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鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中上调L-plastin表达的转录因子 被引量:4
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作者 林天歆 黄健 +5 位作者 许可慰 蔡清清 李泗耀 黄海 尹心宝 江春 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期19-23,共5页
目的鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。方法在鉴定L-plastin启动子近3′端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,... 目的鉴定AP-4是在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机制。方法在鉴定L-plastin启动子近3′端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找可能调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性,研究该转录因子在非激素依赖型前列腺癌中调控L-plastin表达的作用。结果TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-199~-194bp处含有AP-4转录因子结合位点CAGCTG,凝胶滞后实验和超滞后实验表明AP-4是结合于L-plastin启动子3′端序列CAGCTG的转录因子,删除AP-4结合位点后荧光素酶活性下降。结论AP-4是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。 展开更多
关键词 前列腺癌 l-plastin AP-4 转录因子 非激素依赖
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前列腺癌中L-plastin启动子的非甾体激素类顺式作用元件的鉴定 被引量:4
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作者 林天歆 黄健 +4 位作者 黄海 蔡清清 许可慰 尹心宝 江春 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2005年第10期731-734,共4页
目的:寻找前列腺癌中L-plastin启动子的非甾体激素类顺式作用元件序列,并鉴定其相应的转录因子与调控途径.方法:在切除L-plastin启动子中甾体类激素受体位点并建立相应的荧光素酶重组子的基础上,利用外切酶行巢式切除法分段切除L-plasti... 目的:寻找前列腺癌中L-plastin启动子的非甾体激素类顺式作用元件序列,并鉴定其相应的转录因子与调控途径.方法:在切除L-plastin启动子中甾体类激素受体位点并建立相应的荧光素酶重组子的基础上,利用外切酶行巢式切除法分段切除L-plastin启动子基因序列,并建立相应的荧光素酶重组子,检测切除各启动子序列片段后有雄激素刺激组和无雄激素刺激组的荧光素酶活性,寻找调控L-plastin表达的非甾体激素类启动子基因序列所在位置,通过Transfect软件分析寻找对应的转录因子,再通过定点突变技术切除转录因子的结合位点并进一步进行荧光素酶活性测定,从而获得调控L-plastin表达的非甾体激素类途径.结果:成功分段切除了L-plastin启动子,并建立了相应的荧光素酶重组子,转染细胞后在有及无双氢睾酮刺激下检测荧光素酶活性,发现在-206~1片段存在明显的非甾体激素受体类的调控途径,通过软件分析发现AP-4和SP-1可以与该片段结合.切除AP-4和SP-1位点后,荧光素酶活性下降,以AP-4尤为明显.结论:在L-plastin启动子中,除了甾体类激素受体途径,仍然存在其他非甾体类调控途径,该调控途径的结合位点主要在-206~1之间,可能是通过AP-4和SP-1与该片段的启动子基因序列结合来上调L-plastin基因表达的. 展开更多
关键词 前列腺癌 l-plastin 荧光素酶 转录因子
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L-plastin启动子调控下的肿瘤细胞特异性表达载体的构建及活性分析 被引量:3
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作者 李桂英 孙红光 +3 位作者 王磊 田宇 杜柏榕 朱迅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第17期966-969,共4页
目的:构建肿瘤细胞特异性表达载体pcDNA3.1PLN-GFP及鉴定活性。方法:用2.4kb的L-plastin启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告蛋白,通过分子克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1PLN-GFP,用脂质体介导法转染肿瘤细胞和成纤维细胞后,流式细胞... 目的:构建肿瘤细胞特异性表达载体pcDNA3.1PLN-GFP及鉴定活性。方法:用2.4kb的L-plastin启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告蛋白,通过分子克隆技术,构建真核表达载体pcDNA3.1PLN-GFP,用脂质体介导法转染肿瘤细胞和成纤维细胞后,流式细胞术(FACS)分析载体的肿瘤细胞特异性和活性。结果:仅在表达内源性L-plastin的肿瘤细胞和转化的293细胞中有GFP的表达,发光细胞比率较高,而且L-plastin启动子的活性与CMV启动子活性相当,而在其它细胞中没有检测到GFP的表达。结论:我们构建的pcDNA3.1PLN-GFP是一肿瘤特异性的高效表达载体。 展开更多
