比例法测定结核菌药敏试验中菌液浓度的研究

为了探讨比例法测定结核菌药敏试验中结核菌悬液的最佳实验浓度 ,采用国际推行的比例法 ,用 10 -2 mg ml、10 -3 mg ml、10 -4 mg ml、10 -5mg ml、10 -6mg ml,5个浓度进行试验 ,并与国际推行的比例法进行比较。结果用 10 -2 mg ml、10 -4 mg ml、接种培养基 ,其药敏试验结果成功率高 ;基础培养基上结核菌生长良好 ,便于结果判断 ;结果报告及时 ;与国际推行的比例法进行相比较 ,药敏试验结果差异性不显著 (P >0 0 5)。试验结果表明 ,比例法测定结核菌药敏试验时 ,最佳菌液浓度是10 -2 mg ml、10 -4 mg ml。

结核分枝杆菌不同药物敏感性检测方法的比较

采用比例法和绝对浓度法检测了56株结核分枝杆菌对异烟肼和利福平的敏感性,探讨了比例法和绝对浓度法检测结核分枝杆菌耐药性的一致性和可比性。检测结果显示:2种方法检出的耐药率差异无显著性;用2种方法进行结核分枝杆菌耐药性测定的一致性较高,采用国际通用的比例法,依然具有与我国传统采用绝对浓度法获得的资料数据的可比性。

BACTEC MIGT960在结核分枝杆菌药物敏感性试验中的临床研究

目的评价BACTEC MIGT960快速检测8种抗结核药物敏感性效果。方法收集住院结核病人痰标本分离的结核分枝杆菌菌株,分别采用L-J比例法和MGIT960法进行药物敏感性检测,在完成一线4种药物的药敏检测后,选取对任何一种一线药物(异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇)耐药的菌株进行二线药物(卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺)敏感性检测。从结果报告时间和符合率等方面进行评价。统计学分析采用kappa检验和t检验,P值为0.05。结果对212株结核分枝杆菌临床分离株进行了4种一线药物的药物敏感性检测,随后,对耐任何一种一线药物的90株菌进行了4种二线药物的药物敏感性检测,以L-J比例法为金标准,MGIT 960法的准确度和Kappa值分别为:异烟肼96.0%和0.92,利福平99.0%和0.98,链霉素99.0%和0.97,乙胺丁醇96.0%和0.81,卷曲霉素100.0%和1.00,卡那霉素99.0%和0.85,氧氟沙星96.0%和0.88,乙硫异烟胺94.0%和0.73;完成一线/二线药物药敏试验的平均时间,MGIT 960为8.10和10d,L-J法则均为30d,两种方法培养时间的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MGIT 960法与传统的L-J比例法药敏试验比较,具有符合率较好、检测时间明显缩短的特点,有利于临床及时有效合理化用药。

基因芯片技术在检测痰涂阳肺结核患者结核分枝杆菌耐药性的应用效果

目的探讨基因芯片技术在结核病耐多药快速检测中的应用效果。方法收集重庆市五个区县1 030例涂阳肺结核患者的痰标本,同时进行罗氏培养和基因芯片检测异烟肼、利福平耐药性,培养后的菌株用比例法药敏试验检测异烟肼、利福平的耐药性。以比例法药敏试验为判断标准,对基因芯片的检测效果进行分析。结果对同时有两种耐药性检测结果的958例患者进行了统计学分析,基因芯片对异烟肼检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P>0.05),符合率94.1%,灵敏度80.2%,特异度95.9%,阳性预测值71.8%,阴性预测值97.4%,Kappa值为0.724。基因芯片对利福平检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P>0.05),符合率96.3%,灵敏度86.4%,特异度97.5%,阳性预测值80.9%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.815。此外,基因芯片对异烟肼和利福平耐药结核病检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P>0.05),符合率96.9%,灵敏度78.3%,特异度98.3%,阳性预测值78.3%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.766。结论基因芯片技术可用于耐多药结核病早期快速筛查和诊断,以弥补传统药敏试验的不足,但该方法对检测环境要求较高,需对操作人员严格培训。

