抗生素干预后ESBLs-KPN和ESBLs-ECO的变化

目的:评价抗生素干预策略执行后院内感染的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌(ECO)与肺炎克雷伯菌(KPN)阳性率的变化,探索合理的干预模式及干预的合适时期及监测指标。方法:从2004年12月到2007年12月,监测中南大学湘雅二医院病房常见抗生素的年消耗量(DDD/1000patient-days表示)及其耐药率、院内感染的产超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌(ESBLs-KPN)和产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌(ESBsL-ECO)的阳性率;2005年1月至2007年12月对研究科室实施抗生素的综合干预策略。干预科室设为试验组,医院内条件相当的其他科室设为对照组(ICU除外)。结果:干预前(2004年),试验组ESBLs-KPN(43.90%)和ESBLs-ECO(45.83%)阳性率均高于对照组ESBLs-KPN(28.04%)和ESBLs-ECO(24.90%)(P<0.05);干预后试验组ESBLs-KPN阳性率呈显著下降趋势,由26.47%下降至17.65%(P<0.05);而对照组ESBLs-KPN和ESBLs-ECO阳性率呈显著上升趋势,前者由34.18%上升至52.94%(P<0.05),后者由47.03%上升至63.78%(P<0.05),且干预后试验组ESBLs-KPN和ESBLs-ECO阳性率均低于对照组ESBLs-KPN和ESBLs-ECO阳性率(P<0.05)。试验组减少了头孢他啶(CAZ)、头孢哌酮/舒巴坦(CFS)、亚胺培南(IMP)的消耗量,增加了头孢吡肟(FEP)的消耗量(P<0.05);对照组增加了CAZ,FEP和CFS的消耗量。结论:长期抗生素综合干预策略的实施可能有益于降低ESBLs-KPN和ESBLs-ECO的流行。

基于KPN的动态服务组装模型

提出了一个基于KPN(Kahn Process Network)的动态服务组装模型,目的是减少动态服务组装的不可预见性以及服务不匹配现象,提高动态组装的成功率。该组装模型采用KPN及相应的KPN调度策略对服务之间的动态交互进行建模。介绍了该组装模型的数据流建模及调度策略,并以一个船舶信息查询系统为例,介绍了该组装模型在实际中的应用。

限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化

目的探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系,酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2,DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果,以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果 50μL酶切体系,KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的适宜条件:首先在1×L缓冲液情况下,应用1μL KpnⅠ酶切1μg质粒1 h,再加入1×H缓冲液和0.01%BSA,应用1μL EcoRⅠ继续酶切1 h。结论获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切质粒的适宜条件,为今后应用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切实验提供科学的参考依据。

KPN开创All-IP战略转型新纪元

在比较了光进铜退中相关技术方案后,KPN电信给出了最务实的选择。All-IP转型战略KPN电信作为荷兰电信市场的领导者,在固定语音、数据、Cable TV、移动等诸多领域都处于市场领导地位。然而在全球网络IP化、业务移动化、竞争多元化的浪潮冲击下,KPN发现按照惯有的经营战略已越来越难以维持领先优势,急需进行战略调整。

ZTE Partners with KPN Group Belgium to Deploy Packet-Switched Core Network

27 August 2012--ZTE Corporation has signed a deal on a packet-switched core network （CN） for KPN Group Belgium （KPNGB）. KPNGB will deploy ZTE＇s packet-switched CN equipment, which supports unified radio access. The contract is the second of its kind between ZTE and KPNfollows from a construction project with KPN Germany （E-Plus） that was completed in September 2010.