关键词 肿瘤特异性 l-plastin启动子 GFP 表达载体
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子宫内膜异位症患者异位及在位内膜的L-plastin与雌激素受体的表达及相关性研究 被引量:2
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作者 张弛远 赵皤 王丹波 《现代肿瘤医学》 CAS 2013年第6期1313-1316,共4页
目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)患者L-plastin与雌激素受体的表达及二者的相关性在内异症发生、发展中的意义。方法:采用RT-PCR方法及免疫组化S-P法检测L-plastin及雌激素受体在内异症患者的在位和异位内膜及正常子宫内膜中的表达,并... 目的:探讨子宫内膜异位症(内异症)患者L-plastin与雌激素受体的表达及二者的相关性在内异症发生、发展中的意义。方法:采用RT-PCR方法及免疫组化S-P法检测L-plastin及雌激素受体在内异症患者的在位和异位内膜及正常子宫内膜中的表达,并对二者表达的相关性进行分析。结果:L-plastin在内异症患者在位及异位内膜中的表达水平均高于正常子宫内膜(P<0.05),且其在异位内膜中的表达水平高于在位内膜(P<0.05);雌激素受体在内异症患者在位及异位子宫内膜中的表达强于正常子宫内膜(P<0.05),且其在在位内膜中的表达强于异位内膜(P<0.05)。结论:L-plastin和雌激素受体在子宫内膜异位症患者在位及异位内膜中均表达增高,且呈正相关。L-plastin可能通过与ER结合在子宫内膜异位症发生、发展中发挥作用。L-plastin可能是与雌激素代谢相关的子宫内膜异位症特异性靶基因。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 l-plastin 雌激素受体 RT-PCR 免疫组织化学
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鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子SP-1 被引量:2
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作者 林天歆 黄健 +5 位作者 尹心宝 许可慰 叶枫 李泗耀 黄海 江春 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期1330-1334,共5页
目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理。方法:在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找调... 目的:鉴定调控L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的转录因子,进一步阐明非激素依赖型前列腺癌的发病机理。方法:在鉴定L-plastin启动子近3’端-216到1序列片段存在明显的转录活性的基础上,利用TFSEARCH软件分析该片段的序列,寻找调控L-plastin表达的非甾体激素类转录因子,并用凝胶滞后实验和超滞后实验证实结合于该片段的转录因子,利用PCR定点突变法构建删除该转录因子结合位点的重组子,并检测切除该片段序列后荧光素酶活性变化。结果:TFSEARCH软件分析表明在距转录起始点-54--41bp处含有SP-1转录因子结合位点GGTGGGGCGGGGA,凝胶滞后实验和超滞后实验表明SP-1是结合于L-plastin启动子3’端该序列的转录因子,删除SP-1结合位点后荧光素酶活性下降。结论:SP-1是促进L-plastin在非激素依赖型前列腺癌中表达的重要调控因子。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 L—plasfin 启动子 转录因子 Sp1
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网素(L-plastin)在子宫内膜癌中的表达及意义
6
作者 张璐 刘贵鹏 《航空航天医学杂志》 2016年第9期1078-1080,共3页
