UPLC-DAD法同时测定刺五加叶中Chlorogenic acid,Rutin,Hyperoside及Isoquercitrin四种成分的含量

目的：建立UPLC同时定量刺五加叶药材中Chlorogenic acid,Rutin,Hyperoside及Isoquercitrin等4种有效成分的方法。方法：色谱柱：HSS T3（100 mm×2.1 mm,1.8μm,Waters）;柱温：40℃;流速：0.4m L/min;进样量：5μL;流动相A：0.1%甲酸水溶液,流动相B：乙腈;梯度洗脱,洗脱条件：0-8 min,88%-75%A;8-9 min,75%-88%A;9-10 min,88%-88%A;紫外检测波长：360 nm。结果：对9批产地的刺五加叶药材进行测定,绿原酸最高的是虎林（1.287 mg/g）;芦丁含量最高的是鸡东（0.122mg/g）;金丝桃苷含量最高的是宾县（0.528 mg/g）;异槲皮苷含量最高的是五常（0.337 mg/g）。结论：该方法可用于刺五加叶中四种成分的含量测定,本研究所建立的方法稳定性、精密度、重复性良好,适用于刺五加叶的含量测定;不同来源的药材成分含量差异显著,对刺五加实施多指标的含量控制是保证其临床药用安全可控的必要途径。

Isoquercitrin suppresses the expression of histamine and pro-inflammatory cytokines by inhibiting the activation of MAP Kinases and NF-κB in human KU812 cells

Mast cells and basophils are multifunctional effector cells that contain abundant secretory granules in their cytoplasm. Both cell types are involved in a variety of inflammatory and immune events, producing an array of inflammatory mediators, such as cytokines. The aim of the study was to examine whether isoquercitrin modulates allergic and inflammatory reactions in the human basophilic KU812 cells and to elucidate its influence on the phosphorylation of mitogen-activated protein kinase(MAPK) and nuclear factor(NF)-κB activation. The KU812 cells were stimulated with phorbol-12-myristate 13-acetate plus the calcium ionophore A23187(PMACI). The inhibitory effects of isoquercitrin on the productions of histamine and pro-inflammatory cytokines in the stimulated KU812 cells were measured using cytokine-specific enzyme-linked immunosorbent(ELISA) assays. Western blotting analysis was used to assess the effects of isoquercitrin on the MAPKs and NF-κB protein levels. Our results indicated that the isoquercitrin treatment of PMACI-stimulated KU812 cells significantly reduced the production of histamine and the pro-inflammatory cytokines, such as interleukin(IL)-6, IL-8, IL-1β, and tumor necrosis factor(TNF)-α. The treated cells exhibited decreased phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase(ERK), revealing the role of ERK MAPK in isoquercitrin-mediated allergy inhibition. Furthermore, isoquercitrin suppressed the PMACI-mediated activation of NF-κB in the human basophil cells. In conclusion, the results from the present study provide insights into the potential therapeutic use of isoquercitrin for the treatment of inflammatory and allergic reactions.

基于多指标含量测定的山楂炮制前后化学成分的含量变化

目的建立3种指标成分含量测定方法,探究山楂炮制前后的化学成分含量变化规律。方法采用高效液相色谱法(HPLC)测定山楂、炒山楂、焦山楂中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷成分含量,色谱条件为ShimNex CS C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B),梯度洗脱;检测波长280 nm;流速:1.0 ml/min;柱温35℃;进样量20μl。结果绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷所在浓度范围线性良好;平均加样回收率分别为102.4%、96.1%、97.8%,RSD均<3.5%;精密度、稳定性和重复性的RSD均<3.6%。随着炮制温度升高和炮制时间延长,山楂中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷这3种成分含量均呈现下降趋势。与山楂对比,绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷在炒山楂中的含量平均降低5.5%、28.7%、19.5%,在焦山楂中的含量平均降低12.7%、49.4%、43.3%。结论本研究建立HPLC适合山楂及其炮制品中的绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷含量测定,同时分析山楂炮制前后3种化学成分含量变化规律和程度,可为山楂及其炮制品质量控制提供更丰富的研究依据。

