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Kininogen及其在鱼类中的研究进展
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作者 李松 徐建俊 +4 位作者 伍发芬 李彪 刘玲 蒋然然 李树红 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第20期385-390,共6页
本文首先介绍了半胱氨酸蛋白酶抑制因子超家族中kininogen(家族III)及其各结构域的功能。在此基础上,阐述了鱼类kininogen在分离纯化、活性和结构特征的研究进展。最后,分析探讨了鱼类kininogen在食品、医药领域的应用前景,并展望了鱼... 本文首先介绍了半胱氨酸蛋白酶抑制因子超家族中kininogen(家族III)及其各结构域的功能。在此基础上,阐述了鱼类kininogen在分离纯化、活性和结构特征的研究进展。最后,分析探讨了鱼类kininogen在食品、医药领域的应用前景,并展望了鱼类加工下脚料中kininogen的开发利用方向。 展开更多
关键词 鱼类kininogen 纯化鉴定 结构特征 研究进展 应用前景
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Kininogen D5和TRAIL融合蛋白的克隆表达及生物学活性的研究 被引量:2
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作者 宗英 孙铭娟 +3 位作者 董晓毅 高云 王梁华 焦炳华 《药物生物技术》 CAS CSCD 2008年第1期1-5,共5页
用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合编码序列,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经AmyloseResin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白。结果表明MBP-KT... 用重组PCR技术得到Kininogen D5和TRAIL的融合编码序列,将该DNA片段克隆到原核表达载体pMAL-c2,重组质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,得到MBP-KT和MBP-TK,经AmyloseResin亲和层析柱层析,得到初步纯化的融合蛋白。结果表明MBP-KT对胰腺癌细胞1990有明显的杀伤作用其作用的ED50为20 ng/ml,而MBP-TK对1990的抑制作用不明显;同时,MBP-KT和MBP-KD5对内皮细胞ECV304有明显的抑制作用,MBP/KT作用于ECV304的ED50为0.1μg/ml,MBP/KD5作用于ECV304的ED50为9.5μg/ml,但是MBP-TK和TRAIL几乎无作用,表明融合蛋白KT既具抗肿瘤作用又有抗新生血管的作用。本研究为进一步开发靶向性杀伤肿瘤药物奠定了基础。 展开更多
关键词 激肽原 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 增殖抑制 血管生成抑制因子
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融合蛋白Kininogen D5_(60-148)-TRAIL_(114-281)的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用 被引量:1
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作者 宗英 王梁华 +4 位作者 孙铭娟 董晓毅 王燕 陆国才 焦炳华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期336-341,共6页
目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL... 目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL114-281(pMAL-TRAIL)和pMAL-Kininogen D560-148-TRAIL114-281(pMAL-KT),重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果:成功构建原核表达载体pMAL-KD5、pMAL-TRAIL和pMAL-KT,并获得纯化的融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT。融合蛋白MBP-KT与MBP-KD5、MBP-TRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBP-KT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论:融合蛋白Kininogen D560-148-TRAIL114-281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础。 展开更多
关键词 高分子量激肽原 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 血管生成抑制因子 胰腺肿瘤细胞
