自动化药敏系统与K-B纸片扩散法在肠杆菌科细菌中对阿米卡星药敏结果差异的探讨

目的探讨自动化微生物药敏系统与K-B纸片扩散法对阿米卡星(AMK)药敏结果的差异。方法收集临床K-B纸片扩散法对AMK敏感、完全耐药及双圈耐药的肠杆菌科细菌分别为4株、4株和13株;其中大肠埃希菌12株,肺炎克雷伯菌8株,产气肠杆菌1株;分别采用Vitek-2 Compact、Phoenix和Micro Scan药敏系统对以上菌株进行AMK的复核,并采用琼脂稀释法测定最低抑菌药物浓度(MIC)值。采用PCR方法检测氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及16S rRNA甲基化酶相关基因。结果三种自动化药敏系统对于敏感及完全耐药菌株的药物敏感性结果与K-B纸片扩散法相符;对于在K-B纸片扩散法中呈双圈耐药13株菌,Phoenix和Micro Scan药敏系统结果均为耐药(>32 mg/L);而Vitek 2 Compact药敏卡出现不同结果,其中4株菌株为敏感(≤16 mg/L),4株为中介(32 mg/L),5株为耐药(≥64 mg/L);琼脂稀释法结果显示双圈耐药表型菌株的MIC均>512 mg/L。所测菌株携带不同的氨基糖苷类修饰酶基因及整合子基因盒,主要为aac(6’)-Ⅰ和aad A5-dfr A17;双圈耐药表型菌株均扩增出arm A基因,而敏感菌株和完全耐药菌株均未扩增出该基因。结论在K-B纸片扩散法中出现对AMK呈双圈耐药结果时,自动化鉴定药敏系统中的Vitek系统可能会产生偏差,造成这种差异的出现可能与菌株产arm A基因相关。

肝移植病房MRSA分子流行病学研究

目的研究我院肝移植病房MRSA同源性分布情况。方法收集我院2005年3月—2006年11月肝移植病人中分离金葡菌共57株,用头孢西丁纸片法进行MRSA表型检测,筛选MRSA,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对MRSA菌株进行同源性检测。结果57株金葡菌中,46株为MRSA。MRSA经PFGE分为8个型(A^H型)。以A型(27株)、B型(10株)为主。在2005年3月—2006年11月发生了A1亚型的暴发流行。结论MRSA在肝移植病人间流行情况十分严重,及时检测MRSA并进行流行病学研究将有利于控制耐药菌的播散。

耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌中多种抗生素耐药基因的观察

探讨耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(methicillin-resistant coagulase negative staphylococci,MRCNS)中多种抗生素耐药基因的分布情况,采取Kirby Bauer标准纸片扩散法(K-B纸片扩散法)对MRCNS开展药敏实验,并通过PCR检测菌种携带的抗生素耐药基因。药敏实验结果显示,96株MRCNS对庆大霉素、红霉素、莫匹罗星以及四环素的耐药性各有差异,但对氨苄西林的耐药性却达到100%,未发现对万古霉素具有耐药性的菌株;PCR检测结果显示,9种耐药基因merA、ermB、ermC、msrA、tetM、tetK、aac(6’)-aph(2")、aph(3’)-III、mupA的阳性检出率各有差异,没有扩增出vanA、ermA、vanB以及ant(6’)-I基因,但都扩增出mecA基因。结果表明,MRCNS可以同时携带多种抗生素耐药基因,属于一种多重耐药菌。

