自拟疏肝健脾方对肝郁脾虚证大鼠影响及其机制

目的观察自拟疏肝健脾方对肝郁脾虚证大鼠的影响及其可能的作用机制。方法慢性捆绑束缚法制备大鼠肝郁脾虚证模型。60只大鼠随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方高、中、低剂量组,阳性对照组,每组10只,连续21 d每日束缚3 h,束缚前30 min大鼠灌胃给药。通过记录大鼠宏观表征观察一般情况,体质量和小肠推进率观察大鼠“脾虚”情况,脾指数和胸腺指数反映大鼠免疫水平。通过旷场实验观察大鼠抑郁情绪以及糖水偏好率观察大鼠欣快感共同反映“肝郁”的情况。ELISA法检测大鼠血清中皮质酮(corticosterone,CORT)、5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、多巴胺(dopamine,DA)的含量。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量减轻(P<0.05),总活动距离明显减少(P<0.05),活动速度减慢(P<0.05),糖水偏好率、小肠推进率、脾指数均下降(P<0.05),CORT含量、NE含量均升高(P<0.05)。与模型组比较,疏肝健脾方各剂量组大鼠总活动距离及糖水偏好率均增加(P<0.05),疏肝健脾方低剂量组小肠推进率升高、脾指数上升(P<0.05),疏肝健脾方中、低剂量组活动速度增快(P<0.05),疏肝健脾方高、低剂量组CORT含量、NE含量均降低(P<0.05),5-HT和DA含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾方可以有效改善大鼠肝郁脾虚证,其机制可能与调控下丘脑-垂体-肾上腺(hypothalamic pituitary adrenal,HPA)轴功能相关。

健脾疏肝方对IBS模型大鼠的治疗作用

目的:探讨健脾疏肝方对乙酸法复制IBS模型大鼠的治疗作用。方法:新生SD大鼠从第8～21天每天给予直肠内醋酸刺激复制IBS大鼠模型,分别在出生后第6周及8周进行直肠扩张,测定其腹部收缩反射(AWR)的阈值作为肠道敏感性评估。从第9周开始分别给健脾疏肝方6.08g/kg、3.04g/kg、1.52g/kg或泽马可4mg/kg灌胃,每日一次,连续两周,治疗后再次评估AWR阈值。结果:IBS模型大鼠AWR值明显降低,健脾疏肝方能够升高IBS模型大鼠的AWR阈值。结论:健脾疏肝方有降低IBS大鼠肠道敏感性的作用。

疏肝健脾方联合恩替卡韦分散片治疗慢性乙型肝炎肝郁脾虚证临床观察

目的观察疏肝健脾方联合恩替卡韦分散片对慢性乙型肝炎肝郁脾虚证的患者相关指标以及症状改善情况,探讨中医药对慢性乙型肝炎的临床疗效。方法选择符合慢性乙型肝炎肝郁脾虚证患者100例,随机分为试验组和对照组。试验组给予疏肝健脾方联合恩替卡韦分散片;对照组给予恩替卡韦分散片,治疗48周。观察治疗前后两组中医证候积分,并对肝功能中ALT、AST、HBV-DNA、HbeA g,HBsAg等指标进行比较。结果试验组肝功能ALT降低总有效率12周、24周、36周、48周分别为85%、89%、92%、95%,明显高于对照组(P<0.05);AST降低总有效率12周、24周、36周、48周分别为75%、81%、86%、89%,明显高于对照组(P<0.05);乙肝病毒DNA转阴率12周、24周、36周、48周分别为60%、75%、90%、100%,与对照组差异无统计学意义(P>0.05);HBsA g,HBeAg疗效12周、24周、36周、48周总有效率分别为35%、40%、50%、60%,明显高于对照组(P<0.05);试验组中医证候改善12周、24周、36周、48周分别为97%、100%、100%、100%,明显高于对照组(P<0.05)。结论联合健脾疏肝方较单纯应用恩替卡韦在降低转氨酶、HBsAg以及HBeAg转阴率、中医证候改善等方面更加具有优势。

