Effects of BYHW Decoction and Its Effective Constituents on the Fluidity of the Cell Membrane in a Stroke-Modeled Rat Brain

With in vitro spin labeling electron spin resonance (ESR) spectroscopy, we have studied the effects of Bu Yang Huan Wu (BYHW) decoction and its effective constituents such as astragaloside IV ferulic acid, chuanxiongzine, rutin, chlorogenic acid, 9,10 dimethoxy pterocarpane 7 O β D glucoside, calycosin, formononetin, calycosin 7 O glucoside, paeoniflorin, paeonal and quercein on the cell membrane fluidity of a rat brain which was modeled after the dual cervical arteries were intercepted and released for realizing an ischemia reperfusion injury which was selected as a brain stroke model. Our results indicated that the cell membrane fluidity in the model group decreased approximately 8% compared with the control group, and after brain cells were incubatied with species, the membrane fluidity could be recovered closely to the control level depending on the BYHW decoction and its different constituents. As the membrane fluidity is a very sensitive biological index which reflectsd the cell status, our method will be useful to study the molecular mechanism of tradition Chinese medicine (TCM) and its combination recipe.

醋酸泼尼松片联合补阳还五汤治疗特发性肺纤维化的疗效研究

目的:通过观察醋酸泼尼松片联合补阳还五汤治疗特发性肺纤维化的临床疗效,为治疗特发性肺纤维化提供一种新选择。方法:选取2020—2022年间荆门市人民医院(荆楚理工学院附属中心医院)感染科门诊收治的特发性肺纤维化患者98例,将患者随机分为对照组和观察组,每组各49例,对照组给予醋酸泼尼松片口服,观察组给予醋酸泼尼松片和补阳还五汤口服,治疗周期均为6个疗程。结果:治疗后观察组血清细胞因子IL-6、TNF-α以及临床症候评分均低于对照组;观察组的肺功能指标、临床疗效均高于对照组。结论:醋酸泼尼松片联合补阳还五汤治疗IPF的临床疗效显著,可以降低细胞因子水平,改善临床症状积分及肺功能,同时具有副作用少,疗程短特点,值得临床推广应用。

补阳还五汤及其有效部位组方对沙土鼠脑缺血再灌注后海马CA1区神经元损伤的影响

目的 :比较研究补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血再灌注后海马CA1区病理形态结构的影响。方法 :采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型 ,分别腹腔注射补阳还五汤及其有效部位组方 ,于再灌注后 5d取脑观察海马CA1区神经元密度和超微病理的变化。结果 :补阳还五汤及其有效部位组方均可防止脑缺血再灌注后海马CA1区神经元密度的降低 ,对海马CA1区超微病理变化均有改善作用 ,两者的改善程度相近。结论 :补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血再灌注后海马CA1区神经元迟发性损伤具有保护作用。

加味补阳还五汤对动脉硬化模型家兔血脂、CRP变化的影响

目的评价加味补阳还五汤对动脉硬化模型家兔血脂、CRP变化的影响。方法健康新西兰兔68只随机分为:正常对照组,高脂对照组、阿托伐他汀组、加味补阳还五汤组,共4组;除正常对照组外,其余新西兰兔采用高胆固醇饲料并免疫损伤诱发的动脉粥样硬化斑块模型,观察各组血脂和C-反应蛋白(CRP)变化并比较。结果对血脂的影响:高脂对照组与正常对照组比较,血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均升高,差异均有统计学意义(P<0.05);阿托伐他汀组及加味补阳还五汤组TC、LDL-C均明显低于高脂对照组(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)高于正常对照组和高脂对照组(P<0.05),阿托伐他汀组与加味补阳还五汤组比较差异无统计学意义(P>0.05);对CRP的影响:高脂对照组明显高于正常对照组(P<0.05),加味补阳还五汤、正常对照组、阿托伐他汀组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论加味补阳还五汤具有抑制动脉粥样硬化的作用,可能是通过调脂、抗炎作用来完成。

