角质细胞生长因子KGF及其受体KGFR在中耳胆脂瘤中的表达及意义

目的探讨KGF与KGFR在中耳胆脂瘤组织中的表达和意义,以及两者在中耳胆脂瘤发病过程中的作用及表达规律性。方法取手术切除并经常规病理确诊的中耳胆脂瘤标本39例作为病例组,取经病理证实为正常皮肤组织的标本计数10例作为对照组;采用SABC免疫组织化学染色方法,运用计算机数字病理图像分析系统观察并计数阳性细胞表达情况。结果 KGF蛋白在病例组和对照组的阳性表达率分别为84.6%和0,两组间差异有统计学意义;KGFR蛋白在病例组和对照组的阳性表达率分别为82.1%和10.0%,差异有统计学意义;病例组中KGF和KGFR蛋白阳性表达之间存在显著正相关关系。结论 KGF和KGFR可作为特异性标记物,有助于中耳胆脂瘤的诊断并为易患性提供参考;KGF是促进上皮细胞增生的一种重要的细胞因子;KGF和KGFR之间存在旁分泌作用机制。

KGF及KGFR共表达促进铁过载肝细胞增殖

目的铁过载可以促进肝细胞的增生导致纤维化,但其确切机制尚不清楚。本文通过喂食大鼠3%羰基铁3个月后行70%部分肝切除建立动物模型,通过不同时间点(0,12,24,36h)研究铁过载肝细胞增殖的过程中KGF和KGFR的表达。方法我们通过免疫组织化学方法和非放射性原位杂交方法分别检测了KGF和KGFR的蛋白及mRNA水平。结果在正常组,各时间段铁沉积均未检测到。实验组在0小时肝实质细胞和肝间质细胞中铁沉积显著并且随时间而减少(12-36h)。KGF蛋白在正常组12小时肝小叶中央静脉周围的肝实质和肝间质中的细胞质中有表达,36小时这种表达达到最强,但是实验组KGF的表达在24小时最为显著。KGFR的表达在正常组中0小时肝实质细胞中出现,并随时间增加而逐渐增强,到36小时达到高峰。实验组0小时只检测出少量KGFR阳性细胞,到24小时达到高峰随后逐渐减少。KGF和KGFR mRNA的表达在实验组中24小时肝实质细胞同时达到最高。结论 KGF和KGFR的共表达在铁过载肝细胞的增殖过程中促进了肝细胞的增殖。

小鼠角质化生长因子受体（KGFR）重组腺病毒载体的构建

目的 构建表达小鼠KGFR基因的重组腺病毒.方法 提取小鼠肺组织RNA,RT-PCR获得cDNA后,PCR扩增目的 基因片段.将获得的KGFR基因插入载体质粒pShuttle-CMV,构建穿梭质粒pShuttle-CMV-KGFR（pKGFR）.线性化pKGFR后,转化入含Adeasy-1病毒骨架的BJ5183细菌中.筛选正确的同源重组质粒pAdeasy-1-pShuttle-CMV-KGFR（pAd-KGFR）,转染HEK293细胞,产生病毒颗粒Adeasy-1-pShuttle-CMV-KGFR（Ad-KGFR）.进一步,大量扩增病毒,氯化铯梯度离心纯化,测量病毒滴度.结果 ①经限制性内切酶酶切和基因测序鉴定,证实pKGFR构建成功;②限制性内切酶酶切,确定穿梭质粒重组于病毒骨架;显微镜下观察HEK293细胞形态,证实病毒包装复制成功;③病毒滴度2.25×10^10PFU/ml,达到进一步体内、体外实验要求.结论 成功构建的重组腺病毒Ad-KGFR,为了解KGFR在肺部疾病中的作用,及进一步的基因治疗肺纤维化奠定基础.

KGF对无排卵型功血子宫内膜上皮细胞ER和PR的调节研究

目的:观察角质细胞生长因子(KGF)对离体培养的无排卵型功血子宫内膜上皮细胞(EEC)中雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达的影响。方法:体外培养无排卵型功血子宫内膜上皮细胞,加入不同浓度的角质细胞生长因子作用后,RT-PCR检测ER和PR的mRNA表达改变,并与在体无排卵型功血子宫内膜组织及培养的正常子宫内膜上皮细胞进行比较。结果:RT-PCR方法检测两组ER和PR的mRNA的表达情况,结果显示功血组较对照组均显著增高(P<0.05)。结论:KGF对体外培养的EEC有增加ER和PR的作用,但程度不如正常的子宫内膜上皮细胞,提示无排卵功血可能存在与正常的子宫内膜上皮细胞不同的生长机制,但二者的作用均受KGF的影响。

