 探讨房颤射频消融手术(RFA)终止房颤后患者冠状窦血miRNA的变化,试图发现真正起调控作用的miRNA,以揭示房颤的机制及可能的干预靶点.方法 选择30例行房颤射频消融术患者(阵发性、持续性和永久性房颤各10例),健康体检者10例作为正常对照组.射频消融术前分别取冠状窦血和外周血,术后3个月取外周血,使用miRNA芯片进行全基因组miRNA表达谱微阵列分析,Real-time PCR对miRNA结果进行验证,并通过mirbase、miranda、targetscan数据库行靶基因分析,对重要miRNA进行双荧光素酶结合实验.结果 房颤射频消融术前患者冠状窦血与自身外周血比较,共有142种miRNA表达差异,其中6种显著上调、8种下调(P<0.05).射频消融术后外周血较术前上调的6种miRNA中分别有3种表达上调和下调,其中miR-1266下调-204.17倍;较术前下调的8种miRNA中,有7种再下调,其中miR-3664-5p下调-44.66倍.荧光素酶结合实验证实SCN5A是miR-1266的直接靶基因,CACNA1C是miR-4279的直接靶基因.结论 房颤射频消融手术可逆转患者冠状窦血miRNA的调控异常,冠状窦血miRNA的表达差异可直接反映房颤时心肌miRNA的表达状况.MiR-1266有可能成为未来房颤干预的靶点. 展开更多
关键词 心房颤动 射频消融 微小RNA 离子通道蛋白 组学研究
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猪繁殖与呼吸综合病毒结构蛋白2b研究进展 被引量:3
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作者 李勇 夏志平 +1 位作者 高英杰 马德慧 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第10期99-101,共3页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状并导致高死亡率的传染病,近年来国内外学者对病原进行了更广泛深入的研究。2b蛋白是新发现的小结构蛋白,分子质量约10 ku,能够诱导... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的母猪繁殖障碍和新生仔猪呼吸道症状并导致高死亡率的传染病,近年来国内外学者对病原进行了更广泛深入的研究。2b蛋白是新发现的小结构蛋白,分子质量约10 ku,能够诱导产生中和抗体,是ORF2的优势蛋白,研究发现其是一种病毒离子通道蛋白,与病毒感染过程有关,它可以促使PRRSV粒子脱壳,释放RNA到宿主细胞内,但对病毒的装配不起作用,论文就该蛋白的结构和功能进行了综述。 展开更多
关键词 PRRSV 2b蛋白 离子通道
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抗流感病毒药物靶标研究进展 被引量:9
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作者 陈伟 王莉莉 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 2013年第1期1-7,共7页
随着流感病毒的加速变异及不同亚型病毒在物种间重组概率的增加,流感作为世界范围的季节性流行性传染性疾病,对人类健康的威胁正日益增加和严峻。由于特异性疫苗研发的相对滞后性,全新机制的抗流感药物始终是有效对抗流感、保障人类健... 随着流感病毒的加速变异及不同亚型病毒在物种间重组概率的增加,流感作为世界范围的季节性流行性传染性疾病,对人类健康的威胁正日益增加和严峻。由于特异性疫苗研发的相对滞后性,全新机制的抗流感药物始终是有效对抗流感、保障人类健康的第一道防线。人类对流感病毒感染及增殖机制的认识,使现代抗流感药物的研究得到空前的推动。本文介绍了抗流感药物主要靶标的研究进展,以期为流感防治药物的研发提供借鉴。 展开更多
关键词 流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 M2离子通道 RNA聚合酶 核蛋白
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基于连续切片的小鼠窦房结转归及起搏相关基因定位表达 被引量:1
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作者 温昱 李彬 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期403-403,封3,共4页
