关元命门序贯针刺激活FSHR/cAMP/PKA通路促进早发性卵巢功能不全模型大鼠颗粒细胞增殖的机制研究

【目的】观察关元命门序贯针刺方案对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠的治疗作用及机制。【方法】将雌性SD大鼠分为空白组、模型组、蛋白激酶A(PKA)抑制剂(H89)+针刺组、针刺组各12只。除空白组,其他3组大鼠采用雷公藤多苷片灌胃制备POI模型。模型成功建立后,空白组和模型组每日捆绑一次;针刺组大鼠在动情间期取关元穴针刺,在动情前期取命门穴针刺;H89+针刺组按照针刺组针刺方案干预,在每次针刺前30 min内腹腔注射H89。连续干预20 d。各组大鼠分别在干预后第1个动情间期和动情前期取材。酶联免疫吸附分析(ELISA)检测动情间期促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E2)水平,Western Blot法检测动情间期促卵泡激素受体(FSHR)、芳香化酶P450(P450arom)蛋白表达,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测动情间期和动情前期颗粒细胞活性,免疫组织化学法检测动情前期增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达水平。【结果】(1)与空白组比较,模型组和H89+针刺组血清FSH水平显著升高(P<0.01),E2水平显著降低(P<0.001);H89+针刺组FSH水平与模型组无差异(P>0.05),E2水平低于模型组(P<0.05);针刺组FSH水平低于模型组和H89+针刺组(P<0.05),与空白组无差异(P>0.05),E2水平显著高于模型组和H89+针刺组(P<0.01),仍低于空白组(P<0.05)。(2)模型组和H89+针刺组FSHR、P450arom蛋白表达均低于空白组(P<0.01);H89+针刺组FSHR蛋白表达水平与模型组无差异(P>0.05),P450arom蛋白表达水平低于模型组(P<0.05);针刺组FSHR、P450arom蛋白表达水平均高于模型组和H89+针刺组(P<0.05),但仍低于空白组(P<0.05)。(3)模型组和H89+针刺组GCs活性和PCNA平均光密度值均低于空白组(P<0.05);H89+针刺组GCs活性和PCNA平均光密度值均低于模型组(P<0.05);针刺组的GCs活性和PCNA平均光密度值显著高于模型组和H89+针刺组(P<0.05或P<0.01)。【结论】关元命门序贯针刺方案可通过上调促卵泡激素受体(FSHR)/环磷酸腺苷(cAMP)/蛋白激酶A(PKA)通路FSHR、P450arom蛋白的表达,调控性激素水平,提高GCs活性和促进GCs细胞增殖,从而改善POI。

紫菟二仙汤对雷公藤多苷致早发性卵巢功能不全大鼠卵巢凋亡相关蛋白的影响

目的:研究紫菟二仙汤对雷公藤多苷致早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢凋亡蛋白的影响。方法:将60只SD大鼠分为空白组(N组)10只和造模组50只,采用雷公藤多苷灌胃法制作早发性卵巢功能不全大鼠模型,造模成功后将造模组分为模型组(M组)、西药组(X组)、紫菟二仙汤低剂量组(L组)、中剂量组(Z组)和高剂量组(H组)各10只。给药期间观察各组大鼠动情周期,9周后观察子宫指数及卵巢指数变化,蛋白印迹法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白含量,并计算Bcl-2/Bax比值。结果:各组大鼠子宫指数及卵巢指数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与N组比较,M组大鼠动情周期延长(P<0.05);与M组比较,X、Z及H组大鼠动情周期缩短(P<0.05);各治疗组动情周期比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。各组大鼠Bax蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与N组比较,M组Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax降低(P<0.05),Caspase-3表达水平升高(P<0.05);与M组比较,X组、Z组及H组Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax升高(P<0.05),Caspase-3表达水平下降(P<0.05),L组Caspase-3表达水平下降(P<0.05);与X组比较,L组Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax降低(P<0.05);与L组比较,Z组及H组Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax上升(P<0.05),Caspase-3表达水平下降(P<0.05)。结论:紫菟二仙汤可调节雷公藤多苷致早发性卵巢功能不全模型大鼠的动情周期,其机制可能与提高Bcl-2表达,降低Caspase-3表达,提高Bcl-2/Bax密切相关。

