内质网相关降解蛋白Derlin-1和配对盒2在子宫内膜癌组织中的表达及与患者临床特征的关系

目的 探讨内质网相关降解蛋白Derlin-1和配对盒2(PAX2)在子宫内膜癌组织中的表达及与患者临床特征的关系.方法 选取80例子宫内膜癌患者和80例子宫肌瘤患者,取其子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织,免疫组化法检测Derlin-1、PAX2蛋白的表达情况,并比较不同临床特征子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织中Derlin-1、PAX2蛋白的表达情况.Derlin-1蛋白阳性表达的影响因素采用多因素Logistic回归分析.结果 子宫内膜癌组织中Derlin-1、PAX2蛋白阳性表达率均明显高于正常子宫内膜组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01).国际妇产科联盟(FIGO)分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、淋巴结转移子宫内膜癌患者子宫内膜癌组织中Derlin-1阳性表达率分别高于FIGO分期为Ⅰ~Ⅱ期、分化程度为高分化、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,FIGO分期为Ⅲ~Ⅳ期、分化程度为中低分化、淋巴结转移均为Derlin-1蛋白阳性表达的独立危险因素(P﹤0.05).结论 Derlin-1、PAX2在子宫内膜癌组织中高表达,且Derlin-1的表达与子宫内膜癌患者FIGO分期、分化程度、淋巴结转移情况有关.

内质网相关降解蛋白Derlin-1对宫颈癌HeLa细胞生长的影响

目的采用RNAi技术抑制Derlin-1基因的表达,探讨其表达降低后对宫颈癌He La细胞生长的影响。方法合成针对Derlin-1基因的干扰片段,构建重组质粒,用脂质体法将重组质粒转染人宫颈癌He La细胞,并筛选出稳定表达株,作为siRNA-Derlin-1组,选取空质粒转染后的He La细胞为空质粒组,未做任何处理的He La细胞为空白对照组,采用RT-PCR检测重组质粒对He La细胞Derlin-1 mRNA的影响,Western blot检测其对Derlin-1蛋白表达的影响,MTT法分析其对细胞增殖的影响,ELISA法检测其对细胞凋亡的影响,同时检测凋亡因子caspase-3的表达。结果与空质粒组和空白对照组相比,siRNA-Derlin-1组He La细胞中Derlin-1 mRNA和蛋白的表达显著降低(P<0.05),MTT法显示siRNA-Derlin-1组宫颈癌He La细胞增殖能力显著低于空质粒组和空白对照组(P<0.05),同时siRNA-Derlin-1组凋亡细胞增加,凋亡核心蛋白caspase-3表达增加。结论抑制内质网相关降解蛋白Derlin-1的表达能有效降低宫颈癌He La细胞的增殖,促进凋亡。

Derlin-1在膀胱癌组织中的表达及意义

目的探讨Derlin-1在膀胱癌组织中的表达及意义,评估其与膀胱癌患者临床特征的相关性及对患者预后的影响。方法回顾性分析成都医学院第一附属医院2013年1月至2015年1月泌尿外科收治的100例膀胱癌患者的临床资料,比较膀胱癌组织和癌旁组织Derlin-1表达情况,依据膀胱癌组织Derlin-1检测结果是否为阳性将其分为阳性组和阴性组,比较两组患者临床特征及其与Derlin-1表达的相关性;以患者死亡或截止日期为随访终点,依据患者是否死亡将其分为死亡组和存活组,采用多因素Logistic回归分析探讨影响膀胱癌患者预后的危险因素。结果Derlin-1在膀胱癌组织中的阳性表达率(68.00%)显著高于癌旁组织(49.00%)(χ^2=12.235,P<0.001);浅表性膀胱癌患者的癌组织Derlin-1阳性表达率显著低于浸润性膀胱癌(P<0.05);阳性组患者临床分期T2~T4期、病理分级G2~G3级、浸润性膀胱癌占比均显著高于阴性组(均P<0.05)。Derlin-1阳性表达与临床分期和病理分级均呈正相关(r=0.538,0.612,均P<0.01)。患者3年存活率为69.47%,多因素Logistic回归分析结果显示,临床分期T2~T4期、淋巴结转移、Derlin-1阳性表达、病理分级G2~G3级和浸润性膀胱癌均是影响膀胱癌患者预后的危险因素(均P<0.05)。结论Derlin-1在膀胱癌组织中高表达,且与膀胱癌患者临床分期、病理分级、病理类型密切相关,可作为膀胱癌发展、转移的重要预测指标。