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Kininogen 1在非小细胞肺癌体液和组织中的表达及临床意义 被引量:8
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作者 王巍伟 王珊珊 张曼 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第1期77-82,共6页
目的通过检测非小细胞肺癌患者血浆、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、尿液及组织中激肽原1(kininogen 1,KNG1)的表达,了解其在非小细胞肺癌中的临床意义。方法收集40例非小细胞肺癌患者和20例肺良性疾病对照者的血浆、... 目的通过检测非小细胞肺癌患者血浆、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)、尿液及组织中激肽原1(kininogen 1,KNG1)的表达,了解其在非小细胞肺癌中的临床意义。方法收集40例非小细胞肺癌患者和20例肺良性疾病对照者的血浆、BALF和尿液标本,通过酶联免疫方法检测血浆、BALF和尿液中KNG1的含量,应用免疫组织化学法检测40例非小细胞肺癌及其癌旁对照标本KNG1的表达。结果非小细胞肺癌患者血浆、BALF和尿液中KNG1浓度显著高于对照组(P均<0.001)。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析显示KNG1在血浆、肺泡灌洗液和尿液中的曲线下面积分别为0.79、0.89和0.87,差异均有统计学意义(P<0.05),各标本的KNG1均具有一定诊断非小细胞肺癌能力,诊断界值分别为血浆为1653.6 mg/L,BALF为52.1 mg/L,尿液为2.3 mg/L,尿液的一致性最高(Kappa=0.59),尿液诊断效果优于血浆和BALF。在40例非小细胞肺癌和邻近正常组织中的免疫组织化学染色结果显示非小细胞肺癌组织中KNG1表达高于癌旁正常组织。结论KNG1在非小细胞肺癌患者的血浆、肺泡灌洗液、尿液和组织中是高表达的,在体液诊断尤其是尿液中具有一定诊断非小细胞肺癌的能力。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 激肽原1 尿液 肺泡灌洗液 组织
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硝苯地平联合硫酸镁对重度妊娠期高血压患者尿激肽原、尿钙黏蛋白水平的影响
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作者 隋岩 肖晶茹 隋晓红 《中外女性健康研究》 2024年第8期11-14,共4页
目的:研究硝苯地平联合硫酸镁对重度妊娠期高血压患者尿激肽原、尿钙黏蛋白水平的影响。方法:研究对象为120例2022年9月至2023年10月在本院治疗的重度妊娠期高血压患者,以随机数字表法分为对照组(n=60,采用硫酸镁治疗)及观察组(n=60,在... 目的:研究硝苯地平联合硫酸镁对重度妊娠期高血压患者尿激肽原、尿钙黏蛋白水平的影响。方法:研究对象为120例2022年9月至2023年10月在本院治疗的重度妊娠期高血压患者,以随机数字表法分为对照组(n=60,采用硫酸镁治疗)及观察组(n=60,在对照组基础上采用硝苯地平治疗),比较两组患者的血压水平、血压恢复正常时间、尿蛋白水平、血管内皮功能、不良反应发生率及妊娠结局。结果:1)治疗1周后,两组患者血压水平均降低,且观察组较对照组低(P<0.05),观察组血压恢复正常时间较对照组短(P<0.05);2)治疗1周后,两组患者24h尿蛋白、尿钙黏蛋白及尿激肽原水平均降低,且观察组较对照组低(P<0.05);3)治疗1周后,两组患者一氧化氮均升高,且观察组更高(P<0.05),内皮素-1、血管内皮细胞钙黏蛋白均降低,且观察组更低(P<0.05);4)两组患者不良反应发生率(11.67%VS 13.33%)接近(P>0.05);5)随访结束后,观察组患者不良妊娠结局发生率(5.00%VS 16.67%)更低(P<0.05)。结论:硝苯地平联合硫酸镁可降低重度妊娠期高血压患者血压水平,促进其血压的恢复,同时降低其尿蛋白水平,提高其血管内皮功能,改善妊娠结局,安全性较高。 展开更多
关键词 硝苯地平 硫酸镁 重度妊娠期高血压 尿激肽原 尿钙黏蛋白
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肝纤维化患者血清核心岩藻糖基化低分子量激肽原和α-半乳糖基化抗体的表达及预测价值
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作者 张香玲 戴中上 +6 位作者 肖新强 曾智昊 杨垚 高智 蒋永芳 龚国忠 张旻 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期903-913,共11页