电针联合骨髓间充质干细胞治疗化疗致大鼠卵巢功能不全

背景:骨髓间充质干细胞治疗卵巢功能不全有不错的效果,但仍存在归巢效率低、效果欠佳等问题。目的:探讨电针疗法联合骨髓间充质干细胞治疗化疗型卵巢功能不全的效果。方法:从32只SD大鼠中随机选择8只做正常组,其余随机分为卵巢功能不全组、干细胞组、联合组,每组8只,采用腹腔注射环磷酰胺溶液制备卵巢功能不全动物模型。造模结束后,正常组不做处理,卵巢功能不全组尾静脉注射1 mL生理盐水,干细胞组与联合组尾静脉注射1 mL骨髓间充质干细胞悬液(细胞数为2×106),联合组大鼠进行电针治疗,30 min/d,持续7 d,治疗结束后取心脏血与卵巢组织观察疗效。结果与结论:①与卵巢功能不全组相比,干细胞组及联合组大鼠血清雌二醇激素水平明显升高,卵泡刺激素水平明显降低;②与卵巢功能不全组相比,干细胞组及联合组大鼠卵巢卵母细胞数量明显增加;③与干细胞组相比,联合组的骨髓间充质干细胞归巢水平明显增加(P=0.0043),CXCR4蛋白表达水平升高(P=0.036);④与卵巢功能不全组相比,干细胞组及联合组大鼠卵巢凋亡细胞明显减少,Bax蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高;与干细胞组相比,联合组Bax表达水平明显降低(P=0.0284),Bcl-2表达水平明显升高(P=0.0364);⑤结果显示,电针能促进骨髓间充质干细胞归巢,并增强骨髓间充质干细胞的抗凋亡作用。

大鼠虚寒证模型的研制

目的 目前的虚寒证模型存在两个环节的不足 :一是可能未能在寒证的基础上达到寒邪伤阳而致虚 ;二是虚证上未达到“精气夺则虚”。本实验尝试通过加大造模量改进这一模型。方法 雌性WistarⅡ级大鼠 ,按照动物体温分为对照组和虚寒证组。虚寒证用较典型的造模药物灌胃造模 ,但用量较大 ,时间较长。造模结束检测有关指标。结果 与对照组比较 ,虚寒证组动物外观差 ,舌质淡嫩 ,明显腹泻 ,体重增长减缓 ,体温较低 ,食量减少 ,游泳时间缩短 ,受激排便增多。血浆cGMP含量、乳酸脱氢酶活性、肾脏指数、脾脏指数、肝脏指数、肾上腺指数显著增高 ,皮质醇含量、T含量、卵巢指数、血清乳酸含量显著降低 ,cAMP cGMP比值 ,E2 含量、E2 T比值、胸腺指数有降低趋势。血清IL - 2含量、血清木糖吸收率、血清TT3含量无显著差异。结论 本模型有程度较深的寒证表现 。

胃泌素受体在脾虚大鼠的异常表达与中药调控作用研究

目的 :观察脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体的变化规律与益气健脾中药黄芪的调控作用。方法 :应用受体结合法检测胃泌素受体结合位点数。结果 :大黄和利血平脾虚模型大鼠胃粘膜胃泌素受体结合位点数均有明显减少。黄芪在纠正脾虚证的部分病理证候的同时 ,对脾虚大鼠胃粘膜胃泌素受体结合位点数有显著上调作用 ,而对血清胃泌素水平却有一定降低作用趋势。高浓度黄芪注射液在体外可显著促进胃泌素受体结合。结论 :胃泌素受体参与了脾虚证的病理过程 ,黄芪健脾药理可能不是直接作用于胃泌素受体的内源性配基的结合部位 ,而有可能是一种类似酶别构效应机制的 型受体激动剂。