ECL与KPN的分布及其耐药机制分析

目的:探讨肺炎克雷伯菌(klebsiella pneumoniae,KPN)及阴沟肠杆菌(enterobacter cloacae,ECL)的分布及其耐药机制。方法:收集各科室送来的标本,行菌株鉴定及药敏实验。分析ECL及KPN菌种的科室分布情况、标本来源情况,并分析ECL及KPN杆菌的抗生素耐药情况。结果:泌尿外科的ECL菌种比例占比最高,神经外科中ECL菌种比例占比最低,不同科室的KPN菌种占比对比无统计学意义,P>0.05。痰液中的ECL,KPN菌种比例占比均最高,脓液中ECL菌种比例占比最低,分泌物中KPN菌种比例占比最低。头孢氨苄对ECL的耐药率最高,亚胺培南与美罗培南对ECL的耐药率最低,哌拉西林对KPN的耐药率最高,亚胺培南与头孢氨苄对KPN的耐药率最低。结论:亚胺培南与美罗培南可用于ECL感染者的治疗,亚胺培南与头孢氨苄可用于KPN感染者的治疗。

KPN选定西门子合作开展IPTV

据悉，近日荷兰运营商KPN选定西门子作为其合作伙伴，开发和实施IPTV解决方案。继去年底KPN选定西门子作为其整个固定和移动网络的IP战略合作伙伴之后，这进一步加强了双方的合作。KPhJ计划在今年推出基于DSL网络的数字电视业务。籍此合同，KPN和西门子在其双方现有的IP和新一代通信业务方面的合作基础上又增加了“电视”业务。

携带Kpn1酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性克隆的构建与鉴定

目的构建携带特定酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性克隆,并对拯救病毒的生物学特征进行鉴定。方法利用分子克隆和反向遗传学技术,在日本脑炎病毒全长感染性克隆pJE70质粒的基础上引入Kpn1单酶切位点,获得pJE70_Kpn1重组质粒。将质粒线性化后进行体外转录,将转录体RNA转染BHK-21细胞,拯救获得恢复病毒E70-Kpn1。通过间接免疫荧光、蚀斑形成实验、生长曲线测定、小鼠神经毒力评价等方法鉴定恢复病毒E70-Kpn1的生物学特性。结果成功构建了携带Kpn1的日本脑炎病毒全长感染性克隆,该克隆能拯救出重组的日本脑炎病毒E70-Kpn1,其生物学特征与亲本株E70无显著差异。结论研究获得携带Kpn1酶切位点的日本脑炎病毒全长感染性cDNA克隆,并成功拯救获得一株重组日本脑炎病毒,为下一步进行反向遗传学操作提供了可靠的工具。

Telefonica与KPN商谈合并子公司

据国外媒体报道，西班牙电信（Telefonica）正与荷兰KPN商谈合并其各自的德国子公刮，消息称这笔交易宣布在即。KPN已经确认正在谈判出售其在德国的E-Plus移动刚络资产，但是拒绝透露潜在买家是谁。

Web服务交互过程建模与验证研究

Web服务的正确交互是其成功组合的先决条件,该文提出一种Web服务动态交互模型(IWSN),旨在解决Web服务的正确交互问题、提升Web服务组合的灵活性、保证Web服务间的行为兼容性并进一步促进Web服务组合在相关领域的应用。IWSN模型基于Kahn过程网络(KPN),该网络支持基于数据流和通道的并行计算。基于Pi-calculus进程演算定义IWSN模型的形式化语义,并讨论IWSN模型的性质。最后,通过应用案例演示如何将IWSN模型应用于Web服务组合及服务交互。

2016—2019年分离622株肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性变化分析

目的:了解江西中医药大学附属医院肺炎克雷伯菌(KPN)的临床分布情况并分析其耐药性变化。方法:收集江西中医药大学附属医院2016—2019年非重复临床分离KPN,采用MicroScan WalkAway 96全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感性试验,参照美国临床实验室标准化协会标准判断结果,并将结果用Whonet 5.6软件进行统计学分析,分析其临床分布及耐药情况。结果:收集KPN菌株共622株,患者多分布在61~70岁、71~80岁、81~90岁3个年龄段,分别占比25.24%、23.95%、19.94%;科室分布主要为心血管科、呼吸科、肾病科、神经内科、康复科、消化科等;标本来源主要为痰液(39.23%)、尿液(38.10%)、分泌物(10.45%)、血液(7.07%)、脓液(2.25%)等。药敏情况为:KPN对哌拉西林呈现高耐药率,对碳青霉烯类抗生素厄他培南、亚胺培南耐药率较低;2019年分离的KPN对头孢噻肟、头孢吡肟、氨曲南等的耐药率较2016—2018年明显升高(P<0.05)。结论:KPN患者临床分布广泛,以老年患者居多,标本来源主要为痰液、尿液等,对临床常用抗菌药物耐药程度各一。应积极倡导临床抗生素的合理使用,加强KPN的耐药性监测,降低耐药率,避免KPN院内感染暴发。