补阳还五汤对脑缺血大鼠碱性成纤维细胞生长因子的影响

目的通过观察补阳还五汤对碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响，探讨补阳还五汤抗脑缺血的作用机制。方法将85只大鼠（体重280～300g）随机分为正常对照组、假手术组、模型组、传统补阳还五汤饮片组和超微补阳还五汤饮片组，后4组又按术后1、3、5和7d分为亚组，每组5只。采用线栓法制备脑缺血大鼠模型。传统饮片和超微饮片组术后2h起每日灌服传统补阳还五汤或超微补阳还五汤2ml（按体表面积计算，相当于70kg成人用量的3倍），于术后不同时间点处死大鼠，取脑组织制备标本。用免疫组化方法观察脑组织bFGF阳性细胞变化；用酶联免疫吸附法（ELISA）检测脑组织bFGF蛋白含量。结果bFGF阳性细胞主要见于梗死灶周围，中心区仅见少量bFGF阳性细胞，在缺血对侧区未见bFGF阳性细胞；bFGF阳性细胞从1d开始增加，3d达高峰，7d减少明显；传统饮片组与超微饮片组缺血灶周围脑组织bFGF阳性细胞数在3、5和7d较模型组均明显增加，差异有统计学意义（P均〈0．05）。传统饮片与超微饮片组bFGF蛋白含量变化的规律与模型组基本一致，除1d外，在3、5和7d均显著高于模型组（P均〈0．05）。超微饮片组与传统饮片组比较，5d和7dbFGF阳性细胞数及蛋白含量差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论脑缺血可致脑组织中bFGF阳性细胞和bFGF蛋白含量增加；补阳还五汤能维持脑缺血后bFGF的高水平表达，这是其抗脑损伤的可能机制之一；补阳还五汤超微饮片较传统煎剂效果更佳。

补阳还五汤与高血压病气虚血瘀证“方证相关”的蛋白质组学研究

揭示补阳还五汤与高血压病气虚血瘀证"方证相关"的现代生物学基础,制作高血压病气虚血瘀证细胞模型。用补阳还五汤含药血清干预细胞模型,利用双向凝胶电泳(2-DE)及基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS/MS)技术筛选及鉴定差异表达的蛋白点。并对其进行生物学分析。结果高血压病气虚血瘀证组与健康对照组比较,差异蛋白质点有30个。其中,有16个蛋白上调,14个蛋白质下调。补阳还五汤组与高血压病气虚血瘀证组比较,差异蛋白质点有14个。其中,有9个蛋白上调,5个蛋白质下调。MALDI-TOF-MS/MS鉴定出:高血压病气虚血瘀证组与健康对照组差异蛋白点共有8个蛋白被成功鉴定出来。表达上调的蛋白有肽基脯氨酰异构酶A、肽基脯氨酸顺反异构酶A样1亚型、真核翻译起始因子5A-1 B亚型、微管蛋白beta-2C、CRA_b亚型、3-羟酰辅酶A脱氢酶2型异构体2。表达下调的蛋白有丙酮酸激酶同工酶M1亚型、抑制蛋白-1、抑制蛋白-1 1亚型、补阳还五汤组与高血压病气虚血瘀证组差异蛋白点共有3个蛋白被成功鉴定出来。表达上调的蛋白有丙酮酸激酶CRA_c亚型、热休克蛋白27;表达下调的蛋白有膜联蛋白A1,CRA_b亚型。这些蛋白多与促进或抑制细胞凋亡有关。说明高血压病气虚血瘀证存在着细胞凋亡,补阳还五汤可以纠正高血压病气虚血瘀证引起的细胞凋亡。这些差异蛋白可以作为高血压病气虚血瘀证的标志蛋白或补阳还五汤的作用靶点,抑制细胞凋亡可能是补阳还五汤与高血压病气虚血瘀证"方证相关"的现代生物学基础之一。

