基于KAS-seq测序的四妙勇安汤改良及其促进糖尿病足小鼠创面愈合情况的观察

目的 基于现代科学技术对四妙勇安汤进行改良,验证其促进糖尿病足伤口愈合的效果。方法 采用乙氧二羟丁酮辅助的单链DNA测序(kethoxal-assisted single stranded DNA sequencing, KAS-seq)技术检测糖尿病足患者创面组织和正常创面组织,筛选糖尿病足相关的关键基因,并结合网络药理学,根据这些关键基因寻找有针对性的中药从而对四妙勇安汤进行改良,最后通过糖尿病足动物模型验证改良方的治疗效果。结果 通过临床样本测序分析得到CREB1、GRID2、PIK3R3、DRD2、ADORA1、TNFSF11、EDNRB、HTR1B 8个关键基因,靶向到黄柏、苍术、地黄和半夏4味中药配伍入原方。在灌胃干预第7天时改良方组(S+)小鼠伤口愈合效率显著高于对照组(Control)(P<0.05),第12天时S+组伤口愈合率显著高于原方组(S)(P<0.05)。改良方中药靶点在原方基础上更多富集到了神经系统、缺氧和血液循环调节相关通路中。结论 改良方与经方相比具有更好地促进糖尿病足伤口愈合的效果,相关机制可能与调节炎性反应、改善周围神经病变和促进伤口愈合等通路有关,同时也为中药方剂的临床加减应用提供了一种新方法和现代科学理论依据。

加味四妙勇安汤治疗肢体动脉硬化闭塞症急性期疗效观察

目的观察加味四妙勇安汤治疗肢体动脉硬化闭塞症急性期的临床疗效及对超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法将60例肢体动脉硬化闭塞症患者随机分为治疗组30例和对照组30例。2组均给予基础治疗,治疗组同时加服加味四妙勇安汤,2组均以1个月为1个疗程,共治疗3个疗程。结果治疗组总有效率为93%,优于对照组的73%(P<0.05);治疗后2组炎性因子hs-CRP、IL-6水平均较治疗前明显下降(P均<0.01),且治疗组明显优于对照组(P<0.05);治疗后2组踝肱指数较治疗前明显升高(P均<0.01),且治疗组明显高于对照组(P<0.01)。结论加味四妙勇安汤治疗下肢动脉硬化闭塞症急性期疗效显著,可有效提高患者的踝肱指数,其作用机制可能与抗炎作用有关。

加味四妙勇安汤治疗糖尿病足下肢溃疡疗效观察

目的:观察加味四妙勇安汤治疗糖尿病足下肢溃疡的疗效及其对红细胞沉降率(ESR)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法:将86例糖尿病足患者随机分为观察组和对照组,每组43例,两组均给予控制血糖、控制感染、改善下肢循环及常规伤口换药治疗;在此基础上,观察组加服加味四妙勇安汤,对照组加服西洛他唑片。比较两组疗效及治疗前后ESR、hs-CRP、MMP-9水平差异。结果:观察组总显效率(81.40%)明显高于对照组(60.47%),差异有统计学意义(P<0.05),但观察组有效率(93.02%)与对照组(86.05%)差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,两组治疗4周后和治疗8周后ESR、hs-CRP水平均下降,治疗8周后下降更明显,差异有统计学意义(P<0.01);治疗前和治疗4周后,观察组与对照组ESR、hs-CRP水平的组间差异无统计学意义(P>0.05),治疗8周,观察组与对照组ESR水平差异无统计学意义(P>0.05),但观察组hs-CRP水平下降较对照组更明显(P<0.01)。与治疗前比较,对照组治疗4周后MMP-9水平无明显下降(P>0.05),治疗8周后显著下降(P<0.01);观察组治疗4周后和治疗8周后MMP-9水平均下降(P均<0.01),治疗8周后较治疗4周后下降更明显(P<0.05)。治疗前,观察组与对照组MMP-9水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗4周后和治疗8周后,观察组较对照组明显下降(P<0.05)。治疗期间两组均未出现严重不良反应。结论:加味四妙勇安汤治疗糖尿病足临床疗效优于西医治疗。