目的:肝纤维化是许多慢性肝脏疾病的共同病理基础,可进展至肝硬化,是肝脏疾病的主要致死因素,而早期识别并逆转肝纤维化进程是慢性肝病治疗的关键,本研究旨在比较血清核心岩藻糖标志物低分子量激肽原(core fucosylated low molecular we... 目的:肝纤维化是许多慢性肝脏疾病的共同病理基础,可进展至肝硬化,是肝脏疾病的主要致死因素,而早期识别并逆转肝纤维化进程是慢性肝病治疗的关键,本研究旨在比较血清核心岩藻糖标志物低分子量激肽原(core fucosylated low molecular weight kininogen,LMWK-Fc)和α-半乳糖基化(alpha-galactosidase,α-Gal)抗体在不同阶段肝纤维化患者体内的表达情况,评估其诊断肝纤维化的效能。方法:回顾性纳入2022年6月至2023年3月在中南大学湘雅二医院感染科就诊的275例慢性肝病患者,其中115例患者接受了肝活检。根据病理结果显示的肝组织内胶原沉积对肝结构破坏范围、程度和肝微循环影响的大小将115例完善肝活检的患者分为0~4期:S0,肝组织内无明显胶原沉积,肝结构和肝微循环正常;S1,肝组织内有轻度胶原沉积,部分破坏肝小叶结构,但肝微循环基本正常;S2,肝组织内中度胶原沉积,部分破坏肝小叶结构和肝微循环;S3,肝组织内广泛胶原沉积,大量破坏肝小叶结构和肝微循环;S4,发展为肝硬化,肝组织内高度胶原沉积,肝小叶结构完全破坏,肝微循环严重受损。并根据分期标准分为无肝纤维化组(S0)、肝纤维化组(S1~S2)、显著纤维化组(S3~S4)。160例未完善肝活检的患者则按照肝硬度值(liverstiffness measurement,LSM)分为无肝纤维化组(F0:LSM<7.3k Pa)、肝纤维化组(F1~F2:LSM为7.3~12.4 kPa)、明显肝纤维化组(F3~F4:LSM>12.4 kPa)。采集患者的年龄、性别等基本人口学资料以及丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、甲胎蛋白、血小板计数等实验室指标,计算肝纤维化-4指数(fibrosis-4 index,FIB-4)、天冬氨酸转氨酶/血小板比值指数(aspartate aminotransferase-to-platelet ratio index,APRI),并对各项指标进行差异性分析;对入组的患者分别行血清LMWK-Fc和α-Gal抗体检测,比较各组间LMWK-Fc、α-Gal抗体及其他肝纤维化指标的表达情况;分析LMWK-Fc、α-Gal抗体表达水平与肝纤维化程度的相关性;采用受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清LMWK-Fc、α-Gal抗体水平预测肝纤维化的价值。结果:在未完善肝活检的160例患者中,血清α-Gal抗体及LMWK-Fc的表达水平在无肝纤维化组、肝纤维化组、明显肝纤维化组依次递增,差异有统计学意义(P<0.05)。在完善肝活检的115例患者中,血清LMWK-Fc水平在无纤维化组、肝纤维化组、显著肝纤维化组间依次增高,血清α-Gal抗体表达水平在显著肝纤维化组中高于无纤维化组、肝纤维化组,差异有统计学意义(P<0.001,P=0.032)。单变量和多元线性回归分析结果显示肝纤维化与性别、LMWKFc水平均有相关性(均P<0.05),与年龄、α-Gal抗体水平、FIB-4和APRI均无相关性(均P>0.05)。结论:血清LMWK-Fc和α-Gal抗体在不同分级肝纤维化患者血清中的表达水平存在差异,可能与肝纤维化进展有一定的相关性,LMWK-Fc水平对肝纤维化诊断具有一定的预测价值。 展开更多
关键词 核心岩藻糖基化 低分子量激肽原 α-半乳糖基化抗体 肝纤维化 血清学标志物
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Cloning of the kininogen gene from Lampetra japonica provides insights into its phylogeny in vertebrates 被引量:3
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作者 Liwei Zhou Xin Liu Ping Jin Qingwei Li 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2009年第2期109-115,共7页
Kininogens, the precursors of bradykinins, ubiquitously exist in vertebrates, including mammals, birds, amphibians, and fishes. To elucidate the phylogeny of kininogen genes in early vertebrates, we cloned the full-le... Kininogens, the precursors of bradykinins, ubiquitously exist in vertebrates, including mammals, birds, amphibians, and fishes. To elucidate the phylogeny of kininogen genes in early vertebrates, we cloned the full-length cDNA of kininogen gene from the liver of Lampetra japonica. The open reading frame of