加味补阳还五汤对8Hz 130dB次声暴露下小鼠大脑过氧化水平及超微结构的影响

目的:观察加味补阳还五汤对8Hz 130dB次声暴露下小鼠大脑过氧化水平及超微结构的影响。方法:40只BALB/c小鼠分为空白对照组、次声对照组、次声加用药组(根据用药剂量的不同又分高、中、低剂量3个亚组),处理14d后测试其超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、丙二醛(MDA)含量,以及在电镜下观察其大脑皮质超微结构的变化。结果:次声对照组的SOD活力与正常对照组相比有明显降低,各用药组中的SOD活力较次声对照组有明显升高,其中以高剂量组最为明显;次声对照组的GSH-PX活力与正常对照组相比有明显升高,各用药组中的GSH-PX活力较次声对照组也有明显升高;次声对照组的MDA含量与正常对照组相比有明显升高,高、中剂量用药组中的MDA含量较次声对照组有明显降低。透射电镜观察次声对照组的大脑皮质的神经元周围可见小角质细胞水肿、增生;线粒体畸形明显,呈分叉、三角形,并可见空泡化;高尔基体中度扩张;毛细血管周围间隙明显,髓鞘板层排列紊乱,脂褐素增多明显。在用药组中上述损伤有所减轻。结论:8Hz 130dB次声暴露14d(2h/d)可引发小鼠大脑皮质的脂质过氧化,给小鼠造成一定的损伤。加味补阳还五汤可以通过提高小鼠体内GSH-PX和SOD的活性来清除体内的自由基,使MDA含量降低,减轻次声对机体作用后的不良反应。

补阳还五汤对脑水肿的钙拮抗作用

观察补阳还五汤（ＢＹＨＷＤ）对百日咳菌液致大鼠急性脑水肿时的钙拮抗作用。结果：脑水肿时脑含水量与脑组织钙含量的增加呈正相关（ｒ＝０．９１８７，Ｐ＜０．０１），ＢＹＨＷＤ使脑毛细血管周围星形胶质细胞突与神经元内线粒体的肿胀减轻，脑组织钙含量减少，脑组织匀浆丙二醛含量降低，超氧化物歧化酶活性升高。提示：ＢＹＨＷＤ可通过抑制氧自由基连锁反应，维持细胞内Ｃａ￣（２＋）稳态，减轻由胞浆Ｃａ￣（２＋）积聚引起的血脑屏障与脑细胞及其细胞器损伤。

补阳还五汤联合鞘内注射间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究

目的:探讨补阳还五汤联合鞘内注射大鼠间充质干细胞(rMSCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用。方法:将66只Wistar大鼠,随机分成模型组、假手术组、PBS对照组(简称对照组)、补阳还五汤组(简称中药组)、鞘内注射rMSCs组(简称移植组)和补阳还五汤联合鞘内注射rMSCs组(简称联合组)。造模后3天,对照组鞘内注射PBS液,中药组予以补阳还五汤灌胃30天,移植组鞘内注射rMSCs,联合组鞘内注射rMSCs同时给予补阳还五汤灌胃30天。治疗后第7、14、21、28天分别行BBB分级法检测神经功能恢复情况,HE染色法观察脊髓损伤病理改变和修复情况,应用免疫组化技术检测BrdU标记的rMSCs胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异烯醇化酶(NSE)表达情况。结果:成功制作了大鼠脊髓半横断损伤模型,移植组和联合组BBB分级法检测平均得分较模型组、对照组和中药组有显著提高(P<0.05),联合组在不同时间点的BBB平均得分都高于移植组。脊髓组织病理切片显示联合组较移植组组织水肿和炎性细胞浸润减轻更明显,胶质细胞增生更加活跃。双标免疫组化显示移植的rMSCs可迁移到宿主脊髓损伤处并存活,从第7天开始即有NSE和GFAP表达。联合组中GFAP、NSE阳性细胞数目均较移植组多(P<0.05)。结论:鞘内注射移植rMSCs对大鼠脊髓损伤具有修复作用,联合应用补阳还五汤有协同增效的效果,有利于大鼠脊髓功能的恢复。

