丹龙醒脑方对局灶性脑缺血大鼠CA1区Nestin和GFAP表达的影响

目的探讨丹龙醒脑方对大鼠脑缺血损伤后海马CA1区巢蛋白(Nestin)和胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响。方法将48只大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组、丹龙醒脑方组。采用大脑中动脉线栓法制备大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO)模型,对大鼠进行神经功能缺损评分,采用HE染色观察海马CA1区细胞的形态学改变,采用免疫组化法检测海马CA1区Nestin蛋白和GFAP蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组治疗3 d后和7 d后的神经功能缺损评分明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,依达拉奉组和丹龙醒脑方组治疗3 d后和7 d后的神经功能缺损评分明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);丹龙醒脑方组在治疗3 d和7 d后Nestin蛋白的平均光密度增加(P<0.05),GFAP蛋白的平均灰度值减少(P<0.05)。结论丹龙醒脑方对海马CA1区病理形态有保护作用。丹龙醒脑方抗脑缺血损伤可能与促进海马区神经细胞增殖和分化有关。

地塞米松对家兔失血性休克-再灌注损伤的防治作用

目的 :探讨地塞米松对失血性休克再灌注损伤的防治作用。方法 :制备家兔失血性休克模型 ,随机分为地塞米松保护组 ( 组 )和未用地塞米松对照组 ( 组 ) ,检测血浆和组织一氧化氮代谢产物 (NOP)、丙二醛(MDA)含量及平均动脉压 (MAP)。结果 :休克前 2组动物 NOP、MDA及 MAP间均无统计学差异。休克 90分钟时 2组动物 NOP、MDA均明显升高 ,MAP均显著下降。再灌注后 , 组 NOP及 MDA均逐渐下降 ,再灌注 3小时后接近休克前水平 ,但明显低于休克 90分钟和 组同时间点水平 ; 组 MAP逐渐上升 ,再灌注 3小时后接近休克前水平 ,但明显高于休克 90分钟和 组同时间点水平。此外 , 组心、肺、肝、肾、肠道组织 NOP及MDA含量均明显低于 组。结论 :地塞米松可降低一氧化氮及氧自由基水平 ,减轻脂质过氧化反应 。

大鼠缺血预处理对心肌保护作用及脂联素表达的影响

目的探讨心肌缺血预处理(IPC)对成年和老年大鼠的心功能及心肌组织和血浆中脂联素表达的影响。方法取成年和老年大鼠各85只,将IPC成功的成年和老年大鼠各50只中,随机各取40只为IPC组,另10只再建心肌梗死(M1)模型为IPC-M1组;只穿线不阻断血流的成年和老年大鼠各30只中,随机各取20只作为假手术组,另10只建MI模型为单纯MI组。假手术组及IPC组又分别于IPC后0、6、12和24h 4个时间点观察。将未结扎冠状动脉的成年和老年大鼠各5只作为对照组。用M型超声检测心功能,Masson's Trichrome染色,测量MI面积,免疫组织化学法和RT-PCR法测心肌组织脂联素蛋白和mRNA的表达,用ELISA法检测血浆脂联素含量。结果老年大鼠IPC-MI组存活率显著低于单纯MI组和对照组(P<0.05),而成年大鼠3组生存率无变化(P>0.05)。成年大鼠IPC-MI组短轴缩短率较单纯MI组明显升高,MI面积显著减小(P<0.05);与假手术组比较,IPC组6和12h心肌组织脂联素mRNA表达明显升高(P<0.05),血浆脂联素在0、6和12h显著升高(P<0.05)。老年大鼠IPC组各时间点心肌组织脂联素mRNA表达与假手术组无显著差异,血浆脂联素24 h明显升高(P<0.05)。结论成年大鼠IPC后心肌组织和血采脂联素表达均升高,心功能改善,老年大鼠脂联素变化不明显,提示脂联素参与成年大鼠IPC发挥的心肌保护作用。