加味四妙勇安汤联合前列腺素E1治疗下肢动脉硬化闭塞症的临床疗效

目的:观察加味四妙勇安汤联合前列腺素E1治疗下肢动脉硬化闭塞症(ASO)的临床疗效。方法:120例双侧下肢ASO患者,以分层随机法分为两组,每组各60例。对照组用前列腺素E1 20μg静脉滴注,1次/天;治疗组在对照组治疗基础上,另口服加味四妙勇安汤,1剂/天,早晚各1次。30天为1个疗程,共4个疗程。观察两组的临床疗效,并测定治疗前后白介素-17A(IL-17A)、全血表观黏度、血浆黏度、血浆纤维蛋白原(FIB)水平变化。结果:治疗组治疗后总有效率优于对照组(96.67%vs 68.33%,P<0.05)。两组治疗后IL-17A、全血表观黏度、血浆黏度和FIB水平(除对照组外)与治疗前比较,均有显著下降(P<0.05),治疗组较对照组更低(P<0.05)。结论:加味四妙勇安汤联合前列腺素E1治疗下肢ASO疗效明显,能有效降低炎性反应,改善患者血液流变性。

四妙勇安汤调控滋养血管网重建稳定ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化易损斑块的实验研究

观察四妙勇安汤干预AS易损斑块的效应,并以滋养血管(Vasa Vasorum,VV)新生为切入点,进一步探讨其起效的机制和靶点。方法:将雄性Apo E-/-小鼠随机分模型组、辛伐他汀组、四妙勇安汤组,采用添加1.1%L-蛋氨酸的高脂饲料喂养8周,建立AS易损斑块模型,并以C57BL/6小鼠作为对照。连续给药8周后,采用HE染色观察斑块的病理形态;采用免疫组化法观察斑块内与主动脉外膜VV密度以及斑块内巨噬细胞的聚集情况;检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C等血脂变化;采用Western blot技术检测HIF-1α-Apelin/APJ信号通路的关键节点蛋白。四妙勇安汤能够显著改善小鼠主动脉斑块病理形态,减小斑块面积及斑块与管腔面积比,增加最小纤维帽厚度以稳定斑块,且四妙勇安汤对纤维帽厚度的改善明显优于辛伐他汀;可有效抑制斑块内与血管外膜VV新生,降低斑块内巨噬细胞含量。四妙勇安汤可有效降低小鼠血清TC、TG、LDL-C水平,但对血清HDL-C水平无明显的改善作用。四妙勇安汤可降低HIF-1α蛋白表达水平,且其作用优于辛伐他汀;下调主动脉Apelin蛋白、APJ蛋白表达水平;显著降低Phospho-MEK1/2(Ser217/221)、Phospho-p44/42 MAPK(Erk1/2)(Thr202/Tyr204)、Phospho-p70 S6 Kinase(Thr421/Ser424)蛋白表达水平。结论:四妙勇安汤可通过调节HIF-1α-Apelin/APJ信号通路,抑制VV新生,从而稳定AS易损斑块。

