CircRTN4调节miR-224-5p/MYT1L轴对胶质母细胞瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的:探讨环状RNA(CircRNA)RTN4调节微小RNA(miR)-224-5p/髓磷脂转录因子1样(MYT1L)轴对胶质母细胞瘤(GM)细胞恶性生物学行为的影响。方法:以对数生长期的U251细胞进行设置分组:空白组、阴性对照(sh NC)组、沉默circRTN4 shRNA(sh circRTN4)组、sh circRTN4+抑制剂对照(inhibitor NC)组、sh circRTN4+miR-224-5p抑制剂(miR-224-5p inhibitor)组。Transwell实验、流式细胞术、CCK-8、qRT-PCR、Western blot以及双荧光素酶分别检测细胞迁移与侵袭、凋亡、增殖、CircRTN4、miR-224-5p、MYT1L mRNA表达、增殖蛋白(ki-67)、凋亡蛋白(cleaved Caspase-3)、MYT1L蛋白表达以及miR-224-5p分别与CircRTN4、MYT1L靶向关系验证;qRT-PCR检测GM细胞系U118、U87、U251和LN229细胞及正常人星形胶质细胞系NHA细胞中CircRTN4、miR-224-5p、MYT1L mRNA表达水平。结果:U118、U87、U251和LN229细胞中CircRTN4、MYT1L mRNA表达较NHA细胞显著增加,miR-224-5p表达显著下降(P<0.05);miR-224-5p分别与CircRTN4、MYT1L的有靶向关系。与空白组、sh NC组相比,sh circRTN4组迁移、侵袭数、24h、48h A450值、ki-67、CircRTN4、MYT1L mRNA及蛋白表达显著降低,凋亡率、cleaved Caspase-3表达显著增加(P<0.05);与sh circRTN4+inhibitor NC组相比,sh circRTN4+miR-224-5p inhibitor组迁移、侵袭数、24h、48h A450值、ki-67、MYT1L mRNA及蛋白表达显著增加,凋亡率、cleaved Caspase-3表达显著下降(P<0.05),CircRTN4表达无统计学差异(P>0.05),体内实验证明干扰CircRTN4可显著抑制移植瘤裸鼠肿瘤质量(P<0.05)。结论:沉默CircRTN4调节miR-224-5p/MYT1L轴抑制GM细胞恶性生物学行为。

长链非编码RNA FER1L4在肝细胞癌中调节miR-106a-5p发挥抑癌因子作用的研究

目的:探讨长链非编码RNA FER1L4(lncRNA FER1L4)调节miR-106a-5p的表达影响肝癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的可能机制及其临床意义。方法:收集2017~2019年阜阳市第五人民医院及大连大学附属中山医院36例肝细胞癌患者手术标本,采用荧光定量PCR技术(RT-qPCR)分析肝癌细胞和癌旁正常肝细胞中lncRNA FER1L4和miR-106a-5p的表达情况。同时采用RT-qPCR分析肝癌细胞系Huh-7、HepG2和正常肝细胞系L-02中lncRNA FER1L4和miR-106a-5p的表达情况。采用CCK-8法、细胞划痕及集落形成实验等方法测定细胞的增殖、转移和成瘤能力。结果:与正常组织相比,lncRNA FER1L4在肝癌组织中表达较低(P<0.05),而miR-106a-5p表达较高(P<0.05),且两者呈负相关(P<0.0001,R2=0.376);与对照组相比,下调FER1L4肝癌细胞的增殖能力增加(P<0.05),敲除FER1L4肝癌细胞的迁移和侵袭能力增加(P<0.05);与对照组相比,转染FER1L4 siRNA的肿瘤细胞中miR-106a-5p的表达增高(P<0.05),敲除miR-106a-5p的肿瘤细胞中FER1L4的表达增高(P<0.05),两者之间存在相互抑制的关系。结论:lncRNA FER1L4通过抑制miR-106a-5p的表达对肝细胞癌产生抑制作用,单独或联合检测lncRNA FER1L4和miR-106a-5p可能预测肝癌的临床预后。