this sequence contained 546 bp and encoded 181 amino acids, including a cystatin domain without the canonical binding site for cysteine proteinases and a bradykinin domain. Our results suggested that in lampreys and most of other vertebrates, there might be only one kininogen gene, which was fused by certain sequences during vertebrate evolution and encoded proteins with more functions; however, another special kininogen gene, only encoding the bradykinin domain with multiple copies in some species, arose only in amphibians for adapting themselves to the unique environment. Using reverse transcription PCR, kininogen mRNA was also detected in lamprey gut, kidney, and leukocyte, but absent in lamprey buccal gland. Our findings may provide insights into the phylogeny of kininogen genes as well as other gene families in vertebrates. 展开更多
关键词 kininogen Lampetrajaponica PHYLOGENY bradykinin domain cystatin domain tissue distribution
原文传递
青鳉低分子量激肽原(Kininogen)基因cDNA克隆与进化分析
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作者 王家庆 李振刚 +3 位作者 董慧明 张莹莹 付玉洁 李绍明 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3371-3379,共9页
激肽原对半胱氨酸蛋白酶具有抑制作用,可结合血小板及内皮细胞,进而调控凝血、溶血以及调节血压等多种生理功能。本研究以青鳉(Oryzias latipes)为研究对象,通过RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆了青鳉肝脏低分... 激肽原对半胱氨酸蛋白酶具有抑制作用,可结合血小板及内皮细胞,进而调控凝血、溶血以及调节血压等多种生理功能。本研究以青鳉(Oryzias latipes)为研究对象,通过RT-PCR和RACE(rapid amplification of cDNA ends)技术克隆了青鳉肝脏低分子量激肽原(LK)基因cDNA的全长序列(Gen Bank登录号:KP864678)。结果显示LK基因cDNA全长1 477 bp,其中5'端非翻译区190 bp,3'端非翻译区195 bp,开放性阅读框1 092 bp,编码363个氨基酸。青鳉LK蛋白属于分泌蛋白,N端含1个由21个氨基酸组成的信号肽;序列分析显示青鳉LK蛋白存在一个鱼类特有的保守蛋白酶抑制剂位点与1个缓激肽保守序列;Blastp同源性比对显示青鳉LK蛋白与其它鳉科鱼类的LK蛋白同源性均在67%以上,与哺乳动物LK蛋白同源性接近40%;同源建模显示青鳉LK蛋白存在2个空间上相对独立的半胱氨酸蛋白酶抑制剂样结构域。上述结果表明青鳉LK基因在进化过程中是保守的,可能发挥半胱氨酸蛋白酶抑制剂的作用。 展开更多
关键词 青鳉 低分子量激肽原(LK) 基因克隆 缓激肽 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 进化分析
原文传递
激肽原1、精氨酸酶-1在儿童川崎病急性期外周血中的表达及临床意义
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作者 曹金鑫 徐明国 《儿科药学杂志》 CAS 2024年第2期14-17,共4页
目的:检测急性期川崎病(KD)患儿外周血中激肽原1(KNG1)、精氨酸酶-1(Arg-1)的表达并探讨二者的临床意义。方法:选取深圳市儿童医院2020年12月1日至2022年12月31日确诊为川崎病的117例患儿进行研究。根据是否合并冠状动脉病变(CAL)将KD... 目的:检测急性期川崎病(KD)患儿外周血中激肽原1(KNG1)、精氨酸酶-1(Arg-1)的表达并探讨二者的临床意义。方法:选取深圳市儿童医院2020年12月1日至2022年12月31日确诊为川崎病的117例患儿进行研究。根据是否合并冠状动脉病变(CAL)将KD患儿分为CAL组(n=53)和非冠状动脉病变组(NCAL)组(n=64)。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测急性期KD患儿外周血KNG1及Arg-1水平。