基于中性粒细胞胞外诱捕网途径探讨胃黏膜肠上皮化生的发生机制及中药预测研究

目的探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)对胃黏膜肠上皮化生(Intestinal metaplasia,IM)的作用机制及治疗靶点,为中医药防治IM提供新思路和新方向。方法从公共数据库下载IM及NETs相关数据集,通过免疫浸润分析、差异分析及基因相关性分析获得IM与NETs共表达的关键基因集;采用功能富集分析、蛋白互作网络、分子对接技术及实验验证等方法进一步阐述IM及NETs的相关性;最后将获得的关键基因与Coremine Medical平台相互映射,预测中医治疗IM的有效中药和治法。结果共筛选出6个IM与NETs形成相关的共表达的差异基因,分别为THBD、HDAC9、FGA、AQP9、DECR1和PIK3CD,这些基因与NETs的3个标记性蛋白(NE、PADI4、MPO)存在不同程度的相关性,其功能主要富集在呼吸爆发与防御反应、纤维蛋白溶解等生物学过程上;中药预测共映射出中医治疗IM的中药112味,按照功效可归为34类,其中清热解毒类中药出现频次最高,其次为活血化瘀药、温里药、补气药等。结论在IM的病理发生及发展过程中存在NETs,靶标基因NE和THBD可能存在相互关联作用,共同通过NETs通路参与IM进展;健脾化瘀解毒法是中医治疗IM的核心治法,其可能通过抑制NETs的形成,从而减缓IM的发展进程。

健脾化瘀法防治慢性萎缩性胃炎“炎-癌”转化的系统评价及网络药理学研究

目的系统评价健脾化瘀法治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃癌前病变(GPL)的临床有效性及安全性;同时运用网络药理学预测国医大师周岱翰教授健脾化瘀法验方理中消痞方防治胃“炎-癌”转化的效应物质基础和分子机制。方法检索中国知网(CNKI)、万方数据库(Wangfang)、维普中文期刊(VIP)、中国生物医学文献数据库(SinoMed)、PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of Science等数据库,筛选各数据库建库至2023年3月关于健脾化瘀法治疗CAG、GPL的随机对照临床试验,采用RevMan 5.4进行系统评价,利用Stata 17.0软件进行Egger检测评估发表偏倚;运用TCMSP、TCMIP及GeneCards等数据库挖掘理中消痞方的主要活性成分,筛选CAG、GPL的疾病靶点;应用Cytoscape软件构建药物-活性成分-靶点互作网络;String平台构建共同靶点蛋白互作网络(PPI);应用Metascape数据库对共同靶点进行基因本体(GO)功能分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;运用Autoduck Vina软件对理中消痞方的活性成分与核心靶点进行验证。结果共纳入13篇文献,涉及1510例患者。Meta分析结果提示,与西医常规治疗相比,健脾化瘀法可显著提高CAG、GPL患者临床疗效[RR=1.22,95%CI(1.16,1.29),P<0.00001]、胃镜疗效[RR=1.49,95%CI(1.10,2.01),P=0.010]及病理疗效[RR=1.33,95%CI(1.06,1.66),P=0.01],改善CAG、GPL患者胃黏膜萎缩[RR=1.42,95%CI(1.31,1.54),P<0.00001]、肠上皮化生[RR=1.84,95%CI(1.42,2.38),P<0.00001]、异型增生[RR=2.87,95%CI(1.31,6.24),P=0.008],且安全性较好。纳入文献不存在发表偏倚;网络药理学结果提示,理中消痞方10味中药包含活性成分189个,治疗CAG、GPL的潜在作用靶点128个,涉及的核心成分有槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇和豆甾醇等,核心作用靶点为JUN、TP53、HSP90AA1、MAPK3、MAPK1、MYC、MAPK13;GO功能富集共筛出生物学过程1143条、细胞组成39条、分子功能105条,交集靶点主要涉及受体配体活性、细胞迁移运动和细胞内蛋白质合成等。KEGG富集筛得MAPK信号通路、HIF-1信号通路和TNF信号通路等信号通路63条;分子对接表明核心成分与核心靶点结合活性较好。结论健脾化瘀法治疗CAG及GPL的临床疗效确切,安全性较好。健脾化瘀法验方理中消痞方治疗CAG、GPL,阻断胃“炎-癌”转化的机制可能与其调控炎症、缺氧耐受、免疫和细胞凋亡有关。