miR-183-5p和NDUFA4L2在肾透明细胞癌中的表达及相关性

目的检测miR-183-5p和NDUFA4L2在肾透明细胞癌中的表达特征,分析二者相关性及其与术后生存时间的关系。方法收集确诊为肾透明细胞癌并行手术治疗的患者共57例,术后留取肿瘤组织和癌旁正常肾组织。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织中miR-183-5p的表达,应用免疫组织化学法检测NDUFA4L2的表达。应用qRT-PCR检测人肾透明细胞癌786-0细胞株和人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞株中miR-183-5p和NDUFA4L2 mRNA的表达。结果肾透明细胞癌中miR-183-5p表达量明显低于正常肾组织,NDUFA4L2阳性率明显高于正常肾组织(均P<0.05)。miR-183-5p表达量和NDUFA4L2阳性率在不同WHO/ISUP分级、有无肾窦累犯和不同肿瘤最大径间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-183-5p表达量和NDUFA4L2评分均与术后生存时间相关,miR-183-5p表达量和NDUFA4L2评分呈负相关。786-0细胞株中,miR-183-5p表达量明显低于HK-2细胞株,NDUFA4L2 mRNA表达量明显高于HK-2细胞株(均P<0.05)。结论肾透明细胞癌中miR-183-5p和NDUFA4L2异常表达且二者呈负相关,对病变的形成和进展具有促进作用,检测二者的表达可能对预后有预测价值。

SLC1A5协同TM4SF1通过mTOR信号通路调控食管鳞癌细胞迁移

目的探讨氨基酸转运载体溶质载体家族1成员5(SLC1A5)在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理特征的相关性,以及SLC1A5对ESCC细胞迁移的影响及潜在分子机制。方法采用TNM plot在线数据库分析SLC1A5基因在ESCC组织和正常组织中的表达情况。通过实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测ESCC组织和癌旁组织中SLC1A5 mRNA表达情况;采用免疫组化(IHC)法检测SLC1A5蛋白表达情况,并分析其与患者临床病理资料的相关性。分别构建SLC1A5过表达(SLC1A5-OE组)、四跨膜蛋白超家族成员1过表达(TM4SF1-OE组)、SLC1A5和TM4SF1共同过表达的Eca109细胞。采用细胞增殖试验、Transwell实验检测Eca109细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过免疫共沉淀(IP)实验证实SLC1A5和TM4SF1的相互作用;采用蛋白质免疫印迹(WB)法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达水平。结果TNM plot数据库分析显示,ESCC组织中SLC1A5基因表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。ESCC组织中SLC1A5 mRNA表达高于成对的癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.01)。IHC结果显示,SLC1A5蛋白在癌组织中高表达,并且与临床分期(P=0.036)、淋巴结转移(P=0.029)显著相关。细胞增殖实验结果显示,SLC1A5-OE组和对照细胞(Con组)增殖能力比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Transwell实验结果显示,与Con组比较,SLC1A5-OE组细胞迁移及侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.01)。IP结果表明,SLC1A5与TM4SF1存在相互作用。WB结果显示,相对于SLC1A5-OE组或TM4SF1-OE组,p-mTOR、p-S6蛋白表达水平在SLC1A5和TM4SF1共同过表达的细胞中最高。Transwell实验证实,共同过表达SLC1A5和TM4SF1的ESCC细胞迁移能力最强。结论ESCC中SLC1A5呈高表达,且与患者临床分期、淋巴结转移显著相关,SLC1A5可能通过与TM4SF1相互作用,激活mTOR信号通路,进而促进ESCC细胞迁移。

