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一种新发现的鱼类病毒KHV在国外的流行和研究现状 被引量:7
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作者 张利峰 刘晶 苏世敏 《中国动物检疫》 CAS 2003年第2期41-43,共3页
关键词 流行特点 外国 鱼类 病毒 khv 研究现状
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Preliminary Study on Effects of Anthraquinone Extract of Polygonum cuspidatum on KHV
2
作者 Zhuoyu WANG Ming CHEN +4 位作者 Bingkun YANG Changyou LIU Chanjuan CHEN Lihe FAN Yongjun WANG 《Asian Agricultural Research》 2022年第1期72-76,共5页
[Objectives]To study the toxic effect and antiviral activity of anthraquinone extract of Polygonum cuspidatum on infection of Koi herpes virus(KHV).[Methods]The MTT method and CPE microscopy were used to detect the co... [Objectives]To study the toxic effect and antiviral activity of anthraquinone extract of Polygonum cuspidatum on infection of Koi herpes virus(KHV).[Methods]The MTT method and CPE microscopy were used to detect the common carp brain(CCB)cytotoxicity of the P.cuspidatum anthraquinone extract in 48 h.Eight groups of different concentrations of the P.cuspidatum anthraquinone extract 1.96,3.91,7.28,15.63,31.25,62.5,125,250μg/mL experimental groups and a control group without drug effect were set up.After determining the maximum non-toxic range of the P.cuspidatum anthraquinone extract,the viral replication inhibition test was carried out.[Results]The concentration of the P.cuspidatum anthraquinone extract 31.25μg/mL was recognized as the maximum non-toxic concentration.The survival rate of CCB cells was higher than 80%,and the toxic dose(CC50)of the drug for 50%cell death was(72.67±2.12)μg/mL.The maximum inhibition rate of the P.cuspidatum anthraquinone extract was 78.63%±5.47%at a concentration of 31.25μg/mL,and the 50%effective drug dose(IC50)for inhibiting the virus was(13.67±0.47)μg/mL,and the therapeutic index(TI)was 5.48±0.49.In the direct virus killing test,the highest virus inhibition rate was 32.21%.[Conclusions]Under the experimental conditions,it can be concluded that the P.cuspidatum anthraquinone extract has high anti-KHV activity,and at the same time.It is expected to lay a theoretical foundation for the research of P.cuspidatum anthraquinone extract against KHV. 展开更多
关键词 Polygonum cuspidatum Koi herpes virus(khv) Antiviral effect
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锦鲤疱疹病毒(KHV)的检测技术概述 被引量:1
