中药抗纤灵方含药血清对TGF-β_1刺激的HK-2细胞c-Met及其下游MAPK信号分子的调控作用

目的:观察中药抗纤灵方对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激后肾小管上皮细胞(TECs)中肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met及其下游丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号分子的调控作用,以初步探讨其延缓肾纤维化的作用机制。方法:给予大鼠中药灌胃3d后制备抗纤灵含药鼠血清,应用不同含药血清处理经TGF-β1刺激的HK-2细胞,然后用Alarmblue法和Western blotting法检测细胞增殖率、c-Met和MAPK磷酸化情况。结果:TGF-β1和含药鼠血清对HK-2细胞增殖率无明显影响,含药血清影响TGF-β1刺激的HK-2细胞c-Met的表达及MAPK的磷酸化。结论:抗纤灵含药血清可调节HGF受体c-Met介导的MAPK的磷酸化。

抗纤灵冲剂对单侧输尿管梗阻及再通后大鼠尿微量蛋白的影响

目的研究单侧输尿管梗阻(UUO)及再通后大鼠尿微量蛋白的变化和抗纤灵对尿微量蛋白变化的影响。方法建立大鼠UUO模型120只和UUO再通模型90只,随机分为正常组、假手术组、模型组、抗纤灵组和科素亚组。于造模后各时间点检测大鼠尿转铁蛋白(TRF)、尿视黄醇结合蛋白(RBP)、尿β2-微球蛋白(β2-M)。结果在UUO模型中,模型组各时间点TRF、RBP、β2-M较正常组和假手术组明显升高(P<0.01),并随梗阻时间的延长逐渐升高。在UUO再通模型中,各时间点TRF、RBP、β2-M较正常组和假手术组明显升高(P<0.01),并随梗阻时间的延长逐渐降低。与模型组比较,抗纤灵能明显降低两模型中TRF、RBP、β2-M。结论抗纤灵冲剂能减少UUO模型和UUO再通模型中的尿微量蛋白尿,改善两种模型中的肾损伤。

针刺结合活血扶正中药干预大量蛋白尿致早中期慢性肾衰的研究

目的为观察针刺结合活血扶正中药(抗纤灵2号)对早、中期慢性肾衰伴大量蛋白尿患者的临床疗效,探讨其对血脂、血液动力学、氧化—抗氧化系统的影响机制及其与血瘀病理状态的关系。方法选择早、中期慢性肾衰伴大量蛋白尿患者82例,随机分为对照组(25例)、中药组(27例)和针药结合组(30例),分别给予福辛普利、抗纤灵2号、针刺加内服抗纤灵2号治疗,疗程2个月,比较治疗前后肾功能、血常规2、4 h尿蛋白定量、GFR等指标及临床血瘀症状的变化。结果针刺结合活血扶正中药能明显改善慢性肾衰伴大量蛋白尿患者的临床血瘀症状和肾功能(P<0.01),降低尿蛋白(P<0.01),临床总疗效优于对照组和中药组(P<0.05)。结论其机理可能与其改善脂质代谢、血液动力学及氧化—抗氧化系统有关。

抗纤灵冲剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织氧化应激反应的影响

目的:研究抗纤灵冲剂对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织氧化应激的影响。方法:SD雄性大鼠120只,随机分为正常组、假手术组、模型组、抗纤灵组和科素亚组,各组分别观察28d。于造模后每周各组随机选取6只检测肾组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)。结果:与正常组、假手术比较,模型组肾组织SOD、GSH明显降低(P<0.01),MDA明显升高(P<0.01)。在UUO模型中,SOD、GSH、逐渐下降,MDA逐渐升高。抗纤灵组与模型组比较,肾组织SOD、GSH明显升高(P<0.01),MDA明显下降(P<0.01)。结论:在肾间质纤维化的起始和发展过程中,都有氧化应激的参与。抗纤灵冲剂能有效缓解在大鼠UUO模型中肾组织氧化应激的反应,进而可能延缓肾间质纤维化的进程。