BacT/ALERT 3D技术在结核杆菌耐药检测中的应用研究

目的比较BacT/ALERT 3D法与传统罗氏(L-J)比例法在耐药结核分枝杆菌检测中的差异,评价BacT/ALERT 3D快速培养系统在结核分枝杆菌耐药检测中的应用价值。方法对219份固体培养结核杆菌阳性的培养物采用BacT/ALERT 3D液体培养技术和L-J比例法同时进行药敏试验,并进行比对分析。结果 BacT/ALERT 3D法平均检出时间(8.02±3.85)d,比L-J比例法检出时间平均缩短约20 d;BacT/ALERT 3D法检出耐药菌60株,L-J比例法检出耐药菌79株,差异无统计学意义(P>0.05);以L-J比例法结果为判定标准,BacT/ALERT 3D法对INH、RFP、EMB和SM 4种抗结核药耐药检测结果符合率分别为95.43%、92.69%、95.43%和92.24%。结论与L-J比例法比较,BacT/ALERT 3D药敏检测方法对结核杆菌的耐药检出结果有较高的一致性,BacT/ALERT 3D法检出时间明显短于L-J比例法。

MGIT960系统快速检测结核分枝杆菌药物敏感性的应用评价

[目的]评价液体培养及快速药敏检测技术(BACTEC MGIT 960系统)检测结核分枝杆菌对一线、二线8种抗结核药物敏感性的效果。[方法]用BACTEC MGIT 960系统对结核分枝杆菌临床分离株进行一线、二线8种抗结核药物的药物敏感性试验,以传统的L-J比例法药敏试验作对照,从结果报告时间和符合率等方面进行评价。统计学分析分别采用配对t检验和Kappa检验。[结果]用MGIT 960法与L-J比例法同时对202株结核分枝杆菌临床分离株进行一线药物异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的药物敏感性检测,该两种方法对此4种药物的符合率分别为98.0%(198/202)、96.5%(195/202)、94.1%(190/202)和83.7%(169/202);而该两种方法对77株结核分枝杆菌临床分离株进行二线药物卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药物敏感性检测符合率,分别为87.0%(67/77)、93.5%(72/77)、97.4%(75/77)和68.8%(53/77)。MGIT 960法完成一线、二线药物药敏试验的时间中位数分别为11d和8d,而比例法规定判读时间为28 d,二者检测时间差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]与传统比例法相比,BACTEC MGIT 960系统能够快速、准确地检测结核分枝杆菌对一线、二线抗结核药物的敏感性,有利于耐药结核病的早期诊断和治疗。

非结核分枝杆菌快速药敏试验研究

目的研究结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960系统液体培养法和美国临床实验室标准化协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSIM)24-A微量肉汤稀释法的快速药敏试验与对非结核分枝杆菌的意义。方法分别采用BACTEC MGIT 960液体培养法联合微量肉汤稀释法的快速药敏试验与L-J固体培养法和绝对浓度药敏法分别对48份非结核分支杆菌(nontubeerculous mycobacteria,NTM)培养时间和药敏报告时间进行比较研究。结果 48份NTM在BACTEC MGIT 960培养仪的平均阳性报告时间(7.0±1.1)d,L-J培养基平均阳性报告时间(17.6±3.9)d,两者比较差异有统计学意义(t=-18,P<0.01);微量肉汤稀释法结果报告时间为(7.2±1.2)d,L-J固体药敏试验报告时间为(27.3±2.4)d,两者比较差异有统计学意义(t=-52.2,P<0.01),两种药敏试验方法对相同种类药物的耐药率均为90%以上,微量肉汤稀释法比L-J法可以检测的药物种类更多。结论 BACTEC MGIT 960液体培养法联合微量肉汤稀释法的快速药敏试验比L-J固体培养法和绝对浓度药敏法在培养时间和药敏结果种类及报告时间上有着明显优势。