内质网相关降解蛋白Derlin-1对宫颈癌C33A细胞自噬通路的影响

目的探讨内质网相关降解蛋白Derlin 1对宫颈癌C33A细胞自噬通路的影响。方法采用脂质体将HPV16 E6真核表达质粒pcDNA3.1(-)-HPV16 E6、空质粒pcDNA3.1(-)转染人宫颈癌C33A细胞,并筛选出稳定表达株;采用Western blot检测HPV16 E6过表达对HPV16 E6蛋白、内质网应激标志物GRP78蛋白、Derlin-1蛋白,自噬蛋白Beclin 1、P62表达的影响。采用脂质体将Derlin-1的干扰质粒PSUPER-siDerlin-1和空质粒PSUPER转染稳定表达HPV16 E6的C33A细胞;Western blot检测Derlin-1干扰质粒对Derlin-1蛋白、自噬蛋白Beclin 1、P62表达的影响。结果HPV16 E6真核表达质粒pcDNA3.1(-)-HPV16转染成功。与转染空质粒pcDNA3.1(-)和未转染的细胞比较,转染pcDNA3.1(-)-HPV16 E6后HPV16 E6蛋白过表达可以导致内质网应激,使GRP78蛋白、Derlin-1蛋白表达增加,同时使自噬蛋白Beclin 1表达增加,P62蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。Derlin-1干扰质粒PSUPER-siDerlin-1转染成功。与转染空质粒PSUPER和未转染的细胞比较,PSUPER-siDerlin-1转染后Derlin-1蛋白表达降低,自噬蛋白Beclin 1、P62蛋白表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HPV16 E6蛋白过表达可以导致内质网应激,抑制Derlin-1蛋白表达可以阻断自噬溶酶体通路,Derlin-1可能是泛素—蛋白酶体通路和自噬—溶酶体通路之间的对话分子。

内质网膜蛋白Derlin家族与肺疾病

Derlin是内质网膜上的四次跨膜蛋白,近年来已经发现其三个成员,即Derlin-1,Derlin-2和Derlin-3。Derlin在内质网相关性降解信号通路中与其它蛋白相互作用,参与错误折叠蛋白的降解过程,其表达异常在许多疾病的发生、发展中起重要作用,其中在肺疾病发病过程中的作用正日益受到重视。

Derlin-1在宫颈癌组织的表达及其相关性研究

目的观察Derlin-1在宫颈癌组织中的表达水平,探讨Derlin-1表达与宫颈癌的相关性。方法回顾性分析2014年10月—2016年10月期间我院收治的宫颈癌患者30例,另收集同期我院子宫肌瘤行全子宫切除术患者作为观察组,采用免疫组化SABC法检测其Derlin-1水平,分析Derlin水平与年龄、分期、癌组织分化程度及病理类型的关系。结果正常宫颈组织中Derlin-1的表达为率为3.2%(2/61),宫颈癌组织中Derlin-1的表达率为51.7%(31/60),宫颈癌组织中Derlin-1的阳性表达水平显著高于正常宫颈组织(χ2=4.96,P<0.001);且随着FIGO分期的上升,Derlin-1的表达水平也显著上升,IB1+B2期患者Derlin-1阳性表达率为92.3%,显著高于IIA1+A2期患者Derlin-1的阳性表达率(58.8%)(χ2=8.107,P<0.05);结论 Derlin-1的阳性表达与宫颈癌的发病有关,且随着FIGO分期的上升,Derlin-1的表达水平也显著上升,与年龄,分化程度及病理类型均无关。

Derlin-1及其与肿瘤关系的研究进展

恶性肿瘤发生率居高不下,但肿瘤的发病机制目前尚不能明确,因此深入研究肿瘤发病机制具有重要意义。内质网相关的降解蛋白-1(Derlin-1)是内质网膜上的跨膜蛋白,参与错误折叠蛋白的逆向转运,在内质网相关降解信号通路中发挥重要作用。Derlin-1在正常细胞很少表达,但在多种肿瘤细胞中表达异常。Derlin-1参与肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡、浸润及转移等过程,Derlin-1过表达能减少肿瘤细胞的凋亡及自噬作用,促进肿瘤细胞增殖,与肿瘤的发生、发展及预后等密切相关。