目的探讨L-plastin在子宫内膜癌组织中的表达及其在癌变发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法(S-P法),检测45例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生,16例正常子宫内膜中的L-plastin的表达。观察其在子宫内膜癌临床病理学参数的关... 目的探讨L-plastin在子宫内膜癌组织中的表达及其在癌变发生发展中的作用。方法采用免疫组织化学方法(S-P法),检测45例子宫内膜癌、20例子宫内膜不典型增生,16例正常子宫内膜中的L-plastin的表达。观察其在子宫内膜癌临床病理学参数的关系,分析其在肿瘤发生发展中的作用。结果在子宫内膜癌中L-plastin蛋白的表达明显低于非典型增生内膜及正常增生期内膜组织(P<0.01)。在不同手术病理分期子宫内膜癌组织中有显著性差异(P<0.05),在不同病理分级的子宫内膜癌组织中无显著性差异(P>0.05),在不同肌层浸润深度中有显著性差异(P<0.05),在有无淋巴结转移子宫内膜癌组织中无显著差异(P>0.05)。结论L-plastin蛋白参与了子宫内膜癌癌变的病理过程.L-plastin蛋白在子宫内膜癌中存在过度表达,L-plastin的过度表达与手术病理分期和肌层浸润深度有关。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 l-plastin 免疫组织化学
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子宫内膜癌与L-plastin的研究新进展
7
作者 张璐 《中外妇儿健康》 2011年第8X期94-95,共2页
子宫内膜癌是雌激素依赖的妇科常见肿瘤,雌激素通过ER发挥作用的。L-plastin是人肌动蛋白结合蛋白家族中的一个亚型,被发现于肿瘤转化的人纤维母细胞中,在绝大多数肿瘤中表达。L-plastin启动子上存在一个雌激素受体半结合住点,而L-plas... 子宫内膜癌是雌激素依赖的妇科常见肿瘤,雌激素通过ER发挥作用的。L-plastin是人肌动蛋白结合蛋白家族中的一个亚型,被发现于肿瘤转化的人纤维母细胞中,在绝大多数肿瘤中表达。L-plastin启动子上存在一个雌激素受体半结合住点,而L-plastin作为一种肌动蛋白结合蛋白可显著调节微丝系统细胞质内形成过程变化,从而使微丝系统的稳定性下降,这提示L-plastin和ER可能在子宫内膜癌的发生、发展过程中发挥作用。这里我们就L-plastin在人类肿瘤细胞中的异位表达及其在子宫内膜癌中与雌激素相关性的研究新进展进行阐述。 展开更多
关键词 l-plastin 雌激素 人类肿瘤 发病机制
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甾体类激素受体AR、ER对前列腺癌中L-plastin表达的调控 被引量:9
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作者 林天歆 黄健 +4 位作者 黄海 蔡清清 许可慰 尹心宝 江春 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期611-614,共4页
目的研究甾体类激素受体AR、ER对前列腺癌L-Plastin基因的调控作用,确定甾体类激素对前列腺癌的调节作用。方法构建L-plastin启动子于含荧光素酶的pGL3质粒,利用PCR定点突变法依次构建切除ARE1、ARE2、ARE3、ERE序列的pGL3重组子,将重... 目的研究甾体类激素受体AR、ER对前列腺癌L-Plastin基因的调控作用,确定甾体类激素对前列腺癌的调节作用。方法构建L-plastin启动子于含荧光素酶的pGL3质粒,利用PCR定点突变法依次构建切除ARE1、ARE2、ARE3、ERE序列的pGL3重组子,将重组子转染到前列腺癌细胞系LNCaP,检测荧光素酶强度,以了解ARE1、ARE2、ARE3、ER调控L-plastin表达能力。结果成功构建了L-plastin启动子的荧光素酶pGL3重组子以及切除ARE1、ARE2、ARE3、ERE位点的重组子,将这些重组子转染细胞后其荧光素酶强度有明显改变,切除ARE1位点后,荧光素酶活性下降1/3;切除ARE2后,荧光素酶活性与单纯切除ARE1相比下降1/2;切除ARE3后荧光素酶活性升高1倍;切除ERE后,荧光素酶活性下降约4/5。结论在L-plastin启动子转录活性中ARE1、ARE2、ARE3、ERE在前列腺癌中对其下游基因L-plastin起到调控作用,ARE1、ARE2、ERE起促进作用,ARE3起抑制作用。而且,L-plastin启动子上存在其他受甾体类激素调控的位点。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 l-plastin 甾体类激素受体 荧光素酶 转录因子 前列腺癌 调控作用 ER AR 荧光素酶活性
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一个影响前列腺癌中L-plastin启动子转录活性的多态性位点的成功鉴定 被引量:2
9
作者 林天歆 黄健 +5 位作者 蔡清清 谢文练 许可慰 叶枫 尹心宝 胡明 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第S2期29-33,共5页
目的研究已发现的前列腺癌中L-plastin启动子一个多态性位点对其转录活性的影响和意义。方法扩增前列腺癌细胞株LNCaP中L-plastin启动子序列,发现在距离转录起始点-1751上存在多态性位点T后,利用定点突变技术构建文献报道的启动子序列质... 目的研究已发现的前列腺癌中L-plastin启动子一个多态性位点对其转录活性的影响和意义。方法扩增前列腺癌细胞株LNCaP中L-plastin启动子序列,发现在距离转录起始点-1751上存在多态性位点T后,利用定点突变技术构建文献报道的启动子序列质粒(-1751C),测定含-1751T质粒和含-1751C质粒的荧光素酶活性。用巢式PCR扩增前列腺癌细胞株和癌组织中该位点序列,并进行单链构象多态性分析。结果成功构建L-plastin启动子,并发现一个位于-1751的多态性位点(C/T);成功构建启动子序列含-1751C质粒;荧光素酶活性测定表明(-1751C)质粒启动子转录活性为(-1751T)质粒的4~5倍,2者受到雄激素刺激后活性均升高;单链构象多态性分析表明该位点多态性普遍存在于前列腺癌患者和细胞株。结论鉴定了一个普遍存在于前列腺癌的L-plastin基因启动子的多态性位点,含有不同碱基位点的启动子的转录活性明显不同。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 l-plastin 多态性位点
