吡罗昔康贴剂溶出度的测定及不同测定方法结果的评估

目的:采用桨碟法、转筒法、扩散池法测定吡罗昔康贴剂的溶出度,并对溶出结果进行评价,以期选择能更加准确反映吡罗昔康贴剂释药过程的测定方法,为科学准确评价药品质量提供参考。方法:建立检测吡罗昔康的液相色谱测定方法,分别使用桨碟法、转筒法、扩散池法考察吡罗昔康贴剂的24 h溶出曲线,分别使用f 1差异因子法、f 2相似因子法、Weibull模型拟合对溶出曲线进行比较,评估不同测定方法的结果。结果:吡罗昔康在1~150μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r=1.000),准确度100.9%(n=9),精密度1.7%(n=9),样品溶液在72 h内稳定。溶出曲线比较结果表明,吡罗昔康贴剂的溶出曲线更符合Weibull模型。在相同溶出介质和温度的条件下,桨碟法和转筒法差异不大,存在相互替代的可能性,扩散池法与其他2种方法均存在显著性差异。结论:扩散池法的装置更加符合吡罗昔康贴剂在实际使用中的溶出过程,为该药物的质量评价提供更多的参考。

丹参根腐病病原菌及其生防菌的筛选

本研究旨在筛选用于丹参根腐病防治的生物防治菌株。实验以山东省日照市、临沂市、泰安市发病的丹参及健康丹参的根际土为试材。采用组织分离法从发病丹参中分离病原菌,采用稀释涂布法和平板对峙法从根际土中筛选生防菌,利用形态学和16S rRNA进行鉴定,并在离体丹参上进行防效验证。结果表明,从发病丹参上分离出的病原菌RBT-2-1为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti),从根际土中筛选出的生防菌i为绿针假单胞菌橙色亚种(Pseudomonas chlororaphis subsp.aurantiaca)。i对TBG-2-1的抑菌率为66.67%,i在离体丹参上对TBG-2-1的防治效果预防组均高于治疗组,且预防组中追加i菌液的防效最好,为44.45%,比预防组中未追加i菌液的处理提高了1.6倍,比治疗组提高了7.0倍。由此可知,i的接种顺序及使用次数会影响对TBG-2-1的防效。本研究为后期大田试验提供参考依据。

改良K-B法用于副溶血性弧菌耐药性检测

K-B纸片法是最为广泛的细菌药敏测定方法之一,针对常见的食源性致病菌副溶血性弧菌,对K-B纸片法进行优化和改良。通过建立OD-菌数对应公式以代替传统的麦氏比浊方法,并根据抑菌圈判别结果的差异,选择了标准一次性平皿(9 cm×9 cm),同时对比3种不同的涂布方法,得出定量300μL棉拭子涂布方法变异系数(CV)最小,最后通过8株野生副溶血性弧菌的耐药性检测,表明改良K-B法与传统方法的实验结果基本保持一致。从而建立了一种更高效、更快捷的细菌耐药性测量方法,可应用于副溶血性弧菌的耐药性检测。

医院获得性肺炎的病原菌分布特征及其耐药性分析

目的探讨医院获得性肺炎的病原菌分布特征及其耐药性。方法选取2018年1月至2021年1月80例于漳州市中医院住院并继发医院获得性肺炎患者作为研究对象,均进行无菌采集痰液及下呼吸道分泌物经常规细菌培养鉴定,分析病原菌分布特征,并采取纸片扩散法(K-B法)药物敏感试验测定耐药性,分析病原菌对常用抗菌药物的耐药性。结果铜绿假单胞菌对氨苄西林耐药率最高,为88.24%,对环丙沙星耐药率最低,为11.76%。肺炎克雷伯菌对氨苄西林和氨苄西林/舒巴坦耐药率最高,为92.86%,对环丙沙星耐药率最低,为7.14%。金黄色葡萄球菌对利奈唑胺耐药率最高,为100.00%;对万古霉素没有耐药,耐药率为0.00%。结论临床在开展抗感染治疗时,应根据病原学检查结果,选择恰当的药物进行治疗,降低病死率,缩短住院时间。