3
作者 张圆圆 王先科 贾滔 《河南水产》 2016年第4期1-2,6,共3页
本文介绍了锦鲤疱疹病毒(KHV)的临床感染症状和5种检测手段,包括PCR检测法、细胞培养分离法、透射电镜观察法、ELISA检测法、间接免疫荧光检测法(IFAT)等,旨在通过进一步了解锦鲤疱疹病毒病的发病机理,为KHV病毒株的分离纯化以及相关疫... 本文介绍了锦鲤疱疹病毒(KHV)的临床感染症状和5种检测手段,包括PCR检测法、细胞培养分离法、透射电镜观察法、ELISA检测法、间接免疫荧光检测法(IFAT)等,旨在通过进一步了解锦鲤疱疹病毒病的发病机理,为KHV病毒株的分离纯化以及相关疫苗的研制提供参考。 展开更多
关键词 khv 症状 检测 分离
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锦鲤疱疹病毒减毒株的筛选及免疫原性研究 被引量:1
4
作者 王好 刘丽凡 +3 位作者 于丹 王友超 周井祥 刘艳辉 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第10期171-174,297,298,共6页
为了致弱锦鲤疱疹病毒得到减毒株,试验采用细叶桉叶的提取液与病毒在细胞中共培养来致弱病毒,并以中和抗体试验检验弱毒株的免疫原性。结果表明:利用获得的减毒株在加强免疫42天时,抗锦鲤疱疹病毒中和抗体效价达到最高水平,同时灭活病... 为了致弱锦鲤疱疹病毒得到减毒株,试验采用细叶桉叶的提取液与病毒在细胞中共培养来致弱病毒,并以中和抗体试验检验弱毒株的免疫原性。结果表明:利用获得的减毒株在加强免疫42天时,抗锦鲤疱疹病毒中和抗体效价达到最高水平,同时灭活病毒免疫组的抗锦鲤疱疹病毒中和抗体水平低于KHV-P_(52)免疫组,PBS对照组未检测出抗锦鲤疱疹病毒的中和抗体,两个免疫组与对照组比较差异显著(P<0.05);KHV-P52免疫组对鲤鱼的免疫保护效果好,免疫保护率为100%。说明细叶桉叶提取液能有效致弱锦鲤疱疹病毒,通过试验获得了一株锦鲤疱疹病毒弱毒株。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒(khv) 锦鲤疱疹病毒病(khvD) 减毒株 免疫原性 细叶桉叶 中和抗体
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锦鲤疱疹病毒的检测与人工感染试验 被引量:14
5
作者 周永灿 袁军法 +3 位作者 任武泽 刘荭 江育林 石正丽 《武汉大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第S2期249-252,共4页
基于在美国和以色列普通鲤鱼和锦鲤中分离了一种新的疱疹病毒,命名为锦鲤疱疹病毒(KHV)或鲤鱼肾炎鳃坏死病毒(CNGV).本文根据GenBank登记的KHV序列设计了两对特异性引物,在我国患病的锦鲤样品中检测到该类病毒DNA.经对PCR产物进行克隆测... 基于在美国和以色列普通鲤鱼和锦鲤中分离了一种新的疱疹病毒,命名为锦鲤疱疹病毒(KHV)或鲤鱼肾炎鳃坏死病毒(CNGV).本文根据GenBank登记的KHV序列设计了两对特异性引物,在我国患病的锦鲤样品中检测到该类病毒DNA.经对PCR产物进行克隆测序,结果表明与GenBank登记序列完全一致.用组织匀浆上清人工感染健康锦鲤,并从试验感染鱼组织中检测到KHV病毒DNA.该结果表明KHV或CNGV已经传播到我国,应引起重视. 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒(khv) 鲤鱼肾炎鳃坏死病毒(CNGV) 人工感染 PCR检测
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锦鲤疱疹病毒潜伏感染实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:6
6
作者 陈俊杰 李媛媛 +4 位作者 阳瑞雪 古晶晶 汪开毓 耿毅 欧阳萍 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期310-314,共5页
为建立一种特异和敏感的检测锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)潜伏感染的方法,以KHV Sph基因为靶序列设计特异性引物,通过条件优化建立Real–Time PCR检测方法,并且对该方法进行特异性和敏感性评估及临床样品应用研究。结果显示:建立... 为建立一种特异和敏感的检测锦鲤疱疹病毒(koi herpesvirus,KHV)潜伏感染的方法,以KHV Sph基因为靶序列设计特异性引物,通过条件优化建立Real–Time PCR检测方法,并且对该方法进行特异性和敏感性评估及临床样品应用研究。结果显示:建立的方法与鲤痘疱疹病毒、金鱼造血器官坏死病病毒和鳗鲡疱疹病毒均无交叉反应,特异性强;最低检出率为42拷贝/μL,灵敏度高。用本方法对63份临床样品进行检测,有锦鲤疱疹病毒病(KHVD)病史的18份样品的检测结果全为阳性,阳性率为100%;从有临床症状的鱼中得到的15份样品的检测结果全为阳性,阳性率为100%;30份无任何临床症状鱼中的6份被检测为阳性,阳性率为20%。本试验中建立的水生动物疱疹病毒潜伏感染快速检测方法,可为潜伏感染KHV的临床检测提供一种快速、敏感和特异的检测手段,可为KHVD的分子流行病学调查和预防提供参考。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒(khv) 潜伏感染 实时荧光定量PCR(Real—TimePCR)
