不同出生体重新生大鼠胰腺ghrelin和钙通道表达的研究

目的:探讨宫内营养环境对大鼠胰腺ghrelin和胰岛细胞团上L型钙通道(Cav1.2、Cav1.3)相对丰度的影响。方法:建立不同出生体重新生大鼠模型,分别取新生第1天大鼠胰腺或分离的胰岛细胞团组织,用实时荧光定量RT-PCR观察不同出生体重组胰腺ghrelin mRNA表达的变化和胰岛细胞团上Cav1.2、Cav1.3 mRNA的差异;同时,对胰岛细胞团上ghrelin、Cav1.2、Cav1.3蛋白进行免疫组织化学染色。结果:实时荧光定量RT-PCR显示:新生大鼠小于胎龄儿(SGA)组胰腺ghrelin mRNA水平高于适于胎龄儿(AGA)组的表达(P<0.05)。胰岛细胞团上Cav1.2 mRNA SGA组和大于胎龄儿(LGA)组表达量均小于AGA组,Cav1.3 mRNA SGA组小于AGA组(P<0.05)。免疫组化积分光密度数据显示与实时荧光定量RT-PCR结果呈相同趋势。结论:早期宫内营养状况过剩或缺乏可能导致胰腺分化和成熟障碍,并引起胰岛细胞团上ghrelin和钙通道表达差异。

女性腹型肥胖患者低脂联素血症与胰岛β细胞功能关系探讨

目的:探讨女性腹型肥胖患者脂联素水平与胰岛β细胞功能之间的关系。方法:应用高葡萄糖钳夹技术检测了9例女性腹型肥胖、9例健康女性对照和7例女性2型糖尿病患者的胰岛β细胞功能和胰岛素敏感性,用MR I测定局部体脂和酶联免疫法测定脂联素水平。结果:对照组胰岛素分泌第一时相(FP IR)、葡萄糖代谢清除率(GDR)、胰岛素敏感性指数(ISI)和脂联素水平高于腹型肥胖组和2型糖尿病组;内脏脂肪面积(VA)低于腹型肥胖组和2型糖尿病组(P<0.05)。腹型肥胖组脂联素、FP IR、胰岛素分泌第二时相(SP IR)和胰岛素分泌最大量(IN Sm ax)高于2型糖尿病组(P<0.05)。多元逐步回归分析显示,年龄、FP IR和GDR与脂联素呈独立正相关(B分别为0.145、0.194、0.277,均P<0.05);腰臀比(WHR)与脂联素呈独立负相关(B为-7.424,P<0.05)。结论:腹型肥胖女性脂联素水平降低,可能与胰岛素分泌密切相关。

氧化应激与β细胞脂性凋亡关系及机制研究

目的:观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞凋亡影响,探讨氧化应激相关因子及基因表达与β细胞脂性凋亡关系及可能机制。方法:41只SD雄性大鼠随机分为高脂饲料喂养的肥胖组(n=21)和普通饲料喂养的正常对照组(n=20),喂养28周后,检测血浆及胰腺组织中的丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)浓度;静脉葡萄糖耐量试验评价早相胰岛素分泌反应(A IR);TUNEL法观察胰岛β细胞凋亡情况并计数每个胰岛中β细胞凋亡率;采用荧光定量PCR(R eal-tim e PCR)比较两组大鼠胰岛细胞解偶联蛋白-2(UCP-2)mRNA表达的情况。结果:28周时高脂饲养组血浆及胰腺组织中MDA高于正常饲养组(P<0.05),而高脂饲养组血浆及胰腺组织中GSH低于正常饲养组(P<0.01)。与基础值比较,高脂饲养组糖负荷后胰岛素增高的幅度低于正常饲养组(3.0倍vs 5.7倍,P<0.05)。高脂饲养组1 m in后血糖浓度下降缓慢,3、5、10 m in血糖水平均高于正常饲养组(P<0.05)。高脂饲养组胰岛β细胞凋亡率比正常饲养组增加40.0%(P<0.01)。高脂饲养组胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达与正常饲养组相比升高22.4%(P<0.01)。结论:高脂喂养28周后SD大鼠胰岛β细胞凋亡率明显增加,血浆及胰岛细胞中MDA升高、GSH降低,而且胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达升高,提示氧化应激可能参与了高脂引起的β细胞脂性凋亡。

大剂量抗氧化剂对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及机制

目的:探讨大剂量抗氧化剂-N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-l-cysteine,NAC)对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及可能机制。方法:将59只8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组)、高脂饲料组(HF组)和高脂+NAC组(NAC组)。饲养20周,(1)测血浆及胰腺组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹实验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较各组大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和葡萄糖转运子-2(Glut-2)mRNA表达的变化。结果:(1)HF组血浆及胰腺MDA水平明显高于NC组,GSH水平低于NC组,NAC可以改善以上变化;(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)比NC组降低(P<0.01),用NAC后GIR明显改善(P<0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能下降,用NAC后可逆转上述变化;(3)HF组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2mRNA表达降低42.3%、28.1%、22.9%(P均<0.05);NAC组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2 mRNA表达与HF组相比增加40.2%、30.2%,19.1%(P均<0.05)。结论:大剂量抗氧化干预治疗能改善胰岛细胞胰岛素信号传导,逆转高脂饲养导致的大鼠胰岛细胞分泌功能紊乱,其机制可能与NAC纠正机体氧化及抗氧化失衡有关。