特发性低促性腺激素型性腺功能减退患者KAL1基因突变分析

目的:分析男性特发性低促性腺激素型性腺功能减退(IHH)患者KAL1基因突变。方法:30例IHH患者运用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)结合PCR产物直接测序技术分析KAL1基因外显子突变。结果:在30例IHH患者中共发现3例KAL1基因突变,其中1例无义突变,为(c.1270C>T,p.R424X);2例移码突变,分别为(c.279_280delAG,p.G94fs)和(c.1886_1887delTT,p.L629fs)。结论:本文检测到3例KAL1基因突变,其中2例突变是新发现的突变,1例是文献报道过的突变,为IHH的分子遗传学研究积累了宝贵资料。

全外显子组测序技术检出Kallmann syndrome患者KAL1基因新突变

目的分析Kallmann syndrome家系患者的分子遗传机制。方法利用全外显子组测序技术对先证者进行测序分析,按照ACMG解读规则筛选致病性突变,Sanger测序对所有家系成员验证突变结果。结果捕获且比对到目标区的碱基量为3418.98Mb,平均测序深度为77.66X,覆盖度为99.23%,共检出5056个变异,3174为罕见变异(RSV),KAL1基因c.1735_1736insT突变为疑似致病性突变,且满足家系共分离。结论 KAL1基因c.1735_1736insT框移突变为新的疑似致病性突变。

女性特发性低促性腺激素性性腺功能减退症的临床评价及KAL1和FGFR1基因突变分析

目的探讨女性特发性低促性腺激素性性腺功能减退症(Idiopathic Hypogonadotropic Hypogonadism,IHH)的临床特征和相关基因。方法分析4例IHH的临床资料和实验室检查结果,PCR直接测序法对其中3例与健康对照的促性腺激素释放激素受体(GnRHR)、卡尔曼综合征1(KAL1)和纤维母细胞生长因子受体1(FGFR1)基因编码区进行测序分析。结果 4例均具无第二性征发育,逾青春期无月经来潮,促性腺激素及性腺激素水平显著低于正常;正常女性染色体核型,无嗅觉障碍,头部核磁示嗅球和嗅沟均正常。其中3例进行基因检测,未发现GnRHR基因突变,但例3和例4 KAL1基因有两个核苷酸多肽性;例3 FGFR1基因第3外显子第251核苷酸A转换成T,导致错义突变Glu84Val。结论 3例中仅1例发现FGFR1基因突变,提示可能有其他因素导致IHH。

肿瘤转移抑制基因KAI1在大肠癌进展中的作用

背景与目的:对于肿瘤转移抑制基因KAI1在大肠癌中的表达及其与病理分期的关系存有争议,关于它与肿瘤患者预后的报道仍然较少。本研究旨在探讨KAI1在大肠癌进展中的作用及其在预后判断中的价值。方法:采用免疫组化法检测91例大肠癌原发灶及25例淋巴结转移灶中KAI1表达。结果:KAI1在大肠癌原发灶中阳性表达54例(59.3%),弱阳性22例(24.2%),阴性15例(16.5%)。KAI1在低分化、有淋巴结转移、远处脏器转移肿瘤中表达显著降低(P<0.01);5年生存者的KAI1阳性表达率(67.14%)显著高于5年内死亡者(33.33%)(P<0.05);KAI1表达阳性、弱阳性以及阴性患者的5年生存率依次为87.04%、63.34%、60.00%,呈下降趋势(P<0.05),淋巴结转移灶的KAI1表达显著低于原发灶(P<0.05)。结论:KAI1的异常表达可能参与了大肠癌的恶性进展。检测KAI1的表达对判断肿瘤的分化、淋巴结转移和远处转移及大肠癌患者预后有一定的参考价值。

