定量RT-PCR法对“苦参”在心肌炎模型中药效学研究

目的用定量RT-PCR法检测“苦参”中抗柯萨奇B病毒有效成份“抗柯注射液”,在Balb/c小鼠病毒性心肌炎模型病毒血症时,对抗“柯萨奇B病毒”的药效。 方法取48只雄性18-22g 8周龄的Balb/c小鼠,随机分成A-H共8组,每组6只。1.各治疗组(A-F组),每只小鼠从腹腔接种0.1ml l04TCID50 CVB3m病毒2h后,每天从尾静脉分别注射抗柯注射液,5、10、15、20、25、30mg/kg,2次/d,连续用药3d。2.病毒组(G组),注射病毒同上法,2h后从尾静脉注入0.3ml无菌生理盐水,2次/d,连续3d。3.空白对照组(H组),腹腔内注射无小牛血清的RPMI-1640培养液,2h后从尾静脉注入0.3ml无菌生理盐水,2次/d,连续3d。 结果 空白组CVB-RNA(-)对接种CVB3m感染后用不同剂量“抗柯注射液”治疗的各小组血液中CVB3m-RNA含量与病毒组相比明显下降,其抑制率(％)与所用抗柯注射液的剂量呈正比,即“抗柯”剂量增加,CVB3m-RNA含量下降的幅度亦增加,每天5-30mg,/kg中的各剂量都有明显抑制病毒增殖的作用。 结论用定量RT-PCR法检测到“抗柯注射液”对Balb/c小鼠病毒性心肌炎病毒血症时效果明显,最小有效剂量为5mg·kg-1·d-1。

定量RT-PCR检测肝细胞P450酶基因与苦参的关系

目的 明确肝脏微粒体中细胞色素P450酶活性与苦参中对抗CVB病毒的有效成分抗柯注射液药物剂量及用药时间的关系。方法 用定量RT-PCR法,在Begale犬长毒试验的不同时期(45、90、135 d),用不同剂量抗柯注射液(7.5、15、30 mg/kg)检测肝脏微粒体中细胞色素P450酶基因(β-actin/P450)的特异mRNA。结果 P450酶基因(β-actin/P450)特异信使核糖核酸mRNA随所用抗柯注射液剂量及用药时间而增加(P<0.01)。结论 P450的比值随药物剂量及时间延长而上升,可视为机体抵抗中毒而作出的一种适应性反应,可用于有关药物的毒理研究。

病毒性心肌炎(病)患者中IFNγ和IL10的表达及药物干预的研究

本研究采用ELISA法检测心肌炎 (病 )患者外周血Th1/Th2相关细胞因子IFN γ及IL 10浓度 ,以RT PCR检测柯萨奇B病毒 (CVB )表达情况 ,并观察“抗柯”注射液给药后的效果。结果表明 ,(1)急性期者 ,CVB RNA阳性者居多 ,Th1均增高 ,Th2类细胞因子IL 10正常或偏低 ;(2 )恢复期者 ,CVB RNA阴性者居多 ,IL 10均增高 ,IFN γ正常或偏低 ;(3)慢性期者 (包括扩张型心肌病 )Th1/Th2均降低 ,内含CVB RNA持续阳性者。表明心肌炎的炎症主要是Th1细胞所介导 ,而Th2类细胞因子对其有抑制作用 ,抗柯注射液提高Th2活性 ,抑制Th1活性。