目的:探讨成年小鼠窦房结细胞转归及起搏离子通道和神经丝蛋白在窦房结细胞内的定位表达.方法:常规制备成年小鼠心(切除部分心室)连续石蜡切片,5例进行Masson三色染色,5例进行神经丝蛋白免疫组织化学显色,光镜下观察.并在此基础上,另取... 目的:探讨成年小鼠窦房结细胞转归及起搏离子通道和神经丝蛋白在窦房结细胞内的定位表达.方法:常规制备成年小鼠心(切除部分心室)连续石蜡切片,5例进行Masson三色染色,5例进行神经丝蛋白免疫组织化学显色,光镜下观察.并在此基础上,另取5例小鼠全心连续石蜡切片,采用起搏离子通道和神经丝蛋白抗体进行标记,激光共聚焦显微镜观察.结果:观察到小鼠窦房结完全位于紧邻上腔静脉的心外膜结缔组织中,形态不规则;窦房结动脉可作为定位标志.窦房结末端与心内膜下层的阳性表达神经丝蛋白的浦肯野纤维相连续.起博细胞多位于窦房结中央,移行细胞位于周边,2种细胞均表达起搏离子通道和神经丝蛋白.结论:小鼠窦房结起搏细胞及移行细胞均参与生物电活动,窦房结细胞与右心房心肌层和心内膜下层纤维分离,只有在窦房结末端与浦肯野纤维相互移行. 展开更多
关键词 窦房结 起搏离子通道 神经丝蛋白 小鼠
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地塞米松对嗅感觉神经元环核苷酸门控通道mRNA表达的影响 被引量:5
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作者 张聪 魏永祥 +4 位作者 苗旭涛 刘小超 邢飞虹 赵红 韩德民 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2007年第10期595-598,共4页
目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),观察地塞米松对大鼠嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons,ORNs)环核苷酸门控通道(cyclic nucleotide-gated channels,CNG通道)A... 目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),观察地塞米松对大鼠嗅感觉神经元(olfactory receptor neurons,ORNs)环核苷酸门控通道(cyclic nucleotide-gated channels,CNG通道)A2亚基mRNA表达的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为4组(每组10只):24小时激素组、2周激素组及各自对照组。激素组大鼠腹腔注射地塞米松:24小时激素组按1mg/kg体重给药1次,2周激素组按0.2mg/天给药。各对照组均给予生理盐水腹腔注射。通过实时荧光定量RT-PCR方法,检测各组ORNs的CNG通道CNGA2亚基mRNA的表达量。结果24小时激素组和对照组CNG通道CNGA2亚基mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05);2周激素组CNGA2亚基mRNA表达显著高于对照组(P<0.01)。结论地塞米松长期应用可以使ORNs的CNG通道CNGA2亚基mRNA表达上调,CNG通道的转录增强可能是糖皮质激素治疗嗅觉障碍的机制之一。 展开更多
关键词 糖皮质激素类 嗅觉受体神经元 环核苷酸调节蛋白激酶类 离子通道
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烟草慢阴离子通道蛋白基因NtSLAH1的克隆及表达分析 被引量:4
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作者 张慧 金立锋 +6 位作者 徐国云 翟妞 刘萍萍 陈千思 郑庆霞 陈霞 周会娜 《烟草科技》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第3期1-6,共6页
为了揭示烟草慢阴离子通道蛋白(Slowly activating Anion Channel,SLAC)家族成员在氯离子转运过程中的作用,通过同源克隆的方法从栽培烟草K326中克隆到1个SLAC同源基因(SLAC Homologue),命名为NtSLAH1,其开放阅读框长度为1107 bp,编码36... 为了揭示烟草慢阴离子通道蛋白(Slowly activating Anion Channel,SLAC)家族成员在氯离子转运过程中的作用,通过同源克隆的方法从栽培烟草K326中克隆到1个SLAC同源基因(SLAC Homologue),命名为NtSLAH1,其开放阅读框长度为1107 bp,编码368个氨基酸,表达蛋白定位在细胞质膜上。与已报道的其他植物SLAH相比,NtSLAH1与拟南芥SLAH1和SLAH4序列相似性更高、进化距离更近。实时定量荧光PCR(qRT-PCR)结果显示,NtSLAH1在根中的表达量最高,高浓度NaCl处理下其表达量下降,表明NtSLAH1可能在烟草盐胁迫响应及氯离子吸收过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 烟草 慢阴离子通道蛋白 NtSLAH1 氯离子 盐胁迫
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