健脾解毒方逆转大肠癌细胞多药耐药的作用机制

目的探讨中医健脾解毒方逆转大肠癌多药耐药(MDR)的机制。方法采用细胞生长抑制实验观察长春新碱在健脾解毒方治疗前后对大肠癌耐药细胞株(HCT-8/V)敏感性的改变,实时荧光定量PCR及Western blot方法观察健脾解毒方对大肠癌细胞Akt磷酸化程度及MDR1基因表达的影响。结果健脾解毒方药物血清与大肠癌细胞培养24、48、72 h后,长春新碱对细胞的生长抑制率分别为5.9%、11.0%、15.0%,明显高于空白对照组(P均<0.05),其抑制作用与健脾解毒方的药物血清浓度及作用时间呈正相关。健脾解毒方血清能有效降低HCT-8/V中MDR-1的蛋白及mRNA表达(P<0.05);健脾解毒方逆转MDR-1的表达与其所致的细胞内Akt磷酸化水平下降呈正相关,与长春新碱敏感性提高呈线性负相关。健脾解毒方血清与PI3K抑制剂LY294002联用能协同降低HCT-8/V中MDR-1的表达水平和细胞内Akt磷酸化程度,较单用更能增加长春新碱的敏感性。结论健脾解毒方能有效减低耐药肿瘤细胞内Akt磷酸化,从而降低PI3K/Akt信号通路活性,后者进一步导致MDR1表达下降,从而增加长春新碱对大肠癌细胞的敏感性。

健脾解毒方逆转大肠癌多药耐药基因的研究

目的从分子生物学的角度探讨健脾解毒方逆转大肠癌多药耐药基因的作用机制,为中医健脾解毒法治疗大肠癌提供理论依据。方法应用健脾解毒方药对SD大鼠进行灌胃,采集动脉血制备健脾解毒方药物血清,在体外培养人结肠直肠腺癌耐长春新碱细胞HCT-8/V,分别加入培养液配制的5%、10%、15%、20%健脾解毒方药物血清,采用MTT方法检测各组HCT-8/V细胞生长抑制率。结果健脾解毒方药物血清对HCT-8/V细胞有抑制作用,随浓度升高、时间延长,其抑制作用增强,呈剂量和时间效应关系。20%的药物血清和VCR在24、48、72 h对肿瘤细胞的生长抑制率均有统计学差异(P<0.01),随作用时间延长,对肿瘤细胞的杀伤作用明显增强。结论健脾解毒方可逆转大肠癌多药耐药基因,并伴随相关基因的调控。