半枝莲水提液体外抑菌及抑菌稳定性研究

目的 探究半枝莲水提液对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、耻垢分枝杆菌的体外抑菌活性及抑菌稳定性,为临床应用及开发植源性抑菌药物提供研究基础。方法 采用纸片扩散法测定半枝莲水提液对供试菌的抑菌活性,琼脂稀释法测定其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC);同时以抑菌圈直径为指标,探究盐浓度、紫外光照射和不同pH对半枝莲水提液抑菌稳定性的影响。结果 半枝莲水提液对4种供试菌有抑菌活性,抑菌圈直径分别为(18.27±0.25)、(18.0±0.50)、(17.7±0.26)、(18.0±0.00)mm,为高度敏感,MICs分别为5.41、6.08、6.08、5.41mg/ml。抑菌稳定性实验结果表明,盐浓度、紫外光照射、pH对半枝莲水提液体外抑菌活性均无显著影响(P>0.05),抑菌活性保留率均>95.0%。结论 半枝莲水提液对4种供试菌有良好的体外抑菌活性和抑菌稳定性。

禽源沙门氏菌的血清型鉴定和耐药性研究

为了解我国禽源沙门氏菌血清型的分布情况和耐药情况,选取江西、辽宁和广东3个省的部分养殖场进行用药调查和采样,分离到25株沙门氏菌,进行血清型鉴定和对24种抗菌药物的药物敏感性试验。结果显示,分离株的血清型主要为O1、O2、O9和O12,分离细菌对阿米卡星和头孢曲松均敏感,但对萘啶酸、阿莫西林、氨苄西林、链霉素、四环素、磺胺、复方新诺明和部分氟喹诺酮类药物的耐药率都大于50%。

细菌药物敏感性实验方法研究进展

致病菌的耐药性已成为世界范围内的公共卫生和安全问题,如何对致病菌的耐药性进行准确快速的检测是许多微生物科研人员和医疗工作者共同面临的难题。根据近年国内外有关研究资料与报道,对于细菌耐药性的检测和分析主要通过对细菌进行药物敏感性实验来执行。目前用于细菌药敏性实验的方法主要包括:肉汤稀释法、琼脂稀释法、K-B纸片法和E-test实验等。文中就以上几种细菌药敏性实验方法的原理、步骤及优缺点进行了概述,并对各种实验方法的应用进行了举例分析。

耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准,比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的优缺点。方法对临床分离的70株葡萄球菌(其中金黄色葡萄球菌40株,凝固酶阴性的葡萄球菌30株)分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准KB(Kirby Bauer)法进行。结果经PCR法检测mecA基因,耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为75.0%(30/40)和80.0%(24/30);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93.3%、95.9%;90.0%和100%;苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90.0%、87.5%;90.0%和83.3%;乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100.0%、100.0%;100.0%和100.0%。与PCR结果比较,3种方法所获得的结果经统计学分析,差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法;乳胶凝集法检测快速,结果可靠,但检测成本高;实验室应选择合适的方法,以提高MRS的检出率。

羊耳菊水提取物体外抑菌活性研究

目的探讨羊耳菊不同器官水提取物的体外抑菌活性。方法以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌等10种微生物为试验菌株,采用药敏纸片扩散法、试管二倍稀释法,对羊耳菊水提取物进行抑菌试验。结果羊耳菊全株各器官都具有较强的抑菌作用,其中根对10种供试菌种都有抑制作用,抑制范围最广;茎对9种供试菌种有抑制作用,叶对8种供试菌种有抑制作用。羊耳菊各器官对金黄色葡萄球菌与铜绿假单胞菌的抑制作用最强。羊耳菊根、茎、叶对金黄色葡萄球菌的MIC值分别为15.63,62.5,62.5 mg/ml,而其抑菌圈直径分别为14.3,13.8,13.5 mm;羊耳菊根,茎,叶对铜绿假单胞菌的MIC值分别为15.63,31.25,62.5 mg/ml,其抑菌圈直径分别为15.8,15.5,14.0 mm。结论羊耳菊水提取物体外试验证实了该民间药物具有抗菌活性,也表明了羊耳菊是一种有开发潜力的新抗菌药物资源。

含硅多金属氧酸盐的抑菌作用

利用纸片扩散法研究了3种钒取代的硅钨酸盐α-1,2,3-K6H[SiW9V3O40],α-1,2-K6[SiW10V2O40]和α-K5[SiW11VO40](以下分别简写为α-SiW9V3,α-SiW10V2,α-SiW11V)及硅钨酸(H4SiW12O40.xH2O,简写为SiW12)对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌、黑曲霉和青霉的抑菌活性.结果表明,4种物质对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌和黑曲霉有不同程度的抑菌效果,但对青霉的抑菌效果较差.

