丹参酮Ⅱ_A乳剂对小鼠脑缺血的保护作用

目的观察丹参酮ⅡA对小鼠脑缺血、脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用小鼠断头模型、小鼠脑卒中模型、小鼠脑缺血再灌注模型,观察丹参酮ⅡA注射乳剂对小鼠断头后存活时间、喘气次数,小鼠脑卒中后的神经行为,小鼠脑缺血再灌注后脑内SOD活性、MDA含量的影响。结果丹参酮ⅡA能延长小鼠断头后的存活时间、增加断头后的喘气次数,改善脑卒中小鼠的神经行为,提高脑缺血再灌注损伤后小鼠脑组织中SOD酶活性,降低MDA含量。结论丹参酮ⅡA注射乳剂对小鼠脑缺血及脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

葛根素对局灶性脑缺血再灌注模型大鼠脑组织水肿及神经细胞Na^+-K^+-ATPase、Ca^(2+)-ATPase活性的影响

目的探讨葛根素对脑缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法采用大鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO),观察葛根素对脑缺血再灌注脑组织水肿及神经细胞Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的影响。结果葛根素能明显降低MCAO大鼠脑含水量,提高Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性。结论大鼠MCAO后脑组织水肿明显,ATPase活性降低;葛根素可以减轻此类损伤,对脑组织具有保护作用。

腺苷对缺血再灌注后心肌的保护作用

目的研究腺苷对大鼠心肌细胞凋亡及核因子κB(NF-κB)表达的影响。方法制备对照组(C组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)和缺血再灌注前腺苷治疗组(AD组)的大鼠模型。电镜、光镜下观察心肌结构变化,采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡,免疫组织化学方法检测心肌组织NF-κB表达。结果AD组大鼠心肌细胞凋亡数(2 645.0±326.0)及心肌组织中NF-κB的表达(32.21%±17.91%)明显低于I/R组(5 113.0±503.7和60.30%±10.36%),明显高于对照组(67.7±51.3和11.98%±3.65%)。结论腺苷具有明显降低大鼠缺血再灌注后心肌细胞凋亡的作用,可能与腺苷减轻缺血再灌注心肌组织过度表达NF-κB有关。

丹参多酚酸盐对缺血再灌注大鼠脑组织中CAT、XO及NO的影响

目的 观察丹参多酚酸盐对局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠脑组织内CAT、XO和NO含量的影响,探讨其脑保护作用机制.方法 线栓法制作大鼠中动脉缺血再灌注损伤模型.SD大鼠随机分为正常对照组,缺血再灌注组,丹参多酚酸盐低剂量治疗组（10mg/kg）和丹参多酚酸盐高剂量治疗组（30mg/kg）.各组动物按要求给药,在预定时间进行神经损伤行为学评分、脑梗死体积及脑组织内过氧化氢酶（CAT）、黄嘌呤氧化酶（XO）活性和一氧化氮（NO）含量的测定.结果 与缺廊再灌注组相比,丹参多酚酸盐治疗组大鼠神经损伤行为学评分及脑梗死体积减少.脑组织内CAT活性升高,XO活性降低,NO含最下降,均具有显著性意义,且呈剂量依赖性.结论 丹参多酚酸盐可通过抑制自由基引起的脂质过氧化反应,保护抗氧化酶的活性而介导神经保护作用.

菟丝子水提取物对脑缺血大鼠记忆障碍的改善作用

目的探讨菟丝子水提取物(CCL)对脑缺血大鼠学习记忆障碍的改善作用及其作用机制。方法健康成年雄性SD大鼠随机分成4组：对照组、模型组、治疗Ⅰ组和治疗Ⅱ组。除对照组外,其余各组大鼠用双侧颈总动脉反复夹闭再灌注配合腹腔注射硝普钠降压方法建立脑缺血大鼠动物模型。Y迷宫及跳台实验检测大鼠的学习记忆能力,生化测定脑组织SOD活力及MDA含量。结果Y迷宫实验中,模型组大鼠达标所需的训练次数[(93．4±17．3)次]显著高于对照组[(57．8±15．7)次](P＜0．01),而治疗Ⅰ组、Ⅱ组达标所需的训练次数[(68．6±15．1)次,(64．5±13．8)次]显著低于模型组(P＜0．01)。跳台实验中,模型组大鼠的错误次数及受电击时间[(4．0±1．6)s,(26,05±9．63)s]显著高于对照组[(2．1±1．0)s,(11．97±5．67)s](P＜0．01),而治疗Ⅰ组、Ⅱ组的错误次数及受电击时间[Ⅰ组：(3．1±1．5)s,(21．82±8．34)s；Ⅱ组：(2．6±1．3)s,(14．2l±6．48)s]显著低于模型组(P＜0．05及P＜0．01)。模型组SOD活力[(53．71±9．86)U/mg]显著低于对照组[(76．76±6．24)U/mg](P＜0．01),MDA含量[(3．43±0．19)nmol/mg]显著高于对照组[(1．63±0．09)nmol/mg](P＜0．01)；治疗组SOD活力显著高于模型组(P＜0．05),MDA含量显著低于模型组(P＜0．05及P＜0．01)。结论CCL可显著改善脑缺血所致大鼠记忆障碍,其作用机制可能与菟丝子的抗氧化作用有关。

