用反相离子对色谱分离和检测水溶性维生素——十二烷基磺酸钠作离子对试剂

本文使用十二烷基磺酸钠(SDS)作离子对试剂,研究了用反相离子对色谱法对混合水溶性维生素的检测和分离,确定了最佳实验条件,包括SDS浓度,pH值,甲醇与水的配比,三乙胺浓度及柱温等。用本方法对九种混合水溶性维生素〔B_1,B_2,B_5(烟酰胺和烟酸),B_6(吡哆醛和吡哆醇),B_(11),B_(12)和C〕的标样和西瓜汁的分离表明,在所选定的实验条件下,可于10min内一次分离。

反相离子对色谱法测定脱氧精胍菌素药物中的主成分

建立了反相离子对色谱法分离测定脱氧精胍菌素药物中主成分的方法。分别考察了色谱柱类型、离子对试剂种类及浓度、缓冲盐浓度和流动相pH值等参数对实验结果的影响。确定了分离脱氧精胍菌素的最佳条件:C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以5 mmol/L磷酸氢二钾水溶液(含5 mmol/L戊烷磺酸钠,pH 3.6±0.3)-乙腈(90∶10,v/v)为流动相,流速为1.0 mL/min;检测波长为210 nm;柱温为30℃;进样量为20μL。该方法实现了对脱氧精胍菌素的良好分离,且线性关系良好,检出限可达0.5 mg/L。

离子对试剂及其在多肽及蛋白质分离分析中的应用

离子对试剂是实现反相离子对色谱(Reversed-phase Ion-pair Chromatogra-phy,RPIC)快速灵敏和高分辨的关键因素。离子对试剂的正确选择和适当的添加,对多肽及蛋白质的分离分析有着显著影响。本文介绍了RPIC的基本原理及其在蛋白多肽分析中的应用前景,并详细阐述了常用离子对试剂的种类、特点及应用。

两性化合物与离子对试剂的混合物作流动相的流动相离子色谱法测定气溶胶中水溶性阴离子

用流动相离子色谱法 (MPIC) ,以两性化合物与离子对试剂的混合溶液为流动相 ,在C18柱上抑制电导检测分析气溶胶中常规无机阴离子和有机酸。实验采用氢氧化四丁基铵 (TBAOH)为离子对试剂 ,与两性化合物 3 (N 吗啉 ) 1 丙磺酸 (MOPS)混合 ,加入Na2 CO3 无机添加剂作流动相 ,其浓度为 1mmol/LTBAOH/ 5mmol/LMOPS/ 0 .5mmol/LNa2 CO3 。分离柱采用硅质C18柱 ,抑制电导检测。可以较好地分离和检测常见的无机和有机阴离子。该方法具有较好的重现性和线性关系 ,F-、Cl-、NO-2 、Br-、C3 H3 O-3 、NO-3 的回收率分别为10 2 .0 %、10 4 .6 %、10 2 .4 %、97.8%、97.75 %和 10 2 .5 % ;检出限分别为 0 .0 17、0 .0 14、0 .0 0 4 8、0 0 36、0 .16和 0 .0 17mg/L。

离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠的含量

以四丁基溴化铵为离子对试剂，采用离子对反相高校液相色谱法，配以示差折光检测器（RI）检测，建立了用于阿仑膦酸钠含量测定的分析方法。以Agilent CLC-ODS C18柱为固定相，流动相为V（甲醇）：V（水）=10：90，含5mmol／LNH4H2P04，2mmol／L四丁基溴化铵，1．5mmol／L乙二胺四乙酸二钠，用NaOH调节pH至7．2），流速为1．0mL／min，柱温为室温。方法的线性范围为80～720mg／L；回归方程为A=0．3971ρ-10．624，r=0．9993；方法的平均回收率为100．0％：RSD为0．76％．在该色谱条件下,得到阿仑膦酸钠主峰。