基于CT图像腰椎L4～L5节段有限元模型建立与分析

基于CT图像结合图像处理及有限元分析软件采用六面体网格建立完整的人体腰椎L4～L5活动节段三维有限元模型,并对模型有效性进行验证与分析.用块状化分割方法对腰椎模型进行几何处理,然后对二维四边形单元使用扫略和拉伸等方法生成六面体实体单元从而建立三维腰椎有限元模型,并另外建立单元数量和单元类型不同的腰椎有限元模型用以对比.观察腰椎在轴向力和6个方向的扭矩作用下的变形和位移以及椎间盘的应力分布情况.建立的原始模型共有110 762个单元,111 644个节点,模型在500、1000、1 500、2000 N轴向压缩力作用下的位移分别为0.34、0.65、0.91、1.21 mm,在前屈、后伸、侧弯和扭转工况下关节活动度分别为5.69°、2.28°、3.41°和1.29°,终板最大应力分布规律与前人研究结果一致.用六面体单元划分网格的精细有限元模型可兼顾模型的计算效率及精度,所建模型符合腰椎一般生物力学特点,可用于模拟生物力学实验及对脊柱生物力学的进一步研究.

L4/5单节段融合对不同腰椎Roussouly分型腰椎骨盆矢状位参数和临床疗效的影响

目的：探讨腰椎单节段（L4/5）融合对不同腰椎Roussouly分型腰椎骨盆矢状位参数和临床疗效的影响.方法：回顾我院2008年3月～2012年3月行L4/5节段融合的患者317例,共纳入具有健康相邻节段、随访≥3年、资料齐全者51例.男25例,女26例,平均年龄43.45岁.依据腰椎前凸顶点位置将腰椎矢状位曲线分为四型（Roussouly分型）：Ⅰ型,顶点位于L5椎体或者L4/5椎间隙;Ⅱ型,顶点位于L4底部或者中部;Ⅲ型,顶点位于L4上部或者L3/4椎间隙;Ⅳ型,顶点位于L3椎体及其以上.术前、术后和末次随访时行视觉模拟评分（VAS）、Oswestry功能障碍指数（ODI）、JOA评分,测量腰椎前凸角（LL）、上半圆（UP arc）、L4/5椎间前凸角（I-VA4-5）、骨盆入射角（PI）、骨盆倾斜角（PT）、骶骨倾斜角（SS）、C7垂线骶骨距离/股骨头骶骨距离比值（C7PL/SFD ratio）,术前相邻节段评估应用MRI Modified Pfirrmann Scale（Modic）量表分析,随访应用UCLA量表结合脊柱退变稳定性标准评估影像学相邻节段退变（rASD）情况.结果：本组腰椎Roussouly分型的分布如下：Ⅰ型10例（19.61％）,Ⅱ型15例（29.42％）,Ⅲ型20例（39.22％）,Ⅳ型6例（11.76％）.平均随访42.58个月（36～67个月）.Ⅰ型：术后和末次随访时的LL、UP arc、和SS较术前显著提高,PT减小,具有统计学差异（P＜0.01）.Ⅱ和Ⅲ型：LL末次随访时较术前显著提高（P＜0.05）,而SS、PT、PI无显著性变化,Ⅱ型末次随访时UParc较术前和术后显著提高.Ⅳ型：LL、UP arc、SS、PT和PI手术前和术后对比无显著性差异.各型术后及随访时的IVA4-5较术前提高,而C7PL/SFD比值减小,各型术后及末次随访时的VAS、ODI和JOA评分与术前相比显著改善.本组病例中rASD发病率为17.64％,rASD相关危险因素分析发现：年龄、随访时间、IVA4-5、PI是显著危险因素.结论：单节段融合可显著增加节段前凸角,但在不同腰椎Roussouly分型中对脊柱-骨盆参数的影响有所不同.节段椎间角度是ASD的显著危险因素,年龄越大,随访时间越长,PI值较高时较容易发生rASD.