重组人骨形态发生蛋白-7对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立W istar大鼠心肌缺血再灌注(I-R)模型,随机分为对照组(C组)、I-R(I组)和rhBMP-7处理组(B组),B组于血流阻断前10 m in股静脉给予rhBMP-7 250μg/kg,C组和I组给予等量生理盐水。于血流再灌注后24 h取血检测乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CPK)含量,心肌匀浆检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,TTC法测定心肌梗死面积,电镜下观察心肌组织学变化。结果rhBMP-7处理组大鼠心肌I-R24 h后,其心肌酶含量、氧自由基MDA、心肌梗死面积,均明显低于I组;SOD活性增加(P<0.01)。心肌细胞的坏死程度也明显轻于I组。结论rhBMP-7缩小梗死面积,对心肌I-R损伤具有保护作用。可能与其抑制脂质过氧化,保护抗氧化酶活力有关。

Fas蛋白在糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后海马区的表达及意义

目的探讨Fas蛋白在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马区神经元损伤中的表达及意义。方法健康雄性Wister大鼠60只,随机分为4组:①正常对照组,②假手术组,③脑缺血再灌注组(NIR),④糖尿病脑缺血再灌注组(DIR组);采用STZ诱导糖尿病和线栓法建立大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,HE法观察海马CA1神经元缺失,用免疫组化方法检测Fas在糖尿病大鼠脑缺血再灌注海马神经元损伤中的表达。结果HE染色:正常对照与假手术组未见神经元缺失和细胞凋亡,DIR组与脑缺血再灌注组均见神经元缺失和神经细胞凋亡,而DIR组比脑缺血再灌注组神经元缺失严重(P<0.05)。正常对照与假手术组极少见Fas免疫染色阳性细胞,DIR组与脑缺血再灌注组明显见Fas免疫染色阳性细胞,且DIR组比脑缺血再灌注组多(P<0.05)。结论Fas介导的细胞凋亡可能是糖尿病脑缺血再灌注损伤后海马区神经元损伤的机制之一。

PI3-K/Akt通路在脑缺血治疗中的调控机制研究

目的观察脑缺血-再灌注损伤后PI3-K/Akt通路的活性变化,并探讨阿利吉仑的调控机制。方法采用改良线栓法制备大脑中动脉缺血-再灌注模型。实验采用Western blot和qR-T PCR观察PI3-K、Akt基因和蛋白变化,比较各组脑梗死体积、患侧脑水肿和神经功能。结果缺血-再灌注后PI3-K、Akt表达明显减少。阿利吉仑通过激活PI3-K/Akt通路,明显改善神经功能缺失,减轻脑水肿,减小梗死体积。结论 PI3-K/Akt通路参与了阿利吉仑的脑保护作用,为其临床应用提供了理论基础。

阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察阿米洛利对大鼠肺缺血再灌注损伤(LIRI)的保护作用及其可能机制。方法建立大鼠在体肺缺血再灌注模型。将雄性Wistar大鼠54只随机分为手术对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)、阿米洛利组(A组)。每组分别在缺血45min,再灌注60、120min3个时点处死6只大鼠,留取血浆和右肺组织,测定肺组织湿干质量比值(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性,肺组织中细胞凋亡指数(AI)及血清丙二醛(MDA)含量,并进行肺组织病理学检查。结果再灌注期间IR组肺组织W/D、MPO活性、AI、血清MDA均升高,而预先给予阿米洛利干预后可以减弱缺血再灌注诱导上述指标的升高。肺组织病理学检查显示阿米洛利预先给药减轻肺缺血再灌注损伤。结论阿米洛利对肺缺血再灌注损伤有保护作用,可能与其抑制氧自由基生成、中性粒细胞浸润及细胞凋亡有关。