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锦鲤疱疹病毒病简述 被引量:5
7
作者 段宏安 周毅 +5 位作者 徐晔 姚燕林 丁超 曹洁 范广宇 孟祥龙 《中国动物检疫》 CAS 2015年第6期48-52,共5页
锦鲤疱疹病毒病是一种危害严重,尚无有效治疗方法的高致病性传染病。本文汇集大量科研成果,从病原学、流行病学、病理学三个角度对该病毒的特性进行简述,在此基础上,推荐了实验室检测技术,提出了防控建议。
关键词 锦鲤疱疹病毒病 khv 病原学 流行病学 病理学 预防与控制 检测技术
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锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白基因的PCR扩增与序列分析 被引量:12
8
作者 谭爱萍 邹为民 +6 位作者 赵飞 姜兰 陈信廉 劳海华 简清 陆小萏 罗理 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期880-884,共5页
为了进一步研究锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白(KHV-MEP)的功能及锦鲤疱疹病毒(KHV)的感染机制,根据KHV-MEP基因序列设计并合成1对引物,从自然感染KHV发病的锦鲤(Cyprinus carpio Koi)肝组织总DNA中扩增获得特异性基因片段。将所得基因片段... 为了进一步研究锦鲤疱疹病毒主要囊膜蛋白(KHV-MEP)的功能及锦鲤疱疹病毒(KHV)的感染机制,根据KHV-MEP基因序列设计并合成1对引物,从自然感染KHV发病的锦鲤(Cyprinus carpio Koi)肝组织总DNA中扩增获得特异性基因片段。将所得基因片段克隆到pMD18-T Simple Vector载体中,获得重组质粒T-KMEP;酶切鉴定后进行序列测定,并采用氨基酸亲水性分析软件TMpred对其编码氨基酸序列进行分析;在对该片段所编码氨基酸可能抗原位点分析的基础上,进行PCR改造构建原核表达载体,获得重组表达载体pBV-KMEP1和pBV-KMEP2。所获得的基因片段大小为771bp,该基因片段与GenBank中已登录的KHV-MEP基因(AB178537)的同源性为100%,是一个完整的开放阅读框,所编码的蛋白由256个氨基酸组成,分子量为28.2kD,等电点(PI)为8.65。该序列含有4个跨膜区,可构成主要抗原决定簇。结果显示所获得的目的基因片段就是锦鲤主要囊膜蛋白全基因。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒 主要囊膜蛋白基因 序列分析 原核表达载体
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平面行星分度凸轮机构 被引量:16
9
作者 张策 杨玉琥 +2 位作者 叶青 孟彩芳 陆锡年 《机械科学与技术》 CSCD 北大核心 1996年第6期871-874,共4页
提出了一种新型的分度凸轮机构,这种机构特别适用于大分度数的场合。它具有同时工作的滚子数多、强度高,因而可以设计得更紧凑的特点。本文阐述了其结构、工作原理。
关键词 分度 凸轮机构 行星齿轮传动 间歇机构
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四川地区一株锦鲤疱疹病毒的分离鉴定及系统进化分析 被引量:5
10
作者 陈俊杰 李媛瑗 +5 位作者 阳瑞雪 汪开毓 耿毅 黄小丽 陈德芳 欧阳萍 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期141-148,共8页
2015年5月,四川某鲤养殖场暴发一种传染性疾病,导致鲤大面积死亡,死亡率高达80%。为研究此次疾病病因和流行规律,将病料进行解剖、细菌学检查、病理组织观察、PCR鉴定、病毒分离和系统进化分析。结果显示,发病鱼眼球凹陷,胸鳍及腹鳍出... 2015年5月,四川某鲤养殖场暴发一种传染性疾病,导致鲤大面积死亡,死亡率高达80%。为研究此次疾病病因和流行规律,将病料进行解剖、细菌学检查、病理组织观察、PCR鉴定、病毒分离和系统进化分析。结果显示,发病鱼眼球凹陷,胸鳍及腹鳍出现出血斑,病鱼鳃严重坏死,肾脏肿大。细菌检查为阴性。组织病理学观察,病变最明显的是鳃和肾脏。病鱼鳃丝血管扩张充血,鳃小片呼吸上皮细胞肿胀、脱落。鳃丝基部的上皮细胞大量增生,层次增多。肾小管上皮细胞组织结构紊乱,细胞肿胀,管腔变狭小,有崩裂和坏死现象。提取病鱼的肾脏和鳃组织DNA为模板,针对世界动物卫生组织(OIE)推荐的检测锦鲤疱疹病毒(KHV)的Sph基因进行PCR检测,出现特异性扩增产物。将病鱼的肾脏和肝脏组织研磨过滤灭菌后,腹腔注射20尾健康鲤,实验组表现为急性死亡(累积死亡率为90%),出现与自然发病鱼相同的症状。将组织匀浆接种到普通鲤脑细胞系(CCB),盲传3代后可稳定地观察到典型的细胞病变。细胞培养物染色超薄切片电镜观察结果显示,病毒为有囊膜的球状,病毒粒子直径为180~200 nm。对分离株的TK基因全长序列进行系统发育分析,证实该毒株属于KHV亚洲1型毒株。本研究首次报道我国西南地区养殖鲤中KHV感染引起大面积死亡,为KHV起源进化、分类以及疾病诊断和防控提供重要依据。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒 鲤疱疹病毒III型(Cy HV-3) 分离鉴定 系统进化分析