网络药理学联合基因表达数据库芯片分析及分子对接技术探讨健脾清化化瘀汤治疗胃癌前病变的潜在机制

目的基于网络药理学联合基因表达数据库(GEO)芯片分析及分子对接技术探讨健脾清化化瘀汤治疗胃癌前病变(PLGC)的成分靶点及信号通路,预测其潜在作用机制。方法利用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及本草组鉴数据库(HERB)搜集健脾清化化瘀汤中14味药物的活性成分和靶点。通过GEO数据库中的GSE55696基因芯片获取差异表达基因,利用人类孟德尔遗传在线数据库(OMIM)、Dis Ge Net、Gene Cards疾病数据库获取PLGC的相关疾病靶点,运用R软件获取健脾清化化瘀汤治疗PLGC的关键靶点。通过R语言对关键靶点进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组的百科全书(KEGG)通路富集分析,利用蛋白互作(STRING)数据库及Cytoscape3.9.1软件绘制关键靶点的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,筛选出核心靶点,利用Cytoscape3.9.1构建健脾清化化瘀汤与PLGC的“活性成分-关键靶点”网络,筛选出核心成分,最后将核心成分与核心靶点进行分子对接,探索蛋白与分子间的亲和性。结果共获得健脾清化化瘀汤226个活性成分,对应416个药物靶点;获得PLGC差异表达基因1673个,疾病数据库获得相关靶点1302个;药物与疾病交集基因149个;GO功能富集分析得到2802个条目,KEGG通路富集分析得到161条相关通路,主要涉及糖尿病并发症晚期糖基化终末产物/AGEs受体(AGE-RAGE)信号通路与癌症相关信号通路;筛选得到核心活性成分槲皮素、木犀草素等,核心靶点TP53、JUN、AKT1等;分子对接结果证实核心成分与核心靶点之间有较好的结合活性。结论健脾清化化瘀汤可能通过参与多条信号通路作用于多成分、多靶点,从而发挥治疗PLGC的效用。

自拟益气健脾解毒化瘀方联合艾曲泊帕治疗恶性肿瘤化疗相关性血小板减少症的临床效果

目的 探讨自拟益气健脾解毒化瘀方联合艾曲泊帕治疗恶性肿瘤化疗相关性血小板减少症的临床效果。方法 选取2018年1月—2022年4月收治的78例恶性肿瘤化疗相关性血小板减少症作为研究对象,按照治疗方法分为观察组(自拟益气健脾解毒化瘀方联合艾曲泊帕治疗)和对照组(艾曲泊帕治疗),每组39例。观察2组治疗后的临床效果,并比较治疗前后症状积分、血清炎性因子[白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、细胞因子[血小板第4因子(PF4)、血小板生成素(TPO)、血管性血友病因子(vWF)]及凝血功能指标[血小板计数(PLT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)]。结果 治疗后,观察组临床总有效率为94.87%(37/39)高于对照组79.49%(31/39)(P<0.05)。治疗后,2组血清IL-10、TNF-α、PF4、TPO、vWF水平及各症状积分均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组PLT高于治疗前,PT、APTT短于治疗前;且观察组PLT高于对照组,PT、APTT短于对照组(P<0.05)。结论 自拟益气健脾解毒化瘀方联合艾曲泊帕治疗恶性肿瘤化疗相关性血小板减少症,能够提高疗效,减轻临床症状及炎症反应,改善凝血功能。