耐甲氧西林葡萄球菌4种检测方法的比较及临床应用

[目的 ]通过检测 2 80株临床分离的葡萄球菌比较其耐甲氧西林葡萄球菌 (MRS)阳性检出率 ,对其可靠性和临床实用性进行评估。 [方法 ]K -B纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂二倍稀释法(MIC)、mecA基因检测法测试。 [结果 ]K -B法苯唑西林耐药葡萄球菌 1 4 1株 ,阳性率为5 0 .36 % ;琼脂筛选法苯唑西林耐药葡萄球菌 1 35株 ,阳性率为 4 8.2 1 % ;MIC法苯唑西林耐药 1 30株 ,阳性率为 4 6 .4 3% ;mecA阳性葡萄球菌 98株 ,阳性率为 35 %。 3种表型检测法检测结果经 χ2检验无明显差异 ,而与mecA基因检测法结果稍有差异。 [结论 ]mecA基因检测法是检测MRS的一种可靠的方法 ,但受设备、仪器、试剂和费用的限制 ,不易在广大医院临床实验室普遍开展 ,K -B法、琼脂筛选法、MIC法是检测MRS较为适用的方法。

产生物膜的肺炎克雷伯菌的体外药敏试验探讨

目的探讨产生物膜的肺炎克雷伯菌体外药敏试验的不同,为临床治疗提供准确的药敏参考。方法对临床分离筛选的16株产生物膜的肺炎克雷伯菌用K-B纸片扩散法进行药敏试验,记录24、48、72h这几个时间段的结果。然后将菌株传种数代至其不产生物膜,再行上述操作。最后对两次的药敏结果进行对比分析。结果产生物膜的肺炎克雷伯菌24h抑菌圈的毫米数与48、72h结果比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论产生物膜的肺炎克雷伯菌用K-B纸片扩散法进行体外药敏试验时,结果宜在48h后报告,这对于该菌的预防具有一定参考价值。

3000例儿童泌尿道感染细菌培养及药敏试验结果分析

目的探讨儿童泌尿道感染的病原菌分布和耐药特征,指导临床合理使用抗生素。方法收集我院3000例门诊和住院儿童泌尿道感染和患者清洁中段尿,用平板接种法进行细菌培养,全自动细菌鉴定分析仪进行细菌鉴定,并用K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果 3000份尿液中分离出细菌528株(17.6%),其中病原菌主要为大肠埃希菌(G-)、葡萄球菌(G+)、粪肠球菌(G+)以及真菌;药敏试验结果显示三种主要致病菌对多种抗生素耐药性高。结论明确泌尿道感染的病原菌分布及这些病原菌对抗生素的敏感性和耐药性,对临床上儿童合理使用抗生素有重要意义。

比阿培南对临床常见菌的体外抗菌活性

目的本研究评估比阿培南对临床常见菌的体外抗菌活性,以提供建立比阿培南的药物敏感性折点和临床用药指导的实验依据。方法复苏2022年云南新昆华医院冻存的327株临床常见菌,其中包含肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和鲍氏不动杆菌复合群;利用K-B纸片扩散法评估比阿培南、亚胺培南、美罗培南对上述菌株的药物敏感性,并对这三种药物对不同细菌的抑菌圈大小进行比较。结果不同细菌对比阿培南的敏感率存在差异:大肠埃希菌的敏感率最高,为100.00%,其次是肺炎克雷伯菌,敏感率为98.21%,再次是铜绿假单胞菌,敏感率为69.23%,最后是鲍氏不动杆菌,敏感率仅为8.38%;三种药物对同种细菌的抑菌圈直径的结果显示,除在鲍氏不动杆菌中无统计学差异外,三种药物在其他3种菌中的抑菌圈直径存在统计学差异(P<0.05),其中比阿培南与美罗培南的抑菌圈直径大小更为接近。结论比阿培南在肠杆菌目细菌中的抗菌活性最强,对非发酵菌的抗菌活性不够好,尤其是对鲍氏不动杆菌复合群的抗菌活性很低。三种碳青酶烯类药物对以上4种临床常见菌的抗菌活性虽然有一定差异,但其敏感性一致(依据美国临床和实验室标准委员会-M100抗微生物药物敏感性试验执行标准判定),比阿培南可以参考美罗培南的药物敏感性折点,而不是亚胺培南的。