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单壁碳纳米管载锦鲤疱疹病毒ORF149核酸疫苗的构建
11
作者 胡峰 王庆 +5 位作者 李莹莹 曾伟伟 王高学 朱斌 王英英 尹纪元 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期206-213,共8页
为了开发新型高效疫苗预防锦鲤疱疹病毒病,以单壁碳纳米管(SWCNT)作为运输载体,构建锦鲤疱疹病毒(KHV)ORF149核酸疫苗。首先构建pcDNA3.1(+)-ORF149重组质粒,通过瞬时转染和免疫印迹分析确定其表达情况,然后通过1,3-偶极环加成反应法将... 为了开发新型高效疫苗预防锦鲤疱疹病毒病,以单壁碳纳米管(SWCNT)作为运输载体,构建锦鲤疱疹病毒(KHV)ORF149核酸疫苗。首先构建pcDNA3.1(+)-ORF149重组质粒,通过瞬时转染和免疫印迹分析确定其表达情况,然后通过1,3-偶极环加成反应法将重组质粒与SWCNTs进行偶联,最后通过扫描电镜观察和核酸电泳鉴定其偶联是否成功。结果表明,构建的重组质粒转染细胞后经免疫印迹分析和间接免疫荧光试验均能检测到特异性信号;在核酸琼脂糖凝胶电泳中,构建的重组疫苗电泳条带消失;在场发射扫描电镜观察下,与重组质粒进行偶联的SWCNTs和空白SWCNTs形态差异明显。 展开更多
关键词 单壁碳纳米管 khv ORF149 DNA疫苗
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锦鲤疱疹病毒天津株的分离与鉴定 被引量:1
12
作者 罗璋 郝爽 +3 位作者 张振国 孟一耕 史谢尧 冯守明 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期575-585,共11页
为分析近年来天津地区养殖鲤(包括锦鲤)暴发性死亡的病因,利用病原菌分离、细胞培养、电镜观察、组织病理切片、人工感染实验、PCR和荧光定量PCR检测、基因分型等方法对患病鱼及病原进行了研究。结果显示,在患病鱼体表未发现大量寄生虫... 为分析近年来天津地区养殖鲤(包括锦鲤)暴发性死亡的病因,利用病原菌分离、细胞培养、电镜观察、组织病理切片、人工感染实验、PCR和荧光定量PCR检测、基因分型等方法对患病鱼及病原进行了研究。结果显示,在患病鱼体表未发现大量寄生虫;在肝、脾、肾等内脏组织中未能分离到细菌;在鳃组织中发现大量的圆形病毒颗粒;使用患病鱼组织滤液感染锦鲤鳍条原代细胞,可观察到典型的细胞病变效应(CPE),注射患病鱼组织滤液和产生病变的细胞上清液可分别导致健康锦鲤93.3%和86.7%的死亡率;通过病理组织切片观察,主要病变组织为鳃、肝脏和肾脏。采用世界动物卫生组织(OIE)推荐的锦鲤疱疹病毒(KHV)检测方法进行PCR检测发现KHV呈阳性,且KHV在鳃组织中含量最高,肾脏次之,脑组织中最少。结合TK基因全长序列建立系统进化树和基因型分析,证实此次分离到的KHV为亚洲型毒株,属于I++II–基因型,将其命名为KHV-TJ1601株。这是我国华北地区首次报道KHV I++II–基因型的存在,可为KHV的进化分析和疫苗制备提供基础资料。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒 分离鉴定 基因型 天津
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锦鲤疱疹病毒囊膜蛋白ORF132的克隆及分析 被引量:1
13
作者 刘振兴 柯浩 +3 位作者 孟轩 林敏 陈棠堂 颜远义 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期134-136,共3页
提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通... 提取感染锦鲤疱疹病毒(KHV)的锦鲤(Cyprinus carpio koi)肾脏组织DNA,通过PCR扩增了KHV ORF132基因。该基因全长513 bp,所编码的蛋白包含170个氨基酸,分子量18.5 ku,等电点8.11,有信号肽以及2个潜在的O糖基化位点。应用DNA Star程序,通过综合分析二级结构柔性区、蛋白的亲水性、表面可能性、抗原性指数,预测KHV ORF132蛋白主要B细胞表位区段位于Leu40~Ala45、Asn53~Pro66、Arg97~Thr118、Ala125~Pro136、Glu140~Arg145、Asn160~Arg170。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒 囊膜蛋白 B细胞表位
