4种药剂对梨火疫病防病效果及产量品质的影响

【目的】筛选出对库尔勒香梨(简称香梨)梨火疫病高效的防病药剂,分析不同药剂对库尔勒香梨产量及品质的影响。【方法】选用1000×10^(8)CFU/g贝莱斯芽孢杆菌DP、1.8%辛菌胺醋酸盐水剂、3%噻霉酮微乳剂和6%春雷霉素水剂设置12个处理。【结果】高、中、低剂量Bacillus velezensis TK2019(以下简称Bacillus velezensis)可湿性菌粉、1.8%辛菌胺醋酸盐、3%噻霉酮微乳剂和6%春雷霉素水剂,分别对大田香梨梨火疫病的防效为71.64%、65.22%和51.30%,66.69%、56.18%和40.30%,66.50%、58.19%和41.89%,72.28%、60.49%和54.22%,其中Bacillus velezensis可湿性菌粉稀释浓度107 CFU/mL、6%春雷霉素水剂500倍液可显著降低梨火疫病的发生。【结论】Bacillus velezensis菌剂和6%春雷霉素水剂对梨火疫病防效显著高于对照和1.8%辛菌胺醋酸盐水剂、3%噻霉酮微乳剂,较好地抑制梨火疫病的发生,控制发病枝条的数量,提高了香梨单果质量、改善果实品质、提升香梨果实防御酶活性,且高浓度生防菌改善作用更佳,施用后对香梨树生长发育安全。

柱前衍生-高效液相色谱-串联质谱法测定鲜茶叶中的春雷霉素

目的建立柱前衍生高效液相色谱-串联质谱法(high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS/MS)测定鲜茶叶中春雷霉素的检测方法。方法样品经甲醇/水溶液提取,MCX SPE阳离子交换柱(mixed-mode cation exchanger SPE column)净化,9-氯甲酸芴甲酯[9-fluorenylmethyloxycarbonyl(Fmoc)chloride,Fmoc-Cl]衍生后测定,内标法定量。结果目标化合物在0.31~20.00μg/L范围内,线性关系良好,相关系数大于0.998(r^(2))。鲜茶叶中春雷霉素的检出限(limit of detection,LOD)、定量限(limit of quantification,LOQ)分别为2.0μg/kg和5.0μg/kg。在LOQ、2×LOQ和10×LOQ水平上加标,平均回收率为95.2%~104.0%,相对标准偏差为7.4%~13.3%。结论基于Fmoc-Cl衍生化的测定法,能有效提高检测的灵敏度、降低基质的干扰;将西马特罗作为内标使用,可以提供更为准确的检测结果,该方法满足鲜茶叶中春雷霉素的监测。

固相萃取/液相色谱-串联质谱法测定沃柑春雷霉素和双胍辛胺残留

春雷霉素和双胍三辛烷基苯磺酸盐是沃柑生产中常用的杀菌剂。为了建立采用固相萃取/高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS/MS)同时提取同步测定春雷霉素和双胍三辛烷基苯磺酸盐在沃柑果实中残留的方法,开展了提取剂筛选、提取液净化方法筛选、液相色谱流动相体系筛选试验,并对方法的重复性和再现性进行了验证。结果表明,沃柑果实匀浆样品用0.2%(体积分数)甲酸水溶液提取后,先采用HLB固相萃取柱净化,再分别经SCX固相萃取柱、WCX固相萃取柱除去干扰物质,然后用C18-AQ高效液相色谱柱在正电喷雾模式下进行多重反应监测(MRM)分析,以沃柑空白基质匹配标准工作溶液进行外标法定量,可实现准确的定性分析和精确的定量分析。在0.005~0.500 mg/L范围内,春雷霉素和双胍辛胺浓度与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.9999和0.9995。方法的灵敏度高,对沃柑中春雷霉素和双胍辛胺的检出限为0.001 mg/kg,定量限为0.004 mg/kg,对春雷霉素和双胍辛胺的加标(500~8000 ng/10 g试样)回收率分别为64.48%~98.42%和62.38%~85.86%。方法的再现性好,不同检测机构间春雷霉素和双胍辛胺检测结果的相对标准偏差分别为9.89%和9.75%。