基于Wnt/β-catenin信号通路的凉血散瘀法对糖尿病溃疡大鼠模型的干预作用

目的:观察凉血散瘀中药对糖尿病溃疡大鼠的干预作用,并从Wnt/β-catenin通路角度探讨其作用机制。方法:Wistar大鼠采用高脂高糖饲料联合小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法制备糖尿病模型。分别取正常对照组与糖尿病组大鼠制作溃疡模型,并分为溃疡对照(CU)组、糖尿病溃疡(DU)组、四妙勇安汤组(DU-四妙组)、愈疡灵组(DU-愈疡灵组)、四妙勇安汤+愈疡灵组(DU-四妙+愈疡灵组),每组各15只。观察造模后第3、7、14 d各组创面愈合情况和织形态结构的变化的变化,采用ELISA法、RT-PCR法检测创面组织β-catenin、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)蛋白及m RNA的表达水平。结果:DU组大鼠与CU组大鼠相比,第3、7、14 d的创面愈合率明显降低[(5.21±0.94)%vs(20.87±1.39)%,(31.70±1.21)%vs (49.99±1.58)%,(62.20±1.37)%vs (91.60±1.58)%, P <0.05];创面组织中β-catenin蛋白表达[(5.14±0.56) vs (9.04±0.65),(5.83±0.43) vs (10.08±0.35),(6.55±0.58) vs (12.77±0.30), P <0.05]及mRNA表达[(4.40±0.35) vs (6.92±0.16),(5.20±0.49) vs (7.12±0.48),(6.06±0.47) vs (9.24±0.55), P <0.05]均较低,而GSK-3β蛋白表达[(15.52±1.00) vs (7.04±0.53),(14.58±0.45) vs (6.05±0.23),(13.37±0.62) vs (4.49±0.37), P <0.05]及mRNA表达[(7.07±0.29) vs (3.55±0.32),(6.64±0.47) vs (3.00±0.28),(5.68±0.46) vs (1.98±0.19), P <0.05]则较高。与DU组大鼠相比,各治疗组大鼠各时间点的创面愈合率、创面组织中β-catenin蛋白及mRNA的表达水平均升高,而GSK-3β蛋白及mRNA的表达水平则降低,且治疗组中,以DU-四妙+愈疡灵组改善最明显。结论:具有凉血散瘀作用的四妙勇安汤及愈疡灵软膏均可通过干预Wnt/β-catenint通路的表达促进DU大鼠创面愈合,两者同用的效果优于单用其中一种。

加味四妙散联合肌炎灵胶囊治疗多发性肌炎疗效及对血清炎性因子水平的影响

目的探讨加味四妙散联合肌炎灵胶囊治疗多发性肌炎疗效及对患者血清炎性因子水平的影响。方法将62例多发性肌炎患者随机分为2组,对照组31例于西医治疗基础上给予肌炎灵胶囊治疗,观察组31例在对照组治疗基础上给予加味四妙散治疗,观察2组治疗前后中医证候积分、血清炎性因子水平变化情况,统计2组疗效及不良反应发生情况。结果 2组治疗后中医证候评分均显著降低(P均<0.05),且观察组中医证候评分显著低于对照组(P<0.05);2组治疗后前列腺素E_2(PGE_2)、白三烯E_4(LTE_4)、前列腺素D_2(PGD_2)水平均低于治疗前(P均<0.05),且观察组PGE_2、LTE_4、PGD_2水平均明显低于对照组(P均<0.05);2组治疗后谷草转氨酶(AST)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)水平均明显低于治疗前(P均<0.05),且观察组AST、CK、LDH水平均明显低于对照组(P均<0.05);观察组治疗后总有效率显著高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论加味四妙散联合肌炎灵胶囊治疗多发性肌炎疗效较佳,可显著减轻中医证候,降低炎性因子及血清肌酶水平,且临床应用安全。

毛细管区带电泳法测定四妙勇安汤中绿原酸、阿魏酸、甘草酸的含量

目的:建立用毛细管区带电泳法同时测定四妙勇安汤中绿原酸、阿魏酸、甘草酸含量的分析方法。方法:以对氨基苯甲酸为内标物,以50mmol·L^(-1)硼酸钠、12.5mmol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷(pH 9.95)为缓冲溶液;未涂敷熔融石英毛细管(57 cm×50μm),有效柱长为50cm;检测波长为254nm;138kPa压力进样5s;运行电压为22kV;柱温为25℃;运行时间为20 min。结果:绿原酸、阿魏酸、甘草酸的浓度分别在0.09～1.50mg·mL^(-1)、0.01～0.16mg·mL^(-1)、0.04～0.66mg·mL^(-1)范围内线性关系良好,相关系数分别为0.9994,0.9994,0.9993;平均加样回收率分别为97.8%,98.1%,96.3%。结论:本法简便、快速、重现性好。

中西医结合治疗白细胞碎裂性血管炎1例

白细胞碎裂性血管炎(leukocytoclastic vasculitis,LV)是一种由多种原因引起的累及皮肤的血管炎症病变。临床上许多疾病均属于广义LV范畴,而狭义的LV即超敏性血管炎(hypersensitivity vasculitis,HV)多由感染和/或药物引起,临床以多形性皮疹为主要表现,系统性损害少,预后好。在该病的治疗方面,西医除病因及基础病治疗外,多应用抗组胺药、羟氯喹、秋水仙碱、雷公藤多苷和对症处理等。中医方面,该病例属于"湿毒肿"范畴,辨证为"气血失和、热毒蕴结",治疗当以调和气血,清热解毒凉血为法,方选三两三合四妙勇安汤加减。文章介绍了1例应用调气和血、清热解毒凉血法联合口服小剂量盐酸西替利嗪对LV有效的个案。

