加味三棱丸含药血清对子宫内膜异位症内膜细胞芳香化酶及环氧合酶-2的影响

目的:观察子宫肌瘤与子宫内膜异位症(内异症)患者在位内膜芳香化酶(aromatase)和环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)表达上的差异,探讨加味三棱丸(SLW)含药血清对内异症在位内膜芳香化酶、COX-2表达的影响。方法:Western blot和RT-PCR方法分别检测子宫肌瘤组、给予SLW含药血清前后内异症组芳香化酶、COX-2蛋白和mRNA的表达,发光免疫分析法及放射免疫分析法分别检测上述各组细胞上清中雌二醇及前列腺素E2的含量。结果:以未给药的内异症内膜组为对照,子宫肌瘤组芳香化酶、COX-2 mRNA蛋白的表达,分泌雌二醇及前列腺素E2水平均明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。SLW5.0,2.5g·kg-1·d-1组芳香化酶、COX-2蛋白和mRNA的表达低于对照组,差异有显著性或极显著性(P<0.05或P<0.01)。SLW1.25g·kg-1·d-1组芳香化酶mRNA和蛋白、COX-2蛋白的表达也明显低于对照组(P<0.01),但COX-2 mRNA的表达与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。SLW5.0,2.5,1.25g·kg-1·d-1组分泌的雌二醇和前列腺素E2水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:SLW可抑制子宫内膜异位症在位内膜细胞芳香化酶和COX-2的表达,从而降低局部雌激素及前列腺素E2的水平。

加味三棱丸抗子宫内膜异位症雌激素生成作用及对内膜细胞凋亡的影响

目的:研究加味三棱丸(SLW)对子宫内膜异位症(内异症)雌二醇(E2)生成的抑制作用,并探讨其诱导内异症内膜细胞凋亡的机制。方法:培养子宫肌瘤和内异症患者在位子宫内膜细胞,以子宫肌瘤内膜细胞为对照,内异症在位内膜细胞经含SLW大鼠血清高、中、低剂量处理后,分别在不同的时间点采用电化学发光免疫法检测E2的分泌水平;流式细胞术和TUNEL法检测细胞的早期和晚期凋亡率;通过时效关系考察,明确SLW诱导内异症在位内膜细胞早、晚期凋亡的最佳时间后,重新将培养的内膜细胞分为6组:子宫肌瘤组、内异症组、内异症+SLW血清中剂量组、内异症+阿那曲唑血清组、内异症+SLW血清中剂量+雌二醇组和内异症+雌二醇组,在最佳时间点检测各组细胞的早期和晚期凋亡率。结果:SLW可显著降低内异症在位内膜细胞分泌E2的水平,并呈浓度和时间依赖性。子宫肌瘤组内膜细胞的早、晚期凋亡百分率随时间延长而增加,并显著高于同时间点的内异症组(P<0.05或P<0.01);经SLW血清中剂量处理72、96 h后,内异症在位内膜细胞的早、晚期凋亡百分率分别为(35.67±1.73)%和(57.56±1.09)%,较其他处理时间的诱导作用显著;当SLW血清中剂量与雌二醇5.30 ng/L联合处理72 h或与雌二醇6.36 ng/L联合处理96 h后,细胞的早、晚期凋亡百分率分别降低至(11.25±2.00)%和(7.72±0.71)%,与SLW血清中剂量比较,差异显著(P<0.01),添加的雌二醇浓度未能完全抑制SLW诱导内异症内膜细胞的凋亡;单独给予雌二醇5.30、6.36 ng/L进行处理,内异症内膜细胞的早、晚期凋亡百分率有进一步降低的趋势,但无统计学意义(P>0.05),芳香化酶抑制剂阿那曲唑与雌二醇的作用恰好相反。结论:SLW可能通过降低内异症在位内膜细胞分泌雌二醇的水平,发挥其诱导内膜细胞凋亡的作用。

加味三棱丸对子宫内膜异位症雌激素生成及内膜侵袭能力的影响

目的:明确加味三棱丸(SLW)抗子宫内膜异位症(内异症)雌二醇生成的作用,并探讨其在SLW抑制内膜细胞侵袭过程中所起的关键作用。方法:培养子宫肌瘤和内异症患者在位子宫内膜细胞,以子宫肌瘤为对照,内异症在位内膜细胞经SLW大鼠血清高、中、低剂量处理后,分别在不同的时间点采用电化学发光免疫法检测雌二醇(E2)的分泌水平;明胶酶谱法分析内膜细胞分泌的基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,9)活性,细胞免疫荧光法观察组织型金属蛋白酶抑制剂1,2(TIMP-1,2)蛋白的表达;通过时效关系的考察,明确SLW抑制内膜细胞侵袭能力的最佳时间后,重新分为6组:子宫肌瘤组、内异症组、内异症+SLW中剂量组、内异症+SLW中剂量+雌二醇组、内异症+阿那曲唑血清组和内异症+雌二醇组,分别在最佳时间点检测各组细胞分泌的MMP-2,9活性及TIMP-1,2蛋白表达水平。结果:SLW高、中剂量可明显降低内异症在位内膜细胞分泌E2的水平,并呈时间和浓度依赖性;内异症组在各检测时间内,分泌的MMP-2,9活性明显高于子宫肌瘤内膜组(P<0.01);经SLW血清中剂量处理48 h后,与空白对照组比较,内异症在位内膜细胞分泌的MMP-2,9活性明显降低(P<0.01),而TIMP-1,2蛋白的表达明显升高(P<0.01);当SLW中剂量与雌二醇2.70 ng.L-1联合处理48 h后,内异症在位内膜细胞被SLW降低的侵袭能力可被反向添加的雌二醇部分恢复;其中,MMP-2活性、TIMP-1,2蛋白表达与空白组比较,已无显著性差异;而单独进行雌二醇处理,可进一步增加内异症内膜细胞的侵袭能力,特异性芳香化酶抑制剂阿那曲唑与雌二醇的作用恰好相反。结论:SLW可抑制内异症在位内膜细胞的侵袭能力,其作用与SLW降低内膜细胞雌二醇的分泌密切相关。