自拟益肾健脾化瘀方治疗绝经后脾肾阳虚型骨质疏松症的临床研究

目的探讨自拟益肾健脾化瘀方治疗绝经后脾肾阳虚型骨质疏松症的临床疗效。方法选取2016年1月-2017年1月我院收治的120例绝经后骨质疏松症患者,将其按照随机数字法随机分为观察组和对照组,每组60例,2组均给予碳酸钙D3片,在此基础上,对照组给予仙灵骨葆胶囊,观察组给予自拟益肾健脾化瘀方剂,2组均治疗3月。结果治疗后2组腰背疼痛、腰膝酸软、夜尿增加、畏寒肢冷、神疲倦怠及总评分均显著下降(P<0.01),但观察组下降更为明显(P<0.01);治疗后观察组总有效率为93.33%,显著高于对照组(80.00%,P<0.01);2组腰椎L2~L4、股骨颈、股骨大转子、Ward's三角骨密度均较治疗前显著增加(P<0.01),但观察组增加更为明显(P<0.01);2组骨特异性碱性磷酸酶(B-ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)均较治疗前显著下降(P<0.01),观察组下降更为明显(P<0.01);2组雌二醇(E2)、胰岛素生长因子(IGF-1)均较治疗前显著上升(P<0.01),观察组上升更为明显(P<0.01);2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用自拟益肾健脾化瘀方可以显著改善绝经后脾肾阳虚型骨质疏松症的临床症状,同时可改善患者骨代谢和骨密度,其作用机制可能与提高雌激素和IGF-1水平有关。

健脾化瘀方对肝癌bel-7402/5-FU细胞表面耐药蛋白影响的研究

目的初步明确健脾化瘀方对肝癌细胞表面多药耐药蛋白表达的影响,并探讨可能机制。方法选择肝癌细胞bel-7402、肝癌耐药细胞bel-7402/5-FU做为实验细胞,以流式细胞仪(FCM)检测细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、MDR相关蛋白(MRP1)的表达率及细胞内罗丹明123(Rho123)的蓄积浓度。以MTT比色法测定不同浓度健脾化瘀方对bel-7402/5-FU细胞增殖的抑制。FCM检测复方作用后bel-7402/5-FU细胞表面P-gp的表达率及Rho 123的蓄积浓度。结果 bel-7402/5-FU细胞表面P-gp的表达高于亲本bel-7402细胞,细胞内Rho 123蓄积浓度低于亲本细胞。健脾化瘀方可显著抑制细胞生长,并呈量效关系。浓度0.5 mg.mL-1的健脾化瘀方作用bel-7402/5-FU细胞48 h后,细胞表面P-gp的表达率明显下降,细胞内Rho 123蓄积浓度升高。结论健脾化瘀方可能具有逆转肝癌耐药细胞多药耐药的作用,途径可能是通过降低P-gp的表达而实现的。

健脾固肾化瘀组方联合雷公藤多苷片对临床期糖尿病肾病临床疗效及肾脏纤维化指标的影响

目的:观察健脾固肾化瘀组方治疗临床期糖尿病肾病患者的临床疗效以及其对肾脏纤维化相关指标的影响。方法:选取2015年12月至2016年12月沧州中西医结合医院门诊及病房的临床期糖尿病肾病患者100例,随机平均分为2组,对照组50例患者在常规治疗的基础上加用雷公藤多苷片(20 mg/次,口服,3次/d)治疗,观察组50例患者在对照组治疗的基础上加用健脾固肾化瘀组方,1次/d,2组患者均以4周为1疗程,治疗3个疗程后统计2组患者的尿蛋白定量、肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys C)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、Ⅳ型胶原(CⅣ)指标以及临床疗效与不良反应。结果:观察组患者治疗后的尿蛋白、Scr、Cys C、TIMP-1、TGF-β_1、CⅣ明显低于治疗前与对照组治疗后(P <0. 05)。观察组患者治疗总有效率明显高于对照组(P <0. 05)。结论:健脾固肾组方联合雷公藤多苷片治疗临床期糖尿病肾病,能够有效降低尿蛋白,还可以有效改善血清肾功能指标与肾脏纤维化指标,具有良好的临床效果。

健脾益肺化淤方对小鼠Lewis肺癌作用的研究

目的探讨健脾益肺化淤方对肺癌的抑制和对化疗的协同增效作用。方法选择小鼠移植性Lew is肺癌为模型,观察健脾益肺化淤方以及与化疗药物顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果健脾益肺化淤方对小鼠移植性Lew is肺癌有显著的抑制作用(P<0.05),并能显著增强DDP对小鼠Lew is肺癌的抑瘤作用(P<0.01)。结论健脾益肺化淤方对小鼠Lew is肺癌有抑制和对化疗药物有协同增效作用。