KAI1基因对MHCC97-H细胞裸鼠成瘤及转移的影响

目的:研究肿瘤转移抑制基因KAI1对MHCC97-H细胞裸鼠成瘤及转移的影响. 方法:将已转染KAIl正、反义核苷酸的高转移潜能肝癌细胞MHCC97-H接种裸鼠皮下,观察皮下肿瘤生长情况, 再将皮下肿瘤组织进行裸鼠原位肝接种,观察接种后肿瘤肺转移情况.其中,转染空载体及未转染的MHCC97-H亲本细胞作为实验对照组. 结果:正义组、反义组、空载体组及亲本细胞组裸鼠皮下均成瘤,肿瘤出现的时间、肿瘤块生长的速度无明显差异, 生长方式上反义组表现出明显的侵袭性.原位肝接种6 wk 后裸鼠肺部均出现癌巢,AFP染色可见癌巢中肿瘤细胞质有黄色颗粒沉着,证实为肝癌转移至肺形成的转移灶.与MHCC97-H亲本细胞组比较,反义组转移灶数目明显增加(P=0.00158),正义组转移灶数目明显减少(P=0.00465),差异均有显著性,而载体组传移灶数目无明显变化(P=0.15166). 结论:肿瘤转移抑制基因KAI1对MHCC97-H细胞裸鼠成瘤性及肿瘤生长无明显影响,但上调KAI1蛋白的表达水平能在一定程度上降低肿瘤的侵袭性、抑制转移的发生.这为肝癌的抗转移治疗研究提供了重要线索.

食管癌组织中KAI1基因的表达

目的 :探讨KAI1基因的表达与食管癌浸润转移的关系。方法 :采用RT PCR及免疫组化方法 ,检测 35例食管癌组织及其正常黏膜中KAI1mRNA及蛋白的表达。结果 :在食管癌组织及其正常黏膜中 ,KAI1mRNA的表达差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,而癌组织中KAI1蛋白的表达明显低于其正常黏膜 (P <0 .0 5 ) ,但KAImRNA及蛋白表达均与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关 (P >0 .0 5 )。结论 :食管癌癌变可能与KAI1蛋白的低表达有关 ,但与KAI1mRNA的表达无关 。

大肠癌组织中KAI1/CD82蛋白的表达

目的 :探讨KAI1 /CD82蛋白表达与大肠癌浸润和转移的关系。方法 :利用免疫组织化学SP法检测 2 4 1例大肠癌中KAI1 /CD82蛋白的表达。其中高分化腺癌 74例 ,中分化腺癌 90例 ,低分化腺癌 4 2例 ,未分化腺癌 35例 ;肿瘤位于黏膜层 (T0 ) 88例 ,黏膜下层 (T1 ) 1 9例 ,肌层 (T2 ) 5 5例 ,浆膜层 (T3 ) 4 2例 ,侵及外周组织 (T4) 37例。血道转移 1 4例 ,淋巴道转移 4 4例 ,种植性转移 4例。结果 :KAI1 /CD82蛋白的表达随大肠癌恶性程度、浸润深度及临床分期的增高而降低。临床分期有淋巴道和血道转移者KAI1 /CD82蛋白表达阳性率低于无转移者 (P <0 .0 1 )。结论 :大肠癌浸润和转移可能与KAI1

KAI1/CD82基因抑制肿瘤转移的研究进展

KAI1/CD82是近年来发现并分离出的一个新的肿瘤转移抑制基因,属于TM4SF(transmembrane4superfamily)家族成员,能与多种转录因子结合,调节基因转录。研究表明,KAI1/CD82在细胞膜上可与各种整合素分子、表皮生长因子受体组成复合体,通过PKC、IP4等信号通道来介导细胞的黏附,使肿瘤细胞不易脱离原发灶而起抑制转移功能,同时对肿瘤细胞的迁移和在转移部位的增殖有抑制作用,从而实现抑制肿瘤细胞转移和侵袭。本文就KAI1/CD82基因的结构、作用机制及抑制肿瘤转移及意义作一综述。

KAI1的基因表达与胃癌患者生存期的关系

目的检测胃癌组织中转移抑制基因KAI1的表达,分析其与临床病理特征及病人生存期之间的关系。方法采用免疫组化的方法检测92例胃癌组织KAI1的表达水平。结果KAI1在胃癌组织中表达率为42.4%,KAI1阳性表达率与胃癌分化程度、临床分期、淋巴结转移和远处转移显著相关(P<0.005),KAI1的高表达具有显著的生存优势(P<0.005),且独立于浸润深度、分化程度、淋巴结转移和远处转移。结论KAI1的表达与胃癌分化程度、临床分期及预后密切相关,KAI1表达可作为预测胃癌预后的指标。