抗纤灵治疗慢性肾功能衰竭的动物实验研究述评

抗纤灵是何立群教授多年的经验方,经反复临床实验证明,具有较好的临床疗效。近10年来,笔者在不断总结其疗效的基础上,采用不同的造模方式,运用不同品系的动物,采取不同形式的给药途径,围绕着引起肾纤维化的四大因素,从致炎因子或炎症因子、促纤维因子(细胞因子,生长因子,血管活性因子的表达,趋化黏附因子)、纤维化形成因子、肾结构和功能改变等方面着手,结合信号通路,对抗纤灵机制及疗效做了详细的观察和探讨,结果表明抗纤灵能够通过部分信号通路,影响肾纤维化的部分指标,进而抑制肾脏纤维化,延缓肾功能衰竭。同时,通过总结,发现仍有许多需要改进的地方,为今后抗纤灵的进一步研究提供新的思路和方向。

抗纤灵方抑制肾络病慢性肾衰竭大鼠TGF-β/P13K/Akt信号旁路的实验研究

目的:采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭大鼠模型,观察抗纤灵对5/6肾切除大鼠肾组织中TGF-β/PI3k/Akt信号通路的影响。方法:将SD大鼠分为正常组、模型组(生理盐水)、治疗组(抗纤灵)各12只,除正常组外均采用5/6肾切除方法建立慢性肾衰竭大鼠模型,疗程2个月。应用生化、放射免疫法、western blot等技术,检测肾功能、24 h尿蛋白定量、肾脏病理,检测TGF-β/P13K/Akt信号通路蛋白表达。结果:实验结束时,与模型组相比较,抗纤灵组的血肌酐数值显著下降(P<0.01)、蛋白尿下降差异有统计学意义(P<0.05);病理MASSON染色:抗纤灵组肾小球肥大减弱,毛细血管基底膜增厚减轻,系膜基质明显减少,胶原纤维成分低于模型组;western blot检测,与模型组相比,抗纤灵组的p-Akt灰度比值显著下降。结论:抗纤灵方可能通过抑制TGF-β/PI3K/Akt信号通路,从而有效地降低5/6肾切除大鼠的血肌酐,减轻肾组织纤维化、改善肾功能、降低蛋白尿。

抗纤灵冲剂干预单侧输尿管梗阻模型大鼠血清胱抑素C改变的实验研究

目的观察抗纤灵冲剂对单侧输尿管梗阻模型大鼠血清胱抑素C的影响。方法将72只SPF级SD大鼠随机分为正常组、假手术组、UUO模型组、UUO抗纤灵组。行单侧输尿管结扎术,治疗7、14、21、28d后分批腹主动脉取血检测血清胱抑素C的浓度。结果模型组大鼠血清胱抑素C显著升高,与正常组及(或)假手术组比较有统计学意义(P<0.01);抗纤灵组、科素亚组血清胱抑素C明显下降,与模型组比较有统计学意义(P<0.01)。结论抗纤灵冲剂具有和科素亚同样的保护肾功能,减轻肾间质纤维化的作用。