BACTEC MGIT 960在二线抗结核药物药敏试验应用中的效果评价

目的评价BACTEC MGIT 960进行4种二线抗结核药物药敏试验的效果。方法用MGIT 960对结核分枝杆菌临床分离菌株进行二线抗结核药物卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星和乙硫异烟胺的药敏检测,并将结果与L-J比例法结果进行比较分析。结果 111株结核分枝杆菌临床分离株用MGIT 960法与L-J比例法卷曲霉素、卡那霉素、氧氟沙星、乙硫异烟胺药敏符合率分别为95.5%(106/111)、93.7%(104/111)、97.3%(108/111)、85.6%(95/111)。与比例法药敏结果比较,MGIT 960药敏检测的敏感度、特异度和准确性,卷曲霉素分别为80.0%、97.0%、95.5%,卡那霉素分别为92.3%、93.9%、93.7%,氧氟沙星分别为95.3%、98.5%、97.3%,乙硫异烟胺分别为100%、81.2%、85.6%。MGIT 960完成药敏试验的时间平均为8.3 d,L-J法平均为26.2 d,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MGIT 960所得的药敏结果与传统比例法有较高的一致性,但检测时间较短,有利于耐药结核病患者的早期诊断和治疗。

基于药敏试验比例法的耐多药肺结核精准治疗效果的分析

目的探讨基于药敏试验比例法的耐多药肺结核(multidrug-resistant pulmonary tuberculosis,MDR-PTB)患者精准治疗的效果,为制订MDR-PTB治疗方案提供科学依据。方法选取2016年1月5日至2018年4月30日在深圳市慢性病防治中心行结核病治疗的180例MDR-PTB确诊患者,初始治疗方案为6个月阿米卡星、吡嗪酰胺、左氧氟沙星、乙胺丁醇、丙硫异烟胺/18个月吡嗪酰胺、左氧氟沙星、乙胺丁醇、丙硫异烟胺。根据是否完善10种常用药物的药敏试验比例法分为精准治疗组和经验治疗组,精准治疗组根据药物敏感试验结果调整治疗方案。回顾性分析两组患者治疗方案及病情转归等资料。统计学分析采用χ^(2)检验。结果180例患者中,精准治疗组113例,经验治疗组67例。精准治疗组药物的耐药率从低到高依次为:卷曲霉素(0,0/113)、阿米卡星(2.65%,3/113)和卡那霉素(2.65%,3/113)、对氨基水杨酸(7.96%,9/113)、丙硫异烟胺(11.50%,13/113)、氧氟沙星(38.05%,43/113)、乙胺丁醇(39.82%,45/113)、链霉素(76.99%,87/113)。精准治疗组患者在治疗过程中根据药敏试验比例法进行药物调整104人次,从低到高依次为:阿米卡星(3人次)、丙硫异烟胺(13人次)、左氧氟沙星(43人次)、乙胺丁醇(45人次)。精准治疗组治疗成功率为78.8%(89/113),高于经验治疗组的52.2%(35/67),差异有统计学意义(χ^(2)=13.805,P=0.0002)。精准治疗组和经验治疗组患者治疗过程中,丙氨酸转氨酶升高[32.3%(31/96)比34.0%(18/53)]、血肌酐升高[4.2%(4/96)比5.7%(3/53)]、白细胞计数减少[24.0%(23/96)比22.6%(12/53)]患者比例差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论基于药敏试验比例法的传统MDR-PTB治疗方案具有较高的治疗成功率,仍是值得选择的治疗方式。

GeneXpert MTB/RIF系统在疑似结核病患者中的诊断价值

目的评价GeneXpert MTB/RIF系统在临床疑似结核病患者中的诊断价值。方法对临床疑似结核病患者的220份标本分别进行抗酸涂片镜检、结核分枝杆菌培养、鉴定及比例法药敏试验、GeneXpert MTB/RIF系统检测结核分枝杆菌及利福平敏感性。应用统计学方法分析GeneXpert MTB/RIF系统检测结果。结果 GeneXpert MTB/RIF系统与罗氏培养法检测结核分枝杆菌之间的差异无统计学意义(P>0.05),并且通过Kappa检验2种方法检测的结果,一致性较好(Kappa=0.944)。GeneXpert MTB/RIF系统与抗酸涂片镜检检测结核分枝杆菌之间的差异有统计学意义(P<0.05)。Kappa检验2种方法检测的结果,一致性一般(Kappa=0.726)。以结核培养为金标准,220份疑似结核病患者的标本中,GeneXpert MTB/RIF系统检测结核分枝杆菌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为96.92%、97.92%、95.45%、98.60%。结论 GeneXpert MTB/RIF系统在临床疑似结核病患者的诊断中具有重要价值。