含钒多金属氧酸盐的抑菌活性

按文献方法合成了α-Na10[PW9V3(H2O)3O37]·16H2O、α-Na10[PW11V(H2O)O37]·16H2O和[H3O]3[NH4]18[Mo57V6O183(NO)6(H2O)48]·56H2O(分别简称α-PW9V3、α-PW11V和Mo57V6)含V多金属氧酸盐。采用纸片法分别测试了它们对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌和黑曲霉菌的抑菌活性。3种化合物均有不同程度的抑菌作用,其中α-PW11V的抑菌效果最好。

湖南西部地区鸡大肠杆菌血清型分布及耐药性分析

[目的]研究湖南西部地区鸡大肠杆菌的血清型分布及其耐药性。[方法]从湖南西部地区12县市12个养鸡场分离出147株鸡源大肠杆菌,进行血清型鉴定,并测定分离率高的血清型对抗菌药物的敏感性。[结果]在分离到的18个血清型中,O_6、O(22)、O_8和O_4血清型分离率最高,分别为17.7%、12.2%、11.6%和10.2%,为优势型。按NCCLS推荐的纸片扩散法测定了其对14种抗菌药物的敏感性。结果表明,细菌耐药性严重,以多药耐药为主,分离菌对四环素和萘啶酸的耐药率最高,分别为96.6%和85.0%,细菌对头孢噻肟、头孢噻吩、头孢曲松较为敏感,其耐药率在2.0%～8.2%。[结论]为有效防治湖南西部地区鸡大肠杆菌病提供了有价值的参考资料。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法 用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果 mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论 头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。

Neo-Sensitab纸片扩散法与NCCL SM27-A微量稀释法测定97株酵母对抗真菌药物敏感性的比较

目的比较Neo-Sensitab纸片扩散法和NCCLS微量稀释法的一致性,评价该商品化方案的稳定性。方法同时采用NCCLSM27-A微量稀释法和Neo-Sensitab纸片扩散法测定临床分离的97株酵母对两性霉素B(AMB)、氟康唑(FCZ)、5-氟胞嘧啶(5-FC)、酮康唑(KCZ)和伊曲康唑(ITC)等五种常用抗真菌药物的敏感性。结果两种方法的药敏结果一致率分别为AMB100%,FCZ94.8%,5-FC93.8%,KCZ75.3%和ITC84.5%。结论纸片扩散法和微量稀释法药敏测试结果一致率较高,以FCZ、AMB和5-FC最佳,该方法检测敏感株的准确率较高,而在区分耐药株和中介株方面有所不足。

头孢西丁纸片法检测mecA基因介导的MRS

目的评价应用头孢西丁纸片扩散法检测mecA基因介导的耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)。方法分别用头孢西丁纸片法扩散法、苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、VITEK微生物自动分析系统及聚合酶链反应(PCR)mecA基因检测4种方法对MRS进行检测比较,最低抑菌浓度(MIC)测定应用VITEK微生物自动分析系统GPS卡。结果96株葡萄球菌属(金黄色葡萄球菌16株、凝固酶阴性葡萄球菌80株)中苯唑西林纸片法扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、VITEK微生物自动分析系统3种方法检出MRS菌株54株(金黄色葡萄球菌2株、凝固酶阴性葡萄球菌52株),而PCR法检出mecA基因48株(金黄色葡萄球菌2株、凝固酶阴性葡萄球菌46株),头孢西丁纸片法扩散法与PCR法一致。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测法高度一致,是筛选和确认mecA基因介导的MRS一种可靠的方法。

高良姜中的抗白念珠菌化学成分

目的研究高良姜抗白念珠菌的活性成分。方法以生物活性追踪结合色谱分离,用纸片扩散法检测抑菌作用,以各种色谱柱层析,包括制备高效液相色谱,得到单体化学成分,用波谱技术鉴定各化合物的结构,测定各化合物的抗菌效价。结果高良姜三氯甲烷提取物的抑菌活性最强。从三氯甲烷提取物中分离得到6个有抑菌活性的化合物,分别鉴定为2个黄酮类化合物:高良姜素(galangin)和芹菜素(apigenin);3个二芳基庚烷类化合物:7-(4-羟苯基)-1-苯基-4-烯-3-庚酮、5-羟基-1-(4-羟苯基)-7-苯基-3-庚酮,和1-(4-羟基-3-甲氧基苯基)-7-(4-羟苯基)-3,5-庚醇;1个半日花型二萜类化合物:16-醛-8(17),12-半日花二烯-15酸。结论抗白念珠菌实验表明,这6个化合物对白念珠菌均有一定的抑菌活性。