液相色谱串联质谱法快速测定水中敌百虫等6种农药

随着《生活饮用水卫生标准》(GB 5749—2022)的实施,越来越多的农药纳入了饮用水水质监测,但与之相配套的检测方法尚不完善。文章建立了快速且同时测定水中敌百虫、甲基硫菌灵、西草净、甲霜灵、稻瘟灵、氟乐灵6种农药的直接进样-液相色谱串联质谱检测方法,样品经聚四氟乙烯滤膜过滤后进入液相色谱串联质谱仪进行检测,检出限为0.02~3.1μg/L。纯水回收率为60.5%~120.3%,精密度为0.5%~6.2%;饮用水回收率为69.3%~129.8%,精密度为0.4%~7.5%;地表水回收率为75.1%~127.2%,精密度为0.5%~5.1%。试验中考察了4种不同滤膜对方法回收率的影响,最终确定选用聚四氟乙烯过滤材料。本方法检测效率高、可靠性好,适用于饮用水及地表水的常规以及应急检测。

45%春雷霉素·喹啉铜悬浮剂的配方研制及药效评价

为有效防控黄瓜细菌性角斑病等作物病害,研制了45%春雷霉素·喹啉铜悬浮剂,并确定了其最佳配方,通过田间药效试验评价该悬浮剂对黄瓜细菌性角斑病的防控效果.结果表明:45%春雷霉素·喹啉铜悬浮剂的最佳配方为春雷霉素4.5%,喹啉铜40.5%,润湿分散剂比例为MNS/901%,500LQ 2%,FD 3%,乙二醇5%,防腐剂卡松0.2%,消泡剂6300.5%,黄原胶0.2%,硅酸镁铝1%,柠檬酸3%,增效剂Prime 6%,去离子水补足.该配方悬浮性好、储存稳定性高,符合悬浮剂标准要求.田间试验显示,在黄瓜细菌性角斑病发病初期使用1000倍液喷雾,药后10 d防效达到96.77%,表明该制剂具有较好的防治效果.

江西省稻瘟病菌对春雷霉素和稻瘟灵的抗药性研究

稻瘟病是水稻生产上潜在威胁最严重的病害,化学防治是目前防治稻瘟病的关键措施之一.采用生长速率法,分别测定2012年从江西省不同稻区分离的40个稻瘟病菌单孢菌株对春雷霉素与稻瘟灵的敏感性.试验结果表明春雷霉素对供试40个稻瘟病菌株的EC50值范围为6.28～333.01 mg/L,其中,敏感菌株有29个,低抗水平菌株有10个,中抗水平菌株有1个；稻瘟灵的EC50值范围为5.63～ 28.96 mg/L,敏感菌株有38个,低抗水平菌株有2个,表明江西省稻瘟病菌株对春雷霉素与稻瘟灵的抗性均表现为较低水平.抗性菌株对春雷霉素与稻瘟灵的抗性分析表明江西省稻瘟病菌对春雷霉素与稻瘟灵未产生交互抗药性或多抗性.

生物农药和生化复配制剂预防水稻穗颈瘟的效果

为减轻稻瘟病危害的损失,减少化学农药用量、残留和环境污染,确保水稻和粮食生产、农产品质量与贸易和农业生态环境安全,采用测报调查、随机区组设计和统计分析方法,对生物农药井冈·蜡芽菌、生物农药与化学农药复配的春雷·稻瘟灵进行预防穗颈瘟田间药效试验。结果表明:井冈·蜡芽菌的相对防效为78.0%,实际单产为7 702.5kg/hm2,比对照(CK,清水)增产21.3%,增收3349.05元/hm2,在穗颈瘟中等及以下发生区域和轻感稻瘟病品种种植田块可以大力推广,以替代化学农药;春雷·稻瘟灵1 050g/hm2和900g/hm2的相对防效为82.9%和79.9%,与化学农药三环唑的防效(84.6%)接近,实际单产分别为7 959.0kg/hm2和7 902.0kg/hm2,比CK增产25.3%和24.4%,可以大面积推广;化学农药三环唑的实际单产为7 989.0kg/hm2,比CK增产25.8%,最好用于稻瘟病常发、重发和早发区域与高感品种种植田块的穗颈瘟预防;稻瘟灵1 500mL/hm2预防穗颈瘟效果较差,不宜单独使用。三环唑、井冈·蜡芽菌、稻瘟灵和春雷·稻瘟灵处理的实际单产均极显著高于CK。