补阳还五汤对中风后遗症气虚血瘀大鼠病证模型血常规及血液流变性的影响

目的:复制中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型,观察补阳还五汤对其血常规及血液流变性的影响。方法:用仪器分析法检测血常规,用LIANG-100型血液黏度计测定血液流变性指标。结果:①对血常规影响:与正常组比较,模型组和对照组白细胞显著升高(P<0.01);与模型组比较,高、中、低剂量组白细胞显著降低(P<0.01,P<0.05)。与正常组比较,模型组红细胞显著降低(P<0.01);与模型组比较,高、中、低剂量组红细胞显著升高(P<0.01,P<0.05)。与正常组比较,模型组和高、低剂量组血红蛋白显著降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组血红蛋白胞显著升高(P<0.01)。与正常组比较,模型组和高、低剂量组血小板显著升高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,高、中、低剂量组血红蛋白胞显著升高(P<0.01,P<0.05)。②对血液流变性的影响:与正常组比较,模型组各指标均显著升高(P<0.001～0.05);与模型组比较,除高剂量组对5 s-1、30 s-1切变率时的全血黏度影响无统计学意义(P>0.05)外,其余各项指标均显著降低(P<0.001～0.05)。对ADP诱导的大鼠血小板聚集功能的影响,与模型组比较,各剂量组均显著降低(P<0.001～0.05);中剂量组显著低于高剂量组(P<0.05)。结论:补阳还五汤可提高免疫机能,改善气虚血瘀和能量代谢,改善循环功能,并具有明显的活血化瘀作用,一定程度上反映了该方补气活血作用的作用机制。

灌服中药补阳还五汤的大鼠血清促进胚胎神经上皮细胞存活与分化的研究

为了观察灌服中药补阳还五汤的大鼠血清对胚胎神经上皮细胞生长分化的影响 ,在给 Wistar大鼠灌服中药后 ,麻醉后取血并分离血清 ;取孕 11d大鼠胚胎神经管上皮细胞 ,分别接种于含有补阳还五汤药物血清和对照鼠血清的培养基内 ,于培养后不同时间观察细胞的生长状况 ,测量细胞突起长度 ,并用免疫组化技术检测胚胎神经上皮细胞的分化状况。结果显示 :药物血清组神经上皮细胞的生长明显优于对照组 ,细胞突起长度也大于对照组 ;免疫组化反应显示 ,药物血清组神经元及神经胶质细胞数量均多于对照组。结论 :灌服补阳还五汤的鼠血清既可促进胚胎神经上皮细胞的生长也可诱导其分化。

补阳还五汤治疗脑梗塞的疗效及其机制探讨

目的：探讨补阳还五汤治疗脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法：应用补阳还五汤治疗３６例脑梗塞患者（治疗组），并在神经功能的恢复情况及血浆内皮素（ＥＴ）、脂质过氧化物（ＬＰＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和全血谷胱甘肽过氧化酶（ＧＳＨＰｘ）的含量方面分别与对照组３０例患者以及２０例正常人进行比较。结果：治疗组总有效率为８８．９％，对照组为６０．０％，２组比较有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。脑梗塞患者ＥＴ和ＬＰＯ〔（分别为（１５４．６１±３２．５７）ｎｇ／Ｌ和（８．０７±０．８１）μｍｏｌ／Ｌ〕明显高于正常人组〔分别为（１０６．９１±１６．５０）ｎｇ／Ｌ和（５．４６±０．４２）μｍｏｌ／Ｌ〕，Ｐ均＜０．０１；而ＳＯＤ和ＧＳＨＰｘ〔分别为（１５９．４５±３８．３３）μｇ／Ｌ和（１５５．８４±４２．７１）Ｕ〕则明显低于正常人组〔分别为（２１０．３２±４５．２７）μｇ／Ｌ和（２１５．６７５±５３．８１）Ｕ〕，Ｐ均＜０．０１。治疗组以补阳还五汤治疗后，ＥＴ〔（１１８．５５±３０．４１）ｎｇ／Ｌ〕、ＬＰＯ〔（６．００±０．６９）μｍｏｌ／Ｌ〕均明显降低（Ｐ均＜０．０１）；而ＳＯＤ〔（１９３．７５±４１．１６）μｇ／Ｌ?