环孢素A后处理对幼兔离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体功能的影响

目的探讨环孢素A(线粒体通透性转换孔的抑制剂)后处理对幼兔离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体功能的影响。方法新西兰幼兔28只,体重300～350 g,建立离体心脏Langendorff灌注模型,随机分为4组(n=7)。对照组(Control组)用Krebs-Henseleit液(K-H液)灌注150 min。其他三组用K-H液配置的20 mmol/L高钾溶液5 ml,使心脏停跳,心肌缺血30 min。在恢复灌注的最初20 min内,缺血再灌注组(I/R组)仍灌注K-H液,环孢素A组(CsA组)灌注含0.2μmol/L环孢素A的K-H液,环孢素A加苍术甙(线粒体通透性转换孔的开放剂)组(CsA+Atr组)灌注含0.2μmol/L环孢素A和20μmol/L苍术甙的K-H液,此后三组继续用K-H液灌注100 min。于实验结束时取左心室心肌组织,测定心肌线粒体膜电位和线粒体腺苷酸含量。结果 I/R组和CsA+Atr组线粒体膜电位稳定性显著小于Control组(P<0.05),CsA组与Con-trol组没有显著差异。I/R组和CsA+Atr组的三磷酸腺苷(ATP)含量明显低于Control组(P<0.05),I/R组二磷酸腺苷(ADP)含量高于Control组(P<0.05),I/R组和CsA+Atr组的腺嘌呤核苷酸(AMP)含量也高于Control组(P<0.05),而CsA组的ATP、ADP、AMP含量与Control组之间的差异没有统计学意义。I/R组和CsA+Atr组的左室发展压、最大上升和下降速率均显著低于CsA组(P<0.05)。结论环孢素A后处理对幼兔离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体功能具有保护作用,有利于减轻未成熟心肌缺血再灌注损伤。

山莨菪碱对兔急性肾缺血及再灌注损伤时肾小管超微病理变化的影响

用新西兰大白兔制作急性肾缺血及再灌注损伤模型,观察肾小管的超微病理变化及再灌注前给予山莨菪碱片对其变化的影响。结果:再灌注60min组(n=7)兔肾小管超微病理损伤重于缺血60min组(n=7)。山茛菪碱治疗组(n=7)免肾小管的超微病理的损伤明显轻于再灌注60min组,主要表现在肾小管间质水肿减轻,炎性细胞浸润基本消失,肾小管腔面微绒毛排列显著好转。结论:山莨菪碱对急性肾缺血及再灌注损伤时肾小管的超微结构具有保护作用。

预适应联合后适应对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨预适应联合后适应对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法该实验于2015年10月—2016年9月进行。选取清洁级雄性SD大鼠50只,体重(270±30)g(内蒙古科技大学包头医学院动物中心提供,合格证号:201407413,dd Y系SPF级);随机分为假手术组、模型组、预适应组、后适应组和预适应+后适应组,每组10只,除假手术组外,其余各组大鼠均制作为脑缺血/再灌注损伤模型,在再灌注48 h后,检测各组大鼠神经功能、脑梗死灶体检、脑组织氧化应激损伤生化指标及神经元凋亡情况。结果再灌注12、24 h和48 h模型组神经功能缺陷评分(3.10±0.23)分、(3.53±0.15)分、(3.32±0.16)分明显高于其他处理组(P<0.05);再灌注12、24 h和48 h处理组中,预适应+后适应组神经功能缺陷评分最低(1.89±0.11)分、(1.75±0.12)分、(1.22±0.13)分(P<0.05);预适应+后适应组脑梗死灶体积为(100.41±33.26)mm3,明显低于模型组、预适应组和后适应组(P<0.05);预适应组(182.43±50.10)mm3和后适应组(185.10±52.33)mm3脑梗死灶体积较模型组(100.41±33.26)mm3降低(P<0.05);假手术组超氧化物歧化酶(SOD)活性(122.41±24.61)μn/mgprot明显高于模型组(45.56±10.31)μn/mgprot,而丙二醛(MDA)(43.51±9.64)nmol/mgprot低于模型组(113.43±21.07)nmol/mgprot(P<0.05);后适应组(76.81±9.83)μn/mgprot和预适应后适应组SOD活性较模型组升高(110.13±12.16)μn/mgprot,而MDA(61.51±12.15)nmol/mgprot较模型组(113.43±21.07)nmol/mgprot降低(P<0.05);假手术组细胞凋亡数(15.20±7.62)个明显低于模型组(84.11±8.42)个(P<0.05);各处理组细胞凋亡数较模型组有所降低(73.04±9.01)个、(61.12±10.17)个(P<0.05),其中预适应+后适应组神经元细胞凋亡数最少,为(47.20±9.21)个。结论预适应和后适应均能对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,而两者联合应用能进一步加强保护作用。

肝血流阻断方法在肝硬化患者肝肿瘤手术中的选择

目的:评价肝硬化患者行肝脏肿瘤切除术时肝血流阻断方法的选用。方法:将我院2007年6月—2012年12月63例需行肝切除的肝肿瘤伴肝硬化患者随机分为3组。A组22例,为间歇血流阻断组,采用阻断肝血流15 min,复流5 min;B组20例,为半肝血流阻断组,行同侧半肝血流持续性阻断,健侧血流正常;IP组21例,采用入肝血流阻断前先阻断5 min、复流5 min的预处理方法。比较3组术中阻断时间、肝断面单位面积出血量、3组及3组中阻断时间<30 min者术后1、3、7、14 d的ALT、AST及TB变化情况。结果:3组肝断面单位面积出血量差异有统计学意义(P<0.05)。术后B组缺血再灌注损伤最轻,IP组最重,差异有统计学意义(P<0.05)。阻断时间<30min者术后肝功比较,IP组较A组缺血再灌注损伤明显降低(P<0.05)。结论:肝血流阻断前预处理可减少肝切除术中的失血量。术前预计切除时间<30 min的患者可采用预处理减少出血量及再灌注损伤。

