P63及k19标记人角膜缘干细胞特异性对比研究

目的比较P63及k19在标记人角膜缘干细胞相对特异性的高低。方法使用免疫组织化学法检测P63及k19在人角膜中央上皮细胞及角膜缘干细胞的分布情况。结果在人角膜缘干细胞P63少量表达、k19大量表达;角膜中央上皮细胞P63基本没有表达、k19仍有少量表达。结论P63作为人角膜缘干细胞标记物的特异性高于k19。

水稻不育系K19A“九二0”施用技术研究

“九二０”施用时期和施用量的两组试验的结果分析表明：（１）在不同时期施用不同量的“九二０”，均能使Ｋ１９Ａ的株高、包颈长和节间长等发生规律性变化。当株高在１２４ｃｍ，包颈长在１ｃｍ左右，Ｋ１９Ａ异交结实率最高。（２）在用量为１０８ｇ／ｈｍ２时，“九二０”的最佳喷施期在抽穗率２２％～２６％之间.

K19在创面修复过程中的表达及意义

相关研究资料显示,在创面修复过程中,肉芽组织等多种皮肤组织内含有角蛋白19(K19)阳性表达的表皮干细胞,且随着创面的修复,此类干细胞的数量具有从无到有、从少到多,再从多到少、从少到无的变化规律,而表皮干细胞是创面修复及重塑的基础。由此可见,K19可能具有调节表皮干细胞增殖、分化及迁移,从而促进创面再生修复的功能;进一步深入研究K19在创面修复过程中的表达意义及作用机制,可为创面修复提供新思路、新方法。笔者通过查阅近年的相关文献资料,将K19在创面修复过程中的表达及意义予以综述,旨在为K19的研究提供理论依据。

太岁水提物对衰老皮肤透明质酸和表皮角蛋白K19的影响

目的:研究太岁水提物(tai sui aqueous extracts,TSAE)对衰老皮肤透明质酸(hyaluronic acid,HA)和表皮角蛋白K19的影响.方法:用D-半乳糖构建衰老大鼠模型,同时分别给予不同剂量的(0、50、100和200 mg/kg)的TSAE处理,利用HE染色法观察大鼠皮肤组织结构的变化,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测皮肤组织中透明质酸质量浓度,定量PCR和Western blot检测皮肤组织中透明质酸结合蛋白1(hyaluronan binding protein1,HABP1)、表皮角蛋白K19 mRNA水平和蛋白含量.结果:与对照组比较,模型组皮肤出现明显的病理性改变,HA质量浓度、HABP1、表皮角蛋白K19表达水平显著下降.与模型组比较,TSAE干预后,大鼠皮肤病理改变明显减轻,HA质量浓度、HABP1、表皮角蛋白K19表达水平明显上调.结论:TSAE对衰老皮肤有保护作用,机制可能与其干预HA含量及表皮角蛋白K19的表达有关.

不同发育阶段人皮肤β1整和素及细胞角蛋白K19表达特征及其与创面修复结局关系的研究

摘要严重烧创伤等所致皮肤损伤后的愈合能力随着人年龄的增大而逐渐降低,其原因涉及多方面,其中表皮细胞增殖分化潜能的改变可能是其重要原因之一。由于皮肤中印整和素及细胞角蛋白K19仅在具有增殖与分化潜能的表皮干细胞和短暂扩充细胞上表达,本研究利用阻整和素和细胞角蛋白K19单抗,观察人胚胎期、幼儿期、成人期皮肤中表皮干细胞和短暂扩充细胞分布、数量的差异,并探讨这种差异特征与创面表皮再生能力随年龄降低的关系。分别取23一24周龄胎儿、4一10周岁幼儿、35一51岁三组全层皮肤。取材后即刻10%甲醛固定,常规石蜡包埋,切片5拜m待用。采用免疫组织化学SP法,阻整和素和细胞角蛋白K19单抗分别购自Neo Markers和Maxim Bioteeh公司。日1整合素细胞膜染成棕黄色为阳性细胞,角蛋白细胞浆染成棕黄色为阳性细胞,同时设不加一抗的阴性对照。结果显示在胎儿期皮肤表皮基底层细胞邵整和素及角蛋白K19染色均为阳性,毛囊隆突部细胞阻整和素及角蛋白K19表达也均为阳性。