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鲤疱疹病毒3型T分离株主要免疫原性蛋白的鉴定 被引量:1
14
作者 郑树城 王庆 +4 位作者 李莹莹 王英英 曾伟伟 任燕 石存斌 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第2期68-72,共5页
为了鉴定鲤疱疹病毒3型(Cyprinid Herpesvirus 3,CyHV-3)主要免疫原性蛋白,研究采用CyHV-3-T分离株感染CCB细胞系,运用蔗糖密度梯度超速离心方法对CyHV-3进行纯化,纯化的病毒颗粒经SDSPAGE和考马斯亮蓝染色后,用锦鲤(Cyprinus carpio ha... 为了鉴定鲤疱疹病毒3型(Cyprinid Herpesvirus 3,CyHV-3)主要免疫原性蛋白,研究采用CyHV-3-T分离株感染CCB细胞系,运用蔗糖密度梯度超速离心方法对CyHV-3进行纯化,纯化的病毒颗粒经SDSPAGE和考马斯亮蓝染色后,用锦鲤(Cyprinus carpio haematopterus)抗CyHV-3阳性血清进行Western blotting分析和液相色谱串联质谱鉴定。结果表明,透射电镜下可观察到大量完整囊膜包裹或只有裸露核衣壳的CyHV-3颗粒,Western blotting结果显示抗CyHV-3阳性血清与多种病毒蛋白具有明显特异性免疫反应,质谱鉴定表明其中4种免疫原性蛋白分别为ORF92、ORF66、ORF72和ORF81,其中ORF66和ORF72为首次鉴定的具有免疫原性衣壳蛋白。本研究将为CyHV-3血清学诊断方法的建立、亚单位疫苗或DNA疫苗的研制提供更多候选抗原。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒3型 锦鲤疱疹病毒 免疫原性 免疫蛋白质组学 衣壳蛋白
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锦鲤疱疹病毒-CJ株ORF136基因的克隆及生物信息学分析
15
作者 刘春杰 杨丽华 +1 位作者 王好 周井祥 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期172-174,290,共4页
为了了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF136蛋白的结构特征和进化关系,试验用锦鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取DNA,经PCR扩增获得ORF136基因,将其克隆到p MD18-T载体中构建重组质粒,应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF136基因的... 为了了解锦鲤疱疹病毒中国吉林株(KHV-CJ)ORF136蛋白的结构特征和进化关系,试验用锦鲤尾鳍原代细胞增殖KHV-CJ,提取DNA,经PCR扩增获得ORF136基因,将其克隆到p MD18-T载体中构建重组质粒,应用生物信息学方法初步分析KHV-CJ ORF136基因的结构和功能,并与Gen Bank上已公布的KHV进行比较。结果表明:ORF136有2个跨膜区;抗原表位预测显示,抗原性良好;结构预测显示,可能存在1个潜在的N-糖基化位点和19个潜在的O-糖基化位点;BLAST比对分析显示,KHV-CJ ORF136与KHV-U ORF136和KHV-I ORF136的亲缘关系最近,与KHV-GZ11ORF136的亲缘关系较近,与KHV-GZ10 ORF136、KHV-QY08 ORF136和KHV-J ORF136亲缘关系最远,KHV-CJ可能来源于欧美国家和以色列。说明ORF136基因可能具有较好的免疫原性。 展开更多
关键词 锦鲤疱疹病毒(khv) ORF136基因 生物信息学分析 克隆 免疫原性 吉林株
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鲤疱疹病毒3型焦磷酸测序检测方法的建立
16
作者 郑树城 王庆 +4 位作者 李莹莹 曾伟伟 王英英 刘春 石存斌 《生物学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期95-98,共4页
为了针对鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,Cy HV-3)建立一种基于焦磷酸测序技术的高通量、自动化、快速的检测方法,根据Cy HV-3 ORF55、ORF79和ORF92基因保守区域设计特异性PCR扩增引物和测序引物,进行PCR扩增筛选扩增效率最高的... 为了针对鲤疱疹病毒3型(Cyprinid herpesvirus 3,Cy HV-3)建立一种基于焦磷酸测序技术的高通量、自动化、快速的检测方法,根据Cy HV-3 ORF55、ORF79和ORF92基因保守区域设计特异性PCR扩增引物和测序引物,进行PCR扩增筛选扩增效率最高的引物。PCR灵敏性和特异性试验结果显示,针对ORF79设计的引物扩增效率最高,最低检测量为100个拷贝数,且能特异性识别Cy HV-3;将PCR产物进行焦磷酸测序,获得的序列经BLAST比对显示与Cy HV-3-U、I、J和GZ11分离株一致性均为100%。该检测方法方便快速,适用于出入境口岸大批量样品Cy HV-3诊断检测。 展开更多
