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Anti-Diabetic Activity of an Extract of Syzygium Jambolanum - A Review
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作者 Kirubanandan Shanmugam 《Journal of Clinical and Nursing Research》 2024年第3期220-231,共12页
Syzygium jambolanum is a promising natural treatment for diabetes.The potential benefits of S jambolanum for diabetes include lowering blood sugar levels,increasing insulin sensitivity,protecting pancreatic beta cells... Syzygium jambolanum is a promising natural treatment for diabetes.The potential benefits of S jambolanum for diabetes include lowering blood sugar levels,increasing insulin sensitivity,protecting pancreatic beta cells,and slowing the absorption of glucose into the bloodstream.The anti-diabetic activity of the crude extract of S jambolanum was evaluated in L6 myotubes and the lipid deposition in tissue was measured using Nile red Staining.Nile red staining confirmed that a considerable quantity of lipids had been deposited in the tissue treated with a crude extract of S jambolanum,comparable to the quantity of lipids deposited with a standard drug known as Rosiglitazone.This study analyzed the anti-diabetic activity of a crude extract of S jambolanum to understand its potential as a feedstock for extracting bioactive constituents to screen for bioactive molecules in the treatment of diabetes. 展开更多
关键词 Syzygium jambolanum l6 myoblasts Column chromatography Nile red staining
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活性氧促使L6成肌细胞的分化 被引量:9
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作者 邱小忠 余磊 +4 位作者 廖华 张黎声 秦建强 杨俊 欧阳钧 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第11期1384-1386,共3页
目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P&l... 目的探讨氧化应激对L6成肌细胞生长分化的影响。方法MTT法检测H2O2对L6细胞活力的影响;观察H2O2引起的细胞形态学变化,RT-PCR检测myogenin基因表达水平。结果在较短的处理时间内(1h),低浓度的活性氧(50μmol/LH2O2)有利于细胞的生长(P<0.05);H2O2处理12h后,50和150μmol/L的H2O2能够诱导成肌细胞分化的标记分子-myogenin基因的表达,形态学研究结果表明H2O2能够诱导肌管的形成,促使成肌细胞的分化。结论活性氧可能是细胞内诱导细胞生长与分化的信号分子。 展开更多
关键词 H2O2 细胞分化 l6成肌细胞 MYOGENIN