司维拉姆对慢性肾衰大鼠钙磷代谢和胎球蛋白A的影响

目的:观察盐酸司维拉姆对慢性肾衰竭大鼠钙磷代谢和胎球蛋白A水平的影响。方法:30只SD雄性大鼠分别行一步法5/6肾切除(n=20,手术组)或假手术(n=10,对照组)3,0只大鼠术后2周开始给予高磷饮食6周。动物分3组:模型组(手术n=10),治疗组(手术+司维拉姆,n=10),对照组(假手术n=10),司维拉姆组给予司维拉姆(0.2%)治疗。高磷饮食配方:磷(P)1.2%,钙(Ca)1.6%,维生素D31000U/kg。饮食干预开始和结束时检测Scr、血P、血Ca、钙磷乘积及胎球蛋白A。结果:术后第二周饮食干预开始时,手术组大鼠Scr明显高于对照组大鼠(P<0.05),血P、血Ca、钙磷乘积及胎球蛋白A水平两组间差异无统计学意义。饮食干预六周时,血磷模型组最高,治疗组最低(P<0.05);各组间血钙水平差异无统计学意义;胎球蛋白A模型组明显低于治疗组(P<0.05)、对照组(P<0.05)。结论:盐酸司维拉姆能降低慢性肾衰大鼠高血磷及钙磷乘积,减轻钙化抑制物胎球蛋白A水平下降,可有效预防血管钙化的发生和进展。

大鼠虚热证模型的研制

目的 :改进现行的虚热证动物模型。方法 :6到 8倍以往造模量的中药通过灌胃给予动物 ,灌胃时间为 2 8d。在实验过程的不同时间对大鼠的外观、舌象、大便、受激排便等进行观察 ,并测定大鼠的体温、食量、饮水量、游泳时间以及某些脏器指数和与虚热证有关的生物化学指标。结果 :大鼠不但有热证表现 ,而且有一定的虚证表现。结论 :这种诱发虚热证的方法具有一定的优点 ,但仍可进一步改进。

肾阳虚大鼠生殖细胞凋亡及Bcl-xl和Bad蛋白的表达

目的:观察实验性肾阳虚大鼠生殖细胞凋亡及Bcl-xl、Bad蛋白表达的变化。方法:12只成年健康雄性SD大鼠随机分成肾阳虚组(n=6)和对照组(n=6)。建立单侧肾阳虚动物模型后,取睾丸,对照组同侧取材。采用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生殖细胞凋亡,免疫组化法检测Bcl-xl、Bad蛋白表达。结果:凋亡细胞主要是初级精母细胞和圆形精子细胞。肾阳虚组生殖细胞凋亡指数高于对照组(P<0.05);肾阳虚组Bcl-xl蛋白表达低于对照组(P<0.05);Bad蛋白表达高于对照组(P<0.05)。结论:实验性肾阳虚大鼠生殖细胞凋亡明显增多,可能与Bcl-xl蛋白表达降低、Bad蛋白表达升高相关。生殖细胞凋亡可能是肾阳虚所致生殖功能障碍的一个重要原因。

大黄附子配伍对附子总生物碱在阳虚便秘大鼠体内的药动学影响

目的:研究大黄附子组分配伍对附子总生物碱在阳虚便秘大鼠体内的药动学行为的影响。方法:将阳虚便秘大鼠分为附子组和配伍组,附子组灌胃9.6 mg·kg^(-1)附子总生物碱,配伍组灌胃9.6 mg·kg^(-1)附子总生物碱、19.2 mg·kg^(-1)大黄总蒽醌,UHPLC-Q/TOF-MS法测定附子总生物碱的血药浓度,并计算药动学参数。结果:配伍后乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的C_(max)、AUC_(last)明显降低,T_(max)明显提前;苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱和乌头原碱的C_(max)、AUC_(last)明显升高,T_(max)明显延后,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:大黄总蒽醌、附子总生物碱组分配伍后改变了附子总生物碱在阳虚便秘大鼠体内的药动学行为。

养血清脑颗粒治疗慢性脑缺血衰老大鼠的实验研究

目的观察养血清脑颗粒对衰老大鼠慢性脑缺血的影响,并据此探讨其可能的作用机理。方法将健康雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、治疗高剂量组、治疗低剂量组和对照组。空白对照组不做任何处理。其余各组大鼠每日用0.5%的D半乳糖(Dgal)生理盐水按50mg/kg颈背部皮下注射,共6周,诱导亚急性衰老大鼠模型;一个月后,永久性结扎大鼠双侧颈总动脉,以复制老年慢性脑缺血模型;治疗高低剂量组和对照组分别给予养血清脑颗粒和尼莫地平片配制的混悬液灌胃;6周后,下腔静脉取血,处死动物,检测血样中的内皮素(ET)、肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结果治疗高剂量组SOD、NO均升高(P<0.05),ET、TNF、MDA显著降低(P<0.01);治疗低剂量组NO升高(P<0.01),ET、TNF降低(P<0.01,P<0.05);对照组NO升高、TNF降低(P<0.05),其他指标虽有变化,但无统计学意义。结论在Dgal诱导的亚急性衰老大鼠模型的基础上结扎双侧颈总动脉可以制备老年慢性脑缺血模型。养血清脑颗粒可以有效治疗衰老大鼠慢性脑缺血,降低脑缺血后MDA、TNF、ET,升高SOD、NO。