GRP78、Derlin-1在肺纤维化大鼠模型中的表达研究

目的临床上对肺纤维化的研究已取得了极大的进展,疗效仍不尽人意。本研究通过观察百草枯诱导的大鼠肺纤维化模型中受体相关葡萄糖调解调节蛋白78和(grp78)与雌激素受体相关葡萄糖降解调节蛋白1(Derlin-1)的表达变化,探讨内质网应激在大鼠肺组织纤维化过程中的影响和作用,以期挖掘新的诊治靶点。方法腹腔注射百草枯溶液构建肺纤维化大鼠模型,于染毒后1、7、14和21天观察大鼠行为、肺大体标本变化;肺组织HE、Masson染色,观察肺泡炎和肺组织纤维化情况;免疫组化观察肺组织中GRP78和Derlin-1的表达;ELISA法检测肺匀浆中Derlin-1的表达水平。结果染毒后大鼠肺脏随时间先后出现明显急性炎症和纤维化表现;GRP78表达水平总体均升高,呈动态变化,于第7天最高(P<0.05);Derlin-1表达水平总体均升高,呈动态变化,于第14天最高(P<0.05)。结论内质网应激可能在抑制肺部炎症和纤维化的发生发展中起到了重要作用。

内质网相关降解蛋白Derlin-1通过抑制ERK信号通路抗人结肠癌细胞增殖

目的:探讨内质网相关降解蛋白Derlin-1对人结肠癌SW480细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:采用sh-Derlin-1-pGPU6/Neo质粒转染构建瞬时敲除Derlin-1基因的SW480细胞株,应用实时定量PCR和免疫印迹验证Derlin-1基因和蛋白的低表达,采用CCK8法检测SW480细胞增殖情况,流式细胞仪检测SW480细胞凋亡情况,Western blot检测SW480细胞中凋亡蛋白Bcl-2、Bax表达量和ERK磷酸化水平。结果:使用pGPU6/Neo载体能够稳定地抑制SW480细胞中Derlin-1的表达,sh-Derlin-1组细胞增殖率相对于对照组显著降低、凋亡率显著升高(P <0. 05),Western blot实验结果发现sh-Derlin-1组细胞中Bcl-2表达量显著降低、Bax表达量显著升高及ERK磷酸化水平显著降低,与对照组相比差异有统计学意义(P <0. 05)。结论:Derlin-1表达的降低能抑制ERK信号通路活化,进而诱导人结肠癌SW480细胞凋亡、抑制增殖。

内质网相关降解蛋白Derlin-1在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜癌组织中内质网相关降解蛋白Derlin-1的表达及临床意义。方法选取2010年1月至2019年1月南京医科大学附属无锡人民医院病理科的160例患者的石蜡块标本作为研究对象。50例正常子宫内膜蜡块纳入正常组,50例不典型增生蜡块纳入增生组,60例子宫内膜癌蜡块纳入子宫内膜癌组。利用免疫组织化学法检测Derlin-1蛋白表达,并分析其与临床病理特征的关系。结果正常组、增生组、子宫内膜癌组Derlin-1阳性表达率呈上升趋势(36.0%、56.0%、80.0%),差异具有统计学意义(χ^(2)=22.014,P=0.000)。子宫内膜癌组不同FIGO分期、组织分级、肌层肿瘤深度Derlin-1阳性表达率比较,差异具有统计学意义(P<0.05),不同年龄、是否绝经和是否淋巴结转移的Derlin-1阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Derlin-1阳性表达与FIGO分期、组织分级、肌层肿瘤深度密切相关,是子宫内膜癌发病的独立危险因素(P<0.05)。结论Derlin-1在子宫内膜癌组织中高表达可能与子宫内膜癌的发生发展有关。

Derlin-1对非酒精性脂肪肝形成的影响

目的:探讨内质网相关降解蛋白1(endoplasmic reticulum correlative protein 1,Derlin-1)在非酒精性脂肪肝组织中的表达情况及其通过对蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase,PERK),即内质网应激中未折叠蛋白反应感受蛋白的影响,抑制非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)的发生机制。方法:通过免疫组织化学染色及Western bolt技术检测NAFLD小鼠肝脏组织中Derlin-1的表达;在HepG2细胞中利用质粒过表达Derlin-1,以Western blot技术检测其对内质网应激信号通路PERK的影响。结果:Derlin1在NAFLD肝组织中表达明显高于正常肝脏组织;过表达Derlin-1能抑制内质网应激信号通路的激活。结论:Derlin1在NAFLD肝组织的高表达提示其可能通过抑制内质网应激中未折叠蛋白反应感受蛋白PERK,减少内质网应激,阻止肝脏细胞脂肪变。

Anthems from Isaiah 《以赛亚书》之歌

“Anthems from Isaiah”is used as the title for the approximately 100 poems that I am writing from Isaiah in the Bible.And here the following ten poems have been written from parts of the chapters 2-17 of Isaiah.