鸭圆环病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型PCR-RFLP鉴别诊断方法的建立

鸭圆环病毒(Duck circovirus,DuCV)是近年来鸭群新发的免疫抑制病。对DuCV基因特征分析发现,DuCV存在两种基因型(基因1型和基因2型,Du CV-1和DuCV-2)。根据DuCV-1和DuCV-2复制相关蛋白基因编码区核苷酸序列特征,建立一种鉴别DuCV-1和DuCV-2的聚合酶联反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法。结果表明,特异性的PCR引物可同时对DuCV-1和Du CV-2进行扩增,获得约616 nt大小的目的片段。将获得的PCR产物经KpnⅠ酶切后,可见DuCV-2的PCR产物可被切成两段,大小分别为360 nt和256nt;而DuCV-1的PCR产物经KpnⅠ酶切后大小不变,仍为616 nt。研究建立了鸭圆环病毒基因型(DuCV-1和DuCV-2)PCR-RFLP鉴别诊断的方法,可用于DuCV-1和DuCV-2感染的分子流行病学调查。

痰热清对产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的体外抑制作用研究

呼吸道感染是临床常见疾病,致病菌包括肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌（Kpn）等[1]。近年来,关于Kpn导致的院内感染的报道越来越多,β-内酰胺酶类广谱抗生素在临床的广泛应用使Kpn的耐药也在增加,会使Kpn产生ESBLs,限制了青霉素及头孢类抗生素的临床应用,使病情迁延不愈。

含dMAR真核表达载体的构建及影响EGFP表达的研究

目的 研究dMAR对EGFP基因表达的调控作用。方法 用Kpn -I酶切pGFP/MAR,回收含MAR下游850bp的片段dMAR,与Kpn I酶切回收的pEGFP-C1 载体连接,Hind Ⅲ酶切鉴定方向,构建正向、反向连接的真核表达载体pEGFP/dMAR′和pEGFP/dMAR。将该表达载体转染COS7细胞,荧光显微镜观察EGFP的表达并采用流式细胞术进行荧光定量。结果 pEGFP- C1,pEGFP/dMAR′和pEGFP/dMAR转染后48 h EGFP的表达量分别为45.1%、40.5%和11.3%。结论 pEGFP/dMAR显著抑制了EGFP的表达,pEGFP/dMAR′的增强表达作用不明显。

pEGFP/MOMP真核表达重组体的构建及表达

目的:克隆沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因,构建pEGFP/MOMP真核表达重组质粒,为沙眼衣原体核酸疫苗的研制提供依据。方法:用PCR方法从D型Ct基因组中扩增MOMP全基因片段,克隆入真核表达载体pEGFP相应的酶切位点中,阳性重组子经BamHI、KpnI双酶切、PCR扩增及测序鉴定;并经脂质体介导转染HeLa细胞,36h后观察瞬时表达情况。结果:PCR扩增得到约1.2kb的特异性MOMP基因片段;序列测定证实与GenBank登录的D型沙眼衣原体一致;筛选鉴定出真核表达重组体pEGFP/MOMP。结论:成功地构建了pEGFP/MOMP真核表达重组体,并在HeLa细胞中表达了MOMP。

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的TEM基因测序

目的 对产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBLs)的肺炎克雷伯菌 (Kpn)和大肠埃希菌 (Eco)的TEM基因进行序列测定。 方法 分A、B、C 3段扩增TEM基因 ,并对A、B、C 3段扩增产物进行四色荧光标记全自动测序。 结果 来源于呼吸道 (痰 )的 3株Kpn和分别来源于呼吸道 (痰 )、泌尿道 (尿 )、胆道 (胆汁 )和分泌物中的 1 1株Eco测得的TEM序列完全一致。 结论 被检测的来源于不同病灶、不同菌种(Kpn与Eco)的超广谱β -内酰胺酶 (ESBLs)含同种TEM的质粒。