纸片扩散法和微量肉汤稀释法检测念珠菌氟康唑和伏立康唑药物敏感性的比较

目的评价纸片扩散法与微量肉汤稀释法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑药物敏感性的一致率。方法针对218株侵袭性真菌感染部位分离的念珠菌,分别采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)M44-A2纸片扩散法和CLSIM27微量肉汤稀释法进行药物敏感性检测。依据2018年颁布的CLSIM60新的纸片扩散法判定折点,以微量肉汤稀释法为标准评估纸片扩散法测定结果的分类一致率和错误率。结果2种方法检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和光滑念珠菌氟康唑药物敏感性的一致率分别为97.6%、95.1%、97.4%和90.5%。2种方法在检测白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌和克柔念珠菌伏立康唑敏感性的一致率分别为97.6%、90.2%、97.4%和81.2%。结论纸片扩散法检测念珠菌对氟康唑和伏立康唑的药物敏感性与微量肉汤稀释法一致率较高,是念珠菌药物敏感性测定简便且准确性较高的检测方法,推荐在真菌实验室常规检测或耐药监测网使用。

常见皮肤癣菌体外药物敏感试验的研究

目的比较液基稀释法和纸片扩散法对临床常见皮肤癣菌的体外药物敏感性。方法应用Rosco纸片扩散法和微量液基法（参考美国国家实验室标准委员会NCCLS推荐的M38-P方案修改方案）测定临床分离的40株皮肤癣菌（包括红色毛癣菌、须癣毛癣菌、犬小孢子菌及絮状表皮癣菌）对两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑和特比萘芬的体外药物敏感性。结果应用Rosco纸片扩散法，大部分菌株在7—9d时可读到清晰的结果。Rosco纸片扩散法和微量液基法结果中，特比萘芬、伊曲康唑和两性霉素B一致性较好，氟康唑较差。结论Rosco纸片扩散法操作简单，可选择用于皮肤癣菌对某些抗真菌药的药敏试验。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌

目的以PCR方法检测溶血葡萄球菌mecA基因为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcushaemolyticus,MRSH)的敏感度和特异性。方法用PCR扩增临床分离的114株溶血葡萄球菌,检测特异性的mecA基因片段;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测溶血葡萄球菌中耐甲氧西林的溶血葡萄球菌。结果114株溶血葡萄球菌经PCR法检测,MRSH有97株,占85.1%;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测MRSH分别有92、65、93株,与mecA基因法结果比较,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法敏感性分别为94.8%(92/97)、67.0%(65/97)、93.8%(91/97);特异性分别为100%(17/17)、100%(17/17)、88.2%(15/17)。χ2检验,头孢西丁纸片扩散法和mecA基因法差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSH具有很高敏感度和特异性,是筛选和确认MRSH的一种可靠方法。

生殖系统念珠菌感染的菌型及对6种抗真菌药物的体外药敏分析

目的检测性传播疾病病人念珠菌菌型及药物敏感性。方法采用法国梅里埃公司的ATB ID 32 C酵母菌鉴定反应板鉴定菌种和Rosco纸片扩散法进行念珠菌的体外药敏检测,比较不同菌型念珠菌的药敏趋势。结果临床155例生殖系统念珠菌感染者中白念珠菌110例(70.97%)、近平滑念珠菌22例(14.19%)、光滑念珠菌12例(7.74%)、热带念珠菌6例(3.87%)、其它念珠菌5例(3.23%),其药敏结果总体趋势为制霉菌素(100%)、伊曲康唑(89.03%)、氟康唑(95.48%)和酮康唑(96.13%)较为敏感,而益康唑(58.70%)和咪康唑(56.13%)的中介度和耐药性较高。结论唑类抗真菌药存在交叉耐药,不同菌型念珠菌药敏谱存在差异。