RT-PCR扩增K19检测胃癌区域淋巴结微转移

目的 :探讨 RT- PCR检测胃癌区域淋巴结微转移的价值及其应用前景。方法 :以病理组织学和 RT- PCR扩增 K19对 30例胃癌患者的癌组织标本及 12 6个淋巴结进行检测。结果 :30例胃癌患者癌组织均有 K19m RNA表达 ;12 6个淋巴结中 ,组织学阳性 2 6个 (2 0 .6 % ) ,而 RT- PCR阳性 4 2个 (33.3% ) ,RT- PCR扩增 K19及内参基因β- actin后 ,所有瘤组织、转移淋巴结显示 4 6 0和 5 4 0 bp的扩增片段 ,非肿瘤患者的淋巴结中仅显示 5 4 0 bp。结论 :RT- PCR扩增 K19m RNA检测胃癌区域淋巴结微转移是一种敏感、特异的检测方法 ,优于常规病理组织学。

K19 mRNA表达及其在诊断直肠癌淋巴结微转移中的意义

目的:研究角蛋白19(K19)mRNA在直肠癌区域淋巴结微转移中的表达及其临床意义。方法:通过病理组织学及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增K19mRNA对19例直肠癌患者的癌组织标本和51个淋巴结进行检测。结果:19例直肠癌患者癌组织均有K19mRNA表达;51个淋巴结中组织学阳性16个(31.4%),而RT-PCR阳性21个(41.2%),RT-PCR扩增K19mRNA及内参照β-actin后,所有癌组织及转移淋巴结显示221bp和461bp的扩增片断,而非肿瘤患者的8个淋巴结仅显示221bp扩增片断。结论:K19可作为检测直肠癌患者淋巴结微转移的分子标志物,RT-PCR扩增K19mRNA检测直肠癌区域淋巴结微转移可能是一种敏感、特异的检测方法,是对常规病理组织学方法的补充。

表皮干细胞K19、Bcl-2及PKB蛋白的表达

目的探讨角蛋白19(K19)、Bcl-2及蛋白激酶B(PKB)在人表皮干细胞中的表达及其意义。方法应用表皮组织干细胞培养技术及SP免疫组化技术对120张从正常健康人的包皮及皮肤组织提取培养的干细胞涂片进行K19、Bcl-2及PKB蛋白表达检测。结果 K19、PKB及Bcl-2在表皮干细胞中阳性表达率分别为75%、55%和30%;K19与PKB阳性表达率差异无统计学意义,而Bcl-2阳性表达率与K19及PKB的阳性表达率差异具有统计学意义。结论 K19为表皮干细胞特异性表达蛋白,PKB的阳性表达提示PKB在表皮干细胞的生长、代谢、增殖、凋亡中扮演重要角色,而Bcl-2的低表达,提示表皮干细胞虽然有较强的增殖能力,但抗凋亡能力不如肿瘤细胞。

RT-PCR检测K19 mRNA诊断直肠癌区域淋巴结微转移

目的:探讨RT-PCR检测K19 mRNA诊断直肠癌区域淋巴结微转移的价值及其应用前景。方法:通过病理组织学及RT-PCR扩增K19mRNA对19例直肠癌患者的癌组织标本和51个淋巴结进行检测。结果:19例直肠癌患者癌组织均有K19mRNA表达;51个淋巴结中组织学阳性16个(31.4%),而RT-PCR阳性21个(41.2%)。RT-PCR扩增K19 mRNA及内参照β-actin后,所有癌组织及转移淋巴结显示461bp和221bp的扩增片断,而非肿瘤患者的8个淋巴结仅显示221bp扩增片断。结论:RT-PCR扩增K19 mRNA检测直肠癌区域淋巴结微转移是一种敏感、特异的检测方法,优于常规病理组织学方法。

角蛋白19片段K19-2G2对肺癌诊断价值

目的:探讨血清K19-2G2检测对肺癌的诊断价值及临床应用。方法:应用化学发光免疫分析方法检测150例肺癌患者(肺癌组)、50例肺部良性疾病患者(肺部良性疾病组)和150例健康体检者(对照组)血清K19-2G2浓度;同时检测血清CYFRA21-1浓度。结果:肺癌组血清K19-2G2浓度高于肺部良性疾病组(P<0.05)和对照组(P<0.01),K19-2G2检测肺癌的灵敏度为57.8%,特异性为99.0%,其灵敏度和特异性优于CYFRA21-1;在不同病理类型肺癌中,肺鳞癌组K19-2G2的水平明显高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:K19-2G2是一种有效的非小细胞肺癌肿瘤标志物,尤其适用于肺鳞癌的诊断。