大鼠离体心脏缺灌和再灌早期乳酸脱氢酶和肌酸激酶的释放规律

用Ｌａｎｇｅｎｄｏｅｆｆ法灌流雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠心脏，平衡１０ｍｉｎ，缺灌１０ｍｉｎ，于再灌３ｍｉｎ内每隔１５ｓｅｃ收集一次冠脉流份，连续检测冠脉流份中ＣＫ、ＬＤＨ以及ＧＯＴ的活性（Ｕ／Ｌ），比较它们释放的动态特征。结果表明，再灌３ｍｉｎ内，３种酶都呈双相释放。第１峰出现在再灌１５ｓｅｃ，酶活性为对照值的５一９倍，它主要反映缺灌损伤。再灌９０一１２０ｓｅｃ又出现第Ⅱ峰，主要代表再灌损伤。无论是再灌３ｍｉｎ内酶释放总量，还是第Ⅰ，第Ⅱ峰的峰值，依酶活性高低排列的次序都是ＣＫ＞ＬＤＨ＞ＧＯＴ。此外，在部分动物身上进行了反复两次缺灌再灌实验，结果发现，第二次缺灌后ＣＫ释放量明显高于第一次缺灌值。ＬＤＨ的Ⅰ峰和Ⅱ峰出现时间与第一次无差别，只是３分钟内酶释放总量高于第一次。说明在本实验条件下，未见预缺灌处理对随后再次缺灌有保护作用。缺灌期心率逐渐减慢，收缩力逐渐减弱，但多数标本仍有微弱的收缩。这使缺灌期冠脉流份的酶活测定成为可能。实验发现，早在缺灌１ｍｉｎ时心肌细胞释放的酶，其活性可达对照值的２倍（ｐ＜０．０５），至缺灌１０ｍｉｎ时ＣＫ和ＬＤＨ的值可达对照值的１０倍左右。这一现象进一步证实，再灌１５ｓｅｃ内大量酶的?

芪棱汤对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用

目的探讨芪棱汤对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓加环扎法制备大鼠脑缺血-再灌注模型,将其分为空白对照组、假手术组、缺血再灌注组、芪棱汤组与补阳还五汤组。对大鼠进行神经学评分,并测定脑梗死边缘区Ca2+浓度。结果缺血3h时各组神经学评分及细胞Ca2+相近,缺血12h之后各个时点两用药组神经学评分及Ca2+浓度均低于缺血再灌注组,芪棱汤组数据又低于补阳还五汤组。结论芪棱汤对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤有保护作用。

缺血预处理对肢体缺血-再灌注损伤的保护作用

目的 :探索缺血预处理对肢体再灌注损伤的保护作用。方法 :分别给予兔后肢一次或多次短暂的缺血预处理 ,然后于持续缺血 4h ,再灌注 1h后行股静脉穿刺 ,抽血检测血清肌磷酸激酶 (CPK)、谷草转氨酶 (GOT)、乳酸脱氢酶 (LDH)及超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)含量 ,并取腓肠肌病检。结果 :缺血预处理各组再灌注后肌细胞内酶释放减少 ,病理切片也发现骨骼肌坏死和梗塞灶减少 ,血清MDA含量下降 ,而SOD活力升高。不同次数的缺血预处理结果之间存在差异。结论 :缺血预处理可以影响体内的自由基代谢 ,对肢体再灌注损伤具有保护作用 ,且这种保护作用与预处理次数有一定关系。

急性心肌梗死PTCA术后再灌注性心律失常与心室复极离散度的关系

目的 探讨急性心肌梗死 (AMI)患者行经皮冠状动脉腔内成型术 (PTCA)后出现的再灌注性心律失常 (RA)与心室复极离散度 (QTd)的关系。方法与结果 对 36例AMI行PTCA手术患者术前术后 12导联心电图同步监测描记 ,发现 :①PTCA术后出现RA时 ,心电图上QTd值比术前有明显延长 (P <0 0 1)。②PTCA 1h后心电图QTd较术前缩短者 ,心律失常发生明显减少 (P <0 0 1)。结论 ①PTCA术后出现RA与QTd延长有关 ;②成功的PTCA 1h后心律失常的减少与QTd缩短有关。