加味四逆汤治疗结直肠癌患者化疗后血小板减少的临床研究

目的:观察加味四逆汤治疗结直肠癌患者化疗后血小板减少的临床疗效,并探讨其升血小板的作用机制。方法:将60例结直肠癌化疗后血小板减少的患者随机分为治疗组和对照组,每组各30例,治疗组予加味四逆汤治疗,对照组予重组人白介素-11(rhIL-11)治疗,比较2组患者治疗前后PLT、WBC、NF、HB及血清骨髓造血相关调控因子(IL-3、IL-6、IL-10、IL-11、TPO)的测定结果。结果:治疗组治疗后血小板水平明显高于治疗前,与对照组相比,血小板上升趋势无明显差异;治疗组WBC、NF、HB治疗前后无明显差异;治疗组治疗后IL-6浓度显著增加;治疗组不良反应明显少于对照组,耐受性显著提高。结论:1.加味四逆汤可显著提升血小板水平,且疗效不劣于IL-11,且安全性较IL-11高;2.加味四逆汤可以通过调控IL-6等的水平来发挥升血小板的作用。

四妙勇安汤加味合血塞通治疗小儿钩端螺旋体脑动脉炎疗效分析

目的 :探讨四妙勇安汤加味合血塞通注射液对钩端螺旋体脑动脉炎的临床疗效。方法 :以入院先后随机分组对照 ,治疗组口服四妙勇安汤加味 ,静滴血塞通 ;对照组肌注青霉素 ,静滴维脑路通加脑细胞激活剂。结果 :治疗组治愈率 65.2 2 % ,总有效率 95.65% ;对照组治愈率 37.5% ,总有效率 84 .37%。两组治愈率、总有效率比较有显著性差异 ( P<0 .0 5) ,治疗组治疗后血液流变学各项指标明显下降 ,而对照组仅有部分改善。结论 :四妙勇安汤加味联用血塞通注射液治疗钩端螺旋体脑动脉炎临床效果显著 。

高祥福运用四妙勇安汤治疗过敏性紫癜经验

[目的]总结高祥福教授治疗过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)的经验。[方法]通过跟师临证,收集整理高师治疗HSP的医案,阐述其对HSP病因病机的认识,总结高师常用的方药配伍及加减化裁特色,并举验案一则以佐证。[结果]高师认为HSP病机在于感受外邪,邪热入里,脾气亏虚,血热难散,瘀于皮肤而发为斑,是血热内蕴夹杂气虚血瘀之证。治疗在运用银花、玄参等药清热活血,生地、甘草、黄芪等药祛瘀补气的基础上,同时顾及兼证:出现脾肾阳虚的水肿时,应加大黄芪用量,另加车前草、泽泻;若兼有热毒内扰的腹痛,加用蒲公英、丹参、炒白芍、元胡;若出现胃阴不足的口渴,加用麦冬;若出现关节疼痛者,可加用桑枝、姜黄。所举验案中患者辨证为血热内蕴、气虚血瘀,经过四妙勇安汤清热活血祛瘀治疗之后,皮肤四肢瘀斑消退,复查尿常规已正常,可谓效如桴鼓。[结论]高师根据HSP外邪、本虚、瘀血三方面的病因病机,拟定攻邪、补虚、活血化瘀的治法方药,治疗卓有成效,值得深入学习和借鉴。

四妙勇安汤现代文献可视化研究及处方配伍分析

目的分析四妙勇安汤的研究热点、研究趋势和处方配伍规律。方法纳入中国知识资源总库(CNKI)、万方数据知识服务平台V2.0(万方数据)、维普中文期刊服务平台(VIP)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、Pubmed、Web of Science(WOS)自建库至2022年12月31日的四妙勇安汤相关文献为研究对象,应用CiteSpace软件进行可视化分析,统计具体频次;以2006~2022年的四妙勇安汤验案建立处方数据库,形成药物共现复杂网络,并进行分析。结果共纳入文献1086篇,医学院校及其附属医院是研究主力,血栓闭塞性脉管炎、糖尿病足、冠心病、痛风性关节炎、类风湿关节炎是四妙勇安汤的主治病种,四妙勇安汤及其加减方对相关疾病的治疗是研究重点,基础研究主要关注该方的抗动脉粥样硬化相关机制。该方常配伍黄芪、地黄、赤芍、苍术、黄柏等中药。结论四妙勇安汤是中医研究的热点方剂之一,其临床适应证的拓展和处方用药配伍有一定规律可循,其药理作用机制还需深入研究。