K14、K19在寻常型银屑病发病中的作用机制研究

目的:研究细胞角蛋白K14、K19在寻常型银屑病(PV)发病中的作用机制。方法:选择从2012年1月到2016年12月在西安交通大学第二附属医院皮肤科就诊的PV患者60例纳入本次研究。将PV患者在皮损区及未受累皮肤区分别取1份皮肤,制成存档蜡块,分别记为PV皮损组和PV未受累皮肤组各60例。另选同期在我院接受外伤手术治疗的健康皮肤60例作为对照组,分析K14、K19在PV中的阳性表达率以及表达水平,分析K14及K19在PV皮损区阳性表达的相关性。结果:各组的K14及K19阳性表达率以及表达水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。PV皮损组和PV未受累皮肤组的K14阳性表达率及表达水平明显高于对照组,K19阳性表达率及表达水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PV皮损组的K14阳性表达率及表达水平明显高于PV未受累皮肤组,K19阳性表达率及表达水平明显低于PV未受累皮肤组,差异有统计学意义(P<0.05)。根据Spearman法分析相关性发现,K14及K19在PV皮损区阳性表达中呈负相关(r=-0.871,P=0.000)。结论:K14及K19均在PV发病过程中出现异常表达,其中K14阳性表达较强,而K19阳性表达较弱,二者在PV皮损区阳性表达中呈负相关。临床上可考虑监测K14及K19的阳性表达水平,从而更好地辅助临床诊断及病情的预估,值得临床医师关注与重视。

补益营卫方对衰老皮肤表皮角蛋白K19的影响研究

目的观察补益营卫方对衰老小鼠表皮角蛋白(Keratin,K)K19的影响,探讨补益营卫方延缓皮肤衰老的机制。方法以自然衰老小鼠为研究对象,制备冰冻切片,应用免疫荧光法观察补益营卫方对衰老皮肤表皮K19表达的影响。结果衰老小鼠皮肤表皮中K19的表达水平较年轻小鼠明显下调,两者之间有显著差异(P<0.05)。应用补益营卫方高、中、低剂量组处理后,可显著提高K19在衰老表皮的表达,与老龄模型组比较有统计学差异(P<0.05),中、低剂量组较高剂量组为高(P<0.01)。结论补益营卫方通过促进衰老皮肤表皮K19的表达,起到延缓皮肤衰老作用。

Marjolin's溃疡鳞状细胞癌组织中K19、β1整合素的表达

目的检测Marjolin's溃疡鳞状细胞癌中K19、β1整合素的表达情况,探讨Marjolin's溃疡鳞状细胞癌发生与皮肤干细胞的关系。方法选取10例Marjolin's溃疡鳞状细胞癌组织标本、10例皮肤慢性溃疡伴假上皮瘤样增生组织标本、10例原发性皮肤鳞状细胞癌标本、5例正常皮肤组织标本,采用免疫组织化学染色分析皮肤干细胞标记物K19、β1整合素的表达。结果 Marjolin's溃疡鳞状细胞癌组织中,部分癌细胞K19、β1整合素阳性表达,K19为胞浆染色阳性,β1整合素为胞浆、胞膜染色阳性;皮肤慢性溃疡伴假上皮瘤样增生组织在不典型增生部位部分细胞有K19、β1整合素阳性表达;原发性皮肤鳞状细胞癌组织中无K19、β1整合素的表达;K19、β1整合素在正常皮肤毛囊的隆突部位以及基底层仅有少量细胞呈阳性表达。结论皮肤慢性溃疡可以癌变成Marjolin's溃疡鳞状细胞癌,癌变的种子细胞可能来源于溃疡局部的皮肤干细胞。