贵州省稻瘟病菌对稻瘟灵的抗药性研究

采用生长速率法测定了采自贵州省26个县(市)不同年份稻瘟病标样175个稻瘟病菌单孢菌株对稻瘟灵的抗药性。结果表明,贵州省主要稻区都有抗稻瘟灵菌株出现,但大部分抗性菌株的抗药性表现为低抗水平。黔东南、贵阳、遵义地区抗性菌株频率明显高于其他几个地区,其抗性菌株频率分别为10.86%、10.29%和8.00%。

贵州省稻瘟病菌对春雷霉素和稻瘟灵的抗药性监测

采用生长速率法分别测定2013年从贵州省不同3个稻区分离的30个稻瘟病菌株,并测定分离出的菌株对稻瘟灵与春雷霉素的敏感性及抗药性水平.实验结果表明：春雷霉素、稻瘟灵对供试30个稻瘟病菌株的EC50值范围分别为1.60～6.42 μg/mL,1.93～ 6.26μg/mL,其平均值分别为3.69μg/mL,3.54μg/mL,且敏感菌株都为30个,都没有抗性菌株,表明贵州省稻瘟病菌株对春雷霉素与稻瘟灵的抗性均表现为较低水平.从菌株对春雷霉素与稻瘟灵的抗性分析表明贵州省稻瘟病菌对春雷霉素与稻瘟灵未产生交互抗药性或多抗性.

贵州省稻瘟病菌对三环唑和富士一号的敏感性研究

利用生长速测法测定贵州省不同地区的稻瘟病菌菌系对三环唑和富士一号敏感性。结果表明 ,三环唑的抑制中浓度为 6 0 .2 1～ 12 0 .5 6 μg/ml,富士一号的抑制中浓度为 5 .0 1～ 14 .2 μg/ml,两者的 Ec50 值都相差 2倍以上 ,说明贵州省的稻瘟病菌菌系对三环唑和富士一号已产生不同程度的敏感性差异。

春雷霉素在水稻田水和土壤中的残留及消解动态

采用固相萃取(SPE)和高效液相色谱(HPLC)建立了一种检测水稻田水和土壤中春雷霉素残留的方法。田水样品直接过滤后经阳离子固相萃取(SCX-SPE)柱净化;土壤样品用V(丙酮)∶V(水)=3∶7的混合溶液超声提取后经相同方法净化。以庚烷磺酸钠为离子对试剂,采用离子对反相高效液相色谱法(IP-HPLC)进行检测。方法的线性范围在0.05～5.0 mg/L之间,相关系数(r)为0.999 9。当春雷霉素在田水和土壤中的添加水平分别为0.01～0.5 mg/L和0.01～0.5 mg/kg时,其在田水中的平均回收率在83.8%～92.4%之间,相对标准偏差(RSD)为3.67%～5.21%;土壤中的平均回收率在79.7%～84.5%之间,RSD为4.39%～5.62%。方法的检出限(LOD)在田水和土壤中分别为0.001 mg/L和0.001 mg/kg,定量限(LOQ)分别为0.01 mg/L和0.01 mg/kg。采用所建方法对广东、广西和湖北3地2011年春雷霉素在田水及土壤中的消解动态进行了检测。结果表明:其在水稻田水及土壤中的消解动态曲线均符合一级动力学方程;在田水中消解迅速,半衰期分别为2.88 d(广东)、2.52 d(广西)和2.68 d(湖北);在土壤中的消解速率比水中的慢,半衰期分别为4.12 d(广东)、5.41 d(广西)和4.89 d(湖北),属于易降解农药(t1/2<30 d)。