生长激素对离体大鼠缺血再灌注心脏泵功能的影响

目的 应用离体大鼠心脏缺血再灌注模型观察基因重组生长激素（ Ｇ Ｈ）对缺血再灌注心脏泵功能的影响。方法 大鼠随机分为二组，分别每天皮下注射 Ｇ Ｈ ０５ Ｉ Ｕ／ｋｇ（ Ｇ Ｈ 组）或等量生理盐水（对照组），７ ｄ 后进行离体心脏缺血再灌注，分别测定缺血前、后再灌注 １０ ｍ ｉｎ、３０ ｍ ｉｎ 的心脏泵功能指标和冠脉流量的恢复率。结果 Ｇ Ｈ 组离体心脏缺血前基础水平的左室收缩峰压（ Ｌ Ｖ Ｓ Ｐ）、收缩期左室压力上升速度峰值（＋ ｄｐ／ｄｔ ｍ ａｘ）、舒张期左室压力下降速度峰值（－ ｄｐ／ｄｔ ｍ ａｘ ）和冠脉流量（ Ｃ Ｆ） 与对照组比较呈显著差异（ Ｐ ＜ ００１）， 缺血后再灌注１０ ｍ ｉｎ、３０ ｍ ｉｎ 的 Ｌ Ｖ Ｓ Ｐ、±ｄｐ／ｄｔ ｍ ａｘ、 Ｃ Ｆ 与自身缺血前基础水平比较的恢复百分率明显高于对照组（ Ｐ ＜００５），而 Ｇ Ｈ 组心率（ Ｈ Ｒ）的恢复率与对照组比较无显著差异（（ Ｐ ＞ ００５））。结论 提示预先应用 Ｇ Ｈ 可增强心脏泵功能并改善缺血再灌注心脏泵功能的损伤。

高压氧预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护机制探讨

目的:探讨高压氧预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护机制。方法:20只雄性新西兰大白兔,随机分为2组(每组n=10):对照组为常压空气组;HBO组为高压氧预处理组。采用肾下腹主动脉阻断法造成脊髓缺血再灌注损伤,观察两组再灌注后4h、12h、24h、48h时的神经功能评分;再灌注48h时取出腰段脊髓组织(L5-7)测定脊髓抗氧化酶活性(SOD、CAT及GSH-px)及MAD含量。结果:再灌注4h、12h、24h、48h时,HBO组神经功能学评分均明显优于对照组(P<0.05)。再灌注48h时,HBO组脊髓匀浆SOD、CAT及GSH-px活性明显高于对照组(P<0.05),脊髓匀浆MDA含量明显低于对照组(P<0.05)。相关性分析发现,再灌注48h时后肢运动神经功能学评分与脊髓SOD、CAT及GSH-px活性呈正相关(r=0.82,0.65,0.54,P<0.05),与脊髓MDA含量呈负相关(r=-0.69,P<0.05)。结论:高压氧预处理对脊髓缺血再灌注损伤的保护机制可能与上调内源性抗氧化酶活性和清除自由基有关。

舒芬太尼预处理对大鼠心肌缺血再灌注时心肌Toll样受体4表达的影响

目的探讨舒芬太尼预处理对大鼠心肌缺血再灌注时心肌Toll样受体4（TLR4）表达的影响。方法雄性sD大鼠36只，体重250-300g，采用随机数字表法，将大鼠分为3组（n=12）：假手术组（s组）、缺血再灌注组（I／R组）和舒芬太尼预处理组（SPC组）。采用结扎冠状动脉左前降支的方法建立心肌缺血再灌注模型。SPC组于心肌缺血前经股静脉输注舒芬太尼0．2μg·kg-1·min-1，输注5min，停止5min，重复3次进行预处理；S组和I／R组输注等容量生理盐水。于心肌缺血前30min（T0）、缺血前即刻（T1）、缺血30min（T2）、再灌注30min（T3）和再灌注120min（L）时记录HR及MAP。再灌注120min时，取血样，测定血清TNF-α浓度；然后处死大鼠，测定心肌梗死体积以及心肌TLR4和NF-κBp65的表达。结果3组间不同时点HR比较差异无统计学意义（P〉0．05）。与s组比较，I／R组和SPC组Ｔ2-4 时MAP降低，血清TNF-α浓度升高，心肌TLR4和NnKBP65表达上调（P〈0．01）；与I／R组比较，SPC组MAP各时点差异无统计学意义（P〉0．05），心肌梗死体积减少，血清TNF-α浓度降低，心肌TLR4和NF-κBp65表达下调（P〈0．01）。结论舒芬太尼预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的机制可能与下调心肌TLR4的表达有关。