香烟烟雾提取物对Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1表达的影响

目的探讨香烟烟雾提取物(CSE)对Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1蛋白及其mRNA表达的影响。方法体外培养Ⅱ型肺泡上皮细胞(A549),加入10%浓度的CES作用于细胞0、3、6、12、24、48 h,采用免疫蛋白印迹(WB)检测Derlin-1蛋白表达水平的变化,并运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Derlin-1 mRNA含量的变化。结果 10%浓度的CSE作用下,Derlin-1蛋白的表达逐渐提高,并在6 h达最高,随后逐渐下降,Derlin-1 mRNA含量变化与Derlin-1蛋白表达一致。结论香烟烟雾可影响Ⅱ型肺泡上皮细胞中Derlin-1表达的变化,可能与Derlin-1是内质网应激诱导凋亡的抑制剂有关。

64位中国“芯”，威盛发布Isaiah全规格

全球IC设计与个人计算机平台解决方案领导厂商威盛电子，于美国加州举行秋季微处理器论坛，正式公布下一世代64位Isaiah处理器核心的规格内容。

下调内质网相关降解蛋白-1对鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性的作用及机制

目的 探讨下调内质网相关降解蛋白(Derlin-1)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株化疗敏感性的作用及机制。方法 收集10例鼻咽癌患者鼻咽癌组织及癌旁正常组织并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测组织中Derlin-1 mRNA含量;本实验分组:空白对照组(control组)、阴性对照组(NC组)、敲低组(si-Derlin-1组)。RT-qPCR法检测鼻咽癌Derlin-1 mRNA的表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同顺铂浓度时3组细胞的增殖;Annexin V-FITC/PI双染法检测顺铂浓度为5μmol/L时3组细胞的凋亡率;Transwell检测顺铂浓度为5μmol/L时3组细胞的侵袭迁移能力;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法、Western blot法检测Bcl-2、Bax、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9 mRNA及蛋白相对表达量。结果 RT-qPCR结果显示,鼻咽癌癌组织中Derlin-1 mRNA相对表达量较癌旁正常组织显著减少,差异具有统计学意义(P<0.05);si-Derlin-1组Derlin-1 mRNA较control组、NC组明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)MTT法结果显示,与control组、NC组相比,si-Derlin-1组细胞增殖率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);Annexin V-FITC(绿色荧光)/PI(红色荧光)双染法结果可见,当DDP浓度为5μmol/L时,si-Derlin-1组细胞凋亡率为(29.65±2.35)%,较control组(13.24±1.43)%、NC组(15.09±1.32)%明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05);Transwell实验结果显示,当DDP浓度为5μmol/L时,si-Derlin-1组细胞迁移率、侵袭率分别为(20.15±2.20)%、(22.33±3.5)%,较对照组(100±1.3)%、(99±2.43)%以及NC组(96.72±3.22)%、(94.44±1.21)%明显降低,差异具有统计学意义(F迁移率=1080.610,P=0.000)、(F侵袭率=848.590,P=0.000);RT-qPCR结果显示,相比control组、NC组,si-Derlin-1组凋亡抑制因子Bcl-2 mRNA的表达量下降,凋亡诱导因子Bax mRNA表达量上调;si-Derlin-1组迁移相关因子MMP2与MMP9 mRNA相对表达量明显下降,差异均具有统计学意义(P均<0.05);Western blot结果显示,相比control组、NC组,si-Derlin-1组凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达量下降,凋亡诱导蛋白Bax表达量上调;si-Derlin-1组迁移相关蛋白MMP2与MMP9蛋白相对表达量明显下降,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论 Derlin-1在鼻咽癌中表达上调,下调Derlin-1可提高鼻咽癌CNE-2Z细胞化疗敏感性,机制可能与促进细胞凋亡、抑制迁移有关。