补阳还五汤质量标准测定及对中风后遗症“气虚血瘀”大鼠病证模型血常规的影响

目的：研究补阳还五汤水提物中黄芪甲苷、阿魏酸舍量的测定，作为该方的质量控制标准；复制中风后遗症“气虚血瘀”大鼠模型，观察补阳还五汤对其血常规的影响，从而探讨补阳还五汤在治疗中风后遗症方面的作用机制。方法：补阳还五汤采用传统煎法，黄芪甲苷采用高效液相色谱-蒸发光散射检测。阿魏酸采用高效液相色谱法。用仪器分析法检测血常规。结果：黄茂甲苷在0．24～6．00ug与峰面积积分值呈良好线性关系（r=0．9999），平均回收率100．79％。阿魏酸在0．08—0．24ug与峰面积积分值呈良好线性关系（r=0．9999），平均回收率101．76％。对血常规有影响，可降低白细胞，升高红细胞和血红蛋白，降低过多血小板数目。结论：补阳还五汤可提高免疫机能，改善气虚血瘀和能量代谢，改善循环功能，黄芪甲苷、阿魏酸的含量，可作为该方的质量控制标准。

补阳还五汤挥发性成分指纹图谱的研究

目的：建立补阳还五汤挥发性成分的气相色谱-质谱联用（GC-MS）指纹图谱。方法：色谱柱：5HP-MS，载气：He，流速：1.0 mL·min-1，进样量：1μL，分流比：1：20。质谱条件：电子轰击（EI）离子源，辅助线温度：280℃，离子源温度：230℃，四级杆温度：150℃，质量扫描范围：m/z 50-550。通过Chemstation和Nist 05a谱库检索认定共有峰。结果：采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件（2004 A版）对11批样品的指纹图谱进行了匹配，确定并鉴定了9个共有峰，指纹图谱的相似度均在0.93以上。结论：本文建立的GC-MS指纹图谱特征性及专属性强，可以作为补阳还五汤挥发性成分质量控制的稳定方法。

中西医结合治疗椎管内肿瘤30例

目的 :观察中西医结合治疗椎管内肿瘤的疗效。 方法 :采用常规手术 ,术后配合内服中药、针灸、按摩导引等中医药疗法治疗良性椎管内肿瘤 30例。 结果 :术后随访 3个月～ 6年 ,平均 3 4年。治愈 9例 ,显效 16例 ,有效 3例 ,无效 2例。结论 :手术配合中医药疗法可提高患者的康复水平。中西医结合治疗椎管内肿瘤可取得良好疗效。

补阳还五汤冻干粉对HFL1细胞HMGB1/RAGE/CDc42信号通路的干预作用

目的观察补阳还五汤冻干粉对高迁移率族蛋白B1(High Mobility Group box-1 Protein,HMGB1)诱导的HFL1细胞中晚期糖基化终产物受体(receptor of advanced glycation end-product,RAGE)/细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,CDc42)信号通路的影响。方法采用MTT法检测补阳还五汤冻干粉对A549、HFL1增殖的影响;采用Western blot法检测细胞总蛋白中CDc42的表达,采用ELISA法检测细胞外RAGE、TNF-α的表达。结果补阳还五汤冻干粉对HFL1细胞的IC50为11%。在HFL1细胞中,5%、10%、15%冻干粉均能下调CDc42、RAGE、TNF-α的表达,以5%冻干粉组下调最明显。结论补阳还五汤冻干粉可通过对HFL1细胞中HMGB1/RAGE/CDc42信号通路的干预从而调节肺纤维化的发生发展。