培哚普利对慢性心功能不全大鼠心肌肌浆网Ca^(2+)泵功能的影响

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)干预慢性心功能不全对心肌肌浆网 (SR)Ca2 + 泵活性和Ca2 + 摄取功能的影响及意义。方法 80只大鼠分为心功能不全组 (F组 ) ,培哚普利组 (P组 ) ,对照组 (C组 )。通过结扎大鼠左冠脉建立慢性心功能不全模型 ,以培哚普利进行干预 ,对照观察血流动力学、左室心肌SRCa2 + 泵活性、SRCa2 + 摄取Vmax、Kd 值和最大摄取量。结果 F组左室舒张末压 (LVEDP)显著升高 (P <0 .0 1) ,+dp dtmax、-dp dtmax显著降低 (P <0 .0 1) ;P组LVEDP显著低于F组 (P <0 .0 1) ,+dp dtmax、-dp dtmax显著高于F组 (P <0 .0 1)。F组心肌SRCa2 + 泵活性、Ca2 + 最大摄取量和Vmax显著低于C组 (P <0 .0 1) ,P组显著高于F组 (P <0 .0 1) ,3组Kd 值差异不显著 (P >0 .0 5 )。心肌SRCa2 + 泵活性与Vmax、+dp dtmax、-dp dtmax显著正相关 (r=0 .742 9,0 .5 161,0 .6172 ,P <0 .0 1)。结论 培哚普利长期干预慢性心功能不全 ,能够增加心肌SRCa2 + 泵活性 ,改善Ca2 + 摄取功能 ,可能与其改善心肌舒缩功能及心肌保护作用有关。

大黄附子成分配伍治疗大鼠阳虚便秘的整合药效学研究

目的:探讨大黄附子成分配伍后对阳虚便秘大鼠的治疗作用及整合药效学特征。方法:采用山西白醋和0℃冰水活性炭建立大鼠阳虚便秘动物模型,随机分成模型空白组、附子模型组、配伍模型组;将正常大鼠分成正常空白组、附子正常组、配伍正常组,对模型空白组和正常空白组灌胃相应生理盐水,其他4组灌胃相应药物,采血。按照试剂盒说明书测定大鼠不同时间点血浆中胃动素(motillin,MTL)、胃泌素(gastrin,GT)、内皮素(endothelin,ET)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)的浓度,并进行主成分分析。结果:配伍正常组与附子正常组比较,配伍模型组与附子模型组比较,大鼠各时间点血浆中MTL、GT、ET、VIP各自的浓度和四者的整合浓度均明显升高,且均在180 min时升高最明显,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:附子总生物碱和大黄蒽醌配伍后可有效治疗大鼠阳虚便秘;MTL、GT、ET、VIP的整合药效学数据仍然具有明显的药效学特征,且整合后与整合前各成分的药效学特征基本一致,可表达上述4种成分整体的药效学特征。

胶质纤维酸性蛋白在老年痴呆大鼠海马中的表达

为探讨慢性缺血痴呆鼠学习减退与海马内星形胶质细胞表达的关系,基于老年大鼠慢性脑缺血痴呆模型,采用免疫组化技术及迷宫实验,定量分析海马星形胶质细胞变化与学习能力、记忆能力的关系。结果发现,慢性缺血痴呆鼠海马CAl区GFAP阳性细胞数目明显增多,胞体肥大,突起增粗、变长,与对照组相比有显著意义(P<0.05),Y型迷宫测试结果显示,痴呆组大鼠的学习、记忆能力与对照组相比,明显下降。提示海马星形胶质细胞可能参与慢性缺血痴呆大鼠的学习记忆功能。