应用二元Logistic回归分析和受试者工作特征(ROC)曲线分析急性期KD患儿合并CAL的危险因素及KNG1、Arg-1对其的预测价值。结果:CAL组的KNG1及Arg-1水平均高于NCAL组(P<0.01)。多因素Logistic回归分析提示KNG1、Arg-1和中性粒细胞百分比(N%)是KD并发CAL的独立危险因素。ROC分析显示,KNG1对CAL的最佳预测值为1.536 ng/mL,曲线下面积(AUC)为0.823(95%CI 0.750~0.896),而Arg-1≥7.028 ng/mL可用于预测CAL的发生,AUC为0.862(95%CI 0.792~0.931),N%对KD并发CAL的最佳预测值则为54.7%,AUC为0.610(95%CI 0.507~0.712)。此外还发现与单项指标相比,KNG1联合Arg-1及N%对急性期KD患儿并发CAL的预测价值最大(AUC=0.929,95%CI 0.881~0.977),灵敏度和特异度分别为84.9%和92.2%。结论:急性期KD患儿血清中高表达的KNG1和Arg-1均是发生CAL的独立危险因素,可能参与KD并发CAL的发生和发展。 展开更多
关键词 川崎病 冠状动脉病变 激肽原1 精氨酸酶-1
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微脉冲激光联合胰激肽原酶治疗糖尿病性黄斑水肿的疗效观察 被引量:2
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作者 尹丹 孙红双 +3 位作者 刘颖 李跃峰 张兰 李勇 《中南医学科学杂志》 CAS 2023年第5期730-732,共3页
目的观察微脉冲激光联合胰激肽原酶治疗糖尿病性黄斑水肿(DME)的临床疗效。方法选择DME患者90例,分为对照组(微脉冲激光)和联合组(微脉冲激光+胰激肽原酶)。比较两组治疗前后最佳矫正视力(BCVA)、黄斑区中心凹视网膜厚度(CMT)、眼动脉... 目的观察微脉冲激光联合胰激肽原酶治疗糖尿病性黄斑水肿(DME)的临床疗效。方法选择DME患者90例,分为对照组(微脉冲激光)和联合组(微脉冲激光+胰激肽原酶)。比较两组治疗前后最佳矫正视力(BCVA)、黄斑区中心凹视网膜厚度(CMT)、眼动脉的收缩期峰值流速(PSV)、舒张期末流速(EDV)、阻力指数(RI)和治疗后不良反应。结果与治疗前比较,治疗后不同时间两组患者BCVA均提高,CMT均降低,且联合组变化相较于对照组更为显著(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后不同时间两组患者PSV、EDV均提高,RI均降低,且联合组变化相较于对照组更为显著(P<0.05)。结论微脉冲激光联合胰激肽原酶治疗DME可有效促进视功能恢复,改善眼底血流动力学状况,提高临床疗效。 展开更多
关键词 糖尿病性黄斑水肿 微脉冲激光 胰激肽原酶
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基于蛋白质组学技术筛选唐氏妊娠母体血清蛋白标志物的研究 被引量:1
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作者 姚远 张波 +3 位作者 蒋滢 罗娟 吴玉娇 姚宏 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期464-469,共6页
目的筛选唐氏(DS)妊娠母体血清蛋白标志物,初步验证其临床应用价值。方法收集确诊为DS妊娠的母体血清(DS组)和正常孕妇血清标本(对照组)各6例(均为16孕周采集),经二维凝胶电泳(2-DE)获得2组血清蛋白电泳图像,比较2组间蛋白含量变化,选... 目的筛选唐氏(DS)妊娠母体血清蛋白标志物,初步验证其临床应用价值。方法收集确诊为DS妊娠的母体血清(DS组)和正常孕妇血清标本(对照组)各6例(均为16孕周采集),经二维凝胶电泳(2-DE)获得2组血清蛋白电泳图像,比较2组间蛋白含量变化,选取差异显著的蛋白质点进行生物质谱分析与鉴定,并采用Western blot方法验证筛选获得的血清蛋白标志物在DS妊娠母体血清中的变化情况(n=12)。结果通过2-DE图谱分析,共筛选出29个表达显著差异的血清蛋白质点。从中选取6个表达差异较大的蛋白质点,经生物质谱技术分析和NCBI数据库搜索与匹配,发现CFHR1和Kininogen 1等10个蛋白质与其匹配的可能性较大(匹配分值>66分)。Western blot结果显示,CFHR1和Kininogen 1在DS组的积分光密度值分别为(5 687.0±727.8)和(133 451.8±32 118.8),均明显高于对照组水平[(1 414.1±715.6)(P<0.01)和(33 073.9±14 390.4)(P<0.05)]。结论2-DE和生物质谱分析是筛选蛋白质标志物的可靠方法,Western blot结果证实CFHR1和Kininogen 1的异常变化可能与DS妊娠密切相关,有望成为DS早期产前筛查的母体血清蛋白新标志物。 展开更多
关键词 唐氏综合征 CFHR1 kininogen 1 母体血清 产前筛查
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鲢鱼卵中两种高分子半胱氨酸蛋白酶抑制因子的纯化与鉴定 被引量:1