椎板间隙成形技术在经椎板间入路完全内窥镜下手术治疗L4/5椎间盘突出症中的应用

目的 :评价椎板间隙成形技术在完全内窥镜(full-endoscopic,FE)下经椎板间入路手术治疗L4/5椎间盘突出症中的应用价值及临床疗效。方法:2013年2月~2013年8月,我院应用FE下经椎板间入路手术治疗腰椎间盘突出症患者90例,男60例,女30例;年龄22~68岁,平均41.4±13.3岁。其中L4/5椎间盘突出症患者38例(A组),L5/S1椎间盘突出症患者52例(B组)。记录两组患者术前影像学参数、围手术期指标及疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、腰椎Oswestry功能障碍指数(oswestry disability index,ODI),参照改良Mac Nab标准评价临床疗效,并进行统计学分析。结果 :所有患者随访2年以上,平均34.8±4.0个月(25~42个月)。A组患者FE术中均需进行椎板间隙成形技术预处理骨性椎板窗,而B组患者未行椎板间隙成形技术。两组患者术前椎间盘突出类型方面存在显著差异(P<0.05),A组患者以肩上型椎间盘突出为主(29/38,76.3%),而B组患者以腋下型椎间盘突出最常见(34/52,65.4%)。除A组在手术时间明显大于B组外(分别为73.1±9.7min和55.2±7.5min,P<0.05),两组在住院天数、重返工作时间及并发症发生率方面均无显著差异(P>0.05)。两组患者术后VAS评分、ODI评分均较术前明显改善,末次随访时改良Macnab标准评价优良率分别为84.2%和86.5%,两组间无统计学差异(P>0.05)。结论:尽管FE下经椎板间入路手术治疗L4/5椎间盘突出症需术中采用椎板间隙成形技术预处理骨性椎板窗而延长手术时间,但仍可以获得与L5/S1节段一致的良好临床疗效,而且并未增加术后神经损伤和腰椎不稳的发生。

L_(4、5)神经前支和腰骶干与骶髂关节关系的三维重建

目的重建L4、L5神经前支和腰骶干以及与骨盆的三维图像,使之得以直观、形象和生动地体现。方法福尔马林灌注固定的成年男性尸体标本1具。显露L4、L5神经前支、腰骶干和骶髂关节前方,将钛粉和粘合剂的混合物均匀涂抹在L4、L5神经前支、腰骶干、股神经神经以及闭孔主干表面。神经表面涂抹的混合物固化变干后,在螺旋CT下行二维断层扫描,层厚3 mm,获取159张连续的二维CT断层图像。将获取的二维图像数据在个人电脑上采用3D-DOCTOR软件进行三维重建。结果重建的三维图像,可以直观形象生动的体现神经与骨盆的空间位置关系,并可按各种方向任意旋转演示。结论三维重建图像较好地描述了神经与骨盆的相关关系,同时还可应用于临床教学。

L_(4、5)神经前支和腰骶干与骶髂关节毗邻关系及其临床意义

目的 :为单纯或合并临近神经损伤的骨盆后环骨折手术提供解剖学基础。方法 :对 2 0具防腐成年尸体标本依次选取不同平面用分规和克氏针测量L4、5神经前支、腰骶干与骶髂关节间的水平距离。结果 :L5神经前支在其出椎间孔处、L4神经前支在L5椎间孔处、腰骶干在其汇合点处、腰骶干在平骶岬处、腰骶干在骨盆环处与骶髂关节间的距离分别为 :(2 3 .4± 4.0 )mm、(17.8± 4.8)mm、(13 .3± 2 .8)mm、(11.8± 3 .2 )mm、(9.6± 3 .6)mm ,其中在骨盆环处腰骶干与骶髂关节间距离最短 ;在分离神经时可见L4、5前支和腰骶干与骶骨之间有结缔组织相连 ;有 3具标本L4、5神经前支在进入小骨盆前未汇合成腰骶干。结论 :在单纯或者合并L4、5前支和腰骶干损伤的骨盆后环骨折手术中 ,由于骨盆环处腰骶干外缘与骶髂关节间距离最近 ,因此一定要小心辨认 ,勿损伤该神经。

经皮肾穿刺置管联合输尿管镜碎石术治疗L_(4～5)水平输尿管结石356例

经皮肾镜和输尿管镜碎石术具有创伤小、痛苦轻、恢复快、术中出血及合并症少、结石清除较彻底等优点，尤其为治疗复杂性肾、输尿管结石提供了新的治疗手段。但L4-5水平输尿管上段结石为经皮肾镜和输尿管镜治疗的“夹缝地区”，