多重干预RAAS对大鼠慢性心功能不全心室重构及血钾的影响

目的探讨多重干预RAAS对大鼠慢性心功能不全心室重构及血钾的影响。方法实验采用缩窄大鼠腹主动脉法建立慢性压力负荷致心功能不全动物模型,选6周龄20只雌性SD大鼠,随机分4组(每组5只),B组(手术模型组)、C组(卡托普利组)、D组(卡托普利+缬沙坦组)、E组(卡托普利+缬沙坦+螺内酯组),另随机抽取5只同龄雌性SD大鼠假手术作为对照(A组)。给药8周后用Doppler超声心动图检测大鼠心脏结构和心功能各项参数的变化,放射免疫法测定血浆AngⅡ,ALDO浓度,并生化检测血钾水平。结果腹主动脉结扎后第9周,与A组比较,B组舒张末期室间隔厚度(IVSTD)、舒张末期左室后壁厚度(LVPWTD)、相对室壁厚度(RWT)、左室重量(LVM)、左室重量与体重比(LVM/BW)均显著提高(P<0.05);C、D、E组与B组相比,LVM,LVM/BW下降显著(P<0.05)。各药物干预组(C、D、E)血浆AngⅡ,ALDO水平明显低于B组(P<0.05),以联合应用螺内酯组明显。各药物干预组与A组和B组相比较,血钾水平差异无显著性(P>0.05)。结论联合应用卡托普利、缬沙坦及螺内酯多重干预RAAS能明显改善大鼠慢性心功能不全心室重构,对血钾无明显影响。

慢性支气管炎肺气虚证大鼠转化生长因子-β_1的变化及其意义

目的探讨慢性支气管炎肺气虚证大鼠血清及肺组织中抗炎细胞因子转化生长因子β1(TGF-β1)的变化及其意义。方法将40只SD大鼠随机分为空白对照组(对照组)和慢性支气管炎肺气虚证组(模型组),各20只,雌雄各半。模型组大鼠采用改良烟熏法,复制慢性支气管炎肺气虚证模型,检测血清及肺组织中TGF-β1的含量,探讨慢性支气管炎肺气虚证状态下机体炎症因子的变化特点。结果模型组大鼠血清、肺组织中TGF-β1含量均较对照组明显降低(P<0.01)。结论机体TGF-β1水平的降低,是慢性支气管炎发病的重要使动因素,其水平变化可以作为临床肺气虚证微观辨证诊断的重要参考指标。

大鼠慢性肾功能不全模型两种制作方式的比较

目的比较大鼠肾大部切除与肾结扎两种方法制备的5/6肾切除慢性肾功能不全模型的异同。方法雄性SD大鼠随机分为三组。A组行左肾2/3切除加右肾切除,B组行结扎左肾动脉2/3分支加右肾切除,C组为假手术组。分别于第二次手术后5周、9周及13周测血压,处死大鼠,留取24h尿及肾组织。检测尿蛋白,肾组织切片染色。用半定量法评价肾小球硬化指数。结果第5周时,B组大鼠的收缩压显著升高,而A组与C组相比无显著差异,第9周和13周A组和B组与C组大鼠相比,收缩压均显著升高。肾部分切除术后,尿蛋白随时间进行性增加。B组与A组相比,尿蛋白增加更为显著。A组和B组在各观察点均有不同程度肾小球硬化,B组较A组肾小球硬化程度重。结论肾大部切除和肾结扎两种方法制备的大鼠5/6肾切除模型表现有所不同。

加减益经汤对卵巢功能减退大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响

目的:研究加减益经汤对环磷酰胺(CTX)所致卵巢功能减退(DOR)大鼠性激素与卵巢组织形态学的影响。方法:成年雌性SD大鼠随机选出10只作为空白对照组,其余大鼠采用CTX 75 mg/kg腹腔单次注射造模,造模成功后将大鼠分为模型对照组、补佳乐组和加减益经汤高、中、低剂量组,每组10只。加减益经汤高、中、低组予加减益经汤,生药剂量分别为23.58、11.79、5.895 g/kg;补佳乐组予补佳乐,0.09 mg/kg;模型对照组与空白对照组灌胃10 mL/kg蒸馏水。造模当日开始予灌胃给药,1次/d,连续28 d。模型对照组在造模后2周,其余各组在给药结束后,于动情间期处死。观察大鼠的一般情况、动情周期、卵巢指数、卵巢组织形态变化,检测血清FSH、LH、E2值。结果:与模型对照组比较,加减益经汤与补佳乐可恢复DOR大鼠动情周期,升高卵巢指数(P<0.01),降低血清FSH、LH(P<0.05或P<0.01),升高血清E2(P<0.01),改善卵巢组织形态,增加原始、成熟卵泡数(P<0.05或P<0.01),降低初级、次级、闭锁卵泡数(P<0.01)。结论:加减益经汤可明显改善CTX所致DOR大鼠的性激素与卵巢组织形态学,其中中剂量是最适宜剂量。