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L-plastin启动子单核苷酸多态性与前列腺癌遗传易感性的相关性研究 被引量:2
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作者 宋涛 林天歆 +1 位作者 董文 黄健 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2010年第9期8-12,共5页
目的研究L-plastin启动子单核苷酸多态性(SNP)与前列腺癌的关系。方法采用Tm-shifting(等位基因特异性扩增结合融解温度曲线分析法)分析方法,对82例前列腺癌人群和94例对照人群的L-plastin启动子SNP位点的基因型进行检测。结果 L-plasti... 目的研究L-plastin启动子单核苷酸多态性(SNP)与前列腺癌的关系。方法采用Tm-shifting(等位基因特异性扩增结合融解温度曲线分析法)分析方法,对82例前列腺癌人群和94例对照人群的L-plastin启动子SNP位点的基因型进行检测。结果 L-plastin启动子TT、CT、CC基因型及等位基因T、C在汉族前列腺癌患者及对照者中的分布频率差异无显著性(P>0.05);在前列腺癌组内不同病理分级中,中、高分化组和低分化组中TT、CT、CC基因型分布频率差异无显著性(P>0.05);在前列腺癌组内不同临床分期中,与TT纯合子相比,CC纯合子前列腺癌Ⅳ期的风险增加至5.0倍(P<0.05)。结论 L-plastin启动子单核苷酸多态性在中国汉族人群中与前列腺癌无相关,但该启动子多态性可能在预测前列腺癌进展中有一定作用。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 L—plastin基因 多态性 单核苷酸
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淋巴细胞胞浆蛋白在肿瘤中的表达及意义
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作者 李菁 赵任 《外科理论与实践》 2010年第6期695-699,共5页
淋巴细胞胞浆蛋白(L-plastin)简称LCP或LPL。其是一种肌动蛋白结合蛋白,通常在造血细胞中低表达,但近年报道发现其在多种恶性肿瘤细胞中有组成性高表达。Lin等[1]报道,
关键词 l-plastin 肿瘤 肌动蛋白结合蛋白 E-CADHERIN 基因治疗
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淋巴细胞胞质蛋白在结肠直肠肿瘤中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 李菁 赵任 +2 位作者 王华枫 袁成斌 蔡健华 《外科理论与实践》 2010年第4期375-380,共6页
目的:探讨淋巴细胞胞质蛋白(L-plastin)在结肠直肠肿瘤病人的血浆、肿瘤组织中的表达,并分析其与临床病理指标的关系。方法:采用ELISA法检测结肠直肠肿瘤病人与正常人血浆标本的L-plastin表达水平;并用免疫组化法定位检测,Western印迹... 目的:探讨淋巴细胞胞质蛋白(L-plastin)在结肠直肠肿瘤病人的血浆、肿瘤组织中的表达,并分析其与临床病理指标的关系。方法:采用ELISA法检测结肠直肠肿瘤病人与正常人血浆标本的L-plastin表达水平;并用免疫组化法定位检测,Western印迹法半定量测定组织中L-plastin的表达。结果:结肠直肠肿瘤病人血浆L-plastin的表达较正常人显著增高,肿瘤组织中L-plastin的表达亦较正常组织明显增高。而L-plastin高表达与肿瘤分化程度、肿瘤大小、淋巴转移等密切相关,与肿瘤侵犯深度和远处转移无关。结论:L-plastin在结肠直肠肿瘤病人的血浆、组织中表达显著增高,并与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关,可能成为筛查、预后判断及基因靶向治疗的基础。 展开更多
关键词 淋巴细胞胞质蛋白 结肠直肠肿瘤 酶联免疫吸附法 免疫组化 蛋白质印迹
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Proteomics Analysis of T Lymphocytes Damage Induced by Ionizing Irradiation
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作者 Shi, Ying Zhang, Xuan +4 位作者 Liu, Ning Liang, Feng Song, Fengrui Liu, Zhiqiang Liu, Shuying 《Chinese Journal of Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期159-164,共6页