健脾祛痰化瘀方调节miR-155/Rheb/mTOR途径介导内皮细胞自噬防治动脉粥样硬化机制研究

目的探讨健脾祛痰化瘀方调节miR-155/Rheb/mTOR途径介导内皮细胞自噬防治动脉粥样硬化(atherosclerotic,AS)的机制。方法将40只ApoE小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组,8只C57BL/6 Cnc小鼠作为正常组。除正常组给予基础饲料外,其余各组给予高脂饲料。造模12周后,灌胃给药,正常组与模型组给予相应体积的生理盐水,阿托伐他汀组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组给予相应药物。4周后全自动生物化学分析仪检测血清甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;HE染色观察主动脉病理及斑块变化情况;采用透射电镜观察主动脉自噬体超微结构的变化;实时荧光定量Q-PCR法检测miR-155、LC3、Rheb、GAPDHmRNA的表达;采用Wes全自动蛋白质印迹定量分析系统检测LC3、Rheb、p70s6k、p-p70s6k、mTOR、p-mTOR及β-actin蛋白的表达。结果与正常对照组相比,模型组ApoE小鼠血清中TG、TC、LDL-C水平均显著升高,HDL-C水平显著下降(P<0.01);HE染色结果显示模型组小鼠主动脉管腔中斑块面积范围较大、程度较重;电镜结果显示模型组小鼠主动脉超微结构自噬小体增多;模型组ApoEAS小鼠主动脉LC3-I、LC3-II、miR-155 mRNA表达显著下调(P<0.01),Rheb mRNA表达显著升高(P<0.01);模型组ApoEAS小鼠主动脉LC3-II/LC3-I显著下降(P<0.01),Rheb、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K蛋白表达显著升高(P<0.01)。经阿托伐他汀和健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组治疗后,与模型组相比,阿托伐他汀组以及健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组血清中TG、TC、LDL-C水平均发生显著性降低(P<0.01),HDL-C水平无明显变化趋势;HE染色结果显示阿托伐他汀和健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组小鼠主动脉管腔中斑块面积范围明显减小、程度明显减轻;电镜结果显示阿托伐他汀和健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组小鼠主动脉超微结构显示自噬小体减少;阿托伐他汀组以及健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组LC3-I、LC3-II、miR-155mRNA表达显著上调(P<0.01或P<0.05),Rheb mRNA表达显著下调(P<0.01或P<0.05);阿托伐他汀组以及健脾祛痰化瘀方药低、中、高剂量组LC3-II/LC3-I表达有所上调(P<0.01或P<0.05),Rheb、p-mTOR/mTOR、p-P70S6K/P70S6K蛋白表达显著下调(P<0.01或P<0.05)。结论健脾祛痰化瘀方可能通过调节miR-155/Rheb/mTOR途径介导内皮细胞自噬从而达到防治AS的作用。

解毒化瘀健脾方对慢性萎缩性胃炎伴异型增生大鼠PTEN、E-cad表达的影响

目的观察解毒化瘀健脾方对慢性萎缩性胃炎伴异型增生模型大鼠的抑癌基因磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)和上皮细胞钙黏蛋白(E-cad)基因的影响。方法运用综合造模方法 N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(MNNG),建立慢性萎缩性胃炎伴异型增生病变大鼠模型,随机分为模型组、西药组(维甲酸)、中药组(解毒化瘀健脾方),进行相应药物干预,另选取正常大鼠作为正常对照组。应用Real-time PCR、Western blotting技术检测大鼠PTEN、E-cad mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与正常对照组比较,模型组PTEN、E-cad mRNA及蛋白表达量显著降低(P<0.01);中药组E-cad mRNA及蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,中药组和西药组PTEN、E-cad mRNA及蛋白表达量显著增加(P<0.05)。与西药组比较,中药组PTEN、E-cad mRNA表达量明显升高(P<0.01);中药组PTEN蛋白表达量降低,E-cad蛋白表达升高(P<0.01)。结论解毒化瘀健脾方可诱导慢性萎缩性胃炎伴异型增生胃黏膜细胞PTEN、E-cad基因的蛋白表达量上升,从而实现对慢性萎缩性胃炎伴异型增生的治疗,逆转胃癌前病变。