抗纤灵Ⅰ方对小鼠血吸虫病肝纤维化的干预及机制探讨

目的观察抗纤灵Ⅰ方对小鼠血吸虫病肝纤维化的干预效果,探讨抗纤灵Ⅰ方干预血吸虫肝纤维化的可能分子机制,为抗纤灵Ⅰ方的临床应用提供实验依据。方法采用日本血吸虫尾蚴经皮肤贴片感染昆明小鼠,建立血吸虫病早期肝纤维化动物模型,将建模成功的小鼠用吡喹酮药物连续杀虫治疗后分为抗纤灵Ⅰ方低、中、高剂量组,抗纤灵Ⅰ方的丹参加味方低、中、高剂量组,秋水仙素治疗对照组,蒸馏水灌胃对照组和未做任何处理的模型对照9组。以未感染血吸虫的正常小鼠为肝纤维化阴性对照组。各实验组连续灌胃治疗8周,收集各组小鼠肝脏,HE染色观察肝纤维化病理改变,测量肝组织虫卵肉芽肿平均面积;免疫组化染色方法检测肝组织内胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、MMP-1蛋白酶以及TIMP-1蛋白的表达,比较各组间的蛋白表达差异。结果 HE染色显示,与模型组和正常对照组相比抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方高剂量组可显著减少肝组织虫卵肉芽肿面积(P<0.05);免疫组化染色结果显示,与模型组比较,抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方中、高剂量组干预后小鼠肝组织内的胶原Ⅰ、Ⅲ蛋白以及TIMP-1蛋白表达显著减少(P<0.05)、MMP-1蛋白酶表达显著增加(P<0.05),但抗纤灵Ⅰ方与丹参加味方之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论抗纤灵Ⅰ方及其丹参加味方对小鼠血吸虫病肝纤维化具有较好的干预效果,但两者在疗效上差异无统计学意义,丹参未能增强抗纤灵Ⅰ方的干预肝纤维化效果;抗纤灵Ⅰ方的干预机制可能是通过抑制肝组织内胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ和TIMP-1蛋白的表达,增加MMP-1蛋白酶的表达来发挥作用。

抗纤灵对5／6肾切除大鼠肾功能和尿蛋白的影响

目的观察抗纤灵对5／6肾切除大鼠。肾功能、尿蛋白和肾组织病理的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组和造模组，造模组采用5／6肾切除建立慢性肾衰竭大鼠模型，1周后按血肌酐水平将造模大鼠分为模型组、福辛普利组和抗纤灵组，福辛普利组给予3．3mg·kg^-1·d^-1灌胃，抗纤灵组给予23g·kg^-1·d^-1灌胃，模型组和假手术组给予等量生理盐水灌胃，8周后测定各组大鼠肾功能、尿蛋白水平以及采用HE和Masson染色观察各组大鼠的肾组织病理。结果模型组大鼠血肌酐、尿素氮水平和24h尿蛋白定量、α1-MG、β2-MG、NAG水平较假手术组明显升高（P〈0．01），抗纤灵组与模型组比较均明显下降并可减轻模型大鼠的肾组织病理。结论抗纤灵可通过降低模型大鼠尿蛋白延缓。肾小球硬化进程，减轻肾脏功能损害，改善肾组织病理，从而保护残。肾功能。

抗纤灵冲剂治疗慢性肾衰50例观察

目的：观察中药治疗慢性肾衰的效果并与西药治疗效果比较。方法：用抗纤灵冲剂内服的治疗组及用包醛氧淀粉内服的对照组进行对照观察。结果：治疗组总有效率８１．１％，对照组总有效率６２．８％，两组比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：抗纤灵冲剂对延缓肾功能恶化，缓解肾小球纤维化方面有较好疗效。

动态观察抗纤灵冲剂对单侧输尿管梗阻及再通后大鼠血脂变化的影响

目的:研究单侧输尿管梗阻(UUO)及再通后大鼠血脂的变化和抗纤灵对血脂变化的影响。方法:建立大鼠UUO模型120只和UUO再通模型90只,随机分为正常组、假手术组、模型组、抗纤灵组和科素亚组。于造模后各时间点检测TC、TG、HDL-C和LDL-C。结果:在UUO模型中,模型组TC、TG、LDL-C随梗阻时间的延长逐渐升高,在28d时与正常组和假手术组比较有显著差异;HDL-C随梗阻时间的延长逐渐降低,在21d、28d时与正常组和假手术组比较有显著差异。在UUO再通模型中,模型组TC、LDL-C逐步升高,再通21d时与正常组和假手术比较差异有显著性;HDL-C逐渐降低,与正常组和假手术组相比,再通14d、21d时差异显著。与模型组比较,抗纤灵能降低TC、TG、LDL-C,升高HDL-C。结论:抗纤灵冲剂能改善UUO模型和UUO再通模型中的脂代谢紊乱。