硫化氢预处理延迟相对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨硫化氢预处理延迟相对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法将30只健康成年SD雄性大鼠随机分为三组:假手术组(S组)、缺血-再灌注组(IR组)和硫化氢组(H组)。S组仅开胸并分离冠状动脉左前降支,但不阻断血流150min;IR组行冠状动脉左前降支阻断30min,再灌注120min;H组予以静脉注射NaHS0.05mg/kg,给药后24h同IR组处理。再灌注结束后检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和心肌梗死面积,电镜观察各组心肌细胞超微结构变化。结果与IR组比较,H组MDA含量降低,SOD活性增高(P<0.05),心肌梗死面积减少(P<0.05),电镜下H组心肌细胞损伤程度减轻。结论硫化氢预处理延迟相对大鼠缺血-再灌注心肌具有保护作用,与抗氧化反应有关。

左旋四氢巴马汀对大鼠海马脑片缺氧损伤电生理的影响

目的在海马脑片水平观察左旋四氢巴马汀(L-tetrahydropalmatine,L-THP)对脑组织缺氧后及恢复给氧早期突触功能的影响。方法大鼠离体海马脑片以人工脑脊液孵育,观察缺氧后海马CA1区诱发群峰电位(population spike,PS)开始减小的时间和消失时间,缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)出现时间、出现率和保持时间,复氧后PS的恢复率和恢复程度等指标并观察L-THP对这些指标的影响。结果L-THP(0.028,0.14,0.28 mmol.L-1)组脑片PS减小时间、消失时间与缺氧组相比后延,并有显著差异(P<0.05),但其作用强度随剂量递减。缺氧组脑片平均在658.8 s出现HIP,L-THP 0.028 mmol.L-1组,0.14 mmol.L-1组和0.28 mmol.L-1组脑片出现时间分别推迟为1 152.4和851.1,723.5 s,与缺氧组相比均有显著差异(P<0.05)。各组的HIP出现率分别为100%,33.3%,67.0%,83.3%。复氧30 min后,氧-葡萄糖剥夺(oxygen-glucose dep-rivation,OGD)组的恢复率为8.33%,恢复程度为19.8%。在L-THP组(0.028,0.14,0.28 mmol.L-1),PS的恢复率分别为92%、75%和33.3%,恢复程度分别为82.5%,70.4%和58.6%,与对照组比有非常显著的差异(P<0.01)。结论L-THP能减缓缺氧时PS幅度的降低速度,减轻和防止脑片突触功能的不可逆损伤,提高脑片的耐缺氧能力,但随着剂量增加而作用减弱。

马齿苋总黄酮对缺血再灌注心肌细胞损伤的保护作用

目的研究马齿苋总黄酮(portulaca total flavone,PTF)对新生大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法取体外培养的新生大鼠心肌细胞于缺氧24 h复氧1 h造成缺血再灌注(I/R)损伤模型,观察细胞损伤情况,并将PTF终浓度为5、10、20 mg/L分别加入培养基中,预处理24 h后,再置于上述缺氧复氧环境中培养,测定以上不同条件下心肌细胞上清液中的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,并测定各组细胞内Ca^(2+)浓度。结果与正常对照组相比较,缺血组和再灌组细胞上清液中LDH、CK、MDA含量明显升高(P<0.01),SOD活力则显著降低(P<0.01),缺血组和再灌组细胞内Ca^(2+)浓度均明显升高(P<0.01)。而用PTF预处理后缺血组和再灌组的LDH、CK、MDA显著低于用药前(P<0.01),SOD高于缺血组和再灌组(P<0.01);PTF组(20mg/L)对正常心肌细胞内Ca^(2+)浓度影响小(P>0.05);与PDGF-BB诱导增殖组比较,PTF(5、10、20 mg/L)药物干预组心肌细胞Ca^(2+)浓度明显降低(P<0.05),且存在明显的剂量效应关系。结论 PTF对缺血再灌心肌细胞有保护作用,其作用机制可能与增强抗氧化能力、减轻钙超载有关。

As_2O_3预处理对离体缺血再灌注心肌的保护作用及机制

目的研究三氧化二砷(As2O3)预处理抗心肌缺血再灌注损伤中热休克蛋白(HSP)27的作用及调控机制。方法将16只缺血再灌注心肌损伤大鼠随机分为观察组和对照组各8只,观察组再灌注前24 h腹腔注射As2O3预处理,对照组灌注生理盐水。观察两组再灌注后心功能指标、心肌超微结构及心肌组织HSP27表达变化。结果观察组左心室舒张末期压力(LVEDP)、左心室压力收缩速率(LV+dP/dtmax)、左心室压力舒张速率(LV-dP/dtmax)较对照组明显增高,超微结构损伤亦减轻,HSP27表达量明显增加(P均<0.01)。结论 As2O3预处理对缺血再灌注心肌损伤有保护作用;其机制可能为上调HSP27表达。

