miR-125a对肺癌A549细胞放疗敏感性影响机制的初步研究

目的探讨miR-125a对肺癌A549细胞放疗敏感性的作用及其机制。方法将A549细胞分为转染miR-125a细胞组(实验组)和转染miR-125a乱序的细胞组(对照组)。采用MTT法检测其生长率、采用集落形成实验测定不同剂量照射的存活分数、Annexin-V/PI双染测定细胞凋亡情况以及蛋白免疫印迹法检测各组细胞中p53蛋白表达情况。结果 q PCR检测显示,miR-125a能够在A549细胞中成功侵袭,且实验组表达量高于对照组(P<0.05);MTT法检测发现,转染后实验组肺癌A549细胞抑制率明显升高,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);集落形成实验发现,采用X线照射后,实验组细胞存活分数低于对照组,其中实验组在2 Gy时细胞存活分数降低更为明显(P<0.01);Annexin-V/PI双染法发现,照射后实验组细胞凋亡率升高(P<0.05);蛋白免疫印迹法检测发现,p53蛋白在实验组中升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-125a细胞能够在A549细胞中成功转染侵袭,其上调后明显增加细胞的凋亡率,X线照射后细胞凋亡升高。这一作用机制可能与miR-125a细胞上调激活p53蛋白活化有关。

miR-451a对JEG3细胞迁移、侵袭功能的影响

目的研究miR-451a对人绒毛膜癌细胞系JEG3细胞的迁移、侵袭的影响。方法以人工合成的miR-451a模拟物(miR-451a mimics)转染JEG3细胞,过表达miR-451a后,应用逆转录-实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)检测转染后miR-451a的表达水平;应用划痕试验和Transwell小室侵袭试验观察转染前后细胞迁移和侵袭能力的变化。结果对比空白组及hasmiR451a mimics NC组,转染miR-451a mimics后,JEG3细胞中miR-451a表达水平明显升高,细胞迁移、侵袭能力下降。结论miR-451a可以抑制JEG3细胞的迁移与侵袭。

槲皮素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒子的制备、表征和体外抗人子宫内膜癌作用

目的制备槲皮素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒子(QT-PBCA)并考察其理化性质、体外抗人子宫内膜癌作用。方法采用阴离子乳液聚合法制备QT-PBCA纳米粒子。透射电镜观察纳米粒子的形态,Zeta电位仪检测粒径和Zeta电位,红外光谱仪检测QT-PBCA纳米粒子、BCA单体、QT、空载体PBCA纳米粒子的红外吸收光谱,MTT法检测细胞存活率。结果QT-PBCA纳米粒子呈球形或椭圆形,表面光滑,在透射电镜下因PBCA固有的黏合特性而处于略微聚集的状态,其平均粒径为(161.1±0.44)nm,Zeta电位为(-7.28±0.60)mV,平均包封率为(79.86±0.45)%。在纳米粒子的封装以及制备的过程中槲皮素与聚合物之间可能发生的反应。槲皮素封存到PBCA纳米粒子中是靠分子间作用力(如氢键)完成的。随着顺铂、纳米粒子浓度的增加,JEC、LO2细胞的存活率降低,且顺铂组相比于纳米粒子组的存活率要更低(P<0.05)。纳米粒子在6.67 mg/L对LO2细胞有一定的毒性,但随着浓度增高,反而会产生促进细胞增殖的作用。结论 QT-PBCA纳米粒子具有良好的理化性质和抗肿瘤作用且对正常细胞无害,有潜力成为新型抗癌药物。