厚叶切氏海带多糖的提取分离及其结构表征

本文以厚叶切氏海带(Kjellmaniella crassifolia)为原料,经提取分离获得4种多糖(KW1,KW2,KA1和KA2)。运用电泳、高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)及核磁共振氢谱(1H-NMR)法分别对其单糖组成、相对分子量(Mr)以及结构进行分析。结果表明,KW1与KA1是Mr为520 kD和430 kD且M/G(6.14和1.90)显著不同的褐藻胶;KW2是以岩藻糖(82%)为主的岩藻糖硫酸酯;KA2是以半乳糖(34%)、岩藻糖(27%)和甘露糖(21%)为主的杂聚硫酸多糖。KW2和KA2的Mr和硫酸基含量分别为536 kD和427 kD及30%和21%。经1H-NMR分析表明,KW2的硫酸酯基主要存在于岩藻糖残基的C2和C4位。

厚叶海带生物活性成分的研究现状

厚叶海带（Kjellmaniellacrassifolia）属褐藻门、褐藻纲、海带目、海带科，主要分布于日本北海道南部的函馆至室兰区域沿海，属于4～5年生大型褐藻，成体长1．5～2．0rn，宽20-35cm，属于重要的经济海藻。国外学者对该类海藻水提物的抗氧化活性[1]、免疫活性、褐藻胶M／G比[2-3]以及岩藻聚糖硫酸酯降解酶[4]等进行了相关研究，国内也有学者采用不同的提取和分离方法提取该海藻多糖，比较和分析其理化性质和结构特征。

厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯分离纯化及其体外肿瘤抑制活性研究

本研究以日本厚叶海带(Kjellmaniella crassifolia)中提取的岩藻聚糖硫酸酯(Fuciodan)为原料,采用DEAESepharose Fast Flow弱阴离子交换柱层析分离纯化,通过苯酚-硫酸法和氯化钡-明胶法检测各组分中多糖及硫酸根(SO_4~2)含量,MTT法分析50、200、800μg/m L的日本厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯粗品(F)及分离组分对肝癌细胞Hep G2、肺癌细胞A549和结肠癌细胞HT-29细胞存活率影响。研究结果表明,DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换柱对粗品F的分离纯化效果良好,可以得到5个组分(F-0、F-1、F-2、F-3和F-4);组分F-4多糖与SO_4^(2-)含量最高,分别为64.25%和26.32%。MTT实验结果显示,岩藻聚糖硫酸酯粗品及各分离组分对三种肿瘤细胞均具有肿瘤抑制活性,不同组分对HepG2、A549、HT-29的最低细胞存活率分别为67.69%、56.03%和27.56%。基于以上研究结果,表明日本厚叶海带岩藻聚糖硫酸酯具有很大的发展潜力,开发成为一种有效的天然抗肿瘤药物。

海带和厚叶解曼藻中防污活性物质研究

本文选取中肋骨条藻(Keletonema costatum)和东方小藤壶(Hthamalus challengeri)2种典型的污损生物为受试生物,研究了海带(Laminaria)和厚叶解曼藻(Kjellmaniella crassifolia)粗提物的防污活性。抑藻实验结果表明两种海藻粗提物对中肋骨条藻均有较好的抑制效果,其中海带粗提物的抑藻EC50值为(8.9±0.6)μg·mL-1,厚叶解曼藻粗提物的抑藻EC50值为(17.3±1.2)μg·mL-1。藤壶幼虫急性毒性试验表明两种海藻粗提物对东方小藤壶均有较好的致死效果,其中海带粗提物对藤壶幼虫的LC50值为(12.0±1.6)μg·mL-1,厚叶解曼藻粗提物对藤壶幼虫的LC50值为(16.1±2.5)μg·mL-1。两种海藻的粗提物均可作为天然防污剂的潜在来源进行深入研究。