抑菌试验中抑菌圈法的比较研究

试验比较研究了抑菌圈法中的K-B法、牛津杯法和打孔法在抑菌试验中的优缺点,结果表明：打孔法操作简单、方便快捷,获得的抑菌圈质量高、重复性好,是优先选用的方法;牛津杯法获得的抑菌圈质量较高,重复性较好;K-B法则只适宜进行定性试验。在进行抑菌圈法试验时,建议使用预加菌液倾注平板法来制备试验平板,试验平板中菌体浓度应在1×10^5-1×10^6 CFU/m L,试验药物应选择适宜的浓度,加入试验药物后应在4℃条件下预扩散2h左右再放置培养箱进行培养,另外还应考虑培养基的pH。

鲍曼不动杆菌耐药性分析

目的了解鲍曼不动杆菌临床分离菌株的耐药现状与耐药谱特征。方法收集分离的70株鲍曼不动杆菌,用K-B纸片法检测抗菌药物的耐药性。结果 70株鲍曼不动杆菌中,40株(57.14%)为多重耐药菌,6株(8.57%)为泛耐药菌株。鲍曼不动杆菌对亚胺培南、阿米卡星的耐药率最低,分别为30.00%和32.86%;其次是美罗培南、头胞吡肟,耐药率分别为38.57%,41.43%;对其余抗菌药的耐药率大多超过50.00%。结论本院鲍曼不动杆菌临床分离菌株多重耐药情况严重。

鲜牛奶中耐药性细菌的分离与鉴定

目的:分离鉴定鲜牛奶中耐药性细菌的分布。方法:利用含有四环素(16μg/mL)、环丙沙星(4μg/mL)或庆大霉素(16μg/mL)的Luria-Bertani平板,分离样品中的耐药性细菌;采用K-B纸片法对分离菌株的耐药性进行确认;利用血平板测定分离菌株的溶血性;利用16S rRNA方法对分离菌株进行鉴定。结果:对30份采自河北张家口地区新鲜无菌牛奶样品的平板筛选结果显示,具有耐受1种以上抗菌素细菌的样品为23份(76.67%),具有耐受2种以上抗菌素细菌的样品为7份(23.33%),具有耐受3种以上抗菌素细菌的样品为1份(3.33%);共分离得到耐受四环素菌株37株、耐受环丙沙星8株、耐受庆大霉素菌株7株;随机挑选6株(每种抗菌素耐受细菌选取2株)进行16S rRNA鉴定,结果为黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)1株、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)2株、琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii)1株、阪崎肠杆菌(Cronobacter sakazakii)1株和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)1株;6株细菌中α溶血3株,β溶血1株,γ溶血2株;纸片法验证结果显示,只有1株分离细菌对庆大霉素敏感。结论:鲜牛奶样品中普遍存在多种耐药性细菌,抗菌素平板可以用于初步分析牛奶样品的耐药性细菌。

高原压疮感染患者的病原菌分布

目的 探讨高原压疮感染患者病原菌种类,为临床合理用药及对症处理提供依据。方法 选择2014年1月-2017年1月高原医院83例压疮感染患者为研究对象,采集所有患者感染部位深部的化脓组织样本进行细菌培养,使用全自动微生物鉴定系统进行菌种鉴定,药敏试验采用K-B纸片法,记录高原压疮患者感染病原菌类型、分布及耐药性。结果 压疮感染患者共培养出病原菌83株,革兰阴性菌46株占55.42%,以大肠埃希菌和铜绿假单胞菌占比最高,分别占21.69%和16.87%;革兰阳性菌37株占44.58%,以金黄色葡萄球菌占比最高;大肠埃希菌和铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药率低,对青霉素和头孢类抗菌药物耐药率较高;金黄色葡萄球菌对利奈唑胺、莫西沙星等抗菌药物耐药率较低,对红霉素、庆大霉素等抗菌药物耐药率较高,未检出耐万古霉素菌株。结论 高原压疮患者感染病原菌以革兰阴性菌为主,临床应根据药敏结果结合耐药趋势进行合理用药,在抗菌药物应用中应联防联控,以加强用药合理性,减缓耐药菌的出现。