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connexin43基因体外转染大鼠L6骨骼肌成肌细胞的研究 被引量:3
3
作者 王多 张雷 +3 位作者 邵素霞 吕萍 张金平 崔轶 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1821-1823,共3页
目的将含有connexin 43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6myoblast-Cx43。方法通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检... 目的将含有connexin 43基因的质粒在脂质体的介导下转染进入大鼠L6骨骼肌成肌细胞,使用G418根据有限稀释法筛选单克隆细胞株L6myoblast-Cx43。方法通过免疫细胞化学技术、Western blot技术,对整合有connexin43基因的阳性细胞克隆进行检测。结果两个阳性克隆组Cx43蛋白表达均明显高于对照组。结论获得的两个持续高表达connexin43蛋白的细胞株可用于进行移植细胞之间及移植细胞与宿主细胞之间能否形成良好的电偶联的研究。 展开更多
关键词 CONNEXIN43 骨骼肌成肌细胞 基因表达 转染 细胞克隆
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L6细胞复合培养中平行结构支架材料的细胞黏附性观察
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作者 余磊 熊绍虎 +3 位作者 邱小忠 廖华 黄美贤 欧阳钧 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第4期418-419,共2页
目的:检测在L6细胞培养过程中,具有平行结构支架材料的生物相容性。方法:将医用可吸收缝线平行折叠并制备成类似圆柱体样,与大鼠L6成肌细胞株体外复合培养。利用扫描电镜观察平行结构支架材料吸附的L6细胞的形态学结构,观察L6细胞在材... 目的:检测在L6细胞培养过程中,具有平行结构支架材料的生物相容性。方法:将医用可吸收缝线平行折叠并制备成类似圆柱体样,与大鼠L6成肌细胞株体外复合培养。利用扫描电镜观察平行结构支架材料吸附的L6细胞的形态学结构,观察L6细胞在材料上的表面相容性。结果1天后,细胞在支架材料表面黏附、伸展,随时间的延长,显示出沿支架材料纵轴排列趋势,第6天的时候,可以见到类似肌小管的结构。结论:所制备的具有平行结构的支架材料具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 l6细胞株 支架材料 组织工程
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槐属二氢黄酮G促进L6细胞内GLUT4的表达和转运
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作者 宋冠军 田迪 +1 位作者 赵平 杨新洲 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期386-391,共6页
利用细胞葡萄糖摄取检测试剂盒检测苦参中槐属二氢黄酮G(Sophoraflavanone G,SFG)对L6细胞葡萄糖摄取的影响,发现SFG能够增加大鼠成肌细胞(L6)的葡萄糖摄取;之后,使用Western blot检测发现SFG对L6细胞内GLUT4的表达有显著的促进作用;同... 利用细胞葡萄糖摄取检测试剂盒检测苦参中槐属二氢黄酮G(Sophoraflavanone G,SFG)对L6细胞葡萄糖摄取的影响,发现SFG能够增加大鼠成肌细胞(L6)的葡萄糖摄取;之后,使用Western blot检测发现SFG对L6细胞内GLUT4的表达有显著的促进作用;同时.在可稳定表达IRAP-mOrange荧光蛋目的L6细胞内,使用激光共聚焦显微镜监测SFG作用下葡萄糖转位蛋白4(glucose transporter 4.GLUT4)的转位,发现SFG对GLUT4的转位有显著的促进作用,而且SFG对GLUT4转位的促进呈浓度依赖性;另外,免疫荧光实验结果也显示SFG增强L6细胞中GLUT4与细胞膜的融合.这些结果显示利用SFG处理L6细胞后丄6细胞内GLUT4的表达、转运及与细胞膜的融合继而促进葡萄糖的摄取显著增强,说明SFG可能具备开发成一种新的降血糖药物的潜力. 展开更多
关键词 Ⅱ型糖尿病 槐属二氢黄酮G 大鼠成肌细胞l6 葡萄糖转位蛋白4