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作者 李树红 蒋然然 +5 位作者 杨娟 刘玲 钟海霞 陈志光 李美良 李冉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期6-11,共6页
以鲢鱼卵为材料,通过匀浆、酸处理和超滤制备半胱氨酸蛋白酶抑制因子(cystine proteinase inhibitors,CPIs)粗提液,进而经Sephacryl S-100分子筛层析、Blue Sepharose 6 Fast Flow染料亲和层析、SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析、... 以鲢鱼卵为材料,通过匀浆、酸处理和超滤制备半胱氨酸蛋白酶抑制因子(cystine proteinase inhibitors,CPIs)粗提液,进而经Sephacryl S-100分子筛层析、Blue Sepharose 6 Fast Flow染料亲和层析、SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换层析、Con A Sepharose 4B亲和层析,获得两种纯化的高分子CPIs,即Con A不吸附部分a-1和吸附部分的糖蛋白a-2。二者分别被纯化了102.62倍和274.28倍,酶活回收率分别为2.02%和1.42%。通过TSK G2000 SWXL凝胶过滤高效液相色谱结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳及其反相酶谱法分析,表明a-2及再次经高效液相色谱法回收的a-1在电泳图上均呈单一带,a-2为单一峰,且a-1的分子质量为139 ku,a-2的分子质量为92 ku。二者均能抑制半胱氨酸蛋白酶(木瓜蛋白酶和鲢鱼组织蛋白酶L)但不抑制丝氨酸蛋白酶(胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶)。根据a-1和a-2的分子质量及抑制活性特征和糖蛋白特性,推测二者可能为鲢鱼卵Kininogens的不同形式。 展开更多
关键词 鲢鱼卵 半胱氨酸蛋白酶抑制因子 kininogen 纯化 鉴定
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高分子量激肽原富含组氨酸区域抑制细胞伸展的机制分析 被引量:4
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作者 杨威 宋永胜 +2 位作者 李春义 徐大庆 陈世洁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期222-228,共7页
活化型高分子量激肽原 (activehighmolecularweightkininogen ,HKa)是组织培养板上体外连接蛋白 (vitronectin ,VN)促使细胞伸展的潜在抑制物 ,已证实轻链的富含组氨酸区域 (histidine richdomain ,HRD)是HKa抗细胞伸展的活性区域 .HK... 活化型高分子量激肽原 (activehighmolecularweightkininogen ,HKa)是组织培养板上体外连接蛋白 (vitronectin ,VN)促使细胞伸展的潜在抑制物 ,已证实轻链的富含组氨酸区域 (histidine richdomain ,HRD)是HKa抗细胞伸展的活性区域 .HK的重组HRD (r HRD)能够促使成纤维细胞伸展 .通过基于HRD序列的选择肽分析 ,定位了HRD的细胞伸展序列 .5个肽中的 3个能够使TIG 3细胞伸展 .P 1肽引起的细胞伸展能够被可溶性P 5肽或HKa所抑制 .P 2肽不能抑制P 1或P 5肽引起的细胞伸展 .r HRD以及 3种肽介导的细胞伸展能够被RGD合成肽以及抗αvβ3或α5β1整合素抗体所抑制 .结果提示 ,选择肽引起的细胞伸展是由整合素介导的 。 展开更多
关键词 高分子量激肽原 富含组氨酸区域 细胞伸展 作用机制 抑制作用 糖蛋白 活化型高分子量激肽原
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猪血激肽原的分离纯化及其对白鲢鱼鱼糜的凝胶作用 被引量:5
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作者 钟婵 江韬玲 +3 位作者 翁武银 蔡秋凤 翁凌 曹敏杰 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第1期13-19,共7页
以猪血为原材料,通过硫酸铵盐析和柱层析等方法,分离纯化出2种半胱氨酸蛋白抑制剂激肽原(kininogen).激肽原Ⅰ的得率为0.7%,纯化倍数为613.7;激肽原Ⅱ的得率为24.1%,纯化倍数为295.7.SDS-PAGE结果表明,激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ的分子质量分别... 以猪血为原材料,通过硫酸铵盐析和柱层析等方法,分离纯化出2种半胱氨酸蛋白抑制剂激肽原(kininogen).激肽原Ⅰ的得率为0.7%,纯化倍数为613.7;激肽原Ⅱ的得率为24.1%,纯化倍数为295.7.SDS-PAGE结果表明,激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ的分子质量分别为58 ku和116 ku.激肽原Ⅰ和激肽原Ⅱ对白鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)鱼浆中肌原纤维蛋白降解都有一定的抑制作用,当激肽原Ⅱ添加量为鱼浆质量的0.03%时,可以使鱼糜凝胶强度提高24%.因此,激肽原可作为添加剂有效提高鱼糜制品的凝胶强度. 展开更多