健脾益肾化瘀通络方治疗移植肾功能延迟的疗效观察

目的:探讨健脾益肾化瘀通络方治疗移植肾功能延迟的效果及对TNF-α、IL-6、hs-CRP等炎性反应因子的影响。方法:选取2013年4月至2018年3月武汉科技大学附属普仁医院收治的移植肾功能延迟恢复的患者60例作为研究对象。按照随机数字表法随机分组法分为对照组和观察组,每组30例。对照组给予血液透析联合免疫抑制方案辅助治疗,观察组在对照组基础上给予健脾益肾化瘀通络方治疗。比较2组肾功能指标(Scr、BUN、Ccr)、炎性反应因子(TNF-α、IL-6、hs-CRP)、肾功能恢复时间及临床疗效。结果:治疗后,2组Scr、BUN、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均降低,Ccr水平均升高(P<0.05);观察组治疗后Scr、BUN、TNF-α、IL-6、hs-CRP水平均降低幅度及Ccr升高幅度均高于对照组(P<0.05);观察组治疗后肾功能恢复时间早于对照组(P<0.05);2组患者总有效率比较(观察组96.67%:对照组90.00%)(P>0.05)。结论:健脾益肾化瘀通络方可显著改善移植肾功能水平,缩短移植肾功能延迟恢复的时间,降低血清TNF-α、IL-6、hs-CRP等炎性反应因子水平,临床治疗效果显著,可进一步推广。

健脾化瘀方对缺氧微环境下结肠癌SW480细胞生物学行为的影响

目的研究健脾化瘀方对体外模拟缺氧微环境下结肠癌SW480细胞生物学行为的影响。方法 CoCl2化学模拟结肠癌SW480细胞缺氧微环境,实验分为空白组、CoCl2组、健脾化瘀方不同浓度(0.2、0.4、0.8mg/mL)处理组。采用MTT法检测不同浓度健脾化瘀方对缺氧条件下结肠癌SW480细胞株增殖能力、黏附能力的影响,Transwell小室法观察对SW480细胞侵袭能力的影响。结果缺氧条件下SW480细胞增殖能力有所下降,48h时,中、高浓度健脾化瘀方对缺氧条件下SW480细胞的增殖有明显抑制作用,与CoCl2组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);不同浓度的健脾化瘀方作用于缺氧条件下SW480细胞后,细胞黏附能力明显下降,并呈浓度依赖性;CoCl2组较空白组侵袭细胞数明显增多,各浓度的健脾化瘀方均能抑制SW480细胞体外侵袭能力,各浓度组穿过小室的细胞数随健脾化瘀方浓度的增大而减少,侵袭抑制率增大,差异有统计学意义(P<0.01)。结论健脾化瘀方在体外可明显抑制缺氧微环境下SW480细胞增殖、黏附及侵袭能力,具有一定的浓度依赖性。

基于ERK/Cyclin E通路探讨健脾化瘀解毒方逆转CAG大鼠胃黏膜癌变效应机制

目的探讨健脾化瘀解毒方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠增殖、分化ERK/Cyclin E信号通路的影响。方法选用SPF级SD大鼠,运用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)复合造模法复制CAG大鼠模型,设立分组:正常组,模型组,叶酸组,健脾化瘀解毒方高、中、低组。HE染色观察大鼠胃黏膜组织病理学改变;采用qRT-PCR法检测胃黏膜组织ERK1、ERK2、Cyclin E mRNA转录水平;免疫组化法检测胃黏膜组织ERK1、ERK2、Cyclin E蛋白表达。结果健脾化瘀解毒方可显著改善CAG大鼠胃黏膜上皮腺体结构、形态紊乱及细胞异型性等病理表现。模型组CAG大鼠胃黏膜上皮的ERK1、ERK2、Cyclin E mRNA水平及蛋白表达评分均较正常组显著增加(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,健脾化瘀解毒方能显著下调CAG大鼠胃黏膜上皮的ERK1、Cyclin E mRNA水平及蛋白表达评分(P<0.05,P<0.01),以高剂量组疗效最佳;健脾化瘀解毒方对ERK2无显著调控作用。结论健脾化瘀解毒方能显著下调ERK1、Cyclin E的表达,抑制胃黏膜上皮细胞的过度增殖,进而阻断CAG恶性转变。