稻瘟灵原药的气相色谱分析

采用气相色谱定量分析稻瘟灵原药中的有效成分,色谱条件如下:SP-2000型气相色谱仪,2.0 m×2.0 mm不锈钢柱,柱内填充物为5%SE-30/Chromosorb W-HP(0.18-0.25 mm),FID检测器,以邻苯二甲酸二丁酯为内标物。结果表明,线性相关系数为0.9992、标准偏差为0.45、变异系数为0.38%、样品的平均回收率为98.65%。该法简单、快速、准确,已成功地用于稻瘟灵原药的定量分析。

响应面法优化春雷霉素发酵培养基及培养条件

采用响应面法对春雷霉素发酵培养基成分及培养条件进行了优化。首先应用Plackett-Burman(PB)设计对培养基及培养条件相关因素的显著性进行评价,以春雷霉素效价为响应值,筛选出3个可信度90%以上的因素:黄豆粕粉量、装液量和接种量为重要影响因素。经最陡爬坡实验确定中心点范围后,利用CCD设计及响应面分析,最终确定培养基的最优组合为:黄豆粕粉添加量7.6%、装液量25mL/250mL、接种量18%(V/V)。经优化以后,春日链霉菌发酵产生春雷霉素的效价由原来的2350μg/mL提高到了3670μg/mL,相比优化前效价提高了56.17%。

贵州省稻瘟病菌对稻瘟灵的抗药性测定

对来自贵州省20个县(市)200余份稻瘟病标样上的146个单孢菌株采用生长速率法测定了稻瘟病菌对稻瘟灵的抗药性。结果表明,贵州省主要稻区都有抗稻瘟灵菌株出现,但大部分抗性菌株的抗药性水平表现为低抗水平。黔东南、贵阳、遵义地区抗性菌株频率明显高于其它几个地区,抗性菌株频率分别为10．96％、9．59％和7．53％。

稻瘟病菌对稻瘟灵抗性遗传研究

在离体条件下就稻瘟病菌对稻瘟灵抗性的诱导、抗性水平和遗传进行了研究。结果表明，供试３个小种（ＺＡ４９、ＺＦ１和ＺＤ１）４个菌株分别经稻瘟灵５０μｇ／ｍｌ、１００μｇ／ｍｌ和稻瘟灵１００μｇ／ｍｌ＋亚硝基胍０５μｇ／ｍｌ的３种处理诱变，均得到了抗稻瘟灵突变株，在含稻瘟灵的培养基中加入诱变剂亚硝基胍可显著提高稻瘟病菌对稻瘟灵抗性的突变率。上述３个不同处理获得的突变株的抗性水平相似，为野生型亲本的２８～８８倍。突变株对稻瘟灵的抗性在单分生孢子无性系后代可以稳定遗传。

稻瘟灵和乐果对中华蟾蜍蝌蚪的急性毒性实验研究

【目的】研究稻瘟灵和乐果对中华蟾蜍蝌蚪的急性毒性效应,以期为农药的水环境监测及合理使用提供科学依据。【方法】采用水生生物急性毒性实验方法研究稻瘟灵和乐果对中华蟾蜍蝌蚪的单一毒性影响。【结果】中华蟾蜍蝌蚪在稻瘟灵中24、48、72和96h的半致死浓度(LC50)分别是27.885、25.181、23.366和22.551mg/L,安全浓度(SC)为6.283mg/L;在乐果中24、48、72和96h的半致死浓度(LC50)分别是52.321、38.998、29.319和24.115mg/L,安全浓度(SC)为6.500mg/L。【结论】稻瘟灵和乐果对中华蟾蜍蝌蚪属于低毒性农药,本研究结果将为合理使用这两种农药提供依据。

福美双混剂HPLC分析方法的研究

采用 Ｏ Ｄ Ｓ２ Ｃ１８ 色谱柱，反相高效液相色谱法，在只改变检测波长而其它色谱条件不变的情况下，完成福美双混剂中福美双、稻瘟灵和甲霜灵３ 个农药组分含量的测定。结果表明，该方法测定３ 个农药组分的准确度分别为９９８ ％ 、９９５ ％ 、９９２ ％ ，精密度分别为０５１ ％ 、２７４ ％ 、２６９ ％ 。

