副溶血弧菌SHJLA株的分离鉴定及致病性分析

副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是海洋环境中常见的食源性致病菌。本研究从对虾中分离出1株细菌SHJLA,在TCBS和弧菌显色培养基上分别显示典型的蓝绿色和紫红色的菌落,且其生理生化特性具有典型副溶血弧菌的特性。以SHJLA菌株的基因组为模板,检测副溶血弧菌种特异性基因(tlh、toxR、groEL)均为阳性,gyrB基因序列分析表明SHJLA与副溶血弧菌的亲缘关系最近,同源性达98%～100%;检测副溶血弧菌主要毒力相关基因tdh和T3SS2(VopC2和vcrD2)均为阳性。该菌的神奈川溶血实验为阳性,对小鼠的半数致死量(LD50)为4.8×108cfu/mL。结合SHJLA菌株的形态、生理生化、种特异性基因的检测、gyrB基因序列分析、毒力相关基因的检测以及小鼠半数致死量的测定结果,确定SHJLA是一株携带毒力基因的副溶血弧菌。

温州市酒店海产品中副溶血性弧菌的分型鉴定及耐药性研究

目的:了解温州市酒店海产品中副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticusVP)污染、血清群分布及耐药状况,探讨PCR检测基因技术在鉴定中的应用,为旅游消费安全指导提供科学依据。方法:采集温州市各大酒店5类海产品共235件检测VP,以O血清分型、用PCR方法检测毒力基因(tdh、trh)及以神乃川试验检查其特定的溶血素、K-B法进行药敏试验。结果:海产品中共检出VP50株,平均检出率为21.27%。50株(其中9株已死亡)VP血清群分型属于9个血清群。37株VP经PCR结果tdh基因阳性8株;Tdhtrh阳性2株;阴性27株。50株VP神奈川试验阳性的有2株,占4.00%。挑选25株VP进行药敏试验,结果提示对CN、KZ、AK等12种药物100%敏感,对AMP、P 100%耐药;结论:酒店海产品中VP污染较为严重,药敏试验结果对青霉素类100%耐药外,其它抗生素基本敏感。PCR结果2株检出Tdh\trh阳性其神奈川试验也是阳性,神奈川试验作为毒力检测可方便于动物试验更比PCR经济实惠。血清学分型主要为O3群、O4群、O1群、O5群。

副溶血性弧菌引发食源性疾病的病原学检测及同源性分析

目的对引起一起疑似食物中毒事件中的病原菌分离株进行病原学检测,并通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)追溯致病菌的同源性。方法参照GB 4789.7-2013和相关规范对采回样本进行实时荧光定量PCR初筛、分离培养,以及生化鉴定、血清学分型、神奈川试验和药敏试验。使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术分析致病菌的同源性。结果 14份样品中有5份检出副溶血性弧菌,血清学分型结果为O3:K6型,神奈川试验结果均为阳性。所检出的致病菌株对常见抗生素(阿米卡星、优立新、氨曲南、庆大霉素、环丙沙星、头孢类、呋喃坦啶、复方新诺明、哌拉西林、妥布霉素)敏感,而对氨苄西林耐药。PFGE分析结果提示其中4株样本菌株具有同源性,而另一株与其它菌株在分子水平上紧密相关。结论本事件是由副溶血性弧菌引发的群体性食物中毒,且致病菌来自同一污染源。