罗布麻叶不同极性部位及成分对药物诱导的斑马鱼心脏损伤的保护作用研究

目的 基于斑马鱼模型评价罗布麻叶提取物及主要化学成分对药物诱导心脏损伤的保护作用。方法 用野生型AB斑马鱼测试半数致死浓度(LC50);采用盐酸维拉帕米构建斑马鱼心脏损伤模型,并评价不同极性部位及主成分对斑马鱼心包水肿面积和静脉淤血面积的影响。结果 在安全剂量下,罗布麻叶Fr.n-BuOH、Fr.n-BuOH-40%以及Fr.H2O部位对斑马鱼心脏损伤具有更好的保护作用;主成分金丝桃苷的保护作用呈现明显的剂量相关性,且略强于异槲皮苷。结论 罗布麻叶提取物及其主成分对斑马鱼心脏损伤具有保护作用,值得进一步开展机制研究。

蒙药材东北齿缘草的质量标准研究

目的建立东北齿缘草药材的质量标准,为东北齿缘草质量控制和评价提供参考。方法参照2020年版《中华人民共和国药典》四部通则相关方法,对东北齿缘草的水分、总灰分、酸不溶性灰分和浸出物进行测定。用高效液相色谱法,以Hypersil ODS(300 mm×4.6 mm,2.5μm)为色谱柱,以4 mL·L^(−1)磷酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(−1),柱温为35℃,检测波长为360 nm,建立东北齿缘草中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的定量分析方法。结果东北齿缘草中水分、总灰分和酸不溶性灰分不得超过10.0%、7.0%、2.0%,浸出物不得低于20%。在HPLC条件下,绿原酸、芦丁和异槲皮苷质量浓度分别在1.42~4.25、0.80~2.40、0.14~0.42μg·mL^(−1)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为96.33%、95.50%、95.63%,RSD值分别为1.7%、0.9%、1.4%。结论建立的东北齿缘草定量方法重复性好、灵敏度高、专属性强,可用于蒙药材东北齿缘草的质量控制。

异槲皮素的药理作用研究进展

异槲皮素作为一种广泛存在于自然界的天然黄酮类化合物,目前已发现它具有多重生物活性,如抗病毒,抗菌,抗癌作用,在细胞和动物实验中可用来治疗消化、神经、呼吸、运动、代谢系统疾病。目前,关于异槲皮素的研究多而杂,因此,从异槲皮素的药理作用入手,归纳整理近年国内外发表的相关文章,以期为将来的研究提供帮助。

HPLC-MS/MS同时测定感冒安颗粒中5种黄酮成分的含量

目的建立HPLC-MS/MS方法测定感冒安颗粒中5种黄酮成分含量。方法色谱条件:色谱柱为Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×150 mm×4.6 mm,5μm,100Å),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱(0~20 min,35%A;20~40 min,45%A),流速为1.0 ml/min,柱温为25℃;质谱条件:电喷雾电离源(ESI源)负离子扫描,多反应监测(MRM)模式检测。5种黄酮检测的离子对:芦丁m/z 609.1→300.1、金丝桃苷和异槲皮苷m/z 463.0→300.1、槲皮素m/z 301.0→151.0、木犀草素m/z 285.0→132.9。结果5个成分在一定浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系,相关系数r均>0.9991;平均加样回收率在100.63%~102.81%之间,RSD范围在0.67%~2.07%。10批感冒安颗粒中芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、槲皮素和木犀草素的含量测定结果分别为32.23~479.83、0.291~1.825、11.44~20.54、6.32~18.41、3.46~6.51μg/g。结论建立的HPLCMS/MS法灵敏度高、专属性强,适合同时测定感冒安颗粒中5种黄酮类成分的含量。

