硫化砷对K_(562)/ADM细胞HSP70蛋白表达的影响

目的 :探讨硫化砷 (As2 S2 )对K5 6 2 及其耐药细胞株K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达的影响。方法 :采用流式细胞仪 (FCM)测定K5 6 2 和耐药细胞K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达及细胞凋亡 ,利用RT PCR方法检测HSP70的mRNA水平。结果 :硫化砷能增加细胞膜HSP70蛋白表达 ,且与时间及浓度成正相关 ,而在mRNA水平上仍有较高的表达。K5 6 2 ADM细胞膜HSP70蛋白表达和细胞凋亡率均高于K5 6 2 细胞。结论 :硫化砷能增加细胞膜HSP70蛋白表达 。

川芎嗪与β-榄香烯联合应用对K_(562)/ADM细胞的生长抑制作用

目的 :探讨川芎嗪与β-榄香烯联合应用对 K562 /ADM的生长抑制作用。方法 :以耐阿霉素细胞株 K562 /ADM为实验模型。结果 :1.两者对 K562 /ADM及 K562 细胞的 IC50 接近 ,即耐药细胞 K562 /ADM对两种中药制剂不具有耐药性。 2 .非细胞毒性剂量的川芎嗪 (TMP 3 5 0μg/ml)及β-榄香烯 (β-elemene 4.0μg/ml)可显著降低 ADM对 K562 /ADM细胞的 IC50 (P<0 .0 1) ,提高细胞对 ADM的敏感性 ,抗药性逆转分别为 2 .0 3倍及 2 .18倍。 3 .进一步将上述两种药物联合应用 ,发现其对 ADM的抗药性逆转为 4.65倍 ,明显高于二者单独应用 ,而且也高于两者单独应用之和 ,并且其对升高该细胞内 ADM的浓度也具有协同作用。结论 :川芎嗪与β-榄香烯联合应用能够抑制 K562 /ADM的生长 。

敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因促进K562/ADM细胞凋亡

目的研究短发夹RNA(shRNA)敲低花生四烯酸5脂加氧酶(Alox5)基因对慢性粒细胞白血病耐药细胞K562/ADM细胞凋亡的影响。方法设计并合成3对针对人Alox5基因的靶向shRNA片段,插入到p Genesil-1干扰载体中,经过酶切和测序验证,成功构建p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒,转染K562/ADM细胞,实时定量PCR和Western blot法检测Alox5 mRNA及蛋白水平,筛选最好干扰组。选择较高干扰效率的p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒组作为实验组,采用实时定量PCR检测K562/ADM细胞bcr/abl mRNA水平、Western blot法检测BCR/ABL融合蛋白水平、流式细胞术检测细胞凋亡率。结果酶切及测序结果显示重组质粒构建成功。与阴性对照组(p Genesil-1-K562/ADM)和空白K562/ADM细胞组相比,转染p Genesil-1-shRNA-Alox5重组质粒组的K562/ADM细胞Alox5 mRNA和蛋白水平均明显降低。敲低K562/ADM细胞Alox5后,bcr/abl mRNA、BCR/ABL融合蛋白水平均显著降低、细胞凋亡率显著增加。结论敲低Alox5基因后,K562/ADM细胞bcr/abl mRNA和BCR/ABL融合蛋白表达水平下降,细胞凋亡率增加。

丹皮酚对MDR逆转作用的研究

具有钙拮抗作用的中药制剂丹皮酚在非细胞毒性剂量下能降低化疗药物阿霉素 (ADM)、柔红霉素 (DAU )、长春新碱 (VCR)及长春花碱 (VL B)对多耐药 (m ulti drug resistance,MDR)肿瘤细胞株 K5 6 2 /ADM细胞的 IC5 0 ,且能提高细胞内化疗药物的浓度 ,但对细胞膜 P-糖蛋白的表达没有影响 ,表明丹皮酚具有逆转人红白血病细胞株 K5 6 2 /ADM细胞