国产尼莫地平注射液治疗急性缺血性脑梗塞的临床评价

目的 评价国产尼莫地平注射液治疗急性缺血性脑梗塞的临床疗效及安全性。方法 使用单盲、平行对照、随机的方法,将120例急性缺血性脑梗塞患者分为2组:尼莫地平组(n=60)在使用甘露醇治疗的基础上,加用尼莫地平注射液3mg/d静脉滴注;对照组(n=60)单用甘露醇治疗。结果 尼莫地平组和对照组总有效率分别为95.0％和71.7％,前者明显优于后者(P<0.01)。尼莫地平组病情程度轻型的疗效优于中、重型;病程1天内的疗效优于超过3天的疗效。其疗效不受性别及年龄的影响。尼莫地平组改善神经功能缺损比对照组更迅速、更显著(P<0.01)。尼莫地平组血小板聚集率比治疗前降低15.7％(P<0.01);患侧大脑中动脉(MCA)及大脑前动脉(ACA)的血流速度比治疗前分别增加15.4％及11.4％(P均<0.05)。对照组对血小板聚集、脑血流速度无明显影响(P>0.05)。尼莫地平组不良反应以头痛、头晕为主,其发生率低,与对照组无统计学差异(P>0.05)。结论 国产尼莫地平注射液治疗急性缺血性脑梗塞的疗效确切、作用迅速、无明显不良反应,是有价值的治疗药物。

成纤维细胞生长因子和丹参对实验性心肌缺血再灌注损伤的预防作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和丹参(SM)对缺血再灌注心肌组织脂质过氧化反应的预防作用。方法采用新西兰长耳大白兔,心脏左前支冠状动脉结扎,制作心肌缺血动物模型。观察经bFGF和SM预处理的缺血再灌注2 h的心肌组织中琥珀酸脱氢酶(SDH)、脂质过氧化代谢产物MDA含量;抗脂质过氧化酶性指标超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)活性和非酶性指标MDA、还原性谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量。结果bFGF和SM联合预处理组心肌中SDH、SOD、GSHpx活性明显高于缺血再灌注组,抗氧化物GSH和NO的含量明显高于缺血再灌注组,心肌病理改变明显好于未用bFGF和SM组。而MDA的含量比未用SM和bFGF组低。尤其是bFGF和SM联合用药效果更为明显。结论bFGF和SM能有效地减轻心肌缺血再灌注所致的损伤,二者联合使用的抗氧化效果好于单独使用。

视网膜缺血再灌注损伤后Caspases家族的表达及bFGF对其的影响

目的探讨大鼠视网膜缺血再灌注损伤(retina ischemia/reperfusion injury,RIRI)后半胱天冬氨酸酶(Caspases)家族的表达及碱性成纤维细胞因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对其表达的影响。方法采用升高眼内压的方法,制作实验性RIRI的大鼠模型。将28只Wistar大鼠随机分为正常组、缺血组和治疗组,其中后两组又分为再灌注后1、6、12、24、48、72h组。应用SP免疫组化法检测大鼠RIRI后视网膜组织中Caspase-2、Caspase-3的表达及玻璃体腔内注射外源性bFGF后对其表达的影响。结果正常组视网膜组织Caspase-2、Caspase-3不表达。缺血组6h开始出现Caspase-2的表达,24h达高峰,48h和72h下降;Caspase-3在视网膜组织的表达时段与Caspase-2的表达规律相似。bFGF治疗组各观察指标变化趋势基本同缺血组,但各时间段的表达强度明显减弱,两组比较,于再灌注6、12、24h时段差别具有统计学意义。结论Caspases家族参与了RIRI,导致神经细胞的凋亡;bFGF可以抑制Caspase-2、Caspase-3蛋白的表达,因此,bFGF在RIRI中可能通过抑制细胞凋亡而达到其保护作用。

