L-^(15)N亮氨酸和质谱测定大鼠肝蛋白质合成

目的:建立稳定同位素L 15N亮氨酸测定大鼠肝蛋白质合成率的方法。 方法:分别测定静脉注射相同剂量L 15N亮氨酸不同时相的大鼠肝15N丰度及不同剂量L 15N亮氨酸同一时相的大鼠肝15N丰度。 结果:大鼠肝游离氨基酸池中15N同位素丰度在注射后30min内呈线性上升并达高峰,维持4h后缓慢下降,肝蛋白质中的15N丰度30min至12h基本维持不变;随着注射剂量的增加,大鼠肝蛋白质分数合成率亦增加,当L 15N亮氨酸剂量>1. 0mmol/kg,分数合成率并不随施加L 15N亮氨酸剂量的加大而增加。 结论:在进行大鼠肝蛋白质合成率测定时,一次性静脉注射的测量最佳时限为30min,剂量为1. 0mmol/kg。

应用L-^(15)N亮氨酸测定大鼠骨骼肌蛋白质合成

目的:建立稳定同位素L1-5N亮氨酸测定大鼠骨骼肌蛋白质合成率的方法。方法:分别测定静脉注射相同剂量L1-5N亮氨酸不同时相的大鼠骨骼肌15N丰度及不同剂量L1-5N亮氨酸同一时相的大鼠骨骼肌15N丰度。结果:大鼠骨骼肌游离氨基酸池中15N同位素丰度在注射后30 m in内呈线性上升并达高峰,维持4 h后缓慢下降,骨骼肌蛋白质中的15N丰度30 m in至12 h基本维持不变;随着注射剂量的增加,大鼠骨骼肌蛋白质分数合成率亦增加,当L1-5N亮氨酸剂量>1.0 mmol/kg,分数合成率并不随施加L1-5N亮氨酸剂量的加大而增加。结论:在进行大鼠骨骼肌蛋白质合成率测定时,一次性静脉注射的测量最佳时限为30 m in,剂量为1.0 mmol/kg。

肿瘤坏死因子对谷氨酰胺调控大鼠骨骼肌蛋白质合成的影响

目的:研究促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)对谷氨酰胺(G ln)调控大鼠骨骼肌蛋白质合成的影响。方法:雄性SD大鼠30只,随机分为三组:完全肠道外营养(TPN)组,TPN+G ln组和TPN+G ln+TNF-α组。每组各10只大鼠,三组大鼠均行72 h TPN。TPN+G ln组加用丙氨酰谷氨酰胺二肽,提供的G ln剂量为0.3g/(kg.d),共72 h。TPN+G ln+TNF-α组在实验结束前24 h持续静脉滴注TNF-α,速度为5μg/(kg.h),并加入丙氨酰谷氨酰胺二肽(用法同TPN+G ln组)。三组所供营养液氮(N)量、热量均等。所有大鼠均在取材前30 m in一次性静脉注射[L1-5N]亮氨酸,剂量为1.0mmol/kg。分别测定血浆中TNF-α浓度、血浆及组织中G ln浓度,并测定骨骼肌组织的蛋白质合成率。结果:血浆及骨骼肌组织中G ln浓度,TPN组低于TPN+G ln组,两组均低于TPN+G ln+TNF-α组;骨骼肌蛋白质合成率TPN组最低,TPN+G ln组最高。以上各组之间差异均具有显著性意义(P<0.01)。结论:TNF可升高血浆及骨骼肌组织中G ln的浓度;G ln能促进骨骼肌蛋白质合成;而G ln这种促骨骼肌蛋白质合成作用可被TNF-α抑制。

稳定性核素测定大鼠小肠蛋白质合成

目的:建立稳定性核素([L1-5N]亮氨酸)测定大鼠小肠蛋白质合成率的方法。方法:分别测定静脉注射相同剂量[L1-5N]亮氨酸不同时相的大鼠小肠15N丰度及不同剂量[L1-5N]亮氨酸同一时相的大鼠小肠15N丰度。结果:大鼠小肠游离氨基酸池中15N核素丰度在注射后0.5 h内呈线性上升并达高峰,维持4 h后缓慢下降,小肠蛋白质中的15N丰度0.5 h至12 h基本维持不变;随着注射剂量的增加,大鼠小肠蛋白质分数合成率(FSR)亦增加,当[L1-5N]亮氨酸剂量在1.0mmol/kg以上,FSR并不随施加[L1-5N]亮氨酸剂量的加大而增加。结论:在进行大鼠小肠蛋白质合成率测定时,一次性静脉注射的测量最佳时限为0.5 h,剂量为1.0mmol/kg。

肿瘤坏死因子对谷氨酰胺调控大鼠肝蛋白质合成的影响

目的:研究肿瘤坏死因子(TNFα-)对谷氨酰胺(G ln)调控大鼠肝蛋白质合成的影响。方法:将30只雄性SD大鼠,随机分为A(TPN)组;B(TPN+G ln)组;C(TPN+G ln+TNFα-)组,均行72 h全肠外营养。B组加用丙氨酰谷氨酰胺二肽,其中G ln剂量为0.3 g/(kg.d),计72 h。C组在B组的基础上于实验结束前24 h持续静脉滴注TNFα-,速度为5μg/(kg.h)。所有大鼠均在实验结束前0.5 h,一次性静脉注射L-15N亮氨酸1.0 mmol/kg。实验结束时,分别测定血浆中TNFα-浓度,血浆及组织中G ln浓度,并测定肝组织的蛋白质合成率。结果:B组血浆及肝组织中G ln浓度高于A组,但两组均低于C组;B组肝蛋白质合成率高于A组,C组低于B组。结论:TNFα-能升高血浆及肝组织中G ln的浓度;G ln能促进肝蛋白质合成;而G ln这种促肝蛋白质合成作用可被TNFα-抑制。

稳定性核素在测定大鼠组织蛋白质合成中的应用

目的:研究应用稳定性核素(L-15N亮氨酸)测定大鼠组织蛋白质合成率的方法。方法:分别测定静脉注射相同剂量L-15N亮氨酸不同时相的大鼠组织15N丰度及不同剂量L-15N亮氨酸的同一时相大鼠组织15N丰度。结果:大鼠组织中游离及结合氨基酸同位素丰度在注射后半小时内几乎呈线性上升并达高峰,游离氨基酸15N丰度维持4h后缓慢下降,结合氨基酸15N丰度在半小时至12h之内基本维持不变;随着注射剂量的增加,大鼠组织蛋白质分数合成率亦增加。当L-15N亮氨酸剂量>1.0mmol/kg,分数合成率并不随施加L-15NLeucine剂量的加大而增加。结论:在进行大鼠组织蛋白质合成率测定时,一次性静脉注射的测量最佳时限为半小时,剂量为1.0mmol/kg。