疏肝健脾活血方治疗慢性溃疡性结肠炎的疗效及对中医证候积分、Mayo评分的影响

目的探讨疏肝健脾活血方治疗慢性溃疡性结肠炎(UC)的疗效及对中医证候积分、Mayo评分的影响。方法通过随机数字表法将医院2018年4月—2021年4月收治的92例UC患者分为对照组46例与治疗组46例。对照组给予美沙拉嗪治疗,治疗组加用疏肝健脾活血方治疗。对比两组治疗前后中医证候积分、Mayo评分、炎症因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平,分析两组临床疗效与不良反应情况。结果与对照组相比,治疗组治疗有效率更高(95.65%vs 80.43%)(χ^(2)=5.059,P=0.024)。治疗后两组各项证候积分均降低,且治疗组治疗后评分均低于对照组(P<0.05)。治疗后两组Mayo与肠黏膜镜像积分均降低,且治疗组治疗后Mayo与肠黏膜镜像积分低于对照组(P<0.05)。治疗后两组炎症因子水平均降低,且治疗组治疗后IL-6、IL-8和TNF-α水平均低于对照组(P<0.05)。治疗组不良反应发生率与对照组(8.70%vs 10.87%)比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.123,P=0.726)。结论针对UC患者,采取疏肝健脾活血方治疗,临床疗效理想,不但能改善患者临床症状,还能降低肠道炎症反应,不良反应少,值得推广。

健脾疏肝化浊方治疗糖尿病合并非酒精性脂肪肝临床研究

目的探究健脾疏肝化浊方治疗糖尿病合并非酒精性脂肪肝的临床疗效。方法随机将医院诊治64例糖尿病并非酒精性脂肪肝患者分为对照组和治疗组各32例,对照组给予非诺贝特进行治疗,治疗组在对照组的基础上给予健脾疏肝化浊方治疗,两组疗程均为6个月。观察两组患者治疗前后临床疗效、肝脏影像学改变,空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hPG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、血脂、肝酶水平及不良反应发生情况。结果治疗后,治疗组总有效率为93.75%(30/32),对照组总有效率为75.00%(24/32),治疗组显著高于对照组(P<0.05);治疗后,两组患者FBG、2hPG、HbAlc水平显著下降(P<0.05),治疗组显著低于对照组(P<0.05);治疗后,两组总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高(P<0.05),治疗组优于对照组(P<0.05);治疗后,两组丙氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)水平明显降低(P<0.05),治疗组低于对照组(P<0.05);治疗组肝脏影响学改变明显优于对照组(P<0.05);两组均无明显不良反应,差异无统计学意义(P>0.05)。结论健脾疏肝化浊方治疗糖尿病合并非酒精性脂肪肝效果显著,可明显降低患者血糖水平,保护患者肝功能,安全有效,值得推广应用。

疏肝健脾方对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝脏代谢组学的影响

目的从代谢组学的角度探讨疏肝健脾方防治肝纤维化的可能作用机制。方法 15只SD大鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾方组,每组5只。模型组和疏肝健脾方组皮下注射50%四氯化碳溶液0.1 ml/100 g,每周2次,连续12周,复制大鼠肝纤维化模型。造模第1天起,疏肝健脾方组给予疏肝健脾方16.2 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水。每天1次,连续16周。末次给药后处死大鼠,取肝组织观察病理学变化,采用气相色谱-飞行时间质谱联用技术分析其代谢谱变化,鉴定差异化合物并进行相关代谢通路分析。结果模型组大鼠肝组织见有少量的脂肪空泡变性,结缔组织增生,炎性细胞浸润,可见非典型的假小叶形成;疏肝健脾方组未见大范围的脂肪空泡,仅有少量炎性细胞浸润,肝纤维化明显好转。与正常组比较,模型组中共发现棕榈酸、二十碳烯酸、苹果酸、延胡索酸、谷氨酰胺、盐德草碱、N-乙酰-4-氨基丁酸、葡萄糖酸8个生物标志物;与模型组比较,疏肝健脾方能够使8个生物标志物向正常水平靠近。结论疏肝健脾方对肝纤维化大鼠有一定的保护作用,其机制可能与调节能量代谢、酪氨酸代谢、脂肪酸代谢、氨基酸代谢、糖代谢紊乱有关。