α-萘乙酸的分析方法研究

经过实验检测 ,发现采用以甲醇 水为流动相的HPLC和GC法测定α 萘乙酸的结果偏高。通过改变HPLC法中的流动相并加入离子对试剂 ,可使α 萘乙酸原药谱图中分离出一个明显的杂质峰。经过方法验证及实验对比 ,该法平均回收率为 10 0 2 % ,RSD为 0 30 % 。

整体柱离子对色谱快速分析高氯酸盐

研究了用硅胶整体柱和直接电导检测的离子对色谱快速分析高氯酸盐的方法。实验采用Chromolith Speed ROD RP-18e色谱柱，以氢氧化四丁铵（离子对试剂）＋邻苯二甲酸＋乙腈（有机改进剂）为淋洗液，讨论了离子对试剂浓度、有机改进剂浓度、pH、色谱柱温度和流速对ClO4^-保留时间的影响。确定最佳色谱条件为：0．25mmol／L氢氧化四丁铵＋0．18mmol／L邻苯二甲酸＋7％乙腈（pH5．5）作为淋洗液，柱温30℃，流速6．0mL／min。在此条件下，ClO4^-的保留时间在1min之内。其它常见阴离子（Cl^-、NO3^-、SO4^2-和I^-）不干扰测定。方法的检出限为1．56mg／L；工作曲线的线性范围是2．4～100mg／L；峰面积的相对标准偏差（RSD，n=5）为1．9％。将本方法应用于测定加标果汁和加标地下水中的ClO4^-，加标回收率分别为98．2％和97．6％。

液相色谱中一个新的表征参数Z Ⅳ.反相液相色谱中甲酸浓度与生物大分子的构象变化

反相高效液相色谱中蛋白质分子的Z值可以作为平衡状态下蛋白分子构象变化的表征,它与蛋白分子起始状态构象无关。在异丙醇-甲酸-水体系中蛋白的Z值会因流动相中甲酸浓度的增大而减小。除蛋白分子构象变化因素外,蛋白Z值的变化也与甲酸参与蛋白与置换剂分子间的计量置换过程有关。在蛋白分子未完全失去分子立体结构时,其Z值与分子量的立方根成正比。当甲酸浓度足够大时,例如大于40％(V/V)时,蛋白分子完全失去三维结构。

反相离子对液相色谱法同时测定11种氟喹诺酮类药物的研究

建立了高效液相色谱-荧光法同时测定11种氟喹诺酮类药物的分析方法。主要研究了流动相、流动相配比及流动相的pH对氟喹诺酮分离的影响。确定了液相色谱分析最佳条件。分离条件为：Xbridge Shield RP C18柱,以V（0.10%三氟乙酸）∶V（乙腈）∶V（甲醇）=89∶4∶7为流动相;检测波长为λex=280 nm和λem=450 nm。方法检出限为：诺氟沙星、环丙沙星、培氟沙星和恩诺沙星0.007μg/mL,单诺沙星0.002μg/mL,沙拉沙星和氧氟沙星为0.04μg/mL,二氟沙星和奥比沙星为0.02μg/mL,依诺沙星、麻保沙星为0.4μg/mL,各组分回收率在97%-100.2%,相对标准偏差为0.2%-2.9%。

整体柱离子相互作用色谱快速分析无机阴离子

研究了用硅胶整体柱和直接电导检测的离子相互作用色谱快速分析常见无机阴离子的方法。实验采用氢氧化四丁铵和邻苯二甲酸为淋洗液，讨论了包括淋洗液浓度、流速和PH对分离的影响。当以1．5mmol／L氢氧化四丁铵和1．1mmol／L邻苯二甲酸为淋洗液（PH5．5），流速6mL／min时，可以在1min内分离Cl^-、NO2^-、Br^-、NO3^-、ClO3^-、SO4^2-和I^-7种阴离子。方法的检出限为0．3～1．9mg／L，峰面积、峰高的相对标准偏差（RSD，n=5）分别为0．400～2．29／6和0．1％～1．59／6。将该法用于测定矿泉水和地下水中的阴离子，加标回收率在97．9％～100．39／6之间。