乳苣不同部位异槲皮苷含量测定及其抗氧化活性研究

采用高效液相色谱(HPLC)法测定了乳苣不同部位的异槲皮苷含量;以抗坏血酸(VC)为阳性对照,采用DPPH法和FRAP法对乳苣不同部位提取物的抗氧化活性进行了初步探索。结果表明,乳苣样品在14 min内分离度良好,异槲皮苷浓度在2.00~10.00μg·mL^(-1)范围内与吸光度线性关系良好(R=0.9996),精密度(RSD=0.63%)、重复性(RSD=1.24%)、平均加标回收率(95.15%,RSD=1.72%,n=6)均符合要求,乳苣全草提取物溶液在室温下放置24 h稳定性良好(RSD=1.75%);采用HPLC法测得乳苣茎、叶、全草提取物中异槲皮苷含量分别为0.67 mg·g^(-1)、1.70 mg·g^(-1)、1.21 mg·g^(-1),根中未检测到异槲皮苷;乳苣不同部位提取物均具有一定的抗氧化活性,其对DPPH自由基的清除率和还原能力均随提取物浓度的增加逐渐升高,特别是乳苣叶提取物,当其浓度为0.4 mg·mL^(-1)时,其还原能力接近VC。

基于标准汤剂的地耳草配方颗粒质量标准研究

目的以地耳草标准汤剂为基础建立其配方颗粒的质量标准,为地耳草配方颗粒质量评价提供参考。方法采用高效液相色谱法测定饮片、标准汤剂及配方颗粒中槲皮苷、异槲皮苷的质量分数,计算2种成分转移率,并且采用高效液相色谱建立了标准汤剂及配方颗粒特征分析方法。结果15批标准汤剂样品中槲皮苷、异槲皮苷的质量分数为13.66~32.11 mg/g,4.00~16.81 mg/g,转移率为45.7%~63.5%,37.8%~56.9%,3批配方颗粒槲皮苷的质量分数为16.16、17.02、16.52 mg/g,转移率为55.2%、58.2%、55.3%,异槲皮苷的质量分数为7.61、7.93、7.56 mg/g,转移率为45.0%、48.8%、44.7%;各样品特征图谱与对照图谱的相似度均大于0.90,所建立的特征图谱标定共有峰7个,其中指认了4个,峰3为异槲皮苷、峰5为槲皮苷、峰6为白前苷B、峰7为槲皮素;聚为2类,2种主成分的累积方差贡献率达84.85%。结论所创建的质量分数测定及特征图谱HPLC方法的专属性强、重复性好、合理准确,得到的地耳草标准汤剂、配方颗粒一致性良好,可以对地耳草配方颗粒的质量进行控制和整体性评价提供参考。

中药砂仁中的黄酮苷化合物

目的 :研究阳春砂仁水溶性成分。方法 :各种色谱法分离纯化 ,光谱方法鉴定结构。结果 :从阳春砂仁水溶性成分中分得槲皮素的 2种黄酮苷 ,槲皮苷和异槲皮苷。结论

青钱柳化学成分研究

目的 :研究青钱柳叶中的化学成分。方法 :溶剂萃取及各种色谱技术分离纯化 ,理化性质和光谱分析鉴定结构。结果 :分离得到 6个单体化合物 ,为山柰酚 (Ⅰ )、槲皮素 (Ⅱ )、异槲皮苷 (Ⅲ )、逆没食子酸 (Ⅳ )、胡萝卜苷(Ⅴ )和青钱柳酸B(Ⅵ )。结论 :化合物Ⅰ ,Ⅱ 。