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氧化苦参碱对H_2O_2诱导的L_6成肌细胞凋亡的影响 被引量:6
6
作者 朱道立 王康乐 +1 位作者 陈佩林 姜雅琼 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第7期662-670,共9页
研究氧化苦参碱对L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡的影响.采用过氧化氢损伤L6大鼠成肌细胞的方法,建立L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡模型.使用剂量为0.3,0.15,0.75 g/L的氧化苦参碱处理细胞.应用MTT法统计存活率和流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用D... 研究氧化苦参碱对L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡的影响.采用过氧化氢损伤L6大鼠成肌细胞的方法,建立L6大鼠成肌细胞H2O2凋亡模型.使用剂量为0.3,0.15,0.75 g/L的氧化苦参碱处理细胞.应用MTT法统计存活率和流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率,用DAPI荧光染色、HE染色以及Bax和Bcl-2抗体鉴定损伤程度,Western blot检测蛋白质差异.结果表明,H2O2损伤的成肌细胞存活率降低,凋亡率增加.各种剂量氧化苦参碱能提高成肌细胞的存活率,促使Bcl-2增高,Bax降低.对成肌细胞的保护程度随氧化苦参碱剂量增加而增强,在剂量为0.3 g/L时,效果显著,其次是0.15、0.75 g/L的氧化苦参碱.其生理生化机制是氧化苦参碱保护H2O2通过NFκB信号通路造成的大鼠成肌细胞凋亡模型.结果显示,氧化苦参碱具有作为新的抗氧化药物的潜力. 展开更多
关键词 氧化苦参碱 H2O2诱导凋亡模型 l6大鼠成肌细胞 BCL-2 BAX
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ATP对大鼠成肌细胞抗H_2O_2凋亡模型分析 被引量:2
7
作者 朱道立 王康乐 +1 位作者 陈佩林 沈威 《北京工业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期314-320,共7页
为了探讨解决L6大鼠成肌细胞被H2O2损伤的问题,分别用1.210 48、2.420 96、4.841 92 g/L ATP溶液对成肌细胞处理后,利用MTT法、流式细胞仪和荧光凋亡抗体检测了细胞损伤程度.结果表明,经H2O2损伤后L6成肌细胞存活率明显降低,凋亡率增加... 为了探讨解决L6大鼠成肌细胞被H2O2损伤的问题,分别用1.210 48、2.420 96、4.841 92 g/L ATP溶液对成肌细胞处理后,利用MTT法、流式细胞仪和荧光凋亡抗体检测了细胞损伤程度.结果表明,经H2O2损伤后L6成肌细胞存活率明显降低,凋亡率增加.各种剂量ATP溶液均能提高L6成肌细胞的存活率,促使抗凋亡因子bcl-2表达增加,促凋亡因子bax表达降低,减少凋亡的发生.其保护程度随ATP溶液剂量的减少而增强,在1.210 48 g/L剂量时效果最为显著.ATP溶液对H2O2诱导损伤的L6大鼠成肌细胞具有明显保护作用,其机制是通过mTOR/STAT3信号通路增强凋亡抑制因子bcl-2表达、抑制凋亡促进因子bax表达,从而与抑制细胞凋亡有关. 展开更多
关键词 ATP溶液 过氧化氢(H2O2) l6大鼠成肌细胞 凋亡模型
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五羟色胺-N-乙酰转移酶基因真核表达载体的构建表达及活性检测 被引量:1
8
作者 廖华 曹永英 +2 位作者 徐达传 邱小忠 余磊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期656-659,共4页