健脾化瘀解毒方调节NLRP3炎症小体活化的生物信息学研究

目的基于生物信息学方法分析健脾化瘀解毒方对核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体活化的作用机制。方法通过GEO数据库公开发表的基因芯片信息获取NLRP3炎症小体活化的相关基因,并进行差异基因表达分析。利用中药系统药理分析平台(TCMSP)筛选健脾化瘀解毒方的主要活性成分,并结合相关文献对其进行适当补充。借助Pubchem数据库和Swiss Target Prediction数据库查找主要活性成分的作用靶基因。绘制韦恩图得到活性成分靶点与差异基因的交集,即健脾化瘀解毒方调节NLRP3炎症小体活化的潜在作用靶点;构建健脾化瘀解毒方活性成分-靶点网络及靶蛋白相互作用(PPI)网络,并进行GO功能及KEGG通路富集分析。结果共获得健脾化瘀解毒方9味中药的93个主要活性成分,798个作用靶点;得到NLRP3炎症小体活化相关靶点743个,交集靶基因62个;关键靶点包括IL-6、VEGFA、TNF、SRC、IL-1β、PTGS2、BCL2L1、CCND1、FGF2、ICAM1等;共涉及26条GO条目与25条相关信号通路。结论健脾化瘀解毒方可能主要通过槲皮素、山柰酚、β-谷甾醇、豆甾醇等活性成分,作用于IL-6、IL-1β、TNF等核心治疗靶点,通过PI3K-Akt、HIF-1及MAPK等信号通路,调节NLRP3炎症小体活化来影响细胞焦亡,发挥防治胃癌前病变的作用。

健脾补肾化瘀方对小鼠Lewis肺癌的抑瘤增效作用的研究

目的:探讨健脾补肾化瘀方对肺癌的抑制和化疗的协同增效作用。方法:选择小鼠移植性Lewis肺癌为模型,分别观察健脾补肾化瘀方以及与顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果:健脾补肾化瘀方对小鼠移植性Lewis肺癌有显著的抑制作用(P<0.01),并能显著增强DDP对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用(P<0.05)。结论:表明健脾补肾化瘀方对动物移植性肺癌有抑制和对化疗药物的协同增效作用。

健脾化瘀解毒方调控PI3K/AMPK-mTOR-ULK1抑制ROS诱导GPL细胞自噬的机制研究

目的:探讨健脾化瘀解毒方通过抑制氧化应激所致胃癌前病变(GPL)大鼠胃黏膜上皮细胞(GECs)自噬,保护胃黏膜、防治癌变的机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、维酶素组及健脾化瘀解毒方高(9 g/kg)、低(4.5 g/kg)剂量组,复制GPL大鼠模型,于造模第12 w连续灌胃给药10 w,实验结束时麻醉大鼠后,取血分离血清检测ROS、SOD、MDA水平;取胃窦部胃黏膜,观察组织病理学(HE染色)和肠上皮化生(AB-PAS染色),检测GECs的PI3K、mTOR、AMPK、Raptor、ULK1、ATG13、Beclin1、ATG4B mRNA及miR182、miR30a、miR206和Beclin1、HMGB1、ATG5、MUC2、CDX2、ATG2B蛋白表达。结果:正常对照组大鼠胃黏膜无异常;模型组大鼠胃黏膜萎缩,空泡样变、组织异型性变,异型增生灶占胃黏膜厚度的1/3,各给药组胃黏膜病理学改变不同程度减轻;与模型组比较,健脾化瘀解毒方组PI3K、mTOR mRNA及miR30a、miR206显著升高,AMPK、Raptor、ULK1、ATG13、Beclin1、ATG4B mRNA及miR182和Beclin1、HMGB1、ATG5、MUC2、CDX2蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:健脾化瘀解毒方可通过影响miR182、miR30a、miR206等miRNAs活化,调控PI3K/AMPK-mTOR-ULK1通路,从而抑制氧化应激诱导自噬,逆转GPL大鼠GECs的肠化和损伤,防止GPL癌变。