角质细胞生长因子及其受体在Hela细胞中的表达及其作用

目的确定角质细胞生长因子(KGF)及其受体(KGFR)在Hela细胞中的表达及KGF对Hela细胞增殖的影响。方法取对数增长期的Hela细胞,采用RT-PCR在基因水平确定KGF及KGFR在Hela细胞中的表达;Western blot及ELISA在蛋白水平确定KGF及KGFR在Hela细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF对Hela细胞增殖的影响。结果①从基因水平和蛋白水平证实KGF及KGFR在Hela细胞中有表达。②人重组KGF因子对Hela细胞有明显的增殖作用。③用KGF抗体中和Hela细胞自分泌的KGF后,Hela细胞的增殖与对照组相比减弱(P<0.05)。结论Hela细胞中有KGF和KGFR的表达;KGF对Hela细胞有明显的增殖作用。

角质细胞生长因子及其受体在CaSki细胞中的表达及其作用

目的确定角质细胞生长因子(KGF)及受体(KGFR)在CaSki细胞中的表达及KGF对CaSki细胞增殖、迁移的影响。方法取对数增长期的CaSki细胞,ELISA和Western blot确定KGF及KGFR在CaSki细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞增殖的影响;Millicell测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞迁移的影响。结果1KGF、KGFR在CaSki细胞中有表达;2人重组KGF因子对CaSki细胞的增殖、迁移有促进作用(P<0.05);3用KGF抗体中和CaSki细胞自分泌的KGF后,CaSki细胞的增殖、迁移减弱(P<0.05)。结论KGF和KGFR在CaSki细胞中有表达;人重组KGF及CaSki细胞自分泌KGF对CaSki细胞的增殖、迁移均有促进作用。

硝苯地平导致牙龈增生机制的研究

目的:在牙龈成纤维细胞(gingival fibroblasts(GFs))与牙龈角质形成细胞(gingival kerati-nocytes,GKs)共培养下,研究硝苯地平导致牙龈增生的可能机制。方法:用不同浓度(0、0.2、20μg/mL)硝苯地平处理GFs和GKs的共培养体系,3 d后用逆转录PCR、酶联免疫吸附实验以及流式细胞计数等方法观察角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)及其受体(keratinocyte growth factor receptor,KGFR)的表达。结果:在共培养条件下,硝苯地平导致GFs表达KGF显著增高,并呈浓度依赖性。同时硝苯地平能促进GKs中KGFR基因表达上调,膜KGFR蛋白表达水平在硝苯地平浓度为0.2μg/mL时上调。结论:间充质-上皮作用途径之一的角质细胞生长因子-受体间相互影响,在硝苯地平导致牙龈增生中起着一定的作用;体外GFs-GKs共培养模型能够在更接近体内环境的状态下进一步研究牙龈增生的机制。

角质细胞生长因子及其受体在人卵泡膜细胞和颗粒细胞的分布

目的 探讨角质细胞生长因子 (KGF)及其受体 (KGFR)在人卵泡膜细胞和颗粒细胞的表达。方法 采用原位杂交和免疫组化方法分别观察KGF、KGFR在人卵泡膜细胞和颗粒细胞的分布。结果 KGFmRNA存在于正常人卵泡膜细胞和颗粒细胞中 ,KGFmRNA的表达为卵泡膜细胞高于颗粒细胞 (P <0 .0 5 ) ,KGFR的表达为颗粒细胞高于卵泡膜细胞 (P<0 .0 5 ) 。结论 人卵泡膜细胞分布有KGF ,颗粒细胞分布有KGFR ,两者可能存在旁分泌的调节作用。

角化生长因子及其受体在妇科肿瘤中的研究现状

在妇科肿瘤的诊断中,目前对这些疾病分子方面的检测尚无统一的、明确的标准,以宫颈癌为例,鳞状上皮细胞癌抗原的检测仍是目前研究该类疾病的主要内容之一,人们期望在众多所检测的因子中,能寻找到具有对疾病诊断、预后及治疗等方面更为有效的新兴检测指标。角化生长因子及其受体目前在多种肿瘤中被发现表达异常,与多种肿瘤的发生发展相关,本文就其在妇科肿瘤发生发展中的检测变化、现阶段研究进展加以着重综述,显示了其在不同肿瘤、疾病中作用的多形性,探索变化的规律性,以期对临床诊治疾病获益。