Human T lymphocytes were found to be highly radiosensitive and complex cellular responses including apoptosis could be induced upon exposure to X-ray irradiation. However, the mechanism of apoptosis associated with ir... Human T lymphocytes were found to be highly radiosensitive and complex cellular responses including apoptosis could be induced upon exposure to X-ray irradiation. However, the mechanism of apoptosis associated with irradiation was not clear. In this study, a proteomic method was applied to investigation on alteration of proteome of human T-lymphocyte cells after irradiation. The Jurkat cells were irradiated with 4 Gy X-ray and the cell lysates were collected at different times after irradiation (6, 12, 18, 24 and 48 h). The whole proteins were separated and quantified by two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis, and then the differentially expressed proteins were identified by mass spectrometry. 4 proteins exhibited significant irradiation-induced difference in abundance, including L-plastin, bifunctional purine biosynthesis protein, tubulin beta chain, beta-actin. Differentially expressed proteins were reported to be directly or indirectly involved in the function of human T lymphocyte. Thus, this study might provide clues to identify proteins with biological significance related to irradiation. 展开更多
关键词 T-LYMPHOCYTES IRRADIATION ELECTROPHORESIS APOPTOSIS PROTEOMICS l-plastin
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血浆网素在结直肠癌诊断中的意义 被引量:1
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作者 袁成斌 赵任 +3 位作者 万方军 蔡建华 季晓频 于颖彦 《中华胃肠外科杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期687-690,共4页
目的 探讨血浆网素(L-plastin)在结直肠癌诊断中的意义.方法 收集2008年3月至2009年3月间40例结直肠癌患者和40例正常人的血浆标本,采用ELISA检测血浆网素浓度,分析其与临床病理资料的关系,并通过与金属基质蛋白酶抑制剂(TIMP-1)进... 目的 探讨血浆网素(L-plastin)在结直肠癌诊断中的意义.方法 收集2008年3月至2009年3月间40例结直肠癌患者和40例正常人的血浆标本,采用ELISA检测血浆网素浓度,分析其与临床病理资料的关系,并通过与金属基质蛋白酶抑制剂(TIMP-1)进行比较,以评估血浆网素对结直肠癌的诊断价值.结果 肿瘤患者和正常人血浆网素浓度分别为(1.662±0.386) μg/L和(0.485±0.085) μg/L,差异有统计学意义(P<0.01).网素的理想临界值为0.62 μg/L,其诊断结直肠癌的敏感度为67.5%,特异度为80.6%,曲线下面积(AUC)为0.772,该临界值具有临床判定价值(P<0.01).血浆网素浓度与肿瘤的大小(P<0.01)、浆膜穿透(P<0.05)以及淋巴转移(P<0.01)有关.TIMP-1诊断结直肠癌的敏感度为70.0%,特异度为60.0%;网素对肿瘤浸润深度判断与TIMP-1相当(8/10比7/10,P>0.05),但对淋巴结转移的判断则更为准确(86%比58%,P<0.05).结论 血浆网素水平在结直肠癌患者、尤其是在穿透浆膜和有淋巴结转移的患者中显著升高,具有较高的诊断价值,有望成为判断肿瘤浸润转移的分子标志物. 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 诊断 网素 基质金属蛋白酶抑制剂
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