目的构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达并初步探讨AANAT转基因细胞的生物活性。方法提取大鼠松果体组织mRNA,RT-PCR技术扩增五羟色胺-N-乙酰转移酶基因(AANAT)cDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法导... 目的构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达并初步探讨AANAT转基因细胞的生物活性。方法提取大鼠松果体组织mRNA,RT-PCR技术扩增五羟色胺-N-乙酰转移酶基因(AANAT)cDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法导入L6成肌细胞。倒置显微镜观察转化细胞体外存活、RT-PCR及Western blotting技术检测pTARGETTM-AANAT的基因表达产物及转化细胞的功能表达。结果酶切分析、DNA测序及凝胶电泳检测结果证实,pTARGETTM-AANAT真核表达载体构建成功。RT-PCR及Western blotting检测表明,转化后的L6细胞表达AANAT mRNA,细胞具备AANAT蛋白的表达能力。结论成功构建pTARGETTM-AANAT的真核表达载体,转化的L6细胞株能表达AANAT蛋白活性。 展开更多
关键词 五羟色胺-N-乙酰转移酶 l6细胞 pTARGET^TM载体 RT-PCR
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AANAT基因转染成肌细胞及其微囊化研究
9
作者 黄美贤 廖华 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第2期208-211,共4页
目的:构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达;制备pTARGETTMAANAT转基因细胞微囊,初步探讨AANAT转基因细胞微囊的生物活性。方法:RT-PCR技术扩增大鼠AANATcDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法转染L6细... 目的:构建pTARGETTM-AANAT真核表达载体并转化L6成肌细胞,检测目的基因的表达;制备pTARGETTMAANAT转基因细胞微囊,初步探讨AANAT转基因细胞微囊的生物活性。方法:RT-PCR技术扩增大鼠AANATcDNA,酶切连接pTARGETTM载体,脂质体法转染L6细胞并检测pTARGETTM-AANAT的基因表达产物;将高表达活性的L6细胞进行APA微囊化处理,倒置显微镜观察微囊形态,Western-blot检测囊内细胞AANAT蛋白表达活性。结果:酶切、DNA测序及凝胶电泳检测结果证实,pTARGETTM-AANAT真核表达载体构建成功。转染后的L6细胞表达AANATmRNA,胞浆中能检测到AANAT蛋白的表达。转染细胞微囊体外存活良好,微囊外形完整无粘连,大小较均一,囊内细胞清晰可见,体外培养两周后破囊检测证实囊内细胞具有AANAT蛋白表达活性。结论:pTARGETTM-AANAT真核表达载体在L6细胞中成功表达,转染细胞微囊体外存活良好,囊内细胞具备AANAT蛋白表达活性。 展开更多
关键词 AANAT l6细胞 pTARGETTM载体 APA微囊
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Bcl-2和PCNA表达在大鼠成肌细胞氧化应激损伤中的作用 被引量:3
10
作者 毛挺挺 郑亚华 +3 位作者 方红波 谢鲁吉 张伟丹 姜丽萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期935-938,943,共5页
目的:探讨Bcl-2、PCNA等蛋白表达在成肌细胞氧化应激损伤中的意义。方法:将对数生长期成肌细胞进行分组,结合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预处理2 h及过氧化氢处理,分为正常对照(control)组、单纯bFGF组、氧化应激组(H_2O_2组)和干预组... 目的:探讨Bcl-2、PCNA等蛋白表达在成肌细胞氧化应激损伤中的意义。方法:将对数生长期成肌细胞进行分组,结合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预处理2 h及过氧化氢处理,分为正常对照(control)组、单纯bFGF组、氧化应激组(H_2O_2组)和干预组(bFGF+H_2O_2组)。免疫组化检测Bcl-2和Bax阳性沉积颗粒;免疫荧光观察成肌细胞形态及Bcl-2和Bax荧光表达;Western blot检测Bcl-2、PCNA等蛋白表达情况。结果:免疫荧光及免疫组化结果显示,与氧化应激组比较,干预组Bcl-2表达增加,Bax表达减少;Western blot显示,干预组Bcl-2和PCNA水平增加,Bax水平降低。结论:氧化应激诱导的大鼠成肌细胞损伤参与肌细胞病理进程。Bcl-2和PCNA表达上调可减轻成肌细胞损伤程度。 展开更多