四妙勇安汤内服外用对下肢动脉硬化闭塞症的疗效分析

目的分析下肢动脉硬化闭塞症应用四妙勇安汤内服外用治疗的效果。方法选择本院2016年3月至2018年7月诊治的70例下肢动脉硬化闭塞症患者,随机分成研究组(35例)及对照组(35例),对照组使用前列地尔治疗,研究组予以四妙勇安汤内服外用治疗,比较两组治疗效果。结果研究组血浆粘度(1.38±0.26)mPa·s、全血高切粘度(3.90±1.06)mPa·s、全血低切粘度(7.83±1.41)mPa·s、Fib(7.81±1.08)g/L,优于对照组(P<0.05);研究组IL-1(0.41±0.12)ng/L、TNF-α(62.03±7.04)mol/ml、IL-6(1.81±0.54)ng/L,低于对照组(P<0.05);研究组足背动脉峰值流速(41.53±9.15)cm/s、血流量(30.36±5.38)ml/min、血管内径(2.36±0.33)mm、TBI(0.62±0.17)、ABI(0.98±0.17),优于对照组(P<0.05)。结论四妙勇安汤内服外用在下肢动脉硬化闭塞症中的治疗效果显著,可明显改善血流动力学,减轻炎症反应,提升足背动脉指标。

四妙勇安汤对动脉粥样硬化模型兔自噬相关因子的影响

目的:考察四妙勇安汤对新西兰动脉粥样硬化家兔血脂生化指标及自噬相关因子Atg5、Beclin1、mTOR mRNA表达的影响,初步阐明其抗AS的作用机制。方法:将雄性新西兰兔随机分为正常对照组、模型组、四妙勇安汤小、中、大剂量组和辛伐他汀组,每组6只。除正常对照组外,其他各组均建立AS模型,造模后连续给药6周,检测血清中TG、TC、LDL-C、HDL-C的含量;HE染色观察主动脉形态学变化;荧光定量PCR法检测主动脉中自噬相关因子Atg5、Beclin1和mTOR的mRNA表达水平。结果:与正常对照组相比,模型组TG、TC和LDL-C的表达升高,HDL-C表达降低;诱导了Atg5mRNA及Beclin1mRNA表达,抑制了mTOR mRNA的表达。与模型组相比,四妙勇安汤各剂量组和辛伐他汀组降低了TG、TC和LDL-C的表达,升高了HDL-C的表达;进一步诱导了Atg5mRNA及Beclin1mRNA表达,抑制了mTOR mRNA表达。结论:四妙勇安汤能够抑制家兔AS的形成,推测与其诱导自噬相关因子Atg5、Beclin1的表达,抑制mTOR的表达相关,这可能是四妙勇安汤抗AS的作用机制之一。

加味四妙方治疗湿热浊瘀型慢性尿酸性肾病的临床观察

目的评价加味四妙汤治疗湿热内蕴型慢性尿酸性肾病的临床疗效。方法 70例慢性尿酸性肾病患者,随机分为2组。两组疗程均为3个月。观察肾功能[肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)]、C反应蛋白(CRP)、血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、尿微量白蛋白/尿肌酐(U-MA/U-Cr)、尿β2微球蛋白(Uβ2-MG)、尿沉渣红细胞计数的变化以及中医临床征候表现。结果与对照组比较,加味四妙方组总有效率提高,组间差异显著(P<0.05)。在改善血Scr、UA、BUN、CRP、T、E2以及降低U-MA、Uβ2-MG和尿沉渣红细胞计数方面,加味四妙方组均优于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论加味四妙汤联合基础治疗湿热浊瘀型慢性尿酸性肾病疗效显著。