蛇莓黄酮苷类化学成分研究

目的研究蔷薇科植物蛇莓(Duchesnea indica Focke)的黄酮类化学成分。方法采用多种色谱技术对黄酮类成分进行分离纯化,经理化数据和光谱数据分析鉴定其结构。结果从蛇莓中分离得到6个黄酮类化合物,结构鉴定为洋芹素-6-C-β-D-葡萄糖苷(1),金合欢素-7-O-α-L-鼠李糖基(1-6)--βD-葡萄糖苷(2),山奈素-3-O-β-D-半乳糖苷(3),芦丁(4),异槲皮苷(5)和金丝桃苷(6)。结论6个化合物均为首次从本植物中获得。

毛细管电泳紫外检测法测定莲须中的槲皮素、木犀草素、山萘酚、异槲皮甙

采用毛细管区带电泳紫外检测法(CZE-UV)同时测定中药莲须中槲皮素、木犀草素、山萘酚、异槲皮甙4种有效成分。研究了缓冲溶液的离子浓度、pH值和电压对分离度和迁移时间的影响,得到了最佳分离实验条件。在离子浓度为40mmol/LNa2B4O7缓冲溶液(pH9.0)中,分离电压为16kV,波长为254nm时,槲皮素、木犀草素、山萘酚、异槲皮甙4种物质在10min内得到了良好的分离测定,其检出限分别为5.0、6.7、4.5和6.0mg/L。本方法应用于实际样品的测定,结果令人满意。

青钱柳叶中黄酮化合物结构及含量研究

研究青钱柳 (Cyclocaryapaliurus (Batal.)Iljinsk .)叶中的黄酮化合物结构及含量分布。采用溶剂萃取及多种色谱技术分离纯化 ,根据理化性质和光谱分析方法鉴定其结构 ,确定从青钱柳中分离得到山柰酚、槲皮素和异槲皮苷 3个黄酮单体化合物 ,并用反相高效液相色谱法对其含量进行了测定 ,测得各自在甲醇和水提取物中的含量 :山柰酚 0 .0 387% ,0 .0 337% ;槲皮素 0 .0 6 1 5 % ,0 .0 6 0 3% ;异槲皮苷 0 .5 4 3% ,0 .4 6 4 %。

青钱柳黄酮化合物结构及含量

研究了我国特有的胡桃科植物青钱柳(Cyclocaryapaliurus(Batal.)Iljinsk.)叶中的黄酮化合物结构及含量分布。采用溶剂萃取及各种色谱技术分离纯化,根据理化性质和光谱分析方法鉴定其结构。用反相高效液相色谱法对青钱柳中的山柰酚、槲皮素和异槲皮苷的含量进行了测定。色谱条件为AlltimaC18柱(5μm,150×4.6mm),流动相A为H2O:HOAc=98:2,流动相B为CH3CN。洗脱程序为:8%B→30min→50%B→5min→50%B→5min→8%B。检测波长为360nm,流速为0.6mL/min。该方法的平均回收率和RSD为98.6%和1.57%。首次从青钱柳中分离得到3个黄酮单体化合物:山柰酚(kaempferol,I)、槲皮素(quercetin,Ⅱ)和异槲皮苷(isoquercitrin,Ⅲ),其在甲醇和水提取物中的含量分别为:山柰酚0.0387%,0.0337%;槲皮素0.0615%,0.0603;异槲皮苷0.543%,0.464%。

狭序唐松草化学成分的研究(Ⅲ)

从狭序唐松草 Thalictrum atriplex Finetet Gagnep.地上部分分离并鉴定了 6个化合物 ,其中 4个为生物碱 ,即 :N- methyllaurotetanine( )、isoboldine( )、thalisopynine( )和 N- methylcocularine( ) ,2个为非生物碱 ,即 :异槲皮苷 ( )和乙酸 - (3,4-二羟基 ) -苯乙酯 ( )。 6个化合物均为首次从该植物中分出。