N^4-环丙氨-5-氟-β-L-尿苷的合成

报道了N4 环丙氨 5 氟 β L 尿苷的合成新方法 ,以L 阿拉伯糖为起始原料合成了化合物L 吡喃核糖 ( 6) ,然后经三步反应合成了重要中间体 1 氧 -乙酰基 2 ,3 ,5 三 -氧 -苯甲酰基 β L 呋喃核糖 ( 9) ,与硅烷化的 5 氟尿嘧啶缩合得到了带有保护基的 5 氟 β L 尿苷 ( 10 ) ,脱保护后与六甲基二硅氮烷 (HMDS)、环丙氨、硫酸铵 (催化剂 )一锅反应得到了目标化合物N4 环丙氨 5 氟 β L 尿苷 ( 12 ) .产物结构经MS ,UV ,IR ,NMR ,元素分析等确认 .

C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学特性

对比分析C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体的压缩力学性质,确定不同部位的椎间盘与相邻椎体是否具有不同的压缩力学性质。人死后1 h内解剖取出死者C1-S1脊柱标本,以线锯切取C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本各13个。在日本岛津电子万能实验机上进行实验。实验速度为5mm/min,以统计分析和t检验的方法处理实验数据。L4-5组椎间盘与相邻椎体最大载荷大于T12-L1和C5-6组,差异显著(P<0.01);C5-6组最大位移大于L4-5组和T12-L1组,差异显著(P<0.01);L4-5组椎间盘与相邻椎体最大应力大于C5-6和T12-L1组,差异显著(P<0.01);C5-6组椎间盘与相邻椎体最大应变大于L4-5和T12-L1组,差异显著(P<0.01)。C5-6、T12-L1、L4-5椎间盘与相邻椎体标本的压缩力学性质有一定区别。

人体腰椎L_4～L_5段有限元模型建立及力学有效性验证

针对目前腰椎疾病高发,研究多工况下腰椎的力学情况是研究部分腰椎疾病的重要基础,选取一名健康男性志愿者,对其进行螺旋CT扫描,数据通过逆向建模软件处理得到三维实体图,利用有限元软件进行高质量网格划分与模型力学有效性验证。模型在500N、1 000N、1 500N、2 000N的正压力下,轴向位移分别为0.30mm、0.64mm、0.87mm、1.09mm,在500N正压力和10N·m扭矩下,前屈、后伸、侧弯、扭转的关节活动度与文献中数据基本一致,验证了模型的有效性。高质量腰椎有限元模型可用于模拟腰椎生物力学实验,对后续模拟部分人体腰椎疾病和医疗手术的生物力学情况打下了基础。

钴-5,10,15,20-四(3-甲氧基-4-羟基苯基)卟啉修饰玻碳电极的L-抗坏血酸化学传感器研究

将水合 5,10,15,20-四-(3-甲氧基-4-羟基苯基)钴卟啉(CoTMHPP)修饰在玻碳电极表面,制成CoTMHPP修饰电极.电极稳定性好且灵敏度高,对抗坏血酸有良好的电催化氧化作用,测定线性响应范围为1.0×10(-5)～1.0×10(-2)mol/L,响应时间小于12s.本文研究了电极的性质和应用,并用于药物中抗坏血酸的测定,其测定结果与碘量法一致.

人脊柱C5-6、T6-7、L4-5椎间盘归一化蠕变函数

对 9例 1 9～ 35岁新鲜的C5 6椎间盘、9例新鲜的T6 7椎间盘和 1 0例L4 5椎间盘进行了蠕变实验研究。模拟人体体温 36.5± 0 .5℃ ,对试样施加 30 0N的载荷 ,测得了椎间盘蠕变效应 ,得出其应变 时间曲线 ,经数学处理得出椎间盘蠕变函数和归一化蠕变函数及其曲线。