分散固相萃取净化-气相色谱法测定大米中4种农药残留

目的建立一种同时测定大米中丁草胺、噻嗪酮、稻瘟灵、溴氰菊酯4种农药残留的分散固相萃取-气相色谱法。方法样品经乙腈提取,盐析后,提取液经N-丙基-乙二胺硅烷(N-propyl-ethylenediamine silane,PSA)和十八烷基硅胶(C_(18))分散固相萃取材料净化后上机测定。优化的色谱条件为:DB-17(30 m×0.25 mm,0.25μm)石英毛细管柱,采用程序升温分离,流速为1.0 mL/min,进样量1.00μL,电子捕获检测器检测。结果 4种农药在0.001~8μg/mL范围内线性良好,相关系数(r)均大于0.999,定量限为0.001~0.08 mg/kg,4种农药平均回收率为89.6%~102.9%,相对标准偏差(RSD)在2.11%~7.81%(n=6)之间。结论该方法操作简便、快速、准确,适用于大米中4种农药残留痕量分析。

不同抗逆诱导剂对水稻细胞PBZ1基因表达的影响

以水稻品种中花8号的悬浮细胞为试材,分别研究了真菌激发子和盐激发子对用稻瘟灵(IPT)和脱落酸(ABA)预处理24 h的水稻悬浮细胞中PBZ1基因表达的影响.结果发现:单独用IPT、ABA处理可以诱导细胞中PBZ1基因表达;只用真菌激发子和盐激发子处理的细胞中也可以检测到PBZ1基因的表达,但两种激发子对PBZ1基因表达的影响不同,在真菌激发子处理后的0～3 h之间PBZ1基因表达逐渐增强,而在盐激发子处理后的0～3 h之间则呈现逐渐减弱的趋势,到第3 h就检测不到了;用IPT预处理24 h后,再分别用真菌激发子和盐激发子诱导,水稻细胞中PBZ1基因表达强度都显著高于单独用IPT处理的细胞,而且在处理后的第0.5～3 h期间一直保持较强的表达;ABA+盐激发子处理使细胞中PBZ1基因表达推迟且短暂,只在处理后第1～2 h之间可检测到,ABA+真菌激发子处理使细胞中PBZ1基因在0.5～3 h期间一直保持较强的表达,明显强于单独用ABA处理的细胞.可见,IPT和ABA都可以诱导抗病基因PBZ1的表达,PBZ1基因也可由盐激发子诱导表达,说明PBZ1基因对除病害以外的非生物逆境也有积极的作用.

电动和手动喷雾器水稻田喷雾农药利用率及雾滴分布比较

【目的】比较手动和电动喷雾器在水稻上喷施3种农药的有效利用率及药液雾滴分布效果。【方法】在惠州市惠阳区两个镇和博罗县两个镇开展晚稻农药利用率小区试验,供试药剂为50%吡蚜酮水分散粒剂、5%氯虫苯甲酰胺悬浮剂和2%春雷霉素水剂,农药药液加入诱惑红示踪剂,采用五点取样法、雾滴卡和分光光度计(501 nm)等方法和仪器。【结果】电动喷雾器喷施吡蚜酮、氯虫苯甲酰胺和春雷霉素3种药液的农药利用率分别为39.43%、38.03%和38.98%,而手动喷雾器处理的农药利用率分别为29.02%、28.08%和28.50%,电动喷雾器处理比手动喷雾处理分别提高10.41、9.95、10.93个百分点,且电动喷雾器处理的农药利用率均显著高于手动喷雾器处理。雾滴沉积分布试验结果表明:手动和电动喷雾器处理雾滴沉积量在水稻均是自上而下逐渐递减,且水稻不同层间雾滴沉积量差异显著。雾滴粒径分析结果表明:手动喷雾器处理在水稻中层和下层的雾滴粒径均显著大于电动喷雾器处理。雾滴数量分析结果表明:电动喷雾器处理在水稻中层和下层雾滴数量均高于手动喷雾器处理,且下层雾滴数量达到差异显著水平。【结论】电动喷雾器在广东省晚造水稻抽穗期喷施3种药剂的农药利用率均大于38%,比手动喷雾器处理提高9.95~10.41个百分点,且电动喷雾器比手动喷雾器的雾化效果更优。