HPLC法同时测定菟丝子中5种成分的含量

目的建立测定菟丝子中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、山奈酚的含量方法。方法采用高效液相色谱（HPLC）法。色谱柱为ZorbaxSB C18；流动相为乙腈-0．1％磷酸溶液，梯度洗脱；绿原酸的检测波长为327nm，金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、山奈酚的检测波长为360nm；流速为1．0mL·min。；柱温为30℃。结果5种活性成分均达到基线分离，线性关系良好（r≥0．9998）；平均加样回收率为96．8％～101．0％，RSD〈3．0％（n=6）。结论该方法灵敏，可靠，可用于菟丝子药材的质量评价。

桑叶中绿原酸和主要黄酮苷含量的RP-HPLC测定

目的:考察不同品种、不同采摘时间和不同种植基地桑叶中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含量差异。方法:采用反相高效液相色谱法,以 Zorbax SB C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为分离柱,90%乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱[0 min,A-B(12:88);10 min,A-B(16:84);20 min,A-B(20:80);30 min,A-B(25:75)],流速1.0 mL·min^(-1),检测波长358 nm。结果:不同种植基地的桑叶中绿原酸、芦丁和异槲皮苷的含最有一定的差异;不同品种和采摘时间的桑叶中上述三成分含量差异较大。结论:桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷的含量与种植基地、采摘季节、品种等有关,其中尤以季节和品种影响较大。

不同产地水冬瓜叶HPLC指纹图谱建立、化学模式识别分析及含量测定

目的:为水冬瓜叶药材的质量控制提供参考。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),以Agela Promosil C18为色谱柱,以0.2%磷酸水溶液-乙腈(梯度洗脱)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为210 nm,柱温为35℃,进样量为10μL。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)》建立10批不同产地水冬瓜叶的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,通过与对照品色谱图比对进行色谱峰的指认。采用聚类分析、主成分分析(PCA)法和偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)法进行化学模式识别分析,并筛选质量差异标志物。采用相同HPLC法对水冬瓜叶中金丝桃苷和异槲皮苷的含量进行测定。结果:10批不同产地水冬瓜叶HPLC指纹图谱与对照指纹图谱的相似度为0.923~0.983。共确定了11个共有色谱峰,并指认出了峰4、5分别为金丝桃苷、异槲皮苷。聚类分析和PCA、PLS-DA结果均显示,10批水冬瓜叶可分为2类,其中,Y10聚为一类、其余聚为一类;经PLS-DA分析,筛选出了6个变量投影重要性值大于1的共有峰(峰4、3、10、2、6、11)。10批样品中金丝桃苷和异槲皮苷的平均含量分别为0.47~6.97、0.21~1.87 mg/g。结论:所建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法稳定、可靠,初步筛选出了不同产地水冬瓜叶中金丝桃苷等6个质量差异性标志物,可用于不同产地水冬瓜叶药材的质量控制。

高效液相色谱法同时测定桑叶中绿原酸及4种黄酮类成分的含量

目的建立同时测定桑叶中绿原酸及4种黄酮类成分芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量的方法,为优化《中国药典》中桑叶含量测定项下方法提供依据。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,Inertsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)和0.2%磷酸-0.2%三乙胺水溶液(B)为流动相,梯度洗脱;检测波长为360 nm;柱温:30℃;流速:1.0 mL·min-1。结果在50 min内,绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素能达到良好的分离,分别在0.0674~1.3475 mg·mL^-1、0.0045~0.0898 mg·mL^-1、0.0282~0.5640 mg·mL^-1、0.0159~0.3186 mg·mL^-1、0.0006~0.0130 mg·mL^-1范围内呈良好的线性关系(r分别为0.9996、1.0000、1.0000、1.0000、1.0000),平均回收率分别为97.92%、98.74%、98.17%、98.78%、98.6%,相对标准偏差(RSD)分别为1.41%、1.68%、1.69%、1.42%、1.59%。结论所建立的方法准确可靠,可用于桑叶药材的的质量控制,优化了《中国药典》中桑叶药材质量标准。