离子对反相高效液相色谱法分离伊班膦酸钠及其有关物质

采用离子对反相高效液相色谱法研究了伊班膦酸钠及其有关物质的色谱分离方法。以Inertsil C8色谱柱为固定相,乙腈-甲醇-12 mmol/L乙酸铵缓冲液(含35 mmol/L正戊胺,pH 7.0)(8∶4∶88)为流动相,流速为1.0 mL/min,分析物以通用型的蒸发光散射检测器(ELSD)测定。在该色谱条件下,伊班膦酸钠及其有关物质分离良好且能够被同时检测。本方法采用的可挥发离子对试剂和缓冲液的流动相系统,同时解决了伊班膦酸钠及其有关物质的分离与检测的问题,简单快速、专属性强,适用于伊班膦酸钠的有关物质检测,为该药的质量控制提供了简便可靠的分析手段。

高效液相色谱电化学检测生物样品中儿茶酚胺的研究

采用AtlantisC18反相色谱柱,成功地分离去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺等儿茶酚胺类物质。研究了儿茶酚胺在AtlantisC18和NovlepakC18柱的保留特性,比较了流动相中离子对试剂辛烷基磺酸钠(B8)浓度对儿茶酚胺容量因子k'的作用,确认采用AtlantisC18柱分离儿茶酚胺,色谱条件优化空间更大,更适于复杂生物样品分析。色谱条件:AtlantisC18柱,电化检测,流动相:NaH2PO450mmol/L、柠檬酸钠50mmol/L缓冲液-乙腈(体积比为75∶25),检测限(S/N)在0.93～2.43pg以下,绝对回收率均≥98.5%,样品日内相对标准差<1.2%。方法精密、准确。

用离子对色谱分离氨基酸衍生物的对映体

通过在由(S)-(N)-(2-萘基)丙氨酸衍生而成的“刷型”手性固定相上采用离子对色谱分离氨基酸的3,5-二硝基苯甲酰衍生物,探讨了非手性离子对试剂的浓度对溶质保留值和选择性的影响。使用甲醇与磷酸盐缓冲溶液组成的溶剂为流动相,考察了甲醇含量对手性分离的影响。另外,通过在不同构型的手性固定相上做对照实验,证明在结构相同、构型相反的手性固定相上,对映体的出峰顺序是相反的。

辅助降糖胶囊中3种双胍类物质的快速筛查

建立并验证了反相离子对—液质联用法对于辅助降糖胶囊中3种双胍类物质盐酸二甲双胍、盐酸苯乙双胍、盐酸丁二胍进行快速筛查及定性定量检测的方法。以甲醇为样品提取溶剂,超声辅助萃取,选用安捷伦C_(18)(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,检测波长235nm,以甲醇—乙酸铵溶液(0.01mol/L)为流动相进行梯度洗脱,流速0.5mL/min,进样量5μL。液相色谱检测后,进入质谱仪进行正离子模式扫描筛查。该分析方法下,加标回收率为87.5%~108.4%,相对标准偏差为0.5%~7.4%,精密度和准确度良好。

SPE-IPLC-FLD法测定助剂中的线性烷基苯磺酸盐

建立固相萃取-离子对液相色谱-荧光检测器法（SPE—IPLC—FLD），测定纺织染整助剂中的线性烷基苯磺酸盐（LAS）。样品经甲醇＋水（50＋50，体积比）超声助溶、固相萃取SAX柱净化后，以2．5mmol／L磷酸二氢四丁基铵溶液作为阳离子对试剂、乙腈梯度洗脱，经离子对反应和反相C18柱色谱分离后，得到4组峰（每组包含4个色谱峰）的独特图谱。荧光检测的激发波长为230nm，发射波长为310nm。以十二烷基苯磺酸钠为标准物，LAS的定低限为25mg／kg（S／N=10），线性范围为0．5～250mg／L，线性关系大于0．9995，方法的回收率为91．3％-97．4％，批间RSD小于6．8％。对不同类型染整助剂的实际样品检测，LAS检测结果与理论含量比较一致，阳性样品重复测试的RSD都小于4．2％，结果令人满意。