温度对笼目海带配子体生长发育的影响

将笼目海带雌、雄配子体按2∶1的比例混合后,取10mL悬浊液加入到直径12cm的培养皿中,置于5、8、12、15、20、25℃下培养,光周期10L∶14D,光照度1000lx,观察其生长发育,计算萌发率(包括卵囊形成率、排卵率、幼苗形成率),探讨水温对笼目海带配子体生长及发育的影响。试验结果表明,8~12℃下,80%~90%配子体进入了生殖生长,50%以上为多细胞幼苗。在5、15℃下,70%~80%配子体处于营养生长,虽有20%~30%配子体进入生殖生长,但明显滞后于8~12℃温度组。20℃和25℃下所有配子体维持在营养生长状态。因此建议笼目海带配子体育苗的温度控制在8~12℃。

新型笼目海带风味果冻的加工工艺研究

以日本笼目海带为原料进行笼目海带风味果冻加工工艺探究。通过单因素及正交试验确定海带汁的最佳脱腥工艺和复配胶比。研究结果表明,最优脱腥工艺为:绿茶添加量0.15%,脱腥时间25 min,温度90℃;最佳复配胶比例为:卡拉胶∶魔芋胶∶琼脂=10∶2∶1。采用正交试验获得笼目海带风味果冻加工优化工艺为:以20%笼目海带汁为底物,复配胶添加量1.3%(卡拉胶、魔芋胶、琼脂),KCl 0.06%,白砂糖3.0%,浓缩果汁(苹果、橘子)添加量10.0%,pH 4.0。制作的笼目海带果冻色泽均匀,酸甜适中,风味独特,符合国家果冻食品卫生要求(GB 19299-2015)。

笼目海带多酚的分离纯化及其抗氧化活性研究

为高效分离纯化笼目海带Kjellmaniella crassifolia Miyabe多酚及其抗氧化活性,采用大孔树脂对笼目海带多酚进行分离纯化,经静态吸附解吸和动态洗脱试验,确定最适分离条件,并通过测定分离组分对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)的清除能力、铁离子还原力(FRAP)、氧自由基吸收能力(ORAC),评价其体外抗氧化活性。结果表明:大孔树脂XDA-1为最适分离树脂,其分离最适条件为15 mg/mL的样液以1 mL/min的流速进样100 mL,用70%乙醇洗脱200 mL(2 BV),在此条件下得到两个分离组分P1、P2,其多酚含量分别为粗多酚的15.7倍和3.7倍;通过对各组分的DPPH自由基清除能力、·OH清除能力及FRAP、ORAC值测定发现,笼目海带多酚各组分均有较强的抗氧化活性,其中P2组分表现出较高的抗氧化活性,与多酚其他组分相比,其·OH清除能力、FRAP值和ORAC值具有显著性差异(P<0.05),而P1组分对DPPH自由基具有较好的清除能力,且显著优于粗多酚及P2组(P<0.05)。研究表明,经XDA-1树脂分离纯化的笼目海带多酚均具有较强的抗氧化活性,是天然抗氧化剂的良好来源。

光照强度和光照周期对笼目海带配子体发育的影响

通过设置不同的光照强度和光照周期,在实验室条件下检测了笼目海带(Kjellmaniella crassifolia Miyabe)配子体的发育情况。结果显示:光照强度及光照周期均对笼目海带配子体的发育率有显著的影响(P<0.05)。结果表明:1)在光照强度条件不同、其他培养条件相同的情况下,经过4周的发育,5~80μmol·m^(-2)s^(-1)条件下大部分配子体进入了生殖生长状态,发育率为60%~80%,其中20~40μmol·m^(-2)s^(-1)光照强度条件下生殖生长明显快于其他组。2)在光周期不同、其他培养条件相同的情况下,培养第12~25天时,20L∶4D条件下发育率为6.68%~69.87%,发育率与16L∶8D实验组差异不显著,但显著大于其余组。培养第32天,光照时间最长的处理组即20L∶4D的发育率(74.54%)最高,且孢子体细胞列数最多。本研究为笼目海带配子体规模化扩增及育苗提供了数据参考。