脂多糖致小鼠急性肺损伤组织病理变化与角质细胞生长因子受体表达的关系

目的 :观察急性肺损伤 (ALI)时小鼠肺组织损伤程度与角质细胞生长因子受体 (KGFR)表达水平的关系 ,为基因治疗急性肺损伤提供依据。方法 :建立脂多糖 (LPS)造成的小鼠肺损伤模型和Ⅱ型肺泡上皮细胞 (A5 49细胞 )损伤模型 ,通过病理分析、反转录聚合酶链反应 (RT PCR)和荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)观察肺组织损伤程度与KGFR表达水平的关系。结果 :LPS造成轻度、中度和重度肺损伤时肺组织KGFR表达水平逐步下降 ,各种损伤程度之间KGFR表达存在显著差异 (P <0 .0 5 )。A5 49细胞的KGFR表达变化不明显 (P >0 .0 5 )。结论 :随着肺损伤程度的加重 ,肺组织KGFR表达水平逐次减低 。

角质细胞生长因子对大鼠肝癌细胞CBRH-7919增殖的影响

目的研究角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)对大鼠肝癌细胞CBRH-7919增殖的影响。方法MTT法检测不同浓度的重组人角质细胞生长因子(K102)对CBRH-7919细胞增殖的影响;免疫细胞化学技术检测角质细胞生长因子受体(keratinocyte growth factor receptor,KGFR)在CBRH-7919细胞中的表达。结果KGFR在CBRH-7919细胞的胞膜和胞质中均有表达,MTT实验显示K102对CBRH-7919细胞增殖作用与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论KGFR在CBRH-7919细胞的胞膜和胞质中存在表达,但K102对肝癌细胞CBRH-7919的增殖无明显作用。

角质细胞生长因子及其受体在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中表达的研究

目的:探讨角质细胞生长因子(KGF)及其受体(KGFR)在口腔扁平苔藓(OLP)和口腔鳞状细胞癌(OSCC)的表达及意义。方法:运用免疫组化SP法研究KGF及KGFR在糜烂型、非糜烂型OLP,高、中、低分化OSCC中的表达。结果:KGF在糜烂型和非糜烂型OLP中的表达差异无统计学意义,在高、中、低分化OSCC中表达差异也无统计学意义,但KGFR在非糜烂型OLP、正常口腔黏膜(NOM)、糜烂型OLP表达逐渐增强,差异具有统计学意义,KGFR在高、中、低分化OSCC中表达逐渐减弱,差异有统计学意义。结论:KGF对OLP,OSCC发生可能并不起关键作用。KGFR可能是影响口腔黏膜上皮细胞增殖的重要因素,可能与OLP的发病有关,且可作为监测OLP癌变的早期指标,KGFR还可能与OSCC的分化程度有关。

角质细胞生长因子研究进展

角质细胞生长因子 (KGF)属于成纤维细胞生长因子家族 ,它通过与受体 (KGFR)的结合 ,特异性地刺激上皮细胞的增殖 .KGF基因表达受到正负调控作用 ,正负调控作用的平衡对于KGF正常发挥功能具有重要意义 .KGF具有多种生物学功能 :参与组织、器官的发育 ,具有损伤防治功能 。

角质细胞生长因子(KGF)研究进展

角质细胞生长因子(KGF)属于成纤维细胞生长因子(FGFs)家族的成员之一,又称FGF一7,最早由Rubin等(1980)从人类胎肺成纤维细胞培养液中分离提纯获得的。人KGF的cDNA编码一含194个氨基酸的单链多肽,其分子量为26-28KD。KGF由各种来源的间质细胞分泌,与肝素有较强的亲和力,其受体KGFR属于蛋白酪氨酸激酶受体家族,目前已知该家族主要包括FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4四位成员,KGFR由FGFR2基因编码,为FGFR-2的剪接形式,即FGFR2Ⅲb,其主要分布于上皮细胞,KGF与靶细胞膜上的受体KGFR特异性结合后,促使受体自身磷酸化,从而启动细胞内信号级联反应,进而发挥多种生物学功能:参与组织器官发育、促进细胞增殖及组织损伤修复、减少放化疗引起的副反应,尤其与癌症的发生发展有着密切的联系。该文就KGF的研究进展进行综述。