关键词 深部组织损伤 氧化应激 l6成肌细胞 碱性成纤维细胞生长因子
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miRNA-133a过表达对体外L6成肌细胞增殖分化作用机制的研究 被引量:2
11
作者 李波 弓贺炜 +6 位作者 李文斌 李永平 冯勇 贾英伟 田江华 李刚 梁炳生 《中华手外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第5期391-395,共5页
目的 构建微小RNA-133a重组慢病毒载体,观察其转染后对L6成肌细胞增殖、分化及转录因子MEF2A的影响.方法 构建表达含微小RNA-133a基因的重组慢病毒载体,转染L6成肌细胞,以实时定量PCR(Taqman探针法)对微小RNA-133a基因表达水平进行检... 目的 构建微小RNA-133a重组慢病毒载体,观察其转染后对L6成肌细胞增殖、分化及转录因子MEF2A的影响.方法 构建表达含微小RNA-133a基因的重组慢病毒载体,转染L6成肌细胞,以实时定量PCR(Taqman探针法)对微小RNA-133a基因表达水平进行检测;细胞计数试剂盒(CCK-8)试验评价微小RNA-133a过表达后对L6成肌细胞增殖的影响;倒置荧光显微镜观察L6成肌细胞增殖、分化的影响;Western blot法检测转录因子MEF2A表达水平的变化.结果 构建的微小RNA-133a重组慢病毒载体经质粒酶切和测序鉴定正确;与对照组比较,转染L6成肌细胞24h后,微小RNA-133a基因的相对表达量明显增加(P<0.01);L6细胞增殖数量明显增加(P<0.01),对L6成肌细胞的分化有明显抑制作用(P<0.01);MEF2A的表达量逐渐下降(P<0.01).结论 成功构建微小RNA-133a重组慢病毒载体并转染16成肌细胞后可高效表达微小RNA-133a,促进体外成肌细胞的增殖并抑制分化. 展开更多
关键词 细胞分化 细胞增殖 慢病毒载体 l6成肌细胞 微小RNA-133a MEF2A
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FGFR2IIIc重组慢病毒载体的构建及其在肌原细胞L6中的表达 被引量:2
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作者 郭淑军 万艳 +2 位作者 李丽玲 秦丽 陈小佳 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1-7,共7页
目的:构建人FGFR2IIIc重组慢病毒表达系统,感染并筛选获得大鼠肌原细胞L6表达人FGFR2IIIc的重组细胞株,初步研究FGFR2IIIc对L6细胞的作用。方法:从人胎盘组织中获得FGFR2IIIc基因,并克隆到Gateway慢病毒系统的入门载体pENTR-11,采用LR... 目的:构建人FGFR2IIIc重组慢病毒表达系统,感染并筛选获得大鼠肌原细胞L6表达人FGFR2IIIc的重组细胞株,初步研究FGFR2IIIc对L6细胞的作用。方法:从人胎盘组织中获得FGFR2IIIc基因,并克隆到Gateway慢病毒系统的入门载体pENTR-11,采用LR重组酶将重组的pENTR-FGFR2IIIc和表达载体pLenti6/V5-DEST进行重组反应得到pLenti6/V5-DEST-FGFR2IIIc。将该重组表达载体和Viral Packaging Mix包装质粒通过阳离子脂质体共转染293FT细胞,待细胞完全裂解后收集重组慢病毒颗粒上清液;取适量上清液感染L6细胞,杀稻瘟毒素筛选2~4周,挑单克隆细胞进一步扩大培养并建立重组细胞株。RT-PCR、间接免疫荧光和Western blot鉴定重组细胞株中目的基因FGFR2IIIc的表达,bFGF和硫酸乙酰肝素共同诱导各重组L6细胞株后流式细胞术分析细胞周期,形态观察检测成肌分化水平,并通过相关信号通路抑制剂分析与各信号通路的关系。结果:构建了含人FGFR2IIIc基因的重组慢病毒表达载体,获得的重组慢病毒颗粒能高效感染L6细胞,RT-PCR和间接免疫荧光实验说明正确表达目的基因;流式细胞术结果表明L6中高表达FGFR2IIIc的重组细胞株的G1/G0期的细胞增多;各重组细胞株分别加入Erk1/2和p38通路抑制剂抑制诱导2天,发现重组细胞株发生不同的形态变化。结论:通过慢病毒表达系统,成功构建高表达FGFR2IIIc的重组L6细胞株,FGFR2IIIc通过Erk1/2和p38通路影响了L6细胞的形态发生,该结果为下一步在大鼠L6细胞中研究FGFR2IIIc基因与成肌分化功能相关性奠定基础。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体2IIIc 慢病毒表达系统 大鼠肌原细胞