二仙汤对更年期肾阳虚大鼠的影响

目的:探讨二仙汤对更年期肾阳虚大鼠模型的治疗作用。方法:将30只符合自然老化的更年期大鼠模型,随机平均分配为对照组、模型对照组和治疗组,3月龄鼠作为青年组。模型治疗组和治疗组用氢化可的松制造肾阳虚模型成功后,治疗组给予二仙汤灌胃14天。观察二仙汤对大鼠性激素水平的影响。结果:二仙汤能明显减轻肾阳虚症状,体重增加(P<0.01),治疗组血中的雌二醇(E2)明显高于模型组(P<0.05),促黄体生成素(LH)和卵泡生成素(FSH)低于模型组(P<0.05)。结论:二仙汤对更年期肾阳虚大鼠模型有治疗作用。

大鼠体外循环后肝功能障碍与生长激素抵抗的关系

目的探讨大鼠体外循环(CPB)后肝功能障碍与生长激素(GH)抵抗的关系。方法建立大鼠CPB模型,分为GH预处理大鼠(GH组,15只)和CPB对照大鼠(CPB组,15只),按照CPB后不同时间点检测血清GH、生长激素结合蛋白(GHBP)、内毒素(LPS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、肝功能及前清蛋白,采用RT-PCR法检测肝组织生长激素受体(GHR)mRNA。结果CPB后CPB对照组、GH预处理组LPS、TNF-α浓度较CPB前显著升高,且肝组织GHRmRNA的表达明显减少,肝功能损害明显;GH组同时相点血清LPS和TNF-α浓度均较CPB组显著降低(P<0.05或P<0.01),GH组血清GHBP以及肝组织GHRmRNA的表达均较CPB组显著增加(P<0.05或P<0.01),肝功能损害明显减轻。GHBP、GHRmRNA变化趋势与黄疸程度、LPS、TNF-α水平呈负相关(P<0.01)、与PA呈正相关(P<0.01)。结论CPB术后早期肝功能已受到损害,GH/GHR轴存在明显下调,其原因可能与炎症递质血症引起的GHR表达受抑有关,并可进一步加重炎症递质血症,是介导CPB肝脏病理生理改变的重要因素,GH预处理可减轻CPB时炎症递质血症,上调GH/GHR轴可明显改善肝功能。

补肾养精颗粒调控早发性卵巢功能不全模型大鼠卵巢颗粒细胞凋亡机制研究

目的:探讨补肾养精颗粒抑制卵巢颗粒细胞凋亡治疗早发性卵巢功能不全的机制。方法:选择动情周期正常的SD雌性大鼠40只,随机分为空白组、模型组、中药组、激素组,每组各10只,模型诱导期间,空白组予生理盐水灌胃14 d,其他组予50 mg/kg雷公藤多苷片混悬液灌胃14 d建模。其后,空白组、模型组分别予生理盐水灌胃15 d,中药组予3.50 g/kg补肾养精颗粒灌胃15 d;激素组予0.1 mg/kg戊酸雌二醇片(第4天同时加用1 mg/kg醋酸甲羟孕酮片)灌胃,4 d为1个疗程,每4 d停用1 d,共15 d。通过免疫组化检测卵巢颗粒细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及双向调控的核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达;通过异硫氰酸荧光黄/碘化丙啶(Annexin-V-FITC/PI)荧光双染细胞凋亡及原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测卵巢颗粒细胞凋亡情况。结果:与空白组比较,模型组卵巢颗粒细胞VEGF、TGF-β、IGF-1水平显著下调,而NF-κB、TNF-α水平显著上调,细胞凋亡率显著增加(P<0.05);与模型组比较,中药组、激素组VEGF、TGF-β、IGF-1水平上调,NF-κB、TNF-α水平下调,细胞凋亡率下降(P<0.05);与激素组比较,中药组VEGF、IGF-1、TGF-β水平上调,NF-κB水平下调(P<0.05)。结论:补肾养精颗粒可通过上调卵巢颗粒细胞中VEGF、TGF-β、IGF-1的表达,降低NF-κB、TNF-α的表达,进而抑制卵巢颗粒细胞凋亡,促进卵泡发育。