反向离子对色谱法同时测定食品纸塑包材中3种荧光增白剂

建立了超声辅助提取-反相离子对高效液相色谱法同时检测纸塑食品包装材料中3种荧光增白剂:荧光增白剂28(CBS)、荧光增白剂85(VBL)、荧光增白剂220(BBU)的方法。利用单因素试验和正交试验确定3种荧光增白剂的提取条件。该方法具有良好的精密度和准确度,符合常规检测要求。根据离子对试剂的作用原理,将四丁基溴化铵水溶液反向离子对作流动相配合使用,使研究对象中的3种荧光增白剂出峰时间大大延迟,并得以有效分离,提高了检测效率。以校园周边超市出售的奶茶、方便面、奶糖、牛奶等纸塑食品包装材为研究对象,对其中的CBS、VBL、BBU等3种荧光增白剂进行测定,结果 10种样品中均检出BBU,未检出CBS,7种样品中检出VBL。

注射用三磷酸胞苷二钠有关物质检验方法的建立

目的:建立注射用三磷酸胞苷二钠(CTP-Na2)有关物质检验方法。方法:采用高效液相色谱法,以C18为填充柱,以含反相离子对试剂的磷酸盐缓冲液为流动相[0.02 mol·L^-1磷酸盐缓冲液-乙腈(90∶10)];流速:1.0 mL·min^-1;检测波长:271 nm;柱温:35℃,采用校正因子计算有关物质。结果:CTP-Na 2在0.093~1.860 mg·mL^-1范围内,溶液的浓度与峰面积的线性关系良好,r=0.9997;平均回收率为99.6%(RSD=1.5%,n=9),CTP-Na2对照品溶液在25 h内的稳定性良好(RSD=0.7%);CTP-Na2及主要降解杂质二磷酸胞苷二钠(CDP-Na2)、单磷酸胞苷二钠(CMP-Na2)的方法定量限分别为4.1、2.1、2.8 ng,检出限分别为0.82、0.16、0.22 ng。结论:现行质量标准中有关物质项存在诸多问题,新建的检测方法操作简便、灵敏度高,可用于质量控制。

高效液相色谱法测定CLT酸含量

建立了反相高效液相色谱法分析CLT酸含量的方法。流动相为乙腈 /水 ,加之以离子对试剂。外标定量法。标准曲线的相关系数为 0 .9994 ,线性范围 0 .0 1～ 1mg/mL。相对标准偏差 2 .7% ,最低检出浓度 0 .0 1mg/mL。

反相离子对色谱法测定制剂中的舒必利

建立了反相离子对色谱用于测定制剂中舒必利的含量。采用Ｃ８柱，流动相为３５％甲醇－６５％的０．１ｍｏｌ／Ｌ甲酸铵缓冲液（含已烷磺酸钠，ｐＨ＝３．５），检测器ＵＶ２９０ｎｍ，片剂中舒必利平均回收率为９８．８８％～１００．９２％，样品测试日内及日间ＲＳＤ分别为１．０４％～２．２９％及１．８５％～３．０２％。

流动相离子色谱法测定杂多酸中氯与磷酸根离子

探讨了用流动相离子色谱法测定杂多酸中C l-与PO43-的分析条件。通过在淋洗液中加入两性离子3-(N-吗啉)-1-丙磺酸(3-(N-morpholino)propanesu lfon ic ac id,MOPS),调节流动相pH值,找到一种pH 6.98的流动相,同时优化离子对试剂的配比,并加入无机添加剂和有机改进剂,能有效的抑制杂多酸的分解,较精确地测定其中所含阴离子。