关键词 鲤疱疹病毒3型 锦鲤疱疹病毒 焦磷酸测序 检测
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台湾省发生锦鲤疱疹
17
《饲料工业》 北大核心 2004年第5期63-63,共1页
关键词 台湾省 锦鲤 疱疹 中国 病毒 khv
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液相芯片技术同时检测真鲷虹彩病毒和锦鲤疱疹病毒方法的建立 被引量:6
18
作者 尹伟力 耿金培 +4 位作者 刘宁 岳志芹 郑小龙 刘荭 许红岩 《水产科学》 CAS 北大核心 2014年第3期157-162,共6页
为建立一种同时检测真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中真鲷虹彩病毒的CP基因和锦鲤疱疹病毒的TK基因进行序列分析,设计真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰,... 为建立一种同时检测真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒的液相芯片快速检测技术,用DNAStar软件对GenBank中真鲷虹彩病毒的CP基因和锦鲤疱疹病毒的TK基因进行序列分析,设计真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒特异性引物并标记生物素。探针氨基化修饰,与荧光编码微球偶联后与真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒PCR产物杂交反应,用液相芯片仪器检测荧光信号。试验结果表明,液相芯片检测体系能够正确的检测出真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒。真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒病毒核酸的最低检出量为10pg和100pg,检测特异性高,说明初步建立了同时检测真鲷虹彩病毒、锦鲤疱疹病毒的液相芯片技术,为进一步构建其他水生动物病原体快速高通量检测平台奠定基础。 展开更多
关键词 真鲷虹彩病毒 锦鲤疱疹病毒 液相芯片 检测
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三重荧光定量PCR快速检测水产品中的双链DNA病毒的研究 被引量:1
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作者 黄佳鸣 宁喜斌 +3 位作者 史秀杰 刘葒 丛健 兰文升 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期311-315,共5页
目的:建立对水产品中三种双链DNA病毒(斑点叉尾鮰病毒、锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病毒)快速、敏感、特异的检测方法。方法:针对三种病毒的DNA聚合酶基因的保守序列设计三对特异性引物和三条Taqman探针,优化体系,建立三重荧光定... 目的:建立对水产品中三种双链DNA病毒(斑点叉尾鮰病毒、锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病毒)快速、敏感、特异的检测方法。方法:针对三种病毒的DNA聚合酶基因的保守序列设计三对特异性引物和三条Taqman探针,优化体系,建立三重荧光定量PCR体系,并对该方法的灵敏性和特异性评估。结果:建立的三重荧光定量PCR体系特异性强,引物之间及引物和探针之间无相互干扰。对三种病毒的检测限均能达到102拷贝/μL。结论:该方法体系稳定,重复性好,可操作性强,对水产品中的双链DNA病毒的快速检测具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 斑点叉尾鮰病毒 锦鲤疱疹病毒 流行性造血器官坏死病毒 三重荧光定量PCR
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申沃客车系列车型介绍
20
作者 青山 《汽车与配件》 2001年第40期30-31,共2页
随着社会经济的迅猛发展,汽车工业产品更新换代的步伐加快,为方便企事业单位和个人购车,本刊特开辟“汽车商务”专栏,详细介绍我国各大汽车生产企业最新生产的系列车型及主要装备、参考价格等,希望本专栏能成为生产企业产品宣传的阵地... 随着社会经济的迅猛发展,汽车工业产品更新换代的步伐加快,为方便企事业单位和个人购车,本刊特开辟“汽车商务”专栏,详细介绍我国各大汽车生产企业最新生产的系列车型及主要装备、参考价格等,希望本专栏能成为生产企业产品宣传的阵地和广大用户购车的指南。客车将在后一些时间继续刊出,请读者注意阅读、收集。 展开更多
关键词 车型 SWB 城市车 khv 空调 客车 客运车辆
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