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甘草主要成分改善L6大鼠成肌细胞胰岛素抵抗的机制 被引量:14
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作者 程丽娜 曹世杰 +2 位作者 曲明 邱峰 康宁 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期88-94,共7页
目的:确定甘草主要化学成分是否通过调节L6大鼠成肌细胞内糖原合成、糖酵解途径和脂肪酸合成改善胰岛素抵抗。方法:利用0.05 mmol·L^-1棕榈酸(PA)孵育9 h诱导L6大鼠成肌细胞建立胰岛素抵抗(IR)细胞模型;实验设正常组,模型组,甘草酸... 目的:确定甘草主要化学成分是否通过调节L6大鼠成肌细胞内糖原合成、糖酵解途径和脂肪酸合成改善胰岛素抵抗。方法:利用0.05 mmol·L^-1棕榈酸(PA)孵育9 h诱导L6大鼠成肌细胞建立胰岛素抵抗(IR)细胞模型;实验设正常组,模型组,甘草酸(GA,25μmol·L^-1)组,18β-甘草次酸(18β-GA,25μmol·L^-1)组,异甘草素(ILG,25μmol·L^-1)组和异甘草苷(ILQ,25μmol·L^-1)组;葡萄糖试剂盒检测细胞培养液上清葡萄糖含量;糖原检测试剂盒测定肌糖原含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c),脂肪酸合成酶(FAS)和糖原合成酶激酶3β(GSK3β)的蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测糖酵解关键酶的mRNA水平。结果:与正常组比较,模型组IR-L6大鼠成肌细胞中葡萄糖消耗率显著下调(P<0.01),细胞中的糖原含量减少(P<0.05),SREBP-1c和FAS蛋白表达减少(P<0.05,P<0.01),磷酸果糖激酶1(PFK1),丙酮酸激酶(PK)和己糖激酶(HK)mRNA水平下调(P<0.05),GSK3β蛋白表达增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组GA,18β-GA和ILG可以明显增加IR-L6大鼠成肌细胞中糖原含量(P<0.05,P<0.01),GA,18β-GA和ILQ则明显增加SREBP-1c蛋白表达(P<0.05,P<0.01),而GA,18β-GA,ILG和ILQ可明显增加FAS的蛋白表达(P<0.05,P<0.01)以及PFK1,PK和HK mRNA表达(P<0.05,P<0.01),但下调GSK3β蛋白表达(P<0.05)。结论:甘草主要成分通过促进糖酵解和糖原合成发挥降糖作用,并且可通过调节脂肪酸合成改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 甘草主要成分 l6大鼠成肌细胞 胰岛素抵抗 糖原 糖酵解 脂肪酸合成
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Sox9基因转染诱导L6大鼠成肌细胞向软骨细胞表型分化的研究
14
作者 宋宏梅 李彩侠 +2 位作者 王刚 张义正 童英 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期1191-1196,共6页
利用脂质体转染法,将真核表达质粒pcDNA3.1-Sox9导入L6细胞中.通过细胞增殖检测、细胞形态学观察、标志基因表达分析和甲苯胺蓝染色等方法分析Sox9基因转染对L6细胞增殖和向成软骨方向分化的诱导作用.结果表明,Sox9基因转染对L6细胞的... 利用脂质体转染法,将真核表达质粒pcDNA3.1-Sox9导入L6细胞中.通过细胞增殖检测、细胞形态学观察、标志基因表达分析和甲苯胺蓝染色等方法分析Sox9基因转染对L6细胞增殖和向成软骨方向分化的诱导作用.结果表明,Sox9基因转染对L6细胞的增殖能力没有影响,但能明显抑制L6细胞相互融合形成肌管.和对照相比,Sox9基因转染后,细胞成肌分化标志基因Myf5的表达受到明显抑制,而成软骨分化标志基因Ⅱ型胶原(typeⅡcollagen,Col2a1)和蛋白聚糖(Aggrecan,Agg)的表达显著提高.转染后14 d,Sox9基因转染的细胞可见甲苯胺蓝染色阳性的软骨细胞样结节,而对照组则鲜见类似结构.上述结果表明,Sox9基因转染可以抑制L6细胞向成熟肌细胞分化,并促进其向软骨表型分化. 展开更多
关键词 SOX9 l6成肌细胞 软骨细胞 分化 基因转染
