5-杂氮脱氧胞苷对JEG-3细胞侵袭力的影响及相关机制探讨

目的研究甲基化酶抑制剂5-杂氮脱氧胞苷(5-aza-2-′deoxycytidine,ADC)对人绒毛膜上皮癌细胞株JEG-3细胞侵袭能力及其对JEG-3细胞H19甲基化状态的影响,从表观遗传学角度探讨滋养细胞侵袭行为的相关调控机制。方法Matrigel侵袭小室模型观察ADC处理JEG-3细胞24h后细胞侵袭能力的变化。亚硫酸氢盐修饰后测序法检测ADC对JEG-3细胞中H19基因甲基化的影响。结果经100μmol/L ADC作用24h后的JEG-3细胞侵袭能力明显降低,较对照组差异有统计学意义(P<0.01)。经ADC作用后的JEG-3细胞中H19基因甲基化程度降低。结论甲基化酶抑制剂ADC可降低H19基因甲基化程度,并抑制滋养细胞侵袭能力。H19甲基化状态改变可能参与调控滋养细胞侵袭能力。

雌激素对人子宫内膜癌JEC细胞中p57^(kip2)和Cyclin E表达的影响

目的探讨雌激素对体外培养的人子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)JEC细胞中p57^(kip2)和Cyclin E表达的影响。方法体外培养的JEC细胞分别用高、中、低三种浓度(10^(-6)、10^(-8)、10^(-10)mol/L)的雌二醇(β-Estradiol,E2)治疗处理,于作用24、48、72 h后,分别用倒置显微镜和透射电镜观察JEC细胞的形态变化,用MTT、流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞的生长情况和细胞周期分布的变化,用Western blot法检测p57^(kip2)、Cyclin E蛋白的表达。结果形态观察、MTT、FCM检测显示,在中、低浓度的E2对JEC细胞的生长有促进作用(P<0.05);E2作用72 h后,处于G0/G1期细胞明显减少,S期细胞明显增多(P<0.05)。Western blot结果显示,E2作用于JEC细胞:(1)24 h时,p57^(kip2)蛋白在中浓度组表达最低,高浓度组表达最高(P<0.05),Cyclin E蛋白在高浓度组表达最低,中浓度组表达最高(P<0.05),然而,在48 h时,随着浓度的升高,p57^(kip2)、Cyclin E蛋白的表达均逐渐增加(P<0.05),72 h亦然。(2)p57^(kip2)蛋白在中浓度组随着作用时间的延长,表达增高(P<0.05),高浓度组亦然;Cyclin E蛋白在中浓度组随着时间的延长,表达降低(P<0.05),低浓度组亦然。p57^(kip2)、Cyclin E蛋白表达之间无相关性(P>0.05)。结论 p57^(kip2)、Cyclin E蛋白在EC发生、发展中的作用均受到E2的影响。随着E2作用浓度增加、作用时间延长,JEC细胞由增殖促进状态变成增殖抑制状态,中、高浓度组p57^(kip2)蛋白表达逐渐增高;中、低浓度组则随着E2作用时间的延长,Cyclin E蛋白表达逐渐降低。