地芝丸对D-半乳糖衰老小鼠表皮角蛋白K19、水通道蛋白AQP3及皮肤组织形态学结构的影响研究

目的:观察地芝丸对D-半乳糖衰老小鼠水通道蛋白AQP3、角蛋白K19、以及皮肤组织形态学结构的影响,探讨地芝丸延缓皮肤衰老的作用机制。方法:以D-半乳糖衰老小鼠为研究对象,测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量,以及HE染色法观察各组小鼠皮肤组织形态学结构改变。应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠皮肤AQP3的含量,免疫荧光法检测表皮角蛋白K19的表达。结果:与空白对照组比较,模型组皮肤表皮层和真皮层明显变薄;SOD、AQP3含量降低、K19表达下调、MDA含量升高。与模型组相比较,地芝丸剂量依赖地使SOD、AQP3明显增高,MDA降低,使VE组、地芝丸各组小鼠皮肤组织形态学结构有所改善,表皮层和真皮层厚度增厚,K19表达上调,尤以27.3 g/kg组最显著。结论:地芝丸通过改善皮肤组织形态学结构,促进D-半乳糖衰老小鼠表皮AQP3、K19的表达,起到延缓皮肤衰老作用。

人头发毛囊外根鞘中有二个不同的K19阳性区:干细胞储库的统一假说?

至今,人生长期毛囊中干细胞的定位依靠三种互补的检查方法:即检测缓慢周期生长细胞、高集落形成细胞和分化细胞的免疫组化染色。由于干细胞既可以是位于隆突部位的长期标记的保留细胞,也可以是位于毛囊下三分之一处的高集落形成细胞,所以这些技术往往产生相互矛盾的结果。为了阐明毛发生长周期中人毛囊干细胞的分布情况,我们研究了通常被认为是上皮干细胞标志的细胞角蛋白19(K19)的表达。发现人生长期毛囊中有两个干细胞储库,分别位于毛囊的上、下三分之一处。这两个储库在毛囊的退行期-休止期的过渡阶段发生融合,在新形成的生长期毛囊中再次分开。

创面愈合过程中创缘表皮干细胞的再分布

目的:研究皮肤干细胞在全层皮肤创面愈合过程中的分布与增殖分化特征,以及该特征在创面愈合过程中的作用。方法:10只Wistar大鼠背部各制备4个面积为2.54cm^2的全层皮肤创面,将创面随机分为2组,即银锌霜治疗组(20个创面),空白对照组(20个创面)。分别于伤后3d、1周、2周和3周以组织学检查动态观察各组治疗效果,并以β_1整合素、角蛋白19(K19)免疫组化法检测表皮干细胞在创面愈合过程中的表达情况。结果:两面创面愈合率为银锌霜组80%(16/20)。两组创面肉芽组织于各时相点均未见β_1整合素、K19阳性细胞出现,但于创缘表皮的层或颗粒层出现了散在的β_1整合和K19同时染色阳性细胞。且越接近创面这些阳性细胞越密集,组织学上与基底层的阳性细胞无直接联系,其数量随着创面的缩小渐渐增加,直到创面愈合。上皮化后,这些阳性细胞逐渐减少,并随着愈合创面表皮脚的出现而消失,而感染创面的阳性细胞数量明显少于未感染创面的阳性细胞数。结论:表皮干细胞能动地与创面的修复,创缘表皮干细胞再分布的主要功能可能促进创面再上皮化。

皮肤组织工程中毛囊外根鞘细胞增殖能力及细胞角蛋白表达的意义

目的:通过培养人毛囊外根鞘细胞群,观察其增殖活性及细胞角蛋白K19的表达。方法:利用人头皮拔出的毛发,以组织块法和酶消化法培养毛囊外根鞘细胞,用四氮噻唑蓝(MTT)法比较其与表皮角质形成细胞的增殖能力,用免疫组化检测培养外根鞘细胞中细胞角蛋白K19的表达。结果:外根鞘细胞具有较表皮角质形成细胞更强的增殖能力,而且在培养的外根鞘细胞中有大量细胞角蛋白K19阳性的细胞。结论:由于外根鞘细胞具有较表皮角质形成细胞更强的增殖能力,同时含有大量K19阳性细胞,可以作为皮肤组织工程种子细胞来源。

一起水型暴发感染性腹泻的病原学检测结果报告

目的水型暴发流行的病原菌检测。方法采集本次水型暴发流行的肛拭子10份,各种水样8份。参照GB/T4789-2003;GB17012-1997附录A;GB15984-1995;GB18466-2001进行检验。结果10份肛拭子中检出4份ETEC O_(25)K_(19)(L)占40%,8份水样中检出ETEC O_(25)K_(19)(L)2份,占25%。结论本次水型暴发流行是由产肠毒素大肠埃希氏菌ETECO25K19(L)引起的感染。