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补元汤对香烟烟雾提取物诱导的L6大鼠成肌细胞凋亡、增殖及自噬的干预效应与机制研究
15
作者 黄春燕 宋文龙 +3 位作者 李少峰 徐超 周志愉 兰智慧 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期5870-5875,共6页
目的:探讨补元汤对体外香烟烟雾提取物(CSE)诱导的L6大鼠成肌细胞(L6细胞)凋亡、增殖及自噬的干预效应及机制。方法:构建CSE诱导L6细胞损伤的体外模型,实验分为对照组、模型组、补元汤组。对照组常规培养,模型组加入20%CSE诱导,补元汤... 目的:探讨补元汤对体外香烟烟雾提取物(CSE)诱导的L6大鼠成肌细胞(L6细胞)凋亡、增殖及自噬的干预效应及机制。方法:构建CSE诱导L6细胞损伤的体外模型,实验分为对照组、模型组、补元汤组。对照组常规培养,模型组加入20%CSE诱导,补元汤组加入20%CSE及1/500补元汤。流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期分布;CCK8法检测细胞活力;Western blot检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、BCL2/腺病毒E1B 19kDa结合蛋白1(Bnip-1)、自噬相关基因7(Atg7)、p62、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)蛋白表达水平;透射电镜观察自噬体形成情况。结果:与对照组比较,模型组细胞凋亡率、细胞周期中S期细胞比例升高,进入G_(2)/M期细胞比例降低,细胞活力降低,LC3-Ⅱ/Ⅰ、Atg7、Bnip-1、p-PI3K蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低,差异均具有统计学意义(P<0.01),电镜观察到自噬体数量增多;与模型组比较,补元汤组细胞凋亡率、细胞周期中S期细胞比例降低,进入G_(2)/M期细胞比例升高,细胞活力升高,LC3-Ⅱ/Ⅰ、Atg7、Bnip-1、p-PI3K蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高,差异均具有统计学意义(P<0.01),电镜观察到自噬体数量减少。结论:补元汤可以抑制CSE诱导的L6细胞过度自噬作用,减少细胞凋亡、促进细胞增殖,对CSE诱导的L6细胞损伤具有保护作用,其机制可能与调节Ⅲ型PI3K信号通路有关。 展开更多
关键词 补元汤 香烟烟雾提取物 l6大鼠成肌细胞 凋亡 增殖 自噬
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黄芪注射液对L_6成肌细胞抗H_2O_2致凋亡模型的保护 被引量:1
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作者 殷霙 朱道立 +1 位作者 陈佩林 王康乐 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期68-74,共7页
目的:探讨黄芪注射液对H2O2损伤L6大鼠成肌细胞的修复。方法:取1、0.5、0.1、0.05mmol/L H2O2损伤成肌细胞建立模型,再取2 000、1 000、500、250、125、62.5mg/mL黄芪注射液实施保护。应用MTT法、流式细胞仪及荧光抗体Bax和Bcl-2检测,使... 目的:探讨黄芪注射液对H2O2损伤L6大鼠成肌细胞的修复。方法:取1、0.5、0.1、0.05mmol/L H2O2损伤成肌细胞建立模型,再取2 000、1 000、500、250、125、62.5mg/mL黄芪注射液实施保护。应用MTT法、流式细胞仪及荧光抗体Bax和Bcl-2检测,使用SPSS 15.0统计软件处理数据。结果:经0.1mmol/L H2O2损伤成肌细胞存活率由94.4±5.7%降至32.6±3.8%,凋亡率由0增至32.45±2.9%。黄芪注射液处理实验组细胞存活率64.5±4.8~82.2±9.6%较模型组32.6±3.8%增加,凋亡率也从32.45±2.9%减至2.96±0.5~9.29±2.7%,荧光抗体检测Bcl-2细胞数57.7±4.3~74.2±6.9,Bax细胞数42.3±4.0~60.2±5.1。结论:黄芪注射液对大鼠成肌细胞H2O2损伤经由p38MAPK信号通路实施保护。 展开更多
关键词 l6大鼠成肌细胞 黄芪注射液 H2O2 Bcl-2 BAX MTT法 流式细胞仪
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