一例Kallmann综合征患者双基因突变分析

目的分析Kallmann综合征(Kallmann syndrome,KS)患者KS1(Kallmann syndrome 1,KAL1),前动力蛋白2(prokineticin 2,PROK2)和前动力蛋白受体2(prokineticin receptor 2,PROKR2)3个基因的突变情况。方法 1采用放射免疫分析法检测激素水平,超声扫描评估腹部结构,脑部磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)检测嗅球、脑沟和内耳的结构。2运用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),结合PCR产物直接测序技术分析KAL1、PROK2和PROKR2 3个基因外显子突变。3分别利用SIFT、Polyphen和Mutation Taster 3种生物信息学平台进行了错义位点和多态性位点的功能分析。结果1患者青春期发育不良,嗅觉减退,其父母无症状。2在患者基因组中找到2个KAL1杂合突变位点(Ile 565 Thr和Ser 570Thr),5个KAL1基因单核苷酸多态性位点(single nucleotide polymorphism,SNP):Val 534 Ile、Val 560 Phe、Gly 567 Ser、Lys 666 Met和Agr 668 His,以及一个PROKR2纯合突变位点(Tyr 113 His)。同时也在患者父母基因组中检测到PROKR2杂合突变位点(Y113H)。3生物信息学分析结果显示I565T、S570T和Y113H(PROKR2)3个位点可能是该患者的致病基因位点。结论这2个新的突变位点还未在中国人群中报道过,这也是国内报道的第1例同时带有2个KAL1突变和一个PROKR2突变的KS患者,表明该患者可能是一个双基因遗传的KS患者。

Kallmann综合征分子遗传学研究进展

Kallmann综合征（KS）是一种临床和遗传异质性疾病，呈家族性或散发性发病。Ks是由胚胎时期嗅球、嗅束的异常发育致使GnRH-1神经细胞不能完成从鼻基板迁移至下丘脑这一过程所引起。GnRH分泌不足导致低促性腺激素性腺功能减退，嗅球、嗅束的异常发育或缺如引起嗅觉丧失。除上述典型症状外，KS患者还可以表现出一些非生殖和非嗅觉表型。KS分子遗传学机制十分复杂，目前只有6个KS致病基因被鉴定。KAL1基因与KS的X连锁隐性遗传模式相关。成纤维细胞生长因子受体1基因（FGFR1／KAL2）和成纤维细胞生长因子8基因（FGFS／KAL6）与常染色体显性遗传模式有关。但是这6个基因的突变只能解释25％～30％的KS病例，提示还有其他KS致病基因有待发现。本文就KS致病基因的研究进展、临床诊断和治疗作一综述。

β-半乳糖凝集素3和CD82／KAI1蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨β-半乳糖凝集素3（Gal-3）和CD82／KAl1蛋白在非细胞肺癌（NSCLC）组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化Elivision^TM plus法检测160例NSCLC组织和20例正常肺组织中Gal-3和CD82／KAl1蛋白的表达情况。结果在NSCLC组织中，Gal-3蛋白的阳性率为63．8％，高于正常肺组织的阳性率（25．0％，P〈0．01）。Gal-3表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移情况和pTNM分期有关（均P〈0．01）。CD82／KAl1蛋白的阳性率为37．5％，低于在正常肺组织中的阳性率（95．0％，P〈0．01）。CD82／KAll表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移情况和临床分期有关（P〈0．01）。Spearman相关分析显示，NSCLC中Gal-3的表达与CD82／KAll的表达呈负相关（r=-0．732，P〈0．01）。Kaplan-Meier生存分析显示，Gal-3阳性组和阴性组NSCLC患者的生存时间分别为（23．0±17．5）个月和（71．6±21．6）个月，差异有统计学意义（P〈0．001）；CD82／KAl1阳性组和阴性组NSCLC患者的生存时间分别为（72．5±19．5）个月和（21．6±16．1）个月，差异有统计学意义（P〈0．001）。多因素分析结果显示，GAL-3、CD82／KAl1表达和pTNM分期是影响NSCLC患者预后的独立因素（P〈0．01）。结论Gal-3和CD82／KAl1的表达水平与NSCLC的发生、发展和转移密切相关，联合检测Gal-3和CD82／KAl1对判断NSCLC的进展和预后有重要意义。