健脾清热化瘀方抗胃溃疡及复发临床疗效研究

目的探讨健脾清热化瘀方抗胃溃疡及复发的临床疗效。方法 82例胃溃疡患者为研究对象,依照治疗方案的不同分为观察组和对照组,各41例。对照组患者施行常规西药治疗,观察组患者施行健脾清热化瘀方治疗,对比两组患者胃溃疡临床治愈情况和复发情况。结果观察组患者总有效率95.12%高于对照组78.05%,差异具有统计学意义（χ~2=5.145,P〈0.05）。观察组患者复发率9.52%低于对照组37.50%,差异具有统计学意义（χ~2=4.047,P〈0.05）。结论对于胃溃疡患者的临床治疗,相对于传统西药治疗而言,健脾清热化瘀方能显著提升患者治愈率,降低胃溃疡的复发率,疗效较为显著。

健脾补肾化瘀方对小鼠Lewis肺癌的抑瘤增效作用的研究

目的:探讨健脾补肾化瘀方对肺癌的抑制和化疗的协同增效作用。方法:选择小鼠移植性Lewis肺癌为模型,分别观察健脾补肾化瘀方以及与顺铂(DDP)联合应用时的抑瘤率。结果:健脾补肾化瘀方对小鼠移植性Lewis肺癌有显著的抑制作用(P<0.01),并能显著增强DDP对小鼠Lewis肺癌的抑瘤作用(P<0.05)。结论:表明健脾补肾化瘀方对动物移植性肺癌有抑制和对化疗药物的协同增效作用。

健脾化瘀解毒方治疗慢性萎缩性胃炎的临床研究

目的探讨健脾化瘀解毒方治疗脾虚气滞、挟瘀毒内阻证型慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法将80例入选患者随机分为治疗组和对照组,每组40例。治疗组给予张氏"健脾化瘀解毒丸",对照组给予西药抗幽门螺杆菌及对症治疗。3个月后,比较临床综合疗效、中医证候积分、胃镜下黏膜评分、组织病理疗效、幽门螺杆菌根除率等指标变化情况。结果 2组患者中医证候积分比较,治疗组症状积分显著低于对照组,差异有统计意义(P<0.05);治疗前后胃镜下黏膜评分比较,治疗组治疗后胃镜下黏膜评分与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前后病理疗效比较,其中治疗组治疗后萎缩程度积分均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);但肠上皮化生评分和异型增生积分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者幽门螺杆菌根除率比较,治疗前治疗组幽门螺杆菌为28例(70.0%),对照组为25例(62.5%);治疗后治疗组幽门螺杆菌阳性7例,根除率75.0%;对照组幽门螺杆菌阳性16例,根除率36.0%,2组根除率比较差异有统计学意义(χ~2=6.42,P<0.05)。结论健脾化瘀解毒方治疗后可以明显缓解患者胃痛、胃胀以及嗳气、纳呆、疲倦和嘈杂等不适症状,并能改善胃镜下胃黏膜局部循环,还能促进萎缩腺体恢复,缓解胃黏膜炎症状态,并有效提高幽门螺杆菌清除率,但对于逆转肠上皮化生、异型不典型增生,此研究不能体现2组的差异。

刘学勤活用经方治疗肝胆病经验举隅

文章以临床验案为例,分析刘学勤教授活用经方的思路,举隅说明刘学勤教授活用经方治疗肝胆病的临证经验。以逍遥散变方(以丹参易当归、赤芍易白芍、土茯苓易茯苓、生薏仁易白术)拟疏肝健脾汤,治疗慢性肝炎;以血府逐瘀汤去生地、桔梗、川芎、牛膝,加川楝子、香附、郁金拟疏肝化瘀汤,治疗肝硬化;以五苓散去桂枝,加苍术、猪苓、防己、川牛膝、怀牛膝等拟消水汤,治疗肝硬化合并胸腹水;以半夏泻心汤加枳壳、砂仁,以太子参易人参拟胃平汤,治疗脂肪性肝病。在经方原方基础上"取其意、增其效",灵活变通后,更加符合肝胆病特点。经方变方对肝胆病的治疗更具有针对性,在一定程度上提高了临床疗效,这种承古拓今的独特思路值得借鉴。