大脑中动脉狭窄或闭塞致缺血性卒中预后影响因素分析

目的筛查大脑中动脉狭窄或闭塞致缺血性卒中预后良好的影响因素。方法共109例大脑中动脉狭窄或闭塞致缺血性卒中患者,记录性别、年龄、发病至MRI检查时间、既往史[脑卒中和(或)短暂性脑缺血发作、冠心病、心房颤动和吸烟史、饮酒史]、收缩压和舒张压、血糖、血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、血浆同型半胱氨酸、入院时和出院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、随访3个月时改良Rankin量表(mRS)评分,行MRI和三维时间飞跃MRA检查,获得大脑中动脉狭窄率、FLAIR成像血管高信号(FVH)评分、FVH-扩散加权成像(DWI)不匹配比例、DWI-Alberta脑卒中计划早期CT评分(ASPECTS),单因素和多因素前进法Logistic回归分析筛查大脑中动脉狭窄或闭塞致缺血性卒中预后良好的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线确定FVH评分和DWI-ASPECTS评分预测预后良好的临界值。结果根据mRS评分分为预后良好(mRS评分≤2分)组(24例)和预后不良(mRS评分>2分)组(85例)。Logistic回归分析显示,舒张压(OR=0.924,95%CI:0.869~0.983;P=0.013)、FVH评分(OR=2.008,95%CI:1.404~2.873;P=0.000)和DWI-ASPECTS评分(OR=1.955,95%CI:1.336~2.862;P=0.001)是大脑中动脉狭窄或闭塞致缺血性卒中预后良好的独立影响因素。ROC曲线显示,FVH评分曲线下面积为0.768(95%CI:0.656~0.880,P=0.000),DWI-ASPECTS评分曲线下面积为0.721(95%CI:0.608~0.834,P=0.001);FVH评分预测预后良好的临界值为4.50分,其灵敏度为0.625、特异度为0.824、Youden指数为0.449,DWI-ASPECTS评分预测预后良好的临界值为6.50分,其灵敏度为0.750、特异度为0.671、Youden指数为0.421。结论大脑中动脉狭窄或闭塞致缺血性卒中预后的独立影响因素包括舒张压、FVH评分和DWI-ASPECTS评分,其中,FVH评分预测预后良好的价值更高。

头颈部多排螺旋CT血管造影对后循环缺血的诊断价值

目的探讨后循环缺血患者行头颈部多排螺旋CT血管造影（CTA）检查的价值。方法对120例临床诊断为后循环缺血的患者行头颈部CTA检查，观察血管狭窄部位、受累血管数目并判断狭窄程度。结果120例患者中有血管病变者100例（83．3％），其中单纯前循环病变16例（13．3％），单纯后循环病变40例（33．3％），前后循环同时病变44例（36．7％）；其余20例（16．7％）CTA未见异常。累及两条及两条以上血管≥2条者63例（52．5％）。结论头颈部CTA是一种简便、快速、灵活、安全的检查方法，为寻找病灶、指导手术提供了一种可靠、客观、实用的影像资料，对后循环缺血的诊断具有重要价值。

神经保护剂治疗缺血性脑卒中的研究进展

脑卒中的治疗包括超早期溶栓和神经保护药物。溶栓治疗有时间限制,而无时间限制的神经保护治疗也陷入了困境。常规途径的神经保护药物治疗脑缺血性损伤的效果不理想。来自卒中动物模型中的阳性结果和来自人类试验的阴性结果所引起的惊人偏差普遍引起对神经保护治疗的怀疑。2008年的卒中圆桌会议对迄今耗资数百亿美元,而基本均宣告无效的神经保护药物治疗进行了全面的反思和分析。尽管目前神经保护治疗的现状惨淡,但仍有少数药物的神经保护疗效得到随机试验证实,新型抗氧化自由基清除剂依达拉奉就是其中的一种,在Ⅲ期临床试验中取得良好的结果,是目前临床试验证明惟一有效的自由基清除剂。脑活素是另外一个引起关注的药物,在不同的脑缺血动物模型中表现出神经保护和神经营养特性,在几个小规模针对缺血性卒中的对照临床试验中显示了临床有效性和安全性,目前正在进行Ⅲ期临床试验。神经保护治疗的时间窗、改变治疗模式可能是今后神经保护的研究方向。

五味余甘子散对大鼠心肌缺血再灌损伤的保护作用

目的探讨藏方五味余甘子散对心肌缺血再灌损伤大鼠的保护作用。方法将96只SD大鼠随机均分成五味余甘子散高、中、低剂量组及伪手术组、模型组和阳性对照组,连续给药10 d,在末次给药24 h后,进行造模,结扎左冠前室间支30min,复灌40 min。测定血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的含量及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和丙二醛(MDA)的含量,并比较各组心肌的超微结构变化。结果五味余甘子散能显著降低血清中LDH和CK的含量,同时能提高心肌组织中SOD、GSH-Px的活性,降低MDA的活性。结论五味余甘子散对大鼠心肌缺血再灌损伤有保护作用,其机制可能与抑制自由基相关酶有关。