面对多元价值冲突的困境——伯林论题的再考察

以塞亚.伯林主张价值多元论的观点同时也坚持自由主义的立场,但这两者之间的关系并不是自明的,政治哲学界对此一直存在着争议。通过考察伯林多元性论题的内在困境,分析当代自由主义思想家对多元价值冲突问题的回应,我们提出在“反基础主义”的视野中来应对价值冲突的可能性与必要性。

扶正口服液通过内质网应激途径改善癌症恶病质肌肉萎缩的机制研究

目的从内质网应激途径探究扶正口服液改善癌症恶病质肌肉萎缩的机制。方法体外共培养小鼠成肌细胞(C2C12)、小鼠结肠癌细胞(CT26),用携带内质网相关降解蛋白1(Derlin-1)干扰序列siRNA的慢病毒转染C2C12细胞,沉默Derlin-1基因后,采用CT26诱导萎缩以及扶正口服液含药血清干预进行实验,将经过不同处理的C2C12分为空载组(A组)、沉默组(B组)、恶病质+空载体+对照血清组(C组)、恶病质+空载体+含药血清组(D组)、恶病质+沉默+含药血清组(E组),采用Western blot、RT-PCR检测干预前后C2C12细胞Derlin-1、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein-homologous protein,CHOP)、X盒结合蛋白1(X-box binding protein-1,XBP1)、滑膜细胞凋亡抑制物1(synovial apoptosis inhibitor-1,SYVN1)蛋白及mRNA的表达水平。结果(1)Derlin-1 mRNA及其蛋白表达:与A组比较,B、C、D组下降(P<0.05),E组表达升高(P<0.05);与B组比较,C组表达下降(P<0.05),D、E组升高(P<0.05);与C组比较,D、E组表达升高(P<0.05);与D组比,E组表达升高(P<0.05)。(2)凋亡检测结果:与A组比较,B、C、D、E组凋亡率明显上升(P<0.05);与B组比较,C、D、E组凋亡率下降(P<0.05);与C组比较,D、E组凋亡率下降(P<0.05);与D组比较,E组凋亡率下降(P<0.05)。(3)CHOP mRNA及其蛋白、p-JNK蛋白表达:与A组比较,B、C、D、E组表达升高(P<0.05);与B组比较,C组表达升高(P<0.05),D、E组表达下降(P<0.05);与C组比较,D、E组表达下降(P<0.05);与D组比较,E组表达下降(P<0.05)。(4)XBP1、SYVN1 mRNA及其蛋白表达:与A组比较,B组表达下降(P<0.05),C、D、E组表达升高(P<0.05);与B组比较,C、D、E组表达升高(P<0.05);与C组比较,D、E组表达升高(P<0.05);与D组比较,E组表达升高(P<0.05)。结论Derlin-1表达可以减轻CT26诱导的C2C12萎缩凋亡,这可能与Derlin-1参与调控内质网应激信号通路有关,扶正口服液可能通过上调内质网应激相关性降解核心蛋白Derlin-1的表达干预癌症恶病质。

价值多元论与相对主义--论以赛亚·伯林对价值多元论的辩护

伯林的价值多元论主张价值是多元的、不可通约的和冲突的。由于价值多元论与相对主义都拒绝绝对价值和绝对标准,因而一些学者质疑价值多元论是相对主义的。伯林站在价值一元论与相对主义的中道立场,通过求助于共同人性与普遍价值作了回应,不过这种论证依然没有逃脱自由主义的普遍主义模式。

试析以赛亚·伯林创作特色产生的根源

以赛亚.伯林是20世纪最杰出的自由主义思想家之一。他认为有一个控制了19世纪欧洲思想的社会运动,它无所不在。它是当今世界现有各种思想运动中最强大的运动之一,这个运动就是民族主义。伯林这种观点产生的原因可以从他早期的创作中找到倾向。

“两种自由概念”探微

以赛亚.伯林在《两种自由概念》中所论述的"积极自由"至少包括以下四种含义:"自我解脱"的禁欲主义自由、"自我实现"的理性主义自由、集体和社会化形式的自我肯定、强调政治参与和"自我立法"的共和主义自由。伯林的"积极自由"和"消极自由"与贡斯当的"古代人的自由"和"现代人的自由"并不是简单的一一对应关系。无论从思想史还是哲学分析来看,"积极自由"与"消极自由"之间都存在一种辩证的关系。