补阳还五汤及其有效部位组方对沙土鼠脑缺血后反应性星形胶质细胞活化的影响

目的 比较研究补阳还五汤及其有效部位组方对脑缺血后反应性星形胶质细胞活化的影响。方法 采用沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型 ,分别腹腔注射补阳还五汤及其有效部位组方 ,于不同时间取脑组织 ,以免疫组化方法测定胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 缺血 1 5min后各组脑组织无GFAP表达。缺血 1 5min再灌注 2 4h后 ,脑组织GFAP表达达高峰 ,主要在海马区表达 ,补阳还五汤及其有效部位组方可使GFAP表达减弱 ,两者作用相近。缺血 1 5min再灌注 48h后 ,GFAP表达有所减弱 ,而补阳还五汤及其有效部位方组GFAP表达则较模型组有所增强 ,两者作用相近。结论 星形胶质细胞活化主要在脑缺血后再灌注期 ,在再灌注早期 ,补阳还五汤及其有效部位组方通过对抗缺血性脑损伤而改善星形胶质细胞功能的紊乱 ;在再灌注后期 ,则通过促进星形细胞的活化 ,利于损伤的修复。

补阳还五汤对代谢综合征大鼠海马IR、IRS-1mRNA表达的研究

目的:研究补阳还五汤对代谢综合征大鼠海马IR、IRS-1mRNA表达的影响。方法:以高脂高糖高盐饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)建立代谢综合征大鼠模型,随机分为模型组、中药补阳还五汤组、西药罗格列酮组,另设正常对照组。给予相应受试药物,周期8 w。实验结束时,腹主动脉采血,取海马组织。检测各组血糖、血脂、双抗体夹心ELISA法测定血清CRP,实时荧光定量PCR技术检测海马IR、IRS-1mRNA的表达水平。结果:补阳还五汤组大鼠的血糖、血脂、血清CRP含量较模型组均显著降低,海马IR、IRS-1mRNA的表达水平较模型组均显著升高(P<0.05)。结论:降低血糖、血脂,降低血清CRP,升高海马IR、IRS-1mRNA的表达,减轻中枢胰岛素抵抗可能是补阳还五汤干预代谢综合征认知功能障碍的部分作用机制。

补阳还五汤对沙土鼠脑缺血再灌注损伤后血清炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的影响

目的:探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注损伤后炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达的影响。方法:采用Kirino蒙古沙土鼠双侧颈总动脉夹闭脑缺血模型,缺血15min后进行再灌注;于再灌注48h后,测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α的含量。结果:补阳还五汤组的IL-1β、IL-6、TNF-α均含量明显低于模型组(P <0.01)和标准对照组(P <0.01),但补阳还五汤组和标准对照组均显著高于假手术组(P <0.01)。结论:补阳还五汤可拮抗脑缺血再灌注损伤后的炎性细胞因子,因而减轻脑缺血再灌注引起的损伤。

补阳还五汤对大鼠内源性神经干细胞GFAP、SYN表达的影响

目的:研究补阳还五汤对大鼠内源性神经干细胞GFAP、SYN表达的影响。方法:将240只雄性大鼠随机分为模型组、假手术组、补阳还五汤治疗组、正常对照组,采用线栓法制作脑梗死模型,分别给予不同处理,于术后1、3、7、14、21、28天6个时间点分批处死大鼠。采用免疫组织化学方法检测各组大鼠梗死区域GFAP、SYN标记的阳性细胞情况。结果:模型组大鼠脑缺血区域相对应区域可见大量的GFAP、SYN标记阳性细胞,差异均无明显统计学意义(P>0.05)。与假手术组相比,模型组和补阳还五汤治疗组大鼠GFAP标记阳性细胞数目增多,SYN标记阳性细胞数目减少,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,补阳还五汤治疗组大鼠GFAP、SYN标记阳性细胞数目均增多,第14天时GFAP、SYN标记阳性细胞数目达到高峰,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:补阳还五汤是治疗脑梗死恢复期的中药经验方,在改善神经功能缺损方面有显著疗效。补阳还五汤能促进脑梗死后内源性神经干细胞增殖分化为神经元、星形胶质细胞等神经组织的后备细胞,并能增强神经突触之间的联系,使神经元发挥正常的兴奋性,促进神经功能恢复。