关键词 激肽原 组织蛋白酶 猪血 白鲢鱼
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辛伐他汀对成骨细胞增殖分化及连接蛋白43表达的调控 被引量:2
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作者 王国亮 蔡湘波 +3 位作者 李文壮 罗胜明 陈泽雁 陈戈胜 《中国组织工程研究》 CSCD 2014年第15期2303-2308,共6页
背景:辛伐他汀对成骨细胞增殖分化的影响以及分子机制尚不完全明了,尤其对连接蛋白43的作用知之甚少。目的:探讨辛伐他汀对成骨细胞增殖分化及成骨基因和连接蛋白43表达的调控作用。方法:选取新生SD大鼠,采用颅盖骨消化法培养成骨细胞... 背景:辛伐他汀对成骨细胞增殖分化的影响以及分子机制尚不完全明了,尤其对连接蛋白43的作用知之甚少。目的:探讨辛伐他汀对成骨细胞增殖分化及成骨基因和连接蛋白43表达的调控作用。方法:选取新生SD大鼠,采用颅盖骨消化法培养成骨细胞。采用不同浓度辛伐他汀(0.062 5,0.125,0.25,0.5和1.0μmol/L)处理成骨细胞,MTT检测辛伐他汀对成骨细胞增殖作用的影响;碱性磷酸酶活性检测辛伐他汀对成骨细胞分化作用的影响;实时定量RT-PCR和免疫印迹检测细胞成骨基因和间隙连接蛋白43 mRNA和蛋白的表达。结果与结论:细胞培养第3天,辛伐他汀组各浓度组MTT吸光度值比较差异无显著性意义(P>0.05);但是培养第4天和第5天,辛伐他汀各浓度组MTT吸光度值低于对照组(P<0.05)。通过不同浓度辛伐他汀处理成骨细胞后,与对照组比较,成骨细胞碱性磷酸酶活性增加(P<0.05),且0.25μmol/L浓度组作用对成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响最为显著。采用0.25μmol/L辛伐他汀处理成骨细胞后,辛伐他汀组与对照组比较,成骨细胞骨钙蛋白、碱性磷酸酶、I型胶原和连接蛋白43 mRNA和蛋白表达均增加(P<0.05)。提示辛伐他汀可能通过上调成骨基因和间隙连接蛋白43 mRNA和蛋白的表达来抑制成骨细胞增殖和促进其分化,这为他汀类药物治疗骨质疏松症提供新的干预靶点。 展开更多
关键词 组织构建 骨组织工程 辛伐他汀 成骨细胞 骨质疏松症 间隙连接蛋白43 增殖 分化
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激活的高分子激肽原抗细胞伸展与体外连接蛋白结构变化关系的探讨 被引量:2
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作者 杨威 宋永胜 +3 位作者 李春义 徐大庆 陈世洁 张锦华 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期5-8,共4页
目的 :通过观察结构上改变的体外连接蛋白 (aVN)底物上激活的高分子激肽原 (HKa)对细胞伸展的影响 ,比较VN与aVN上HKa对细胞抑制活性。方法 :采用细胞杂交及细胞粘附方法观察在HKa存在与否下VN对细胞伸展的影响。结果 :HKa存在下MG 6 3... 目的 :通过观察结构上改变的体外连接蛋白 (aVN)底物上激活的高分子激肽原 (HKa)对细胞伸展的影响 ,比较VN与aVN上HKa对细胞抑制活性。方法 :采用细胞杂交及细胞粘附方法观察在HKa存在与否下VN对细胞伸展的影响。结果 :HKa存在下MG 6 3细胞不能在固定的VN上伸展 ,但能在aVN上伸展 ;天然VN固定于塑料表面后用尿素处理 ,HKa存在或缺乏状态下细胞伸展活性相同。细胞杂交结果显示 ,在包被VN的硝酸纤维素膜上MG 6 3细胞伸展 ,存在HKa状态下细胞不能伸展于天然VN ,而伸展于aVN底物。结论 :在天然VN与aVN底物上HKa对细胞的抑制活性不同 。 展开更多
关键词 激活 高分子激肽原 体外连接蛋白 细胞粘附 细胞杂交
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组织激肽释放酶、激肽原在子痫前期患者胎盘中表达的研究 被引量:3
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作者 陈静 沈理 滕银成 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第9期676-679,共4页
目的:研究胎盘中组织激肽释放酶、激肽原表达水平,探讨组织激肽释放酶-激肽系统在子痫前期发病中的作用。方法:采集子痫前期患者(轻度9例,重度11例)及正常妊娠妇女的新鲜胎盘标本各20例。用酶免疫分析法检测胎盘中活化型组织激肽释放酶... 目的:研究胎盘中组织激肽释放酶、激肽原表达水平,探讨组织激肽释放酶-激肽系统在子痫前期发病中的作用。方法:采集子痫前期患者(轻度9例,重度11例)及正常妊娠妇女的新鲜胎盘标本各20例。用酶免疫分析法检测胎盘中活化型组织激肽释放酶水平,用免疫组化技术对各组胎盘中激肽原表达进行定位、定量分析。结果:子痫前期患者胎盘中活化型组织激肽释放酶水平为(2.40±0.88)×10-4ku/mg,显著低于正常妊娠妇女的(3.61±1.25)×10-4ku/mg(P<0.01),激肽原于胎盘绒毛间隙毛细血管内皮细胞表面表达,子痫前期患者胎盘组织的表达阳性率显著低于正常妊娠妇女(P<0.05),而子痫前期轻度组与重度组之间组织激肽释放酶和激肽原的表达均无显著性差异(P>0.05;P>0.05)。结论:胎盘组织激肽释放酶、激肽原低表达可能是子痫前期发生的重要原因。 展开更多