疏肝健脾方对产后缺乳肝郁脾虚证模型大鼠JAK2/STAT5A信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾方治疗产后缺乳肝郁脾虚证的可能作用机制。方法 60只Wistar临产期孕鼠随机分为模型组、空白对照组、西药对照组和疏肝健脾方低、中、高剂量组,每组10只。除空白对照组外,其余各组大鼠产后采用甲磺酸溴隐亭溶液+慢性束缚法复制大鼠产后缺乳肝郁脾虚病证模型。造模后西药对照组予甲氧氯普胺片溶液3. 15 mg/(kg·d)灌胃,疏肝健脾方低、中、高剂量组分别给予浓度为1. 109、2. 218、4. 435 g/ml疏肝健脾方溶液每只5 ml灌胃,模型组、空白对照组予等体积蒸馏水灌胃,各组均每日早、晚各灌胃1次,连续7天。采用RT-PCR法检测乳腺组织中酪氨酸激酶2 (JAK2)、信号传导及转录激活因子5A (STAT5A)、催乳素受体(PRLR)和β-酪蛋白(β-casein) mRNA表达,采用Western blot法检测乳腺组织中JAK2、STAT5A、PRLR和β-casein蛋白表达。结果与空白对照组比较,模型组、西药组和疏肝健脾方低、高剂量组大鼠乳腺组织JAK2、STAT5A、PRLR及β-casein mRNA及蛋白水平显著降低(P <0. 05),而疏肝健脾方中剂量组差异无统计学意义(P> 0. 05)。与模型组比较,西药对照组和疏肝健脾方各剂量组大鼠乳腺组织JAK2、STAT5A、PRLR及β-casein mRNA及蛋白水平均升高,且疏肝健脾方中剂量组明显高于其余给药组(P <0. 05)。结论疏肝健脾方治疗产后缺乳肝郁脾虚证的机制可能与其促进催乳素与其受体结合,激活JAK2/STAT5A信号转导通路,并上调β-casein基因表达相关。

疏肝健脾活血方对肝纤维化模型小鼠肝组织CUG结合蛋白1表达及TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的探讨疏肝健脾活血方防治肝纤维化的可能作用机制。方法48只C57BL/6雄性小鼠随机分为正常组、模型组、疏肝健脾活血方组、CUGBP1敲减组,每组12只。CUGBP1敲减组一次性尾静脉注射CUGBP1敲减腺相关病毒,其余各组尾静脉注射对照腺相关病毒,每只小鼠注射量为100μl,病毒滴度不少于1×10^(12)vg/ml。4周后,除正常组外,其余各组小鼠腹腔注射20%四氯化碳(CCl_(4))2.5 ml/kg,每3天注射1次,连续4周,诱导肝纤维化模型;同时疏肝健脾活血方组小鼠予33.3 g/(kg·d)疏肝健脾活血方药液灌胃,正常组、模型组及CUGBP1敲减组予10 ml/kg蒸馏水灌胃,每天1次,连续4周。末次给药12 h后取材,采用HE染色、Masson染色、天狼星红染色进行肝脏病理学观察;检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平及肝组织中羟脯氨酸(HYP)含量;检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、α平滑肌激动蛋白(α-SMA)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad3(p-Smad3)、Smad7、CUG结合蛋白1(CUGBP1)蛋白表达,肝组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、CollagenⅠ、α-SMA、Smad7、CUGBP1 mRNA表达。结果与正常组比较,模型组小鼠肝组织病理显示肝细胞排列紊乱,有大量炎性细胞浸润与大量胶原纤维沉积,并且形成明显的纤维间隔;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量上升,肝组织中CollagenⅠ、CUGBP1、p-Smad2、p-Smad3、α-SMA蛋白表达升高,TGF-β1、CollagenⅠ、CUGBP1、α-SMA mRNA表达升高,Smad7蛋白及mRNA表达下降(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,疏肝健脾活血方组和CUGBP1敲减组小鼠肝组织病理显示有少量炎性细胞浸润,纤维组织增生不明显,纤维间隔稀疏;血清中ALT、AST水平及肝组织中HYP含量下降,上述蛋白及mRNA水平均有所改善(P<0.05或P<0.01)。与疏肝健脾活血方组比较,除Smad7 mRNA表达升高外,CUGBP1敲减组其余各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论疏肝健脾活血方可能通过抑制肝组织CUGBP1表达,从而阻断TGF-β1/Smads信号后续转导,进而抑制肝纤维化进展。