发散式冲击波疗法治疗L_(4～5)椎间盘突出症的临床观察

目的观察发散式冲击波疗法（radial shock wave therapy,RSWT）治疗L4~5椎间盘突出症的临床疗效。方法将61例L4~5椎间盘突出症患者随机分为两组,观察组32例,采用发散式冲击波疗法治疗;对照组29例,采用传统针刺方法治疗。记录治疗前、治疗后即刻及治疗后4周两组的日本骨科学会（Japanese orthopaedic association,JOA）下腰痛评分,比较两种治疗方法的疗效。结果两组治疗前、后的下腰痛评分改变差异有统计学意义（P〈0.01）,两组患者总体疗效差异有统计学意义（P〈0.05）,观察组愈显率明显高于对照组。结论发散式冲击波疗法治疗L4~5椎间盘突出症效果优于传统针刺方法。该疗法值得临床推广应用。

经皮穿刺L_(3～4)和L_(4～5)椎间盘的断层解剖与CT

目的 :为临床开展腰椎间盘突出症有限手术治疗提供断层解剖学基础及 CT影像资料。方法 :在 60例 (标本 30 ,CT片 30 )经L3～ 4 、L4～ 5椎间盘横断层面上 ,观察确定经皮穿刺点及穿刺线路 ,并测量穿刺点至后正中线的距离、穿刺角度、穿刺点至椎间盘后外缘及椎间盘中心的距离等。结果 :经 L3～ 4 椎间盘穿刺 ,其穿刺角度。穿刺点距后正中线、至椎间盘后外缘、至椎间盘中心的距离 ,平均分别为 :(38.7± 0 .5)°、(6.0± 0 .1 ) cm、(7.1± 0 .1 ) cm、(9.3± 0 .2 ) cm;经 L4～ 5椎间盘穿刺 ,上述项目的数据分别为 :(46.6± 0 .4)°、(7.6± 0 .1 ) cm、(7.9±0 .2 ) cm、(1 0 .3± 0 .2 ) cm.结论 :在 L3与 L4 棘突下缘平面 ,后正中线旁开约 6.0 cm与 7.6cm处 ,以大约 38.7°与 46.6°穿经上关节突外侧缘的安全区至 L3～ 4 与 L4～ 5椎间盘 ,是安全的、可靠的。穿刺针至椎间盘后外缘的深度约 7.1 cm与 7.9cm,至椎间盘中心的深度约 9.3 cm与 1 0 .3cm。

CT引导下经旁路联合注射胶原酶治疗L4-5椎间盘突出症的临床研究

目的探讨L45椎间盘突出经旁路联合注射胶原酶到突出物内和表面的技术与疗效。方法通过L45解剖学和影像学的研究分析,确定经椎间孔,通过硬膜外达突出物的穿刺入路。在临床应用中结合硬膜外CT空气造影解决该入路的准确性和安全性问题。对66例经CT检查证实、临床诊断为L45椎间盘突出症的患者在CT引导下经旁路直接注射胶原酶到突出物内和表面。结果穿刺成功率100%;术后3个月至3年的随访,62例疗效优良,优良率93%,23例3个月后CT复查22例突出物变小或消失,溶解率95%。结论CT引导下注射胶原酶治疗L45椎间盘脱出是一种简单、安全、准确、有效的技术方法。

正交表L16（4^4）和L16（4^5）的优良性

本文概括了各种优良准则 ,并在极大最小距离 [1]准则下详细讨论了正交表 L16( 4 4) ,L16( 4 5)的优良性 ,给出了一个正交表 L16( 4 5) ,它在上述准则下优于文 [2 ]附录中提供的 L16( 4 5) .

韦氏脊柱整合手法治疗L4～5椎间盘突出症疗效观察

目的：观察韦氏脊柱整合手法治疗L4～5椎间盘突出症的疗效。方法：将100例患者随机分为两组各50例,治疗组采用韦氏脊柱整合手法治疗,对照组采用常规推拿手法治疗。手法治疗每天1次,10天为1个疗程,治疗2个疗程后观察疗效。结果：治疗组治愈率为70.0%,总有效率为100.0%;对照组治愈率为38.0%,总有效率为68.0%,治疗组疗效优于对照组（P〈0.01）。结论：韦氏脊柱整合手法治疗L4～5椎间盘突出症疗效满意,值得临床推广应用。