关键词 子痫前期 组织激肽释放酶 激肽原
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高分子量激肽原第5结构域的研究进展 被引量:2
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作者 吕刚 杜培革 +1 位作者 张秀娟 徐伟平 《北华大学学报(自然科学版)》 CAS 2007年第6期513-516,共4页
高分子激肽原的第5结构域在抑制细胞粘附和浸润、抑制内皮细胞增生、诱导细胞凋亡、参与炎症反应等方面发挥着重要作用.其反应机制可能与高分子激肽原在激肽释放酶的作用下释放缓激肽后,增加其轻链的第5区的暴露面积、增加第5区与内皮... 高分子激肽原的第5结构域在抑制细胞粘附和浸润、抑制内皮细胞增生、诱导细胞凋亡、参与炎症反应等方面发挥着重要作用.其反应机制可能与高分子激肽原在激肽释放酶的作用下释放缓激肽后,增加其轻链的第5区的暴露面积、增加第5区与内皮细胞的接触机会有关.研究高分子激肽原第5区的作用,有助于预防恶性肿瘤的增长和转移、炎症效应的调节和控制,并为临床上生物治疗的应用奠定实验基础. 展开更多
关键词 高分子激肽原 内皮细胞 抗粘附 抗炎
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HKa轻链D5区及其合成肽对MDA-MB-231细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 徐秀月 杨威 +3 位作者 吴斌 王彪 迟昨非 刘卓刚 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期494-496,499,共4页
目的探讨Hka轻链D5区对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响及其发挥活性作用的功能区。方法通过制备HKaD5区重组蛋白(r-HRD)及其D5区合成肽P-5、P-5n、P-5m、P-5c,采用WST法和AnnexinⅤ/PI双标记法检测HKa轻链D5区及其合成肽对MDA-MB-231细胞增... 目的探讨Hka轻链D5区对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响及其发挥活性作用的功能区。方法通过制备HKaD5区重组蛋白(r-HRD)及其D5区合成肽P-5、P-5n、P-5m、P-5c,采用WST法和AnnexinⅤ/PI双标记法检测HKa轻链D5区及其合成肽对MDA-MB-231细胞增殖与凋亡的影响。结果合成肽P-5、P-5n、P-5m能抑制MDA-MB-231细胞增殖,诱导MDA-MB-231细胞凋亡;P-5c无抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡的作用。相差显微镜观察细胞形态改变,发现肽P-5、P-5n、P-5m处理组细胞体积缩小、变圆,细胞生长受抑制,活力下降;P-5c处理组与对照组相比无差异。结论合成肽P-5、P-5n、P-5m抑制MDA-MB-231细胞增殖的作用是通过诱导细胞凋亡实现的,组-甘-赖氨酸序列可能是其发挥活性作用的核心序列。 展开更多
关键词 活化型高分子量激肽原 MDA-MB-231细胞 增殖 凋亡 组-甘-赖氨酸序列
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活化型高分子量激肽原潜在的抗肿瘤作用及其分子机制 被引量:5
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作者 徐秀月 杨威 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期691-696,共6页
高分子量激肽原是血浆中一种多功能的糖蛋白,与血液凝固的启动、补体反应及炎症发生等有密切关系.新近的研究显示,活化型高分子量激肽原具有潜在的抗肿瘤作用.本文综述活化型高分子量激肽原在细胞粘附和血管生成中发挥的抑制作用及其活... 高分子量激肽原是血浆中一种多功能的糖蛋白,与血液凝固的启动、补体反应及炎症发生等有密切关系.新近的研究显示,活化型高分子量激肽原具有潜在的抗肿瘤作用.本文综述活化型高分子量激肽原在细胞粘附和血管生成中发挥的抑制作用及其活性区域,抑制细胞迁移、增殖并诱导细胞凋亡的作用,及其在细胞表面的作用位点和分子机制.活化型高分子量激肽原作用机制,包括抑制细胞DNA的从头合成,使细胞周期蛋白D1表达下降,以及通过影响细胞内信号通路发挥其活性效应等.深入研究活化型高分子量激肽原在细胞表面作用的信号转导通路可能是今后抗肿瘤研究途径之一. 展开更多
关键词 高分子量激肽原 